一种鹿瓜多肽注射制剂的制作方法_2

文档序号:9917799阅读:来源:国知局
量一万超滤系统、截 取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,得到鹿骨提取液,转入冷库零下18°C保存。
[0019] 取甜瓜子每次加2倍量的水,经125°C提取三次,每次60分钟,合并提取液,得到甜 瓜子初提液;甜瓜子初提液加入2摩尔/升盐酸溶液,调pH值至2. 5, (TC静置16小时,浓缩 至甜瓜子投料量的3倍,降温至30°C,用离心机离心,离心液再用截取分子量十万超滤系统 超滤,保留透过液,得甜瓜子酸处理液;甜瓜子酸处理液加5摩尔/升氢氧化钠溶液,调pH 值至9. 2,得甜瓜子碱处理液,浓缩至投料量的2-4倍,降温至30°C,离心,离心液中加入2 摩尔/升盐酸溶液,调PH值至6. 6,得甜瓜子中和液;甜瓜子中和液依次用截取分子量十万 超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,得 甜瓜子提取液,转入冷库零下18°C保存。
[0020] 取鹿骨提取液和甜瓜子提取液解冻后,按照多肽含量重量比2 :0. 8混合混合制得 鹿瓜多肽提取液,加入活性炭,过滤,滤液用截取分子量8000的超滤膜超滤,保留透过液, 透过液经0. 22 μ m滤芯过滤,浓缩至多肽含量为4. 5mg/ml,灌装,得到注射液100支。
[0021] 试验2组:取鹿骨,去除骨髓,称重,加2. 5倍鹿骨投料量的水,加入鹿骨重量 2. 0 %的胰蛋白酶,保存1. 5小时,125 °C提取,保持60分钟,提取液在除油罐中,静置,撇去 上浮油脂,得到鹿骨初提液,鹿骨初提液加2摩尔/升盐酸溶液,调pH值至4. 0, (TC静置16 小时,取上清液,弃去底部沉淀,浓缩至鹿骨投料量的0. 3倍,5°C静置16小时,取上清液,弃 去底部沉淀,用30 μ m预处理柱过滤,滤液用5摩尔/升氢氧化钠溶液调pH值至9. 5,浓缩 至鹿骨投料量〇. 3倍,5°C静置16小时,取上清液,弃去底部沉淀,上清液加入2摩尔/升盐 酸溶液调PH值至7. 0后,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取 分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,得到鹿骨提取液,转入冷库零下18°C保存。
[0022] 甜瓜子提取液制备方法包括:取甜瓜子每次加2倍量的水,经121°C提取三次,每 次60分钟,合并提取液,得到甜瓜子初提液;甜瓜子初提液加入2摩尔/升盐酸溶液,调pH 值至4. 0, 5°C静置16小时,浓缩至甜瓜子投料量的3倍,降温至30°C,用离心机离心,离心 液再用截取分子量十万超滤系统超滤,保留透过液,得甜瓜子酸处理液;甜瓜子酸处理液 加5摩尔/升氢氧化钠溶液,调pH值至9. 5,得甜瓜子碱处理液,碱处理液5°C静置18小 时,浓缩至投料量的3倍,降温至30°C,离心,离心液中加入2摩尔/升盐酸溶液,调pH值 至7. 0,得甜瓜子中和液;甜瓜子中和液依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万 超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,得甜瓜子提取液,转入冷库零 下18°C保存。
[0023] 取鹿骨提取液和甜瓜子提取液解冻后,按照多肽含量重量比2 :0. 8混合混合制得 鹿瓜多肽提取液,加入活性炭,过滤,滤液用截取分子量8000的超滤膜超滤,保留透过液, 透过液经0. 22 μ m滤芯过滤,浓缩至多肽含量为4. 5mg/ml,灌装,得到注射液100支。
[0024] 试验3组:取鹿骨,去除骨髓,称重,加2. 5倍鹿骨投料量的水,加入鹿骨重量 I. 0 %的木瓜蛋白酶和胰蛋白酶,其中内切酶与胃蛋白酶的重量比为0. 5 :1,撇去上浮油 月旨,得到鹿骨初提液,鹿骨初提液加2摩尔/升盐酸溶液,调pH值至3. 3,加热至KKTC,保 持20分钟,25°C静置16小时,取上清液,弃去底部沉淀,浓缩至鹿骨投料量的0. 3倍,25°C 静置16小时,取上清液,弃去底部沉淀,用30 μ m预处理柱过滤,滤液用5摩尔/升氢氧化 钠溶液调pH值至8. 8,浓缩至鹿骨投料量0. 3倍,25°C静置16小时,取上清液,弃去底部沉 淀,上清液加入2摩尔/升盐酸溶液调pH值至7. 0后,依次用截取分子量十万超滤系统、截 取分子量一万超滤系统、截取分子量六千超滤机组,进行超滤,保留透过液,得到鹿骨提取 液,转入冷库零下18°C保存。
[0025] 取甜瓜子每次加2倍量的水,经125°C提取三次,每次60分钟,合并提取液,得到 甜瓜子初提液;甜瓜子初提液加入2摩尔/升盐酸溶液,调pH值至3. 3, 25°C静置16小时, 浓缩至甜瓜子投料量的3倍,降温至30°C,用离心机离心,离心液再用截取分子量十万超 滤系统超滤,保留透过液,得甜瓜子酸处理液;甜瓜子酸处理液加5摩尔/升氢氧化钠溶液, 调PH值至8. 8,得甜瓜子碱处理液,碱处理液先在-28°C冷库速冻16小时;将甜瓜子碱处理 液解冻后,浓缩至投料量的3倍,降温至30°C,离心,离心液中加入2摩尔/升盐酸溶液,调 pH值至6. 2,得甜瓜子中和液;甜瓜子中和液依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量 一万超滤系统、截取分子量六千超滤机组,进行超滤,保留透过液,得甜瓜子提取液,转入冷 库零下18 °C保存。
[0026] 取鹿骨提取液和甜瓜子提取液解冻后,按照多肽含量重量比2 :0. 8混合混合制得 鹿瓜多肽提取液,加入活性炭,过滤,滤液用截取分子量8000的超滤膜超滤,保留透过液, 透过液经0. 22 μ m滤芯过滤,浓缩至多肽含量为4. 5mg/ml,灌装,得到注射液100支。
[0027] 试验4组(本发明试验方法):取鹿骨,去除骨髓,称重,加2. 5倍鹿骨投料量 的水,加入鹿骨重量2. O %的木瓜蛋白酶和胰蛋白酶,木瓜蛋白酶与胰蛋白酶的重量比为 0. 30:1,保存1. 5小时,125°C提取,保持60分钟,提取液在除油罐中,静置,撇去上浮油脂, 得到鹿骨初提液,鹿骨初提液加2摩尔/升盐酸溶液,调pH值至3. 3,加热至90°C,保持30 分钟,25°C静置16小时,取上清液,弃去底部沉淀,浓缩至鹿骨投料量的0. 3倍,25°C静置16 小时,取上清液,弃去底部沉淀,用30 μ m预处理柱过滤,滤液用5摩尔/升氢氧化钠溶液调 pH值至8. 8,浓缩至鹿骨投料量0. 3倍,25°C静置16小时,取上清液,弃去底部沉淀,上清液 加入2摩尔/升盐酸溶液调pH值至6. 2后,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量 一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,得到鹿骨提取液,转入冷 库零下18 °C保存。
[0028] 取甜瓜子每次加2倍量的水,经125°C提取三次,每次60分钟,合并提取液,得到 甜瓜子初提液;甜瓜子初提液加入2摩尔/升盐酸溶液,调pH值至3. 3, 25°C静置16小时, 浓缩至甜瓜子投料量的3倍,降温至30°C,用离心机离心,离心液再用截取分子量十万超滤 系统超滤,保留透过液,得甜瓜子酸处理液;甜瓜子酸处理液加5摩尔/升氢氧化钠溶液,调 pH值至8. 8,得甜瓜子碱处理液,碱处理液先在-28°C冷库速冻16小时,再转入-18°C冷库 冷冻保存88小时;将甜瓜子碱处理液解冻后,浓缩至投料量的3倍,降温至30°C,离心,离 心液中加入2摩尔/升盐酸溶液,调pH值至6. 2,得甜瓜子中和液;甜瓜子中和液依次用截 取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤, 保留透过液,得甜瓜子提取液,转入冷库零下18°C保存。
[0029] 取鹿骨提取液和甜瓜子提取液解冻后,按照多肽含量重量比2 :0. 8混合混合制得 鹿瓜多肽提取液,加入活性炭,过滤,滤液用截取分子量8000的超滤膜超滤,保留透过液, 透过液经0. 22 μ m滤芯过滤,浓缩至多肽含量为4. 5mg/ml,灌装,得到注射液100支。
[0030] 试验5组(本发明试验方法):取鹿骨,去除骨髓,称重,加2. 5倍鹿骨投料量 的水,加入鹿骨重量2. 0 %的木瓜蛋白酶和胰蛋白酶,木瓜蛋白酶与胰蛋白酶的重量比为 0. 30:1,保存1. 5小时,125°C提取,保持60分钟,提取液在除油罐中,静置,撇去上浮油脂, 得到鹿骨初提液,鹿骨初提液加2摩尔/升盐酸溶液,调pH值至3. 5,加热至85°C,保持34 分钟,20°C静置14小时,取上清液,弃去底部沉淀,浓缩至鹿骨投料量的0. 25倍,30°C静置 13小时,取上清液,弃去底部沉淀,用30 μ m预处理柱过滤,滤液用5摩尔/升氢氧化钠溶液 调pH值至8. 9,浓缩至鹿骨投料量0. 4倍,28°C静置12. 5小时,取上清液,弃去底部沉淀,上 清液加入2摩尔/升盐酸溶液调pH值至6. 0后,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分 子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,得到鹿骨提取液, 转入冷库零下18 °C保存。
[0031] 取甜瓜子每次加2倍量的水,经125°C提取三次,每次60分钟,合并提取液,得到 甜瓜子初提液;甜瓜子初提液加入2摩尔/升盐酸溶液,调pH值至3. 5, 28°C静置12小时, 浓缩至甜瓜子投料量的3倍,降温至25°C,用离心机离心,离心液再用截取分子量十万超滤 系统超滤,保留透过液,得甜瓜子酸处理液;甜瓜子酸处理液加5摩尔/升氢氧化钠溶液,调 pH值至8. 6,得甜瓜子碱处理液,碱处理液先在-25°C冷库速冻17小时,再转入-16°C冷库 冷冻保存96小时;将甜瓜子
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