一种低乙醇残留的那曲肝素钙冻干工艺的制作方法
【专利摘要】本发明提出了一种低乙醇残留的那曲肝素钙冻干工艺，经过冻干前预处理、预冻、一次干燥、解析干燥，最终得到那曲肝素钙，通过将乙醇沉淀的那曲肝素钙湿品，直接用纯化水溶解，进行冷冻干燥，经过冻干工艺生产出的那曲肝素钙，乙醇残留量≤0.5％，符合欧洲药典EP7.0中对乙醇残留项目的检测要求。
【专利说明】
一种低乙醇残留的那曲肝素钙冻干工艺
技术领域
[0001]本发明涉及生物技术领域，具体地说是涉及一种低乙醇残留的那曲肝素钙冻干工
-H-
O
【背景技术】
[0002]低分子肝素(LMWH)是一类以未分级肝素为起始物料，通过不同的方法解聚而得到的具有较低分子量的低分子肝素。低分子肝素的平均分子量约为普通肝素的三分之一，与普通肝素相比，LMWH具有生物利用度高、抗血栓作用强、药理作用更加清晰，副作用减少等优点。LMWH的制备方法有多种，不同来源和方法制得的产品其末端结构、分子量及其分布、抗Xa因子活性等均有差异，目前欧洲药典EP7.0和英国药典2010年版收载了5种不同LMWH，分别是达肝素钠、依诺肝素钠、那曲肝素钙、帕肝素钠和汀肝素钠。
[0003]那曲肝素钙(速碧林)是由法国CHOAY研究所发明了全球第一个低分子肝素，它的问世堪称抗凝治疗里程碑式的重大发现，目前葛兰素史克作为该品种最大的生产商。在临床上主要用于预防深静脉血栓、肺动脉血栓，治疗不稳定心绞痛和心肌梗死，还用于体外循环和血液透析等。那曲肝素钙是从猪肠粘膜提取的肝素钠经亚硝酸裂解得到的平均分子量为4300的低分子量肝素产品。按EP7.0和BP2010收载那曲肝素钙的分子量及其活性要求为平均分子量为3600-5000，分子量小于2000的级分比例不得过15%，分子量2000-8000的级分比例在75.0%-95.0%，分子量2000-4000的级分比例在35.0%-55.0%，抗Xa因子与抗I Ia因子活性比应在2.5-4.0。
[0004]那曲肝素钙的制备工艺，通常采用乙醇作为醇沉试剂，从而得到那曲肝素钙湿品原料，再经过真空干燥技术去除湿品中乙醇的残留，但这样方式得到的那曲肝素钙中乙醇残留往往很高。而乙醇作为三类溶剂，按照ICH指导原则及药典要求，有必要对其进行控制。
【发明内容】
[0005]针对上述问题，本发明提出了一种低乙醇残留的那曲肝素钙冻干工艺，能够降低那曲肝素钙原料药中乙醇残留量。
[0006]—种低乙醇残留的那曲肝素钙冻干工艺，包括以下步骤:
[0007](I)冻干前预处理:用注射水制备浓度为10-30%的那曲肝素钙水溶液，45_50°C，
0.1MPa减压蒸馏出三分之一的液体，剩余溶液补加注射水至原体积;用0.22μπι滤膜过滤，过滤后分装在托盘中，药液厚度为0.5-2cm，放入冷冻干燥机内；
[0008](2)预冻阶段:
[0009]a)将隔板温度在15分钟降至_5°C，保温90分钟；
[0010]b)将隔板温度在120分钟由-5°c降至-35°c，保温I分钟；
[0011]c)将隔板温度在I分钟由-35°C降至-45°C，保温240分钟；
[0012](3)—次干燥阶段:
[0013]a)将隔板温度在60分钟由-45°C升至_20°C，保温I分钟，真空度设定为0.25mbar;
[0014]b)将隔板温度在120-240分钟由-20°C升至-10-0°C，保温1500-1800分钟，真空度设定为0.1-0.17mbar ；
[0015](4)解析干燥阶段:
[0016]a)将隔板温度在60分钟由_6°C升至10°C，保温I分钟，真空度设定为0.17mbar;
[0017]b)将隔板温度在60分钟由10°C升至45°C，保温180分钟，真空度设定为0.17mbar;
[0018]c)将隔板温度在I分钟由45°C升至45°C，保温120分钟，真空度设定为0.0lmbar;得到那曲肝素钙。
[0019]优选地，所述冻干前预处理阶段那曲肝素钙浓度为20%。
[0020]优选地，所述冻干前预处理阶段药液厚度为lcm。
[0021]优选地，所述一次干燥阶段b)阶段升温时间定为180分钟。
[0022 ] 优选地，所述一次干燥阶段b)阶段升温至-6 V。
[0023]优选地，所述一次干燥阶段b)阶段保温时间设定为1680分钟。
[0024]优选地，所述一次干燥阶段b)阶段真空度设定为0.14mbar。
[0025]本发明产生的有益效果为:通过将乙醇沉淀的那曲肝素钙湿品，直接用纯化水溶解，进行冷冻干燥，经过冻干工艺生产出的那曲肝素钙，乙醇残留量<0.5 %，符合欧洲药典EP7.0中对乙醇残留项目的检测要求，质量稳定，工艺成熟可行，本工艺可以进行工业化生产。
【具体实施方式】
[0026]下面将结合本发明实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0027]实施例1
[0028](I)冻干前预处理:取那曲肝素钙20g，用10ml注射水制备浓度为20%的那曲肝素钙水溶液，50°C，0.1MPa减压蒸馏出约30ml的液体，剩余溶液补加注射水30ml。用0.22μπι滤膜过滤，过滤后分装在托盘中，药液厚度为I cm，放入冷冻干燥机内；
[0029](2)预冻阶段:
[0030]a)将隔板温度在15分钟降至_5°C，保温90分钟；
[0031]b)将隔板温度在120分钟由_5°C降至_35°C，保温I分钟；
[0032]c)将隔板温度在I分钟由-35°C降至_45°C，保温240分钟；
[0033](3)—次干燥阶段:
[0034]a)将隔板温度在60分钟由_45°C升至_20°C，保温I分钟，真空度设定为0.25mbar;
[0035]b)将隔板温度在180分钟由-20°C升至_6°C，保温1680分钟，真空度设定为
0.14mbar；
[0036](4)解析干燥阶段:
[0037]a)将隔板温度在60分钟由_6°C升至10°C，保温I分钟，真空度设定为0.17mbar;
[0038]b)将隔板温度在60分钟由10°C升至45°C，保温180分钟，真空度设定为0.17mbar;
[0039]c)将隔板温度在I分钟由45°C升至45°C，保温120分钟，真空度设定为0.0lmbar;
[0040]得到那曲肝素钙，测得乙醇残留为0.47%。
[0041 ] 实施例2
[0042]冻干前预处理:取那曲肝素钙20g，用67ml注射水制备浓度为30%的那曲肝素钙水溶液，50 °C，0.1MPa减压蒸馏出约20ml的液体，剩余溶液补加注射水20ml。用0.22μπι滤膜过滤，过滤后分装在托盘中，药液厚度为I cm，放入冷冻干燥机内；
[0043]其他操作同实施例1。
[0044]获得的那曲肝素钙为块状，且特别坚硬，测得乙醇残留为0.45%。
[0045]实施例3
[0046]冻干前预处理:取那曲肝素钙20g，用10ml注射水制备浓度为20%的那曲肝素钙水溶液，50 °C，0.1MPa减压蒸馏出约30ml的液体，剩余溶液补加注射水30ml。用0.22μπι滤膜过滤，过滤后分装在托盘中，药液厚度为2cm，放入冷冻干燥机内；
[0047]其他操作同实施例1。
[0048]获得的那曲肝素钙为块状，且特别坚硬，测得乙醇残留为0.44%。
[0049]实施例4
[0050]取那曲肝素钙20g，一次干燥阶段前的工艺同实施例1，将隔板温度在240分钟由-20°C升至_6°C，保温1680分钟，真空度设定为0.14mbar，其他条件与实施例1相同。
[0051]得到那曲肝素钙，测得乙醇残留为0.48%。
[0052]实施例5
[0053]取那曲肝素钙20g，一次干燥阶段前的工艺同实施例1，将隔板温度在180分钟由-20°C升至(TC，当温度升到(TC时，电阻发生变化，可以观察到样品融化，停止此次冻干实验。
[0054]得到那曲肝素钙，测得乙醇残留为0.48%o
[0055]实施例6
[0056]取那曲肝素钙20g，一次干燥阶段前的工艺同实施例1，将隔板温度在180分钟由-20°C升至_6°C，保温1500分钟，真空度设定为0.14mbar，其他条件与实施例1相同。
[0057]得到那曲肝素钙，测得乙醇残留为0.49%，乙醇残留高于实施例1。
[0058]实施例7
[0059]取那曲肝素钙20g，一次干燥阶段前的工艺同实施例1，将隔板温度在180分钟由-20°C升至_6°C，保温1680分钟，真空度设定为0.1mbar，其他条件与实施例1相同。
[0060]得到那曲肝素钙，乙醇残留高于实施例1。
[0061 ] 实施例8
[0062](I)冻干前预处理:取那曲肝素钙200g，用100ml注射水制备浓度为20%的那曲肝素钙水溶液，50 °C，0.1MPa减压蒸馏出约300ml的液体，剩余溶液补加注射水300ml。用0.22μm滤膜过滤，过滤后分装在托盘中，药液厚度为I cm，放入冷冻干燥机内；
[0063](2)预冻阶段:
[0064]a)将隔板温度在15分钟降至_5°C，保温90分钟；
[0065]b)将隔板温度在120分钟由_5°C降至_35°C，保温I分钟；
[0066]c)将隔板温度在I分钟由-35°C降至-45°C，保温240分钟；
[0067](3)—次干燥阶段:
[0068]a)将隔板温度在60分钟由_45°C升至_20°C，保温I分钟，真空度设定为0.25mbar;
[0069]b)将隔板温度在180分钟由-20 °C升至-6 °C，保温1680分钟，真空度设定为
0.14mbar；
[0070](4)解析干燥阶段:
[0071]a)将隔板温度在60分钟由_6°C升至10°C，保温I分钟，真空度设定为0.17mbar;
[0072]b)将隔板温度在60分钟由10°C升至45°C，保温180分钟，真空度设定为0.17mbar;
[0073]c)将隔板温度在I分钟由45°C升至45°C，保温120分钟，真空度设定为0.0lmbar;
[0074]得到那曲肝素钙，测得乙醇残留为0.46%。
[0075]以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种低乙醇残留的那曲肝素钙冻干工艺，其特征在于，包括以下步骤: (1)冻干前预处理:用注射水制备浓度为10-30%的那曲肝素钙水溶液，45-50°C，0.1MPa减压蒸馏出三分之一的液体，剩余溶液补加注射水至原体积;用0.22μπι滤膜过滤，过滤后分装在托盘中，药液厚度为0.5-2cm，放入冷冻干燥机内； (2)预冻阶段: a)将隔板温度在15分钟降至-5°C，保温90分钟； b)将隔板温度在120分钟由-5°C降至_35°C，保温I分钟； c)将隔板温度在I分钟由_35°C降至_45°C，保温240分钟； (3)—次干燥阶段: a)将隔板温度在60分钟由-45°C升至-20°C，保温I分钟，真空度设定为0.25mbar; b)将隔板温度在120-240分钟由-20°C升至-10-0°C，保温1500-1800分钟，真空度设定为0.1-0.17mbar； (4)解析干燥阶段: a)将隔板温度在60分钟由-6°C升至10°C，保温I分钟，真空度设定为0.17mbar; b)将隔板温度在60分钟由10°C升至45°C，保温180分钟，真空度设定为0.17mbar; c)将隔板温度在I分钟由45°C升至45°C，保温120分钟，真空度设定为0.0lmbar;得到那曲肝素钙。2.如权利要求1所述的一种低乙醇残留的那曲肝素钙冻干工艺，其特征在于，所述冻干前预处理阶段那曲肝素钙浓度为20 %。3.如权利要求1所述的一种低乙醇残留的那曲肝素钙冻干工艺，其特征在于，所述冻干前预处理阶段药液厚度为Icm04.如权利要求1所述的一种低乙醇残留的那曲肝素钙冻干工艺，其特征在于，所述一次干燥阶段b)阶段升温时间定为180分钟。5.如权利要求1所述的一种低乙醇残留的那曲肝素钙冻干工艺，其特征在于，所述一次干燥阶段b)阶段升温至-6 °C。6.如权利要求1所述的一种低乙醇残留的那曲肝素钙冻干工艺，其特征在于，所述一次干燥阶段b)阶段保温时间设定为1680分钟。7.如权利要求1所述的一种低乙醇残留的那曲肝素钙冻干工艺，其特征在于，所述一次干燥阶段b)阶段真空度设定为0.14mbar。
【文档编号】F26B5/06GK106074400SQ201610472554
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月23日
【发明人】干浩, 董凯, 何锐, 罗锡川, 倪爱民, 韩自江
【申请人】湖北亿诺瑞生物制药有限公司