温度为80°C、提取过程 中控制pH值为5.5，提取过程中压力设置为:-0.15MPa，每小时提取液回流量设置为3200kg (为总药材总重量的4倍）；然后加入称量好的连翘，继续采用动态热回流提取浓缩罐提取 25min，提取温度为80°C、提取过程中控制pH值为5.5，提取过程中压力设置为:-0.15MPa，每 小时提取液回流量设置为3200kg(为总药材总重量的4倍）；最后加入称量好的金银花，继续 采用动态热回流提取浓缩罐提取25min后，提取温度为80°C、提取过程中控制pH值为5.5,提 取过程中压力设置为:_〇.15MPa，每小时提取液回流量设置为3200kg(为总药材总重量的4 倍）；然后过滤，得提取液，
[0049] 步骤2、将提取液逐步加入浓缩罐中，于80°C的温度下进行减压浓缩，得浓缩液，所 述减压浓缩的压力为-0.15MPa;浓缩过程中控制pH为5.5;
[0050] 步骤3、待浓缩液冷却后，采用5μπι板框过滤器再次过滤以除去杂质，滤液调pH为 5.5后，按每1000kg总药材对应666L 口服液的量定容至533L，即得双黄连口服液。
[0051 ] 对比例2 [0052]原料：
[0053]金银花200kg，黄芩200kg，连翘400kg。
[0054]制备方法：
[0055] 步骤1、按上述药材总重量的8倍称取水6400kg，先将水调pH至5.0,加热至100°C 后，加入称量好的黄芩，采用动态热回流提取浓缩罐提取90min，提取温度为80°C、提取过程 中控制pH值为5.5，提取过程中压力设置为:-0.15MPa，每小时提取液回流量设置为3200kg (为总药材总重量的4倍）；然后加入称量好的连翘，继续采用动态热回流提取浓缩罐提取 50min，提取温度为80°C、提取过程中控制pH值为5.5，提取过程中压力设置为:-0.15MPa，每 小时提取液回流量设置为3200kg(为总药材总重量的4倍)最后加入称量好的金银花，继续 采用动态热回流提取浓缩罐提取50min后，提取温度为80°C、提取过程中控制pH值为5.5,提 取过程中压力设置为:_〇.15MPa，每小时提取液回流量设置为3200kg(为总药材总重量的4 倍）；然后过滤，得提取液，
[0056]步骤2、将提取液逐步加入浓缩罐中，于80°C的温度下进行减压浓缩，得浓缩液，所 述减压浓缩的压力为-ο. 15MPa;浓缩过程中控制pH为5.5;
[0057] 步骤3、待浓缩液冷却后，采用5μπι板框过滤器再次过滤以除去杂质，滤液调pH为 5.5后，按每1000kg总药材对应666L 口服液的量定容至533L，即得双黄连口服液。
[0058] 对比例3(传统工艺）
[0059]原料：
[0060]金银花200kg，黄芩200kg，连翘400kg。
[0061 ]步骤1、将黄芩加水煎煮3次，第一次2小时，第二，第三次各1小时，合并煎液，滤过， 滤液浓缩并再80 °C时加入2mo 1/L盐酸溶液适量调节pH值至1.0-2.0，保温1小时，静置12小 时，滤过，沉淀加6-8倍量水，用40 %氢氧化钠溶液调节pH值至7.0，再加等量乙醇，搅拌使溶 解，滤过，滤液用2mol/L盐酸溶液调节pH值至2.0，60°C保温30分钟，静置12小时，滤过，沉淀 加乙醇洗至pH值至7.0，挥尽乙醇，得黄芩提取液。
[0062] 步骤2、金银花、连翘加水温浸半小时后，煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过， 滤液浓缩至相对密度为1.20-1.25(70-80°C )，冷至40°C时缓慢加入乙醇，使含醇量达75%， 充分搅拌，静置12小时，滤取上清液，残渣加75 %乙醇适量，搅匀，静置12小时，滤过，合并乙 醇液，回收乙醇至无醇味，得金银花、连翘提取液；
[0063] 步骤3、向步骤2得到的金银花、连翘提取液中，加入步骤1所得黄芩提取液，并加水 适量，以40 %氢氧化钠溶液调pH值至7.0，搅匀，冷藏(4-8°C) 72小时，滤过，滤液调节pH值至 7.0，加水制成533L，搅匀，静置12小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
[0064] 效果例1
[0065] 各实施例和对比例所制得的双黄连口服液中有效成分(绿原酸、连翘苷、黄芩苷） 的含量，结果见表1;
[0066] 绿原酸的含量测定方法:高效液相色谱法。
[0067] 具体步骤：
[0068]色谱条件与系统适应性试验：用十八基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-冰醋酸 (20:80:1)为流动相，检测波长324nm。理论版数按绿原酸峰计算应不低于6000。
[0069] 对照品溶液的制备:精密称取绿原酸对照品10mg，置250mL棕色量瓶中，加水稀释 至刻度，制成lmL含40yg的溶液，即得。
[0070] 供试品溶液的制备:精密称取本品2mL，置50mL棕色量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀 即得。
[0071] 测定法:分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10yL，注入液相色谱仪，测定， 即得。
[0072] 连翘苷的含量测定方法:高效液相色谱法。
[0073] 具体步骤：
[0074]色谱条件与系统适应性试验：用十八基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水（25:75) 为流动相，检测波长278nm。理论板数按连翘苷峰计算应不低于6000。
[0075] 对照品溶液的制备：取连翘苷对照品6mg，置100mL量瓶中，加50%甲醇制成每lmL 含60yg的溶液，即得。
[0076]供试品溶液的制备:精密称取本品lmL，加在中性氧化铝柱（100-120目，6g，内径为 lcm)上，用70%乙醇40mL洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣加50%甲醇适量，温热使溶解， 转移至5mL量瓶中，并稀释至刻度摇匀即得。
[0077] 测定法:分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10yL，注入液相色谱仪，测定， 即得。
[0078] 黄芩苷的含量测定方法:高效液相色谱法。
[0079] 具体步骤：
[0080]色谱条件与系统适应性试验：用十八基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-冰醋酸 (50:50:1)为流动相，检测波长274nm。理论版数按黄芩苷峰计算应不低于1500。
[0081 ] 对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品10mg，置100mL量瓶中，加50%甲醇适 量，置水浴中振摇使溶解，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
[0082] 供试品溶液的制备:精密称取本品lmL，置50mL量瓶中，加50 %甲醇适量，超声处理 20分钟，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀即得。
[0083]测定法:分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各5yL，注入液相色谱仪，测定，即 得。
[0084]表1各实施例和对比例制得的双黄连口服液中有效成分的含量
[0087] 由表中数据可知，在所用原料的重量相同，制得的双黄连口服液的体积相同的情 况下，采用实施例1~4所述方法制得的双黄连口服液中有效成分绿原酸、连翘苷和黄芩苷 的含量较高，而采用提取时间较短的对比例1和提取时间较长的对比例2其中的有效成分绿 原酸、连翘苷和黄芩苷的含量明显偏低;其原因主要在于，本发明采用的是动态回流浓缩提 取法，在提取过程中同时进行着浓缩，而将提取时间延长或缩短后，不仅影响到提取时间， 还影响到药液的浓缩量，使药液在提取过程中料液不能达到最优，因此，可以得出：提取工 艺不同，其有效成分绿原酸、连翘苷和黄芩苷的提取率亦有很大不同，且提取时间是决定所 制得的双黄连口服液中有效成分含量的关键因素，每种原料的提取时间不同，其有效成分 的提取效率差异显著。
[0088] 采用实施例1~4所述方法制得的双黄连口服液中有效成分绿原酸、连翘苷和黄芩 苷的含量远优于采用传统工艺的对比例3制得的双黄连口服液，其原因主要在于，绿原酸、 连翘苷和黄芩苷的提取对工艺条件要求严格，而采用传统工艺，步骤长，操作繁琐，很难将 其提取控制在三种药材的最优提取条件上，且还需要多次醇沉工艺，造成有效成分的损失。
[0089]以上所述实施方式仅为本发明的优选实施例，而并非本发明可行实施的穷举。对 于本领域一般技术人员而言，在不背离本发明原理和精神的前提下对其所作出的任何显而 易见的改动，都应当被认为包含在本发明的权利要求保护范围之内。
【主权项】
1. 一种兽用双黄连口服液的复方精提工艺，其特征在于，具体包括以下步骤： 步骤1、先将水调pH至5.0，加热至80-100 °C后，加入黄芩，提取40-60min，然后加入连 翘，继续提取30-40min，最后加入金银花，继续提取30-40min，然后过滤，得提取液，提取过 程全程中控制温度为80-100 °C，控制pH为5.5; 步骤2、将提取液逐步加入浓缩罐中，于80°C的温度下进行减压浓缩，得浓缩液，减压浓 缩过程中控制pH为5.5; 步骤3、待浓缩液冷却后，再次过滤，滤液调pH为5.5后，定容，即得双黄连口服液。2. 根据权利要求1所述的一种兽用双黄连口服液的复方精提工艺，其特征在于，步骤1 中所用水的重量为:黄芩、连翘和金银花重量总和的7-9倍。3. 根据权利要求1所述的一种兽用双黄连口服液的复方精提工艺，其特征在于，步骤1 所述提取均采用动态回流浓缩提取法;所述动态回流浓缩提取法采用的是:动态热回流提 取浓缩罐。4. 根据权利要求3所述的一种兽用双黄连口服液的复方精提工艺，其特征在于，所述动 态热回流提取浓缩罐的参数设置为:提取压力为-0.15MPa，每小时提取液的回流量为药材 总重量的4倍。5. 根据权利要求1所述的一种兽用双黄连口服液的复方精提工艺，其特征在于，步骤2 所述减压浓缩的压力为-〇· 15MPa。6. 根据权利要求1所述的一种兽用双黄连口服液的复方精提工艺，其特征在于，步骤3 所述过滤采用的是5μπι板框过滤器。7. 根据权利要求1所述的一种兽用双黄连口服液的复方精提工艺，其特征在于，步骤3 定容后所得口服液的体积为:每1000kg总药材对应666L 口服液。
【专利摘要】本发明涉及一种兽用双黄连口服液的复方精提工艺，具体包括以下步骤：1、先将水调pH至5.0，加热至80-100℃后，加入黄芩，提取40-60min，然后加入连翘，继续提取30-40min，最后加入金银花，继续提取30-40min，然后过滤，得提取液；2、将提取液逐步加入浓缩罐中，于80℃的温度下进行减压浓缩，得浓缩液；3、待浓缩液冷却后，再次过滤，滤液调pH为5.5后，定容，即得；本发明通过精确制定的加药顺序和提取时间，采用动态回流浓缩提取方法，解决了提取中各药材相互影响问题；本发明工艺简单，步骤少，所需时间短、操作成本低，使用该方法制备的双黄连口服液有效成分含量高、稳定性好，安全有效。
【IPC分类】A61K36/634, A61K9/08
【公开号】CN105616517
【申请号】CN201610068470
【发明人】田继业, 李定刚, 吴里明, 王宏伟, 陈静, 杜伟伟
【申请人】保定冀中药业有限公司
【公开日】2016年6月1日
【申请日】2016年2月2日