miR-378在预防和/或治疗肥胖症中的用图
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及miR-378在预防和/或治疗肥胖症，特别是获得性肥胖症中的用途。
【背景技术】
[0002] 肥胖症是一种常见的代谢疾病。据报道，2008年全世界共有2亿成年男性、3亿成年 女性患有肥胖症[1]。估计到2030年，全球肥胖人数将会高达10亿 [2]。正常男性成人脂肪组织 重量约占体重的15%~18%，女性约占20%~25%。随年龄增长，体脂所占比例相应增加。 体重指数[BMI =体重(Kg)/(身高)2(m2)]大于28者称为肥胖症[3]。
[0003] 无明显病因的肥胖症称单纯性肥胖症;具有明确病因者称为继发性肥胖症。单纯 性肥胖是各种肥胖最常见的一种，全身脂肪分布比较均匀，没有内分泌混乱现象，也无代谢 障碍性疾病，其家族往往有肥胖病史。单纯性肥胖又分为体质性肥胖和过食性肥胖两种。体 质性肥胖即双亲肥胖，是由于遗传和机体脂肪细胞数目增多而造成的，还与25岁以前的营 养过度有关系。这类人的物质代谢过程比较慢，比较低，合成代谢超过分解代谢。过食性肥 胖也称为获得性肥胖，是由于人成年后有意识或无意识地过度饮食，使摄入的热量大大超 过身体生长和活动的需要，多余的热量转化为脂肪，促进脂肪细胞肥大与细胞数目增加，月旨 肪大量堆积而导致肥胖。
[0004] 与单纯性肥胖不同，继发性肥胖是于疾病引起的肥胖。继发性肥胖是由内分泌混 乱或代谢障碍引起的一类疾病，虽然同样具有体内脂肪沉积过多的特征，但仍然以原发性 疾病的临床症状为主要表现，肥胖只是这类患者的重要症状之一。这类患者同时还会出现 其他各种各样的临床表现，多表现为皮质酵增多、甲状腺功能减退人群、性腺功能减退等多 种疾病中。
[0005] 肥胖症会使高血压、糖尿病和心脑血管疾病等的发病率及死亡率显著增加[3]，已 成为危害全球人类健康的重要问题之一，成为社会广泛关注的焦点。肥胖的预防和治疗已 成为现代医学面临的一项挑战。2008年，仅美国用于肥胖的医疗费用就高达1470亿美元 [4]。 据博思数据统计，2012年全球减肥药市场规模为15.6亿美元，我国减肥药零售市场规模 30.5亿元，其中减肥药(处方药)市场规模为16.8亿元 [5]。按现在的市场预测未来可能全球 将达到700亿，其中中国将近100亿元。
[0006] microRNA是一类非编码小RNA分子，在基因转录后水平通过对靶mRNA的翻译抑制 或降解，继而调控基因的表达。最近的研究表明，miR-378参与调控糖脂代谢，与脂类的合成 与分解密切相关 [6_7]。
【发明内容】
[0007] 本发明人通过一系列实验发现内源性微小核糖核酸micr〇RNA-378(miR-378)对肥 胖症有明显的预防和/或治疗作用。miR-378可以调节糖脂代谢，促进脂类氧化分解，miR-378 转基因小鼠体脂显著低于对照小鼠 。给小鼠注射 miR-378 对高脂饮食诱导的肥胖具有显 著的预防和治疗作用，尤其可降低肥胖症中白色脂肪积累。进一步研究发现miR-378在骨骼 肌中可以通过抑制Aktl而促进FoxOl活性，从而促进PEPCK表达，激活丙酮酸-PEP无效循环。 无效循环导致小鼠能量缺陷，从而促进脂肪分解。在脂肪组织中，miR-378通过靶向调节 Scdl而促进脂解作用。以上研究表明微小核糖核酸miR-378可以参与整体代谢调控，促进脂 肪氧化分解，减少脂肪积累，从而预防和治疗肥胖。
[0008] 因此，本发明的目的是提供miR-378在制备预防和/或治疗肥胖症的药物中的用 途。
[0009] 进一步地，肥胖症选自单纯性肥胖症和继发性肥胖症，所述单纯性肥胖症选自体 质性肥胖症和获得性肥胖症，优选获得性肥胖症。
[0010] 进一步地，miR-378的序列如SEQ ID No. 1所示。
[0011] 进一步地，预防和/或治疗是指降低肥胖症中白色脂肪积累。
[0012] 进一步地，肥胖症是指由白色脂肪积累引起的肥胖症。
[0013] 进一步地，miR-378可由胆固醇修饰。
[0014] 进一步地，胆固醇修饰的miR-378可降低肥胖症中白色脂肪积累。
[0015] 进一步地，胆固醇修饰的miR-378可预防和/或治疗由白色脂肪积累引起的肥胖 症。
[0016] 进一步地，miR-378 的革 El 标是 Scdl。
[0017] 此外，本发明还提供了一种制备用于治疗和/或预防肥胖症的组合物，其包含miR-378〇
[0018] 进一步地，组合物还包含一种或更多药学上可接受的载体。
[0019] 进一步地，miR-378可由胆固醇修饰。
[0020] 进一步地，肥胖症选自单纯性肥胖症和继发性肥胖症。所述单纯性肥胖症选自体 质性肥胖症和获得性肥胖症，优选获得性肥胖症。
[0021] 进一步地，miR-378的序列如SEQ ID No. 1所示。
[0022] 进一步地，预防和/或治疗是指降低肥胖症中白色脂肪积累。
[0023] 进一步地，肥胖症是指由白色脂肪积累引起的肥胖症。
[0024] 进一步地，胆固醇修饰的miR-378可降低肥胖症中白色脂肪积累。
[0025] 进一步地，胆固醇修饰的miR-378可预防和/或治疗由白色脂肪积累引起的肥胖 症。
[0026] 进一步地，miR-378 的革 El 标是 Scdl。
[0027]术语"肥胖症"是指体重指数[BMI =体重(Kg)/(身高)2(m2)]大于28者。
【附图说明】
[0028]图IA-图lK:miR-378转基因小鼠脂肪积累减少。图中Wt代表野生型对照小鼠，Tg代 表转基因小鼠。图IA显示转基因小鼠体型小于野生型对照小鼠。图IB显示在转基因小鼠的 骨骼肌、棕色脂肪、白色脂肪和肝脏中miR-378均高表达，其中Mus:骨骼肌，BAT:棕色脂肪， WAT:白色脂肪。图IC显示转基因小鼠的体重减轻。图ID显示转基因小鼠的骨骼肌重量减少， 其中TA:腔骨前肌，EDL:趾长伸肌，Gastro :腓肠肌，Qu:股四头肌。图IE-图IF显示转基因小 鼠的脂肪积累少，图IG显示转基因小鼠的脂肪细胞数量没有显著变化，其中iWAT:腹股沟皮 下白色脂肪，gWAT:性腺旁腹腔白色脂肪。图IH显示miR-378对脂肪细胞的分化无显著影响， 其中Ppar γ :过氧化物酶体增殖物激活受体γ，aP2:脂肪细胞脂结合蛋白，也称为FABP4， Agt:血管紧张肽原。图II-图IJ显示转基因小鼠的脂肪细胞体积明显减小。图IK显示转基因 小鼠棕色脂肪中脂肪分解相关基因表达显著增加，其中Ucpl:解偶联蛋白l，Pgc-la :过氧化 物酶体增殖物激活受体γ共激活因子Ia ,Pgc-?β:过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活 因子1β，Prdml6:含PR结构域的蛋白16，Cox7al:细胞色素 C氧化酶蛋白7Α1。
[0029]图2A-图2Q: miR-378转基因小鼠分解代谢活跃。图中Wt代表野生型对照小鼠，Tg代 表转基因小鼠。图2A显示转基因小鼠氧消耗显著高于野生型对照小鼠，图2B显示转基因小 鼠二氧化碳产生高于野生型对照小鼠，图2C显示转基因小鼠食物摄取高于野生型对照小 鼠，图2D显示转基因小鼠饮水量高于野生型对照小鼠，图2E显示转基因小鼠产热高于野生 型对照小鼠。图2F显示转基因小鼠棕色脂肪中解偶联蛋白I(Ucpl)表达高于野生型对照小 鼠。图2G显示转基因小鼠白色脂肪中脂肪分解的关键酶表达高于野生型对照小鼠，其中 ATGL :脂肪甘油三酯脂肪酶，HSL :激素敏感的脂肪酶，CGI-58 (Comparative gene identification-58):比较文库方法鉴定的第58号蛋白。图2H显示转基因小鼠白色脂肪中 甘油浓度高于野生型对照小鼠。图21-图2J显示转基因小鼠棕色脂肪（图21)及骨骼肌（图 2J)中脂肪分解及脂肪酸利用的关键酶表达高于野生型对照小鼠，其中LPL:脂蛋白脂酶， CD36:细胞分化蛋白36，CPTlb:肉碱脂酰基转移酶，UCP3:解偶联蛋白3。图2K显示转基因小 鼠血清中游离脂肪酸(FFA)浓度明显降低。图2L显示转基因小鼠在饥饿条件下血糖高于野 生型对照小鼠。图2M显示转基因小鼠糖耐量(GTT)异常，图2N显示转基因小鼠胰岛素耐量 (ITT)正常。图20显示转基因小鼠血清胰岛素水平正常。图2P显示转基因小鼠丙酮酸耐量 (PTT)显著高于野生型对照小鼠。图2Q显示转基因小鼠肝脏磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶 (PEPCK)表达上调。
[0030] 图3A-图3H:miR-378转基因小鼠抵抗