Sns-032在抑制胰腺癌细胞增殖中的用图
【技术领域】
[0001 ]本发明属于生物制药领域，具体涉及SNS-032在抑制胰腺癌细胞增殖中的用途。
【背景技术】
[0002]胰腺癌是恶性程度很高的消化系统肿瘤，近年来其发病率在我国呈现逐年升高的趋势。胰腺癌临床表现隐匿，发展迅速，具有高度侵袭性，预后极差。近几十年来，国内外学者利用不断提高的外科手术技能和现代医疗手段，不断扩大手术切除范围和加大淋巴结清除的彻底性，以期达到根治的目的。尽管胰腺癌的切除率有所提高，但5年生存期仍低于3%，主要原因是大多数胰腺癌难以早期发现，确诊时多数已属中晚期，失去了根治性手术切除的最佳时机。同时对化疗、放疗等综合治疗的敏感性较差也是导致胰腺癌患者高死亡率的重要因素。因此，发展新型安全有效的治疗方法以提高胰腺癌患者生存期具有非常重要的意义。
[0003]溶瘤腺病毒(Oncolytic Adenovirus)是近年来发展起来的一种肿瘤治疗新方法，其优点在于能特异性识别肿瘤细胞，而对正常组织细胞不会产生影响。2005年，溶瘤腺病毒HlOl在国内获得治疗头颈部肿瘤的上市批准，从而使中国成为世界上首个批准将溶瘤腺病毒正式用于肿瘤临床治疗的国家。然而，尽管在体外实验和动物实验中取得了令人振奋的结果，在临床研究中，大多数溶瘤腺病毒的疗效却不理想。原因是多方面的，包括肿瘤、微环境、病毒和宿主免疫反应及其之间的交互作用。因此，设计安全有效的药物组合方案，提高溶瘤腺病毒抗胰腺癌的作用效应，是当前亟待解决的问题。
[0004]细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent-kinase，Q)K)是参与细胞周期调控和基因转录的关键分子之一。CDK是一组丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，包括⑶K2、CDK4、⑶Κ6、CDK7和CDK9等一系列重要的细胞周期调控蛋白，该酶通过与细胞周期蛋白相结合产生活性，促进细胞周期中Gl期到S期和G2期到M期的转变，是细胞周期启动、形成和结束的主导力量。由于CDK在调控恶性肿瘤细胞的增殖与凋亡中起关键性作用，理论上来讲，对其进行抑制可导致肺瘤细胞的增殖受到抑制，进而诱导细胞调亡。与正常细胞不一样，肺瘤细胞中常有活性异常，因此可以作为恶性肿瘤治疗的新点。细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)在调控细胞周期和基因转录中起重要作用，胰腺癌常有⑶K活性异常增高，因此⑶K抑制剂可能在治疗胰腺癌中发挥重要作用。SNS-032是一种新型选择性⑶K2抑制剂，可抑制调控RNA转录的⑶K2，同时抑制⑶K7和CDK9的活性。已有研究表明SNS-032对多种恶性肿瘤有显著抗肿瘤作用。
【发明内容】
[0005]为了更好的治愈胰腺癌，提高患者的预后或者生活质量，本发明的发明人经过大量、坚持不懈的筛选，发现SNS-032与其他活性成分的组合对胰腺癌或胰腺癌细胞的增殖具有协同的治疗或者抑制作用，进而为治疗胰腺癌或抑制胰腺癌细胞的增殖提供了新的疗法或手段。
[0006]本发明采用SNS-032和ZD55-TIS联合抑制胰腺癌细胞增殖作用影响进行体外实验，结果显示在(I?16)M0I ZD55-TIS:(5?80)ng/ml SNS-032的选定剂量范围内，两者联合应用具有协同抑制骨髓瘤细胞增殖的作用，随着作用浓度的增高，协同抑制胰腺癌细胞增殖的作用逐渐增强。
[0007]本发明对ZD55-TIS和SNS-032联合应用药物组合抑制胰腺癌增殖进行相关作用机理研究，结果显示该组合药物能显著抑制胰腺癌细胞BxPC-3抗凋亡蛋白Mcl-1、XIAP和Bcl-2的表达水平，上调线粒体凋亡通路标记蛋白剪切型Caspase 9(半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9)、Caspase 3(半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9)和PARP的表达水平。因此，ZD55-TIS和SNS-032组合物能有效诱导胰腺癌线粒体凋亡发生，在制备抑制胰腺癌增殖药物中具有广阔的应用开发前途。
[0008]本发明所述的ZD55-TIS(WangSB,Tan Y,Lei ff,ffang YG,Zhou XM,Jia XY,LiuXY,Qian WB.Complete eradicat1n of xenograft hepatoma by oncolytic adenovirusZD55harboring TRAIL-1ETD-Smac gene with broad antitumor effect.Hum GeneTher.2012;23(9):992-1002.)为同时携带抗癌基因TRAIL和Smac的复制型溶瘤腺病毒，具有肿瘤复制特异性，并对正常细胞无毒性。ZD55-TIS和SNS-032结构式或基因组结构见图5。
[0009]本发明首先提供了SNS-032在制备用于在受试者中治疗胰腺癌或抑制胰腺癌细胞增殖的药物组合物或药盒中的用途，其中所述药物组合物或药盒含有ZD55-TIS和SNS-032，任选地，所述药物组合物或药盒还含有用于治疗胰腺癌或抑制胰腺癌细胞增殖的其他药物活性成分，例如吉西他滨、普乐沙福(AMD3100)或紫杉醇等。任选地，所述的药物组合物或药盒中的ZD55-TIS和SNS-032分别在分开的容器中存放或者ZD55-TIS和SNS-032在同一容器中存放。
[0010]本发明还提供了SNS-032在制备用于在受试者中上调胰腺癌细胞中的剪切型caspase3、caspase9和PARP的表达水平的药物组合物或药盒中的用途，其中所述药物组合物或药盒含有ZD55-TIS和SNS-032，任选地，所述药物组合物或药盒还含有用于治疗胰腺癌或抑制胰腺癌细胞增殖的其他药物活性成分，例如吉西他滨、普乐沙福(AMD3100)或紫杉醇等。任选地，所述的药物组合物或药盒中的ZD55-TIS和SNS-032分别在分开的容器中存放或者ZD55-TIS和SNS-032在同一容器中存放。
[0011]本发明还提供了SNS-032在制备用于在受试者中下调胰腺癌细胞中的抑凋亡蛋白Mcl-1、XIAP和Bcl-2的蛋白表达水平的药物组合物或药盒中的用途，其中所述药物组合物或药盒含有ZD55-TIS和SNS-032，任选地，所述药物组合物或药盒还含有用于治疗胰腺癌或抑制胰腺癌细胞增殖的其他药物活性成分，例如吉西他滨、普乐沙福(AMD3100)或紫杉醇等。任选地，所述的药物组合物或药盒中的ZD55-TIS和SNS-032分别在分开的容器中存放或者ZD55-TIS和SNS-032在同一容器中存放。
[0012]本发明提供了在受试者中治疗胰腺癌或抑制胰腺癌细胞增殖的方法，其包括向所述受试者同时或依次施用SNS-032和ZD55-TIS。任选地，在本发明的方法中，可以同时或者依次施用其他的治疗胰腺癌或抑制胰腺癌细胞增殖的药物活性成分，例如吉西他滨、普乐沙福(AMD3100)或紫杉醇等。
[0013]对于本发明所述的受试者，其优选为哺乳动物，更优选为人。
[0014]对于本发明的SNS-032和ZD55-TIS，本领域技术人员可以对其作出任何修饰，前体是所述修饰不负面影响其活性。例如，可以对化合物进行修饰或装载在其他载体上，以提高其在体内的半衰期;或者可以与已知的穿透肽连接，以促进本发明化合物的透皮吸收或者越过血脑屏障等。总之，本领域技术人员可对本发明的化合物进行各种修饰以提高递送效率或用于其他目的并保持其活性。对于病毒的修饰，例如，本领域技术人员可以进行基因修饰，以使其表达其他的抵抗癌症的活性成分。这类修饰也是在本发明的范围之内的。
[0015]本发明的作为活性成分的SNS-032和ZD55-TIS可以连同药学上可接受的载体一起使用。除活性成分外，本发明的方法、用途和产品还可以包含合适的药学上可接受的载体，包括促进活性成分加工成制剂(例如适于注射或输注的制剂)的赋形剂和助剂。
[0016]适于注射或输注的制剂可包括水性和非水性无菌注射液和水性和非水性无菌混悬剂，所述无菌注射液可任选地包含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和能使制剂与目的接收者的血液等压的溶质，所述无菌混悬剂可包括悬浮剂和增稠剂。所述制剂可存在于单位剂量或多剂量容器中，例如密封的安瓿，并且可以保存在冻结干燥的(冻干)条件，在立即使用前仅需要加入无菌液体载体，例如注射用水。
[0017]本发明的活性成分任选地可与固体赋形剂相组合，且任选地磨碎所得到的混合物，并且需要时，在加入合适的助剂后，加工颗粒的混合物，以获得所需剂型。合适的赋形剂特别是填充剂例如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇;纤维素或淀粉制剂、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。需要时，可以加入崩解剂，例如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐例如海藻酸钠。
[0018]在本发明中施用SNS-032和ZD55-TIS的量可为能协同治疗受试者中胰腺癌或抑制胰腺癌细胞增殖的任何量，其可以是相当于约0.l-15mg SNS-032，优选0.0l-20mg SNS-032和1-100M0IZD55-TIS的剂量。更优选地，剂量单位包括约l-4mg的SNS-032和5-80M0IZD55-TIS。最优选地，剂量单位包括约2-3mg的SNS-032和10-60M0IZD55-TIS。有效量的测定在本领域技术人员的能力内，特别是根据本文提供的公开内容的启示下。
[0019]根据本发明，本发明的药学产品(药物、药剂)或药物组合物可以以任意有效剂量施用给药受试者。优选地，本发明的药学产品(药物、药剂或药盒)或药物组合物可以以多次剂量给药，例如从约2至约15次剂量，更优选从约4-10次剂量，最优选约6次剂量。在特别优选的实施方案，在给药过程中，以每三周给药约一次的频率将本发明的药学产品(药物、药剂)或药物组合物给药至受试者，例如注射、输注或口服。在特别优选的实施方案，给药为通过静脉注射施用SNS-032，通过腹腔注射ZD55-TIS。
[0020]应当理解本发明的药学产品(药物、药剂或药盒)或药物组合物可以按用于通过任意适宜的途径给药的任意适宜的方式配制。
[0021]本发明的药学产品(药物、药剂)或药物组合物的剂量单位是基于常规进行给药受试者。例如，剂量单位可以给药多于每日一次、每周一次、每月一次等。剂量单位可以是以两次/周为基础给药，即每周两次，例如每三天一次。
[0022]如本文所使用的，“包含”与“包括”、“含有”或“特征在于”同义，并且是包括在内的或开放性的，并且不排除另外的未陈述的元件或方法步骤。术语“包含”在本文中的任何表述，特别是在描述本发明的方法、用途或产品时，应理解为包括基本上由所述组分或元件或步骤组成和由所述组分或元件或步骤组成的那些产品、方法和用途。本文示例性描述的本发明适当地可以在不存在本文未具体公开的任何一种或多种元件、一种或多种限制的情况下进行实践。
[0023]本发明的药学产品(例如药物组合物或药盒)中可包含涉及该药学产品的说明书，且该说明书可以含有如下内容:适应症(例如胰腺癌)、施用剂量(例如上述所示例性说明的)以