一种卵黄生物蛋白皮肤修护敷料及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及皮肤的保护与护理技术领域，具体是涉及一种卵黄生物蛋白皮肤修护 敷料及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 医学整形美容是未来的发展趋势，例如面部激光、光子嫩肤、微晶磨削、果酸活肤 术等，这些医疗美容术后需要对创面进行护理。
[0003] 而目前传统产品成分主要以中药、化药、抗生素为主。传统药物在作用时会产生不 同程度的副作用，并难以选择性杀灭病原菌。一些较为先进的针对各种手术创伤可促进恢 复能的医用敷料还不够完美，并不能有效防止细菌感染，并快速促进表皮创面快速还原。
[0004] 因此，本发明的目的就是针对以上不足，研发出一种基于卵黄生物蛋白的皮肤修 护敷料，不仅适用于面部激光、光子嫩肤、微晶磨削、果酸活肤术等术后创伤皮肤的保护与 护理，还适用于皮炎湿疹、敏感性皮肤、激素依赖性皮炎等屏障受损皮肤的保护与护理。
【发明内容】
[0005] 本发明解决的第一个技术问题是提供一种能够靶向灭活多种引起皮肤感染的病 原体、并能修复受损肌肤的卵黄生物蛋白液。
[0006] 本发明解决的第二个技术问题是提供一种包含所述卵黄生物蛋白液的卵黄生物 蛋白皮肤修护敷料及其制备方法。
[0007] 为解决上述第一个技术问题，本发明所采用的技术方案是：
[0008] -种卵黄生物蛋白液，按质量百分比计，主要成分如下：多联卵黄蛋白1-5%、表皮 生长因子0.1-0.3%、余量为透明质酸溶液，所述多联卵黄蛋白是以一种或多种能够引起皮 肤感染的病原体作为免疫原，对母鸡进行注射免疫，取母鸡生产的鸡蛋并分离纯化得到的 卵黄抗体。
[0009] 进一步地，在上述方案中，所述病原体包括但不限于痤疮丙酸杆菌、麻风杆菌、淋 球菌、蠕形螨、疥螨。
[0010] 进一步地，在上述方案中，所述多联卵黄蛋白的制备方法为：
[0011] (1)用培养基分别培养痤疮丙酸杆菌麻风杆菌、淋球菌、蠕形螨、疥螨;得到的菌体 分别用甲醛灭活，乳化制成油乳剂灭活菌苗；
[0012] (2)将母鸡分别用上述步骤(1)得到的灭活菌苗进行免疫，取母鸡生产的鸡蛋并分 离得到卵黄液；
[0013] (3)将步骤(2)得到的蛋黄液与灭菌蒸馏水按1:1-5的体积比混合，350-500rpm振 荡15-30min，再按1: 2的体积比加入灭菌蒸馏水，600rpm振荡5-10min，调节pH至5.1，4°C静 置10小时，然后6000rpm离心10分钟，收集上清液；
[0014] (4)将等体积饱和硫酸铵水溶液加入步骤(3)得到的上清液中，4 °C静置12小时， SOOOrpm离心20分钟，取沉淀;按1:6的质量比用蒸馏水溶解所得到的沉淀，得到溶解液，然 后加入相对于所得溶解液1.3%。的正辛酸，混匀；
[0015] (5)按1:2的体积比将饱和硫酸铵水溶液与步骤⑷得到溶解液混勾，4°C静置12小 时，8000rpm离心20分钟，取沉淀，按1:4的质量比用无菌、pH7.2、0.0 lM的PBS缓冲液溶解，得 到的溶液用IOOKu超滤膜包进行除盐浓缩，得到浓缩液；
[0016] (6)步骤(5)得到的浓缩液中加入0.05-0.1%的甲醛，然后在密封状态下室温静置 3-5小时，然后用微孔滤膜过滤，得到滤液，即为卵黄抗体。
[0017] 优选地，所述母鸡为未经人工免疫、已开产且产蛋正常的健康母鸡。
[0018] 进一步地，在上述方案中，所述透明质酸溶液的浓度为6-8g/L，该透明质酸溶液呈 凝胶状，溶胀率高，凝胶弹性强度大，具有较好的促进皮肤表皮细胞增殖的作用。
[0019] 为解决上述第二个技术问题，本发明所采用的技术方案是：
[0020] -种包含所述的卵黄生物蛋白液的卵黄生物蛋白皮肤修护敷料，是由所述卵黄生 物蛋白液与海藻酸钠、聚乙烯醇、壳聚糖、山梨醇、丙三醇、复合维生素、丝素蛋白按照一定 的配比组成。
[0021] 进一步地，其制备方法为:在所述卵黄生物蛋白液中加入相对于该卵黄生物蛋白 液重量0.3-1.6%的海藻酸钠、2-5%的聚乙烯醇、1-5%的壳聚糖、0.1-0.5%的山梨醇、1-1.5%的丙三醇、0.2-1%复合维生素、0.3-2%的丝素蛋白，搅拌均匀，即得到所述卵黄生物 蛋白皮肤修护敷料。所述复合维生素是由维生素 A、维生素 C、维生素 E按1:1.2: 2组成的混合 物，不仅具有抗氧化、清除自由基的功能，还能促进表皮细胞生长。
[0022] 进一步地，在上述方案中，所述搅拌过程中保持物料温度为35_50°C，提高物料的 融合度。
[0023] 本发明的有益效果是:本发明的多联卵黄蛋白能够靶向灭活多种引起皮肤感染的 病原体，可促进手术创伤恢复，并且可以有效防止细菌感染，对人体无刺激，所加入的表皮 生长因子不仅能够修复创伤，促进表皮创面快速还原，还能够滋润皮肤，消除皱纹、伤疤，与 多联卵黄蛋白的生物相容性较好，不产生依赖性及耐药性，无过敏性，安全高效。适用于皮 炎湿疹、敏感性皮肤、激素依赖性皮炎等屏障受损皮肤的保护与护理，同时适用于面部激 光、光子嫩肤、微晶磨削、果酸活肤术等术后创伤皮肤的保护与护理。
【具体实施方式】 [0024] 实施例1:
[0025] -种卵黄生物蛋白液，按质量百分比计，主要成分如下：多联卵黄蛋白1%、表皮生 长因子0.1%、余量为透明质酸溶液，所述多联卵黄蛋白是以一种或多种能够引起皮肤感染 的病原体作为免疫原，对母鸡进行注射免疫，取母鸡生产的鸡蛋并分离纯化得到的卵黄抗 体。
[0026]其中，所述透明质酸溶液的浓度为6g/L，该透明质酸溶液呈凝胶状，溶胀率高，凝 胶弹性强度大，具有较好的促进皮肤表皮细胞增殖的作用。所述病原体包括但不限于痤疮 丙酸杆菌、麻风杆菌、淋球菌、蠕形螨、疥螨。
[0027] 所述多联卵黄蛋白的制备方法为：
[0028] (1)用培养基分别培养痤疮丙酸杆菌麻风杆菌、淋球菌、蠕形螨、疥螨;得到的菌体 分别用甲醛灭活，乳化制成油乳剂灭活菌苗；
[0029] (2)将母鸡分别用上述步骤（1)得到的灭活菌苗进行免疫，优选地，所述母鸡为未 经人工免疫、已开产且产蛋正常的健康母鸡，取母鸡生产的鸡蛋并分离得到卵黄液；
[0030] (3)将步骤（2)得到的蛋黄液与灭菌蒸馏水按1:1-5的体积比混合，350rpm振荡 15min，再按1:2的体积比加入灭菌蒸馏水，600rpm振荡5min，调节pH至5.1，4°C静置10小时， 然后6000rpm离心10分钟，收集上清液；
[0031] (4)将等体积饱和硫酸铵水溶液加入步骤(3)得到的上清液中，4 °C静置12小时， SOOOrpm离心20分钟，取沉淀;按1:6的质量比用蒸馏水溶解所得到的沉淀，得到溶解液，然 后加入相对于所得溶解液1.3%。的正辛酸，混匀；
[0032] (5)按1:2的体积比将饱和硫酸铵水溶液与步骤(4)得到溶解液混匀，4°C静置12小 时，8000rpm离心20分钟，取沉淀，按1:4的质量比用无菌、pH7.2、0.0 lM的PBS缓冲液溶解，得 到的溶液用IOOKu超滤膜包进行除盐浓缩，得到浓缩液；
[0033] (6)步骤(5)得到的浓缩液中加入0.05%的甲醛，然后在密封状态下室温静置3小 时，然后用微孔滤膜过滤，得到滤液，即为卵黄抗体。
[0034] 包含所述的卵黄生物蛋白液的卵黄生物蛋白皮肤修护敷料，是由所述卵黄生物蛋 白液与海藻酸钠、聚乙烯醇、壳聚糖、山梨醇、丙三醇、复合维生素、丝素蛋白按照一定的配 比组成。所述复合维生素是由维生素 A、维生素 C、维生素 E按1:1.2: 2组成的混合物，不仅具 有抗氧化、清除自由基的功能，还能促进表皮细胞生长。
[0035] 其制备方法为：在所述卵黄生物蛋白液中加入相对于该卵黄生物蛋白液重量 〇. 3%的海藻酸钠、2%的聚乙烯醇、1 %的壳聚糖、0.1 %的山梨醇、1 %的丙三醇、0.2%复合 维生素、0.3%的丝素蛋白，保持物料温度35°C进行搅拌，提高物料的融合度，搅拌均匀，即 得到所述卵黄生物蛋白皮肤修护敷料。
[0036] 实施例2:
[0037] -种卵黄生物蛋白液，按质量百分比计，主要成分如下：多联卵黄蛋白3%、表皮生 长因子0.2%、余量为透明质酸溶液，所述多联卵黄蛋白是以一种或多种能够引起皮肤感染 的病原体作为免疫原，对母鸡进行注射免疫，取母鸡生产的鸡蛋并分离纯化得到的卵黄抗 体。
[0038]其中，所述透明质酸溶液的浓度为7g/L，该透明质酸溶液呈凝胶状，溶胀率高，凝 胶弹性强度大，具有较好的促进皮肤表皮细胞增殖的作用。所述病原体包括但不限于痤疮 丙酸杆菌、麻风杆菌、淋球菌、蠕形螨、疥螨。
[0039] 所述多联卵黄蛋白的制备方法为：
[0040] (1)用培养基分别培养痤疮丙酸杆菌麻风杆菌、淋球菌、蠕形螨、疥螨;得到的菌体 分别用甲醛灭活，乳化制成油乳剂灭活菌苗；
[0041] (2)将母鸡分别用上述步骤（1)得到的灭活菌苗进行免疫，优选地，所述母鸡为未 经人工免疫、已开产且产蛋正常的健康母鸡，取母鸡生产的鸡蛋并分离得到卵黄液；
[0042] (3)将步骤（2)得到的蛋黄液与灭菌蒸馏水按1 : 3的体积比混合，425rpm振荡 22.5min，再按1: 2的体积比加入灭菌蒸馏水，600rpm振荡5-10min，调节pH至5.1，4°C静置10 小时，然后6000rpm离心10分钟，收集上清液；
[0043] (4)将等体积饱和硫酸铵水溶液加入步骤(3)得到的上清液中，4°C静置12小时， SOOOrpm离心20分钟，取沉淀;按1:6的质量比用蒸馏水溶解所得到的沉淀，得到溶解液，然 后加入相对于所得溶解液1.3%。的正辛酸，混匀；
[0044] (5)按1:2的体积比将饱和硫酸铵水溶液与步骤(4)得到溶解液混匀，4°C静置12小 时，8000rpm离心20分钟，取沉淀，按1:4的质量比用无菌、pH7.2、0.0 lM的PBS缓冲液溶解，得 到的溶液用IOOKu超滤膜包进行除盐浓缩，得到浓缩液；
[0045] (6)步骤(5)得到的浓缩液中加入0.075%的甲醛，