]铁架台、移液枪、枪头、小儿喉镜、细绳、麻醉罐、无水乙醚、棉花、计时器 [0082]雄性健康SD大鼠25只，体量为285-345g，（SPF级，由长沙市开福区东创实验动物科 技服务部提供，许可证号：SCXK(湘)2009-0012)。实验动物分笼喂养，室内温度保持在22 ± 2 °C，保持良好通风，每2天换垫料1次，每周用巴斯消毒液进行消毒，每2周清洗笼具一次。 [0083] 1.2大鼠滴注操作方法
[0084] 1.2.1麻醉罐的制作:本试验中选用一透明塑料罐作为麻醉罐。将棉花放入罐中， 使麻醉罐底部覆盖，将适量的无水乙醚注入罐中。
[0085] 1.2.2简易手术台的制作：取铁架台一个，将铁夹系一根能够承受大鼠重量的细 绳，升高铁夹高度，至能使上门牙挂在绳上的大鼠能伸展开。
[0086] 1.2.3大鼠麻醉:抓取欲滴注的大鼠，快速密封至麻醉罐中，盖紧麻醉罐，大鼠在5-IOs内被麻醉，麻醉标准为倒下不动，呼吸较慢，似熟睡状，快速从罐中取除大鼠，将大鼠上 门牙悬挂只铁架台上的细绳上，使其自然垂落。
[0087] 1.2.4定位气管:将麻醉大鼠挂至铁架台细绳后，一人右手用包一层薄纱布的镊子 将大鼠舌头夹住拉出之口腔外，用左手用拇指、食指轻轻顺向拉出舌头，右手放下镊子，拿 小儿喉镜从口腔顺着舌根照射，能清楚的看到大鼠的声门随着呼吸如鱼嘴般开启与闭合。
[0088] 1.2.5药物滴注：另一人左手捏住大鼠鼻子，大鼠用嘴呼吸，可见声门一张一闭，右 手持已吸好滴注药物400μ1的移液枪快速插入声门，将药物滴注至气管，退出移液枪，左手 继续捏鼻6s，使其通过呼吸主动将滴注药物吸入肺部，若听到湿啰音，则说明滴注成功。 [0089] 1.2.6药物均匀分布:大鼠滴注结束后，继续悬挂在细绳上8s，缓慢转动大鼠，使药 物均匀分布到大鼠肺部。
[0090] 2结果与分析
[0091] 2.1滴注效果分析
[0092] 本试验大鼠共计24只，滴注药物为悬浮液，滴注剂量为400μ1/只，滴注时间平均耗 时23.8s，整个造模过程从抓取大鼠、麻醉、滴注到大鼠完全清醒耗时61.4s，滴注过程中大 鼠死亡3只，观察一天后，其余大鼠无异常现象，成功率87.5 %。
[0093]本次造模是在第三次造模后第三天进行的，滴注过程中，操作者技术娴熟、动作熟 练、反应快速、配合默契，但是，相对于第三次滴注，此次滴消耗注时间增加，主要原因是滴 注量增加，为避免大鼠室息，滴注速度有所减缓;另外，相比前三次滴注，本次大鼠死亡3只， 死亡率增加，总结前面滴注经验，推测为大鼠一次性滴注剂量太大，呼吸困难，室息而亡。为 进一步验证该推测是否正确，可以在下一个试验中将400μ1药物分两次滴注，最后比较滴注 效果和死亡率。
[0094]实施例5精准快速无创式大鼠滴注方法 [0095] 1、材料与方法
[0096] 1 · 1材料
[0097]铁架台、移液枪、枪头、小儿喉镜、细绳、麻醉罐、无水乙醚、棉花、计时器 [0098]雄性健康SD大鼠25只，体量为305-365g，（SPF级，由长沙市开福区东创实验动物科 技服务部提供，许可证号：SCXK(湘)2009-0012)。实验动物分笼喂养，室内温度保持在22 ± 2 °C，保持良好通风，每2天换垫料1次，每周用巴斯消毒液进行消毒，每2周清洗笼具一次。 [0099] 1.2大鼠滴注操作方法
[01 00] 1.2.1麻醉罐的制作:本试验中选用一透明塑料罐作为麻醉罐。将棉花放入罐中， 使麻醉罐底部覆盖，将适量的无水乙醚注入罐中。
[0101] 1.2.2简易手术台的制作：取铁架台一个，将铁夹系一根能够承受大鼠重量的细 绳，升高铁夹高度，至能使上门牙挂在绳上的大鼠能伸展开。
[0102] 1.2.3大鼠麻醉:抓取欲滴注的大鼠，快速密封至麻醉罐中，盖紧麻醉罐，大鼠在5-IOs内被麻醉，麻醉标准为倒下不动，呼吸较慢，似熟睡状，快速从罐中取除大鼠，将大鼠上 门牙悬挂只铁架台上的细绳上，使其自然垂落。
[0103] 1.2.4定位气管:将麻醉大鼠挂至铁架台细绳后，一人右手用包一层薄纱布的镊子 将大鼠舌头夹住拉出之口腔外，用左手用拇指、食指轻轻顺向拉出舌头，右手放下镊子，拿 小儿喉镜从口腔顺着舌根照射，能清楚的看到大鼠的声门随着呼吸如鱼嘴般开启与闭合。
[0104] 1.2.5药物滴注：另一人左手捏住大鼠鼻子，大鼠用嘴呼吸，可见声门一张一闭，右 手持已吸好滴注药物400μ1的移液枪快速插入声门，将药物分两次缓慢滴注至气管，退出移 液枪，左手继续捏鼻8s，使其通过呼吸主动将滴注药物吸入肺部，若听到湿啰音，则说明滴 注成功。
[0105] 1.2.6药物均匀分布:大鼠滴注结束后，继续悬挂在细绳上8s，缓慢转动大鼠，使药 物均匀分布到大鼠肺部。
[0106] 2结果与分析
[0107] 2.1滴注效果分析
[0108] 本试验大鼠共计21只，滴注药物为悬浮液，滴注剂量为400μ1/只，一次吸入400μ1 分两次滴注只大鼠气管。滴注时间平均耗时27.3s，整个造模过程从抓取大鼠、麻醉、滴注到 大鼠完全清醒耗时66.7s，滴注过程中无大鼠死亡，观察一天后，其余大鼠无异常现象，成功 率 100% 〇
[0109]本次造模是在第四次造模后第三天进行的，滴注过程中，操作者技术娴熟、动作熟 练、反应快速、配合默契，滴注剂量同样为400μ1，分为两次，缓慢注入只大鼠气管，滴注中无 室息死亡现象，第二天无异常现象，成功率100 %。因剂量增加，滴注分次而缓慢，滴注时间 相比第二次、第三次、第四次时间延长了，但是确保了成功率。
[0110] 通过以上实施例，可以确定本发明滴注剂量在3〇〇μL以下，可以一次滴注，安全快 捷，滴注量在300μ1以上，分为两次缓慢滴注，同样能够确保大鼠的成功率。
[0111]另外，在滴注过程中还需注意以下事项:第一、麻醉时一定要密切观察动物的运动 和呼吸状态，防止麻醉过深或过浅；第二、麻醉前做好滴注准备，使麻醉和滴注操作做到无 缝对接，提高效率;第三、事先准备蘸有乙醚的棉花团，以防大鼠滴注中苏醒，如果苏醒，迅 速将棉花团堵住大鼠鼻孔，使其继续麻醉，保证滴注顺利进行。
[0112] 实施例1 -5中使用的麻醉罐、移液枪和枪头以及铁架台的示意图分别见图1 -图3。
[0113] 实施例1-5中试验大鼠滴注量、滴注时间与成功率分析结果见表1。
[0114]表1试验大鼠滴注量、滴注时间与成功率分析
[0116]虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在 本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因 此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
【主权项】
1. 一种精准快速无创式大鼠滴注方法，其特征在于，所述方法是在大鼠用乙醚麻醉后， 将其悬挂在铁架台上，用包缠纱布的镊子将大鼠舌头夹住拉出口腔之外，在喉镜照射下找 到声门，然后捏住大鼠鼻子，使大鼠用嘴呼吸，随着声门开合，将已吸好滴注药物的移液枪 快速插入声门，将药物滴注至气管;退出移液枪，继续捏鼻3-8S，使其通过呼吸自动将滴注 药物吸入肺部，待听到湿啰音，表明滴注成功。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，滴注结束后，将大鼠继续悬挂在铁架台上 5-10s，保持身体自然垂落，缓慢转动大鼠，使药物均匀分布到大鼠肺部。3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将大鼠置于带盖的麻醉罐中进行麻醉，麻 醉罐中放有蘸满乙醚的棉花或纱布。4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述麻醉罐为玻璃罐或透明塑料罐。5. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，待大鼠用乙醚麻醉后，用细绳系住大鼠门 牙，将其悬挂在铁架台上。6. 根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，每次滴注剂量控制在300μ1以内。
【专利摘要】本发明提供一种精准快速无创式大鼠滴注方法，所述方法是在大鼠用乙醚麻醉后，将其悬挂在铁架台上，用包缠纱布的镊子将大鼠舌头夹住拉出口腔之外，在喉镜照射下找到声门，然后捏住大鼠鼻子，使大鼠用嘴呼吸，随着声门开合，将已吸好滴注药物的移液枪快速插入声门，将药物滴注至气管；退出移液枪，继续捏鼻3-8s，使其通过呼吸自动将滴注药物吸入肺部，待听到湿啰音，表明滴注成功。本发明提供的大鼠滴注方法具有无创、无痛苦、经济、快捷、精准等特点，相比于其他滴注方式具有明显优势。
【IPC分类】A61D7/00, A61D7/04
【公开号】CN105434081
【申请号】CN201510847643
【发明人】刘仲华, 刘建军, 林勇, 林海燕, 洪乐乐
【申请人】湖南农业大学
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2015年11月27日