丹红注射液作为特非那定心脏不良反应拮抗剂的应用

丹红注射液作为特非那定心脏不良反应拮抗剂的应用
【专利摘要】本发明公开了丹红注射液作为作为特非那定心脏不良反应拮抗剂的应用。本发明克服了现有技术应用方面的技术偏见，通过实验得出，丹红注射液对特非那定引起的斑马鱼心脏节律变化有明显的改善作用。并且丹红注射液在浓度≤30μL/mL时，对正常斑马鱼连续6天未显示出明显致畸作用。基于丹红注射液在临床上的广泛应用，可为特非那定合并用药和增强其安全性提供理论依据。
【专利说明】
丹红注射液作为特非那定心脏不良反应拮抗剂的应用
技术领域
[0001] 本发明涉及一种丹红注射液的应用，特别涉及一种丹红注射液作为特非那定心脏 不良反应拮抗剂的应用，属于药物开发技术领域。
【背景技术】
[0002] 随着社会经济的发展，尤其是人口老龄化及城镇化进程的加速，中国心血管疾病 危险因素流行趋势呈明显上升态势，导致了心血管疾病的发病人数持续增加。据《中国心血 管病报告2014》公布，全国有心血管病患者2.9亿，每5个成人中有1名患心血管病。心血管疾 病死亡率居各种疾病之首，每5例死亡者中就有2例死于心血管病。据《中国心血管病报告 2014》公布，对全国22家省级医院心内科住院患者的回顾性调查显示，心内科住院患者中心 律失常占26.8%。植入性心脏起搏器是针对心动过缓唯一有效的治疗方法，手术成功率高， 并发症低。导管射频消融术(RFCA)根治预激综合征(WPW)和室上性心动过速(SVT)作为成熟 技术已在我国广泛使用。我国的心律失常在健康有序地发展，但仍然存在困难与不足，主要 表现在:开展起搏器、ICD、CRT、房颤射频消融手术的医院不足、专业人员及技术缺乏;医保 支付不足等方面。
[0003] 特非那定为第二代抗组胺药，化学名为α-[4_1，1-二甲基乙基)苯基]-4-(羟基-二 苯甲基)-1_哌啶丁醇。用于治疗过敏性疾病。它的最大优点是不会对中枢神经系统产生镇 静作用，因此不会产生嗜睡、困倦、乏力、注意力不集中等副作用。但是临床使用发现特非那 定可导致严重的心率失常，于上世纪90年代末在欧美等国家撤市或限制使用，该药目前在 我国以处方药管理。特非那定的药物本身而非代谢产物有诱发心律失常的作用。特非那定 引起的偶发尖端扭转性室速发生于那些特非那定代谢受损的患者。特非那定诱发心律失常 的机制和其他能够引起尖端扭转型室速的药物相似，是由于其阻滞了钾通道。阻断了心室 肌细胞膜上快速激活的延迟整流钾电流（IKr)，使心肌复极时间及动作电位时间延长，表现 为体表心电图QT间期延长，心肌各部分复极离散度增加，QT间期延长，产生早期后除极 (EAD)和触发活动，继而导致多型性室性心律失常及尖端扭转型室速(TdP)。
[0004] 特非那定不合理用药导致的心脏毒性是明显存在的，我国对特非那定实施处方药 管理，说明书中已对心脏毒性等风险已进行了提示，建议医务人员严格掌握适应症，避免禁 忌证用药，控制用药剂量疗程。流行病学调查发现特非那定引起的心脏毒性并不比其他药 明显，如果严格控制禁忌症和不良的合并用药，对于原有心血管系统疾病的患者权衡利弊， 警惕临床应用该药的不良反应，规范用药剂量及合并药物，对可能出现的不良反应提前预 防用药，将提高特非那定临床用药的有效性和安全性。
[0005] 丹红注射液是以丹参为主药、红花为辅药制成的中药注射剂，具有活血化瘀，通脉 舒络的功效。经专利和文献检索，未发现丹红注射液用于拮抗特非那定心脏不良反应药物 方面的研究或报道。

【发明内容】

[0006] 针对现有的特非那定临床不良反应现状，本发明所要解决的技术问题是提供一种 丹红注射液作为特非那定心脏不良反应拮抗剂的应用。
[0007] 术语说明：
[0008] 丹红注射液:收载于国家中成药标准汇编，标准编号:WS-11220(ZD-1220)-2002。
[0009] 丹红注射液配方:丹参750克，红花250克，注射用氯化钠7克，制成1000mL。
[0010] 丹红注射液制备方法:丹参用稀乙醇浸提2次，取滤液。药渣与红花用水浸提2次， 取滤液。合并滤液，浓缩至清膏，加入氯化钠至等渗，调节PH6-7,滤过，冷藏，加注射用水至 规定量，滤过，灌封，灭菌，即得。
[0011] 本发明的技术方案如下：
[0012] 丹红注射液作为特非那定心脏不良反应拮抗剂的应用。
[0013] 根据本发明优选的，所述的应用，丹红注射液临床用法用量为：肌肉注射一次1-2ml，一日1-2次;或者静脉注射，一次3-4ml，加入质量浓度50 %葡萄糖注射液20ml稀释后缓 慢注射，一日1-2次。
[0014] 根据本发明优选的，所述的应用，所述心脏不良反应包括尖端扭转型室性心动过 速、阵发性室性心动过速、窦性心动过缓伴心律不齐、完全右束支传导阻滞和/或心房纤颤。
[0015] 根据本发明优选的，所述的应用，丹红注射液与特非那定的临床使用时间是同时 使用。
[0016] 有益效果
[0017] 本发明克服了现有技术应用方面的技术偏见，丹红注射液具有较优的缓解特非那 定心脏不良反应的作用。通过实验得出，丹红注射液对特非那定引起的斑马鱼心脏节律变 化有明显的改善作用。并且丹红注射液在浓度彡30yL/mL时，对正常斑马鱼连续6天未显示 出明显致畸作用。基于丹红注射液在临床上的广泛应用，可为特非那定合并用药和增强其 安全性提供理论依据。
[0018] 以下用具体实验例和实施例对本发明作进一步说明，但不限于本发明。
[0019] 实验例1:
[0020] 本实施例所用的丹红注射液，其主要成分为丹参、红花和注射用水，生产厂家为菏 泽步长制药有限公司，生产批号为15051030,国药准字为Z20026866。
[0021 ] 本实施例所用的特非那定购自sigma公司，tefenadine)，原始溶液为浓度为IOmM 溶于二甲基亚砜的溶液。使用时须用培养用水稀释。
[0022]本实验例所用斑马鱼为健康AB品系或野生型斑马鱼（均可购自中国科学院上海生 命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所），饲养在28°C、光周期14小时的鱼房中，并且 将雄鱼与雌鱼分开饲养，养殖用水的配方见表1。鱼房固定于每天早上9:00开始光照，并喂 食丰年虾，而下午16:00再度喂食丰年虾一次，如此饲育之斑马鱼可确保鱼卵质量与产量稳 定。待鱼进食完毕后把鱼捞出来置于配对盒中，每盒中含一对公母鱼，并在配对盒上层插入 隔板将公、母分开，避免鱼在预定时间之前产卵。隔日，欲使用鱼卵前先将隔板抽出，让鱼可 以开始进行追尾，约隔3~5分钟后鱼就会开始产卵。收集鱼卵，以清水小心的冲掉杂质后， 将干净的鱼卵转置到注有胚胎培养液的培养皿后即可。
[0023]表1.养殖用水的配方
[0025] 斑马鱼胚胎的获得与使用：
[0026] 利用野生型的斑马鱼进行交配，配对前一天需使用隔板，以确保胚胎时期的一致 性。使用同一对的胚胎进行实验，生出的胚胎时间控制在半小时以内，降低胚胎间发育时间 的差异性，将胚胎收在加有胚胎培养液的培养皿中，使胚胎不易发霉外，也让水中矿物质含 量一致。将出生后2小时的斑马鱼置于解剖镜下，选取发育正常的斑马鱼仔鱼，放入6孔板 中，每孔15尾。从斑马鱼胚胎出生后2小时左右加入特非那定和丹红注射液，同时加入 0.2_〇1 · L-I的苯硫脲，防止色素沉积过多，影响观察心脏形态。
[0027] 化合物处理：
[0028] 设置6个实验组：1个溶剂对照组，1个特非那定处理组，3个特非那定+丹红注射液 处理组。移除微孔板中的养殖用水，空白对照组中加入5ml养殖用水，溶剂对照组加入5ml含 体积浓度0.1%二甲基亚砜的养殖用水溶液，特非那定处理组加入5ml 4μπι〇1 · L-I特非那 定溶液，特非那定+丹红注射液处理组分别加入4ym〇l · L-I特非那定溶液和4yL/mL、8yL/ mL、16yL/mL和30yL/mL丹红注射液，放入28 °C恒温培养箱中培养6天后，每天更换一次新鲜 药液，至出生后6天每组3个平行孔。
[0029] 表型分析：
[0030] 加入0.3%。(质量百分比）的三卡因麻醉斑马鱼，然后用4% (质量百分比）甲基纤维 素固定于载玻片上，接着在倒置显微镜下观察心脏形态。
[0031] 溶剂对照组和空白对照组中心脏形态正常。特非那定组出现心包水肿和卵黄囊水 月中。随着丹红注射液浓度的增加，心包水肿和卵黄囊水肿逐渐消失(见附图1，出生后6天的 斑马鱼仔鱼）。随着丹红注射液浓度增加，受试斑马鱼死亡率逐渐增加。经实验探索确定丹 红注射液与特非那定共用的最大安全浓度为30yL/mL。因此，可通过观察心脏形态分析丹红 注射液(<30yL/mL)对特非那定毒性的缓解作用。
[0032]定量分析：
[0033]加入浓度为0.3%。(质量百分比）的三卡因麻醉斑马鱼，然后用3% (质量百分比）甲 基纤维素固定于载玻片上，在一个安静的环境下，保持室温25°C，记录15秒内斑马鱼的心跳 数，所得心跳数乘以4为每分钟斑马鱼的心率。
[0034]正常状态下的斑马鱼心房与心室跳动节律一致。特非那定给药后，斑马鱼心房率 与心室率比值在2.5左右。丹红注射液与特非那定共同给药组，斑马鱼心脏心房率与心室率 的比值明显下降，比值在1.5左右。说明丹红注射液对特非那定引起的斑马鱼心脏节律变化 有明显的改善作用(见附图2)。
[0035] 提取实验各组的信使核糖核酸，经过转录组学测序分析发现多个与心脏功能有关 的基因表达水平发生了明显变化，丹红注射液可以恢复这些基因的表达(见表2)。
[0036] 表2每个实验组中心脏电节律相关基因表达水平的变化

【附图说明】
[0039] 图1是丹红注射液对特非那定引起的心包水肿的缓解作用图；其中，A.溶剂对照 组；B.特非那定4μηιο1 · L-1;C.特非那定4μηιο1 · L-I+丹红注射液4yL/mL;D.特非那定4μ mol · L-I+丹红注射液8yL/mL;E.特非那定4μπιο1 · L-I+丹红注射液16yL/mL;
[0040] 图2是丹红注射液对特非那定引起的斑马鱼心律异常现象的保护作用图。
【具体实施方式】
[0041] 本实施例所述丹红注射液的生产厂家为菏泽步长制药有限公司，生产批号为 15051030,国药准字为Z20026866。本实施例所用的特非那定购自sigma公司，原始溶液为浓 度为IOmM溶于二甲基亚砜的溶液。使用时须用培养用水稀释。
[0042] 实施例1、丹红注射液作为特非那定心脏不良反应拮抗剂的应用
[0043] 丹红注射液作为特非那定尖端扭转型室性心动过速不良反应拮抗剂的临床用法 用量:肌肉注射一次l-2ml，一日1-2次。
[0044] 实施例2、丹红注射液作为特非那定心脏不良反应拮抗剂的应用
[0045] 丹红注射液作为特非那定阵发性室性心动过速不良反应拮抗剂的临床用法用量： 静脉注射，一次4ml，加入质量浓度50 %葡萄糖注射液20ml稀释后缓慢注射，一日1-2次。
[0046] 实施例3、丹红注射液作为特非那定心脏不良反应拮抗剂的应用
[0047] 丹红注射液作为特非那定窦性心动过缓伴心律不齐不良反应拮抗剂的临床用法 用量:肌肉注射一次l-2ml，一日1-2次。
[0048] 实施例4、丹红注射液作为特非那定心脏不良反应拮抗剂的应用
[0049] 丹红注射液作为特非那定完全右束支传导阻滞和心房纤颤不良反应拮抗剂的临 床用法用量:静脉注射，一次4ml，加入质量浓度50 %葡萄糖注射液20ml稀释后缓慢注射，一 日1-2次。
【主权项】
1. 丹红注射液作为特非那定心脏不良反应拮抗剂的应用。2. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，丹红注射液临床用法用量为:肌肉注射一次 l-2ml，一日 1-2 次。3. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，丹红注射液临床用法用量为:静脉注射，一次 3-4ml，加入质量浓度50 %葡萄糖注射液20ml稀释后缓慢注射，一日1-2次。4. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述心脏不良反应包括尖端扭转型室性心动 过速、阵发性室性心动过速、窦性心动过缓伴心律不齐、完全右束支传导阻滞和/或心房纤 颤。5. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，丹红注射液与特非那定的临床使用时间是同 时使用。
【文档编号】A61K9/08GK105943605SQ201610498724
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年6月29日
【发明人】何秋霞, 韩利文, 刘可春, 彭维兵, 楚杰, 韩建, 张云, 王希敏, 侯海荣, 王雪, 孙晨, 王荣春, 张姗姗
【申请人】山东省科学院生物研究所