专利名称：：含纤维素织物的脱浆方法
技术领域：
：本发明涉及一种含纤维素的织物或布的脱浆方法，和一种适用于本方法的酶组合物。
背景技术：
：在织物的编织过程中，丝线可能受到较大的机械张力。为了防止断裂，通常通过涂覆(涂浆)一种凝胶状物质(浆料)使丝线增强。最常见的涂浆剂是天然的或改良形式的淀粉，浆料中也可以富含其它聚合物，如聚乙烯醇(PVA)，聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚丙烯酸(PAA)或纤维素的衍生物(例如羧甲基纤维素(CMC)，羟乙基纤维素，羟丙基纤维素或甲基纤维素)。为了润滑表面也可以向浆料中加入少量的如脂肪和油类。涂浆的结果是丝线不能吸附足够量的水或整理剂或组合物(漂白、染色、抗皱等)。因此只有在从布中除去浆料后(即所谓的脱浆)，才能获得均匀性和持久的整理。在浆料含有大量的羧甲基纤维素(CMC)或其它纤维素衍生物的情况下，可使用一种纤维素分解酶，单独地或与其它物质相结合，选择性地与其它酶(例如淀粉降解酶，如淀粉酶)相结合来实施脱浆处理。但是，在涂浆的布或织物含有纤维素或纤维素衍生物的情况下，这种用纤维素分解酶的处理不仅可以全部或部分地分解浆料而且也分解织物或布，因而与未涂浆料的织物或布的强度或重量相比会产生一种具有一定强度损失和/或重量损失的脱浆的布或织物。本发明的目的是提供一种含有纤维素的织物或布而基本不损害织物的脱浆方法，即不会导致织物的强度损失或重量损失或二者皆不损失。发明综述令人吃惊的是，现已发现，利用某种类型的纤维素分解酶处理织物或布，有可能基本不损害布或织物而将含有纤维素的布或织物脱浆。因此，本发明提供了一种使含有纤维素的布或织物脱浆的方法，其中用对羧甲基纤维素(CMC)具有一定活性和在pH8.5时对纤维三糖具有一定催化活性(相应于每秒至少0.01Kcat)的一种纤维素分解酶来处理布或织物。另一方面，提供了一种适用于本发明方法的组合物，该组合物含有对羧甲基纤维素(CMC)具有一定活性和在pH8.5时对纤维三糖有一定催化活性(相应于每秒至少0.01Kcat)的一种纤维素分解酶。当然，组合物不含任何能导致织物损害的纤维素酶组分。通过使用本发明的方法可以得到含脱浆纤维素的布或织物，与未涂浆的布或织物相比，它们基本上没有强度损失或重量损失。发明详述术语“脱浆”应理解为以常规的方式，即从织物中除去浆料。在本说明书和权利要求书中，术语“纤维素分解酶”，“纤维素酶”和“纤维素酶组分”是指一种能水解纤维素的酶。纤维素分解酶，纤维素酶或纤维素酶组分可以作为存在于由一种指定的微生物所产生的纤维素酶体系中的一种成分，这样的纤维素酶体系主要含有一些不同的纤维素酶成分，包括那些通常被鉴定的，例如纤维生物水解酶，外切纤维生物水解酶，内切-β-1，4-葡聚糖酶，β-葡糖苷酶。另外，纤维素酶组分可以是一种单一的组分，即基本上不含通常存在于由一种指定的微生物所产生的纤维素酶体系中的其它纤维素酶组分的组分，单一组分是一个重组体组分，即，通过将编码单一组分的DNA序列克隆和用该DNA序列转化后续细胞并在宿主中表达而制备。宿主优选为一种异源宿主，但宿主在某些条件下也可以是同源宿主。天然的或未改良的纤维素酶或纤维素酶组分可以从已知的能产生纤维素分解酶的微生物中衍生，例如，下述微生物的菌株腐质霉属、Thermomvces、杆菌属、木霉属、新月孢子菌属、Mvceliophthora、Phanerochaete、耙菌属、Scvtalidium、裂褶菌属、青霉菌属、曲霉属和地丝菌属。衍生的组分可以是同源性的也可以是非同源性的。组分优选为同源的。但是能与针对高度纯化的纤维素酶组分的抗体进行免疫反应和能从一种特定的微生物衍生的非同源性组分也是优选的。适用于本发明方法的有用的纤维素酶优选来自微生物。在本发明的一个优选的实施方案中，纤维素分解酶从Humicola、木霉属、Mvceliophthora、青霉属、耙菌属、曲霉属、Scvtalidium或新月孢子菌属的菌株中得到或衍生，酶更优选从Humicolainsolens、尖孢镰刀菌或Trichodermareesei的菌株中得到或衍生。在本说明书中，术语“可衍生的”或“衍生自”不仅是指由所讨论的生物体的菌株所产生的纤维素酶，而且还指由从这些菌株分离出来的DNA序列编码并在用所说的DNA序列转化的宿主生物体中所产生的纤维素酶。此外，该术语也指由合成的和/或cDNA来源的DNA序列编码并且具有与所讨论的纤维素酶相同特性的纤维素酶。用于本发明方法的纤维素分解酶优选是一种重组体纤维素酶，即一种基本上不含有其它蛋白质或纤维素酶蛋白的纤维素酶。对于专业人员来说，可以根据常规的标准技术将一种重组体纤维素酶组分进行克隆和表达。可以有利地使用霉菌来源的母体纤维素酶，例如从真菌Humicola或新月孢子菌属的菌株衍生的纤维素酶。例如，母体纤维素酶可以从真菌H.insolens或尖孢镰刀菌衍生得到，这些纤维素酶中许多已得到性状分析并且它们的全部氨基酸序列已得到描述。在一个优选的实施方案中母体纤维素酶选自H.insolens、尖孢镰刀菌和Trichodermareesei纤维素酶，或是所述的母体纤维素酶的任意一种的功能类似物，该类似物i)含有至少60％与母体纤维素酶的氨基酸序列同源的氨基酸序列，ii)与针对母体纤维素酶的抗体进行反应，和/或iii)由一种DNA序列所编码，该DNA序列可与相同于编码母体纤维素酶的DNA序列的探针相杂交。类似物的性质i)是指在类似物和母体纤维素酶之间的同一性程度，表明了第一个序列从第二个序列的衍生。尤其是，如果对应的氨基酸序列的比较显示同一性高于约60％，如高于70％、80％、85％、90％或甚至95％时，一种多肽被认为是与母体纤维素酶同源的。序列比较可以通过已知的算法来实施，如由Lipman和Pearson所叙述的一种算法(1985)。同源的纤维素酶可以是一种遗传工程的纤维素酶，例如为改进一种或几种性质(如热稳定性、酸/碱稳定性、温度或pH最适条件等)而制备的纤维素酶。母体纤维素酶类似物的其它性质ii)和iii)可如下确定性质ii)，即免疫交叉反应性，可以利用针对或与母体纤维素酶的至少一个抗原决定基反应的抗体来测定。抗体(可以是单克隆或多克隆的)可以用本领域中熟知的方法来制备，例如Hudson等人1989年所叙述的方法。免疫交叉反应性可以利用本领域中熟知的测定法来确定，这些测定法的实例是Western印迹法或径向免疫扩散测定，例如，如Hudson等人1989年所叙述的。根据上文所定义的性质iii)，类似物的表征中所用的低聚核苷酸探针可以适当地在母体纤维素酶的全部的或部分的核苷酸或氨基酸序列的基础上来制备。杂交可以在允许DNA序列杂交的任何适当的条件下来实施，例如，这些条件是在特定条件下的杂交，如包括在5×SSC中预浸和在20％甲酰胺、5xDenhardt's溶液，50mM磷酸钠，pH6.8和50μg的变性的声波处理的小牛胸腺DNA的溶液中于～40℃预杂交1小时，接着在相同溶液中补充100μMATP于～40℃杂交18小时，或如Sambrook等人在1989年叙述的其它方法。根据本发明适用的纤维素分解酶的实例是一种内切葡聚糖酶组分，它是可与针对从Humicolainsolens.DSM1800衍生的高度纯化的～50KD内切葡聚糖酶的抗体免疫反应的，或是显示纤维素酶活性的～50KD内切葡聚糖酶的同系物或衍生物。一种优选的内切葡聚糖酶组分具有在PCT专利申请第WO91/17244号图14A-E中所公开的氨基酸序列，该序列示于所附的SEQIDNO2中，或具有与所说的序列至少60％，优选至少70％，更好地至少75％，更优选地至少80％，更好地至少85％，尤其是至少90％同源的氨基酸序列的所说的内切葡聚糖酶的变体。在下文中该内切葡聚糖酶组分被称为EGI；和一种内切葡聚糖酶组分，该组分是可与针对从尖孢镰刀菌，DSM2672，衍生的高度纯化的～50KD(表观分子量、氨基酸组成相应于具有2n糖基化位点的45KD)内切葡聚糖酶的抗体免疫反应的，或该组分是表现纤维素酶活性的～50KD内切葡聚糖酶的同系物或衍生物。一种优选的内切葡聚糖酶组分具有在PCT专利申请第WO91/17244号图13中所公开的氨基酸序列。该序列列于所附的SEQIDNO3中，或具有与所说的序列至少60％，优选至少70％，更好至少75％，更优选至少80％，更好地至少85％，尤其是至少90％同源的氨基酸序列的所说的内切葡聚糖酶的变体。在下文中该内切葡聚糖酶组分被称为EGI-F。EGI-F纤维素酶组分可用含有相应于所附的SEQIDNO3的氨基酸序列的DNA序列的质粒转化后的米曲霉并使用常规的Taka启动子和AMG终止子来制备。EGI-F可以用阳离子色谱纯化成均匀性的并且具有pI＞9。利用“蛋白质化学的新进展”(Adv.ProteinChem.)17，第69-165页(1962)(C.Tanford)中的pHKa值根据氨基酸的组成计算得出pI是9，摩尔消光系数经计算为58180，和在公开的欧洲专利申请第EP-A2-271,004号中公开的任何纤维素酶，即纤维素酶的非降解指数(NDI)不少于500并且是一种最适pH不少于7的亲碱纤维素酶或在羧甲基纤维素(CMC)作为底物时其相对活性在pH不少于8时为在最适条件下的活性的50％或更高；该纤维素酶优选选自碱性纤维素酶K(由杆菌属SP.KSM-635，FERMBP1485产生)；碱性纤维素酶K-534(由杆菌属SP.KSM-534，FERMBP1508产生)；碱性纤维素酶K-539(由杆菌属SP.KSM-539，FERMBP1509产生)；碱性纤维素酶K-577(由杆菌属SP.KSM-577，FERMBP1510产生)；碱性纤维素酶K-521(由杆菌属SP.FERMBP1507产生)；碱性纤维素酶K-580(由杆菌属SP.KSM-580，FERMBP1511产生)；碱性纤维素酶化K-588(由杆菌属SP.KSM-588，FERMBP1513产生)；碱性纤维素酶K-597(由杆菌属SP.KSM-597，FERMBP1514产生)；碱性纤维素酶K-522(由杆菌属SP.KSM-522，FERMBP1512产生)；羧甲基纤维素酶I，羧甲基纤维素酶II(二者均由杆菌属SP.KSM-635，FERMBP1485产生)；碱性纤维素酶E-II和碱性纤维素酶E-III(二者均由杆菌属SP.KSM-522，FERMBP1512产生)。术语“含纤维素的织物/布”和“纤维素的织物/布”是指从含纤维素的原料制备且含有纤维素或纤维素衍生物的任何类型的织物，尤其是纺织品，倒如从木浆，和棉布制得的纺织品。存在于织物上的纤维素或纤维素衍生物的主要成分通常是浆料，其中纱线，通常是卷绕纱线，在纺织前已被涂覆。在本发明中，术语“织物”也包括服装和其它类型的加工织物。纤维素的织物的实例是棉布，粘胶丝(纤维素人造丝)；lyocell；粘胶丝、棉布或lyocell与其它织物如聚酯的所有混纺织物；粘胶丝、棉布或lyocell与其它纤维(如聚酯)的混合物lyocell/棉布混纺物，粘胶丝/羊毛混纺物，lyocell/羊毛混纺物，棉布/羊毛混纺物；亚麻布、苎麻和基于纤维素织物的其它织物、包括纤维素的织物与其它织物如羊毛、聚酰胺、丙烯酸和聚酯织物的所有混纺物，例如粘胶丝/棉布/聚酯混纺物，羊毛/棉布/聚酯混纺物，亚麻布/棉布混纺物等。工艺条件不用说，本发明的方法可以按照本领域中熟知的任何适宜的脱浆方法来实施，例如，如Olson，E.S.(1983)，和Peter，M.和RouetteH，K(1988)所叙述的方法。因此，可以选择在实施本发明中所应用的工艺条件以适应一种特定的设备或使用中所需要的一种特定形式的方法。与本发明有关的适用的方法类型的优选的实例包括Jigger/Winch，Pad-Roll和Red-Steam类型。这些类型在下面将详细讨论。本发明的方法可用分批法、半连续法或连续法来实施，作为实例本方法可包括下列步骤(a)将织物浸渍在脱浆浴中，其含有(最低限度的)对羧甲基纤维素(CMC)具有一定活性并对纤维三糖在pH8.5具有一定催化活性相应于Kcat每秒至少为0.01的纤维素酶，然后挤出过量的液体以保持实施该反应所必需的液体的量(通常为干燥织物重量的60％至120％)，(b)将浸渍的织物进行汽蒸以使织物达到所需的反应温度，通常在20°至120°之间，和(c)通过缠绕或打褶将衣服在一个J-Box、U-Box，地毯机等中保持一段足够的时间(通常在数分钟至几小时之间)以进行脱浆。在进行处理前，适用的纤维素酶可以方便地与通常在脱浆方法中所用的其它组分进行混合。这些组分的实例是其它的酶，优选为那些可商购的通常用于脱浆的淀粉酶，如微生物的淀粉酶，特别是用杆菌属(例如地衣型芽孢杆菌，解淀粉芽孢杆菌、枯草杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌)或曲霉菌属可产生的淀粉酶；或由这些菌属的突变体来产生，例如，如在WO91/00353或WO91/16423中所述产生的淀粉酶。用于脱浆的商业上的淀粉酶的实例是从NovoNordiskA/S得到的Aquazym、AquazymUltra，Dezyme，ThermozymeTM和Termamyl。其它优选的淀粉酶是在国际专利申请PCT/DK94/00371中公开的氧化-稳定性α-淀粉酶突变体，该文在此合并作为参考。因此，在本发明的组合物中加入一种已改进酸稳定性的α-淀粉酶可能是较有利的，以便使组合物能用于一种合并的脱浆和漂白方法中(在单一步骤中进行)，例如，一种利用亚氯酸钠配合强碱，表面活性剂，活化剂，促进淀粉分解的酶和选择性纤维素分解酶的方法；或是一种利用四硼酸钠六水合物作为在一个含有过氧化氢，多价螯合剂，表面活性剂，促进淀粉分解的酶和选择性的纤维素分解酶的浴中的缓冲剂的方法。可以分别加入实施该方法所需要的其它组分。这些组分的实例包括稳定剂和润湿剂。稳定剂可以是一种稳定纤维素分解酶的试剂。润湿剂起到改进织物可湿性以便得到一个快速和平稳的脱浆过程。润湿剂优选是氧化稳定型的。在本发明的一个优选的实施方案中，适用的纤维素酶是以超过1克/升的量来使用的，优选是1-20克/升的量，如1-10克/升、1-5克/升或1-3克/升，对应的纤维素酶活性范围是在每升脱浆液10～5000ECU，优选在每升脱浆液50～500ECU。当然所用的纤维素的量取决于所讨论的纤维素酶产物的组成。不考虑本发明的脱浆所用的方法的特定类型，本发明的方法通常是在30-100℃的温度范围，如35～60℃，和在3-11的pH范围，优选7-9间实施的。但是，实际工艺条件可以在这些范围内变化很大，从下列公开的内容中可以明显看出。用于本发明的工艺条件的优选实例包括分批法，例如Jigger/Winch型，使用1-5克/升适用的纤维素酶，和0.25-5克/升的润湿剂，例如从德国的Grunau可商购的产品ArbylR，在pH范围是7-9(通过加入NaOH可达到)和温度范围是40-55℃下实施本方法，一般实施1-2小时。半连续法，例如Pad-Roll型，使用1-5克/升适用的纤维素酶，0.25-5克/升的润湿剂，例如ArbylR，在pH范围7-9(通过加入NaOH可以达到)和温度范围30-50℃下实施本方法，一般实施12-24小时。当然，本方法可以在足够耐受该方法的条件的任何设备中进行。此外，很显然，除了Kcat限制了在本发明的方法中所用纤维素酶外，这种纤维素酶应是在pH大于3(如大于约pH7)下是有效的。纤维素酶优选在pH7-9范围中是具有较高活性的。本发明的方法可以在另一个可以补充纤维素酶处理的脱浆处理步骤之前或之后来使用，补充处理优选是一种利用淀粉酶的酶促脱浆处理。本发明的组合物尽管适用的纤维素酶可以直接加入，但优选将其组配成一种适用的脱浆组合物，该组合物优选地进一步含有其它的脱浆酶，例如上述的淀粉酶。本发明的脱浆组合物可以是以一种颗粒，优选为一种无尘的颗粒，一种液体，尤其是一种稳定化的液体，一种稀浆或是以一种被保护的形式的各个酶的混合物。无尘的颗粒可以按如在美国专利4,106,991和美国专利4,661,452(二者均为NovoNordiskA/S)中所公开的来制备并且可以选择性地用本领域中已知的方法涂覆。例如，液体酶制剂可以根据已经建立的方法通过加入一种多元醇(如丙二醇)，一种糖或糖醇或乙酸来稳定化。其它酶稳定剂是在本领域中熟知的，被保护的酶可以根据在欧洲专利EP238216中公开的方法来制备。大体上，本发明的组合物含有一种对羧甲基纤维素(CMC)具有一定活性和在pH8.5下对纤维三糖有一定催化活性相应于Kcat至少是每秒0.01的纤维素分解酶，和淀粉酶还可以含有用于本发明的组合方法中的任何其它试剂。但是，优选的是组合物不含有漂白剂和其它强氧化剂。本发明的组合物可以包含一种或数种选自下列物质的其它成分，它们是润湿剂、分散剂、多价螯合剂和乳化剂。适用的润湿剂实例如上面所公开的。乳化剂的作用是将存在于织物上的疏水杂质乳化。分散剂的作用是防止提取出的杂质再沉积到织物上。多价螯合剂的作用是除去离子如Ca、Mg和Fe，这些离子可能对本方法有负作用和优选的实例包括苛性苏打(氢氧化钠)和苏打粉(碳酸钠)。纤维素酶对纤维三糖活性的测定以术语Kcat(S-1)表示的纤维素酶对纤维三糖的活性可以用一种偶合测定法来确定纤维三糖→葡萄糖+纤维二糖(催化剂纤维素酶)(催化剂葡糖氧化酶)(催化剂过氧化物酶)接着在418nm(ABTSOx最大吸收在418nm)进行分光光度法分析。方法使用God-Perid试验试剂盒(从BoehringerMannhein可商购，art124036)。将试验试剂盒中的缓冲剂-酶溶液溶解在500毫升milliQ水中，将溶液的pH调整至8.5(NaOH)。将80毫克的ABTSR(从BoehringerMannheim可商购，art756407)溶于10毫升的God-Perid，对应的ABTSR总浓度为10毫克/毫升。制备一种5毫摩尔(2.52毫克/毫升)的纤维三糖(从Merck可商购的art24741)的底物贮备溶液。制备对应1000微摩尔、500微摩尔、376微摩尔、250微摩尔、100微摩尔和60微摩尔的稀释水溶液。将1份底物溶液与1份God-Rerid相混合制备反应混合物。制备一种浓度为1.0-3.0微摩尔的要测定的纤维素酶溶液。将50微升的酶溶液和450微升的反应混合物进行混合。在40℃恒温，1厘米比色杯，于418纳米波长下用一台HP8452ADiodeArray(二极管分析)分光光度计上进行测定。反应后接着测定ABTS的氧化反应，每20秒测一次，共计测600秒。计算术语Kact(S-1)表示的纤维素酶对纤维三糖的活性可以从Lineweaver-Burk曲线(1/v对1/[S]的曲线)计算得到用线性回归分析确定斜率和交叉点。下列常数用于计算中纤维素酶∈＝66,310M-1·厘米-1ABTSOx∈＝0.0323微摩尔-1·厘米-1从分析中得到下列结果</tables>以一种分析标准测定内切葡聚糖酶的纤维素分解活性，并可以用ECU单位来表示。纤维素分解酶水解羧甲基纤维素，由此降低了温育混合物的粘度。粘度降低的结果可以用一种振动粘度计(例如从法国Sofraser商购的MIVI3000)来测定。以ECU测量的纤维素分解活性的确定，可以根据分析方法AF301.1(该法可根据需要从申请人处得到)来测定。通过测量样品降低羧甲基纤维素(CMC)溶液的粘度的能力，ECU测定对样品具有的催化活性的量进行定量。该测定在40℃，于pH7.5使用一种关于羧甲基纤维素底物粘度降低的相对酶标准来实施。通过下列非限定性的实施例进一步说明本发明。实施例1棉布针织品与HumicolainsolensEGI和EGV在Launder-O-meter中的温育为了说明从Humicolainsolens得到的内切葡聚糖酶I(EGI)对棉布织物的显著的低活性，实施了用以Humicolainsolens得到的内切葡聚糖酶V(EGV，～43KDa，在WO91/17243中公开的)的比较性研究。两种纤维素酶均具有以ECU表示的可观活性并且由此能够降解可能存在于浆料组合物中的羧甲基纤维素和大量其它水胶态的纤维素衍生物。用两种不同的酶在下列条件下于一台Lannder-O-Meter中处理脱浆的100％棉布针织品</tables>织物漂白的联锁编织的100％棉布(205克/米2)，7克/烧杯(2块布样，每块大约13厘米×13厘米)。液体体积140毫升(LQR120)温育于55℃下60分钟向每个Launder-O-meter烧杯中加入20个钢球(直径＝14毫米，重量＝11克)以增加在纤维素酶处理中对织物的机械作用。得到如下结果</tables>重量损失如下所定义重量损失百分数(％)＝[1-(处理后的重量)/(处理前的重量)]·100结果表明与由EGV纤维素酶所引起的重量损失相比，EGI纤维素酶对棉布基本上没有重量损失。实施例2该实施例说明利用一种具有在权利要求书中所陈述的特点的纤维素分解酶能够提供适度过量脱除羧甲基纤维素-浆料并会显著改进织物的手感/刚性和，此外，这种酶对于用由羧甲基纤维素和淀粉/淀粉衍生物混合物组成的组合物上浆的织物具有一定的有益作用。由纯的羧基纤维素(CMC)组成的上浆组合物或富含羧甲基纤维素(CMC)的上浆组合物通常极易溶于水，即，只需将上浆的织物与一种水溶液相接触，羧甲基纤维素浆料中的大部分就可迅速地溶解掉。但是，一少部分的羧甲基纤维素(CMC)浆料将会紧密地粘附在织物上并给织物带来一种非常坚硬的手感，这种刚性会使织物不适于进一步的加工。在这些实验中所用的织物是100％棉布联锁毛织运动衫，织物在脱浆前已用纯羧甲基纤维素CMC(从德国的AqualonGmbH商购的Blanose7LFD)或1∶1(W/W)的羧甲基纤维素CMC(从德国AqualonGmbH商购的Blanose7LFD)和羧甲基化的淀(从意大利LambertiS.p.a商购的CMCSolvitoseC5)混合物组成的一种混合的浆料上浆。织物上浆料的量对于羧甲基纤维素-浆料来说约6.5％(按织物重量计)，和对于羧甲基纤维素/羧甲基化的淀粉-浆料来说约5.6％(按织物重量计)。织物被剪成12厘米×14厘米的布样(未上浆时重量大约3.54克/布样)。气候实验后将布样称重和然后在含有200毫升2克/升pH7.0的磷酸钾缓冲剂(包括如下表的酶)的玻璃烧杯中于50℃温育30分钟</tables><tablesid="table5"num="005"><tablewidth="838">2CMC20ECU/克织物无3CMC/CMS无100KNU/克织物4CMC/CMS20ECU/克织物100KNU/克织物</table></tables>纤维素酶从H.insolens到的EGI(如实施例I所述)。淀粉酶Aquazym120L(活性120KNU/克)，从NovoNordiskA/S可商购的细菌淀粉酶。温育后将布样于103℃在烘箱中干燥60分钟，气候实验和然后称重以评价浆料的脱除，浆料的脱除的平均数据列于下表中<tablesid="table6"num="006"><tablewidth="817">序列号浆料平均克数/布样除去的浆料平均克数/布样脱除％10.230.2191％20.230.23100％30.200.1575％40.200.1785％</table></tables>如所看到的，纤维素酶确实在两种情况下(分别为羧甲基纤维素-浆料和羧甲基纤维素/羧甲基化的淀粉-浆料)使得浆料的脱除变容易了。对于羧甲基纤维素-浆料来说，当将布样在没有纤维素酶的缓冲剂中温育时发现也可以除去大量的浆料，可是从织物手感上来说很显然剩余的羧甲基纤维素(大约20毫克/布样)对织物的刚性具有显著的作用。为了说明该作用，由5个在织物手感评价方面有经验的人组成的专家小组，将每个系列中的布样按从1至4的等级排列，其中记号1代表最硬的织物和记号4代表最软的(脱浆结果最好的)。这种作用如此显著以致于试验专家小组的全体成员给出了完全相同的评级，如下表所示<tablesid="table7"num="007"><tablewidth="574">系列号记号(平均)</table></tables>将系列1与系列2和系列3与序列4进行比较揭示了织物刚性的显著降低和相应地更好的脱浆作用是来自用纤维素分解酶进行的处理。说明书中所引用的参考文献Lipman和Pearson，科学227，1435(1985)；Hudson，L.，和Hay，F.，实用免疫学，第三版(1989)，Blackwell科学出版公司；Sambrook等人，分子克隆实验室手册，第2版，冷泉港，1989；Olson，E.S.织物润湿方法，第1卷，Noyes出版公司，ParkRidge，新泽西，美国(1983)；M.PaterundH.K.Pouette，GrundlagenderTextilveredlung，Deutsche，FachverlagGmbH，FrankfurtamMain，德国(1988)；序列表SEQIDNO1的信息(i)序列特征(A)长度415氨基酸(B)类型氨基酸(C)链况单(D)拓朴学线性(ii)分子类型蛋白质(vi)来源(A)生物体Humicolainsolens(B)菌株DSM1800序列描述SEQIDNO1GlnLysProGlyGluThrLysGluValHisProGlnLeuThrThrPhe151015ArgCysThrLysArgGlyGlyCysLysProAlaThrAsnPheIleVal202530LeuAspSerLeuSerHisProIleHisArgAlaGluGlyLeuGlyPro354045GlyGlyCysGlyAspTrpGlyAsnProProProLysAspValCysPro505560AspValGluSerCysAlaLysAsnCysIleMetGluGlyIleProAsp65707580TyrSerGlnTyrGlyValThrThrAsnGlyThrSerLeuArgLeuGln859095HisIleLeuProAspGiyArgValProSerProArgValTyrLeuLeu100105110AspLysThrLysArgArgTyrGluMetLeuHisLeuThrGlyPheGlu115120125PheThrPheAspValAspAlaThrLysLeuProCysGlyMetAsnSer130135140AlaLeuTyrLeuSerGluMetHisProThrGlyAlaLysSerLysTyr145150155160AsnProGlyGlyAlaTyrTyrGlyThrGlyTyrCysAspAlaGlnCys165170175PheValThrProPheIleAsnGlyLeuGlyAsnIleGluGlyLysGly180185190SerCysCysAsnGluMetAspIleTrpGluAlaAsnSerArgAlaSer195200205HisValAlaProHisTrCysAsnLysLysGlyLeuTyrLeuCysGlu210215220GlyGluGluCysAlaPheGluGlyValCysAspLysAsnGlyCysGly225230235240TrpAsnAsnTyrArgValAsnValThrAspTyrTyrGlyArgGlyGlu245250255GluPheLysValAsnThrLeuLysProPheThrValValThrGlnPhe260265270LeuAlaAsnArgArgGlyLysLeuGluLysIleHisArgPheTyrVal275280285GlnAspGlyLysValIleGluSerPheTyrThrAsnLysGluGlyVal290295300ProTyrThrAsnMetIleAspAspGluPheCysGluAlaThrGlySer305310315320ArgLysTyrMetGluLeuGlyAlaThrGlnGlyMetGlyGluAlaLeu325330335ThrArgGlyMetValLeuAlaMetSerIleTrpTrpAspGlnGlyGly340345350AsnMetGluTrpLeuAspHisGlyGluAlaGlyProCysAlaLysGly355360365GluGlyAlaProSerAsnIleValGlnValGluProPheProGluVal370375380ThrTyrThrAsnLeuArgTrpGlyGluIleGlySerThrTyrGlnGlu385390395400ValGlnLysProLysProLysProGlyHisGlyProArgSerAsp405410415SEQIDNO2的信息(i)序列特征(A)长度409氨基酸(B)类型氨基酸(C)链况单(D)拓朴学线性(ii)分子类型蛋白质(vi)来源(A)生物体尖孢镰刀菌(B)菌株DSM2672(xi)序列描述SEQIDNO2GlnThrProAspLysAlaLysGluGlnHisProLysLeuGluThrTyr151015ArgCysThrLysAlaSerGlyCysLysLysGlnThrAsnTyrIleVal202530AlaAspAlaGlyIleHisGlyIleArgArgSerAlaGlyCysGlyAsp354045TrpGlyGlnLysProAsnAlaThrAlaCysProAspGluAlaSerCys505560AlaLysAsnCysIleLeuSerGlyMetAspSerAsnAlaTyrLysAsn65707580AlaGlyIleThrThrSerGlyAsnLysLeuArgLeuGlnGlnLeuIle859095AsnAsnGlnLeuValSerProArgValTyrLeuLeuGluGluAsnLys100105110LysLysTyrGluMetLeuHisLeuThrGlyThrGluPheSerPheAsp115120125ValGluMetGluLysLeuProCysGlyMetAsnGlyAlaLeuTyrLeu130135140SerGluMetProGlnAspGlyGlyLysSerThrSerArgAsnSerLys145150155160AlaGlyAlaTyrTyrGlyAlaGlyTyrCysAspAlaGlnCysTyrVal165170175ThrProPheIleAsnGlyValGlyAsnIleLysGlyGlnGlyValCys180185190CysAsnGluLeuAspIleTrpGluAlaAsnSerArgAlaThrHisIle195200205AlaProHisProCysSerLysProGlyLeuTyrGlyCysThrGlyAsp210215220GluCysGlySerSerGlyIleCysAspLysAlaGlyCysGlyTrpAsn225230235240HisAsnArgIleAsnValThrAspPheTyrGlyArgGlyLysGlnTyr245250255LysValAspSerThrArgLysPheThrValThrSerGlnPheValAla260265270AsnLysGlnGlyAspLeuIleGluLeuHisArgHisTyrIleGlnAsp275280285AsnLysValIleGluSerAlaValValAsnIleSerGlyProProLys290295300IleAsnPheIleAsnAspLysTyrCysAlaAlaThrGlyAlaAsnGlu305310315320TyrMetArgLeuGlyGlyThrLysGlnMetGlyAspAlaMetSerArg325330335GlyMetValLeuAlaMetSerValTrpTrpSerGluGlyAspPheMet340345350AlaTrpLeuAspGlnGlyValAlaGlyProCysAspAlaThrGluGly355360365AspProLysAsnIleValLysValGlnProAsnProGluValThrPhe370375380SerAsnIleArgIleGlyGluIleGlySerThrSerSerValLysAla385390395400ProAlaTyrProGlyProHisArgLeu40权利要求1.一种含有纤维素的织物的脱浆方法，其中织物用一种对羧甲基纤维素CMC具有一定活性和在pH8.5时对纤维三糖有一定催化活性，对应的Kcat至少0.01S-1的纤维素分解酶进行处理。2.根据权利要求1的方法，其中在pH8.5时对纤维三糖的催化活性对应的Kcat至少0.1S-1，优选至少1S-1。3.根据权利要求1或2的方法，其中纤维素分解酶是从腐质霉属，木霉属，Mvceliophthora，青霉属、耙菌属、曲霉属、Scvlalidium或新月孢子菌属的菌株衍生得到的。4.根据权利要求3的方法，其中的酶是从Humicolainsolens、尖孢镰刀菌或Trichodermareesei的菌株衍生得到的。5.根据权利要求1-4中任一项的方法，其中的酶是一种重组体纤维素酶，即，一种基本不含其它蛋白质的纤维素酶。6.根据权利要求5的方法，其中母体纤维素分解酶含有在SEQIDNO.1中所示的Humicolainsolens内切葡聚糖酶的氨基酸序列或是所说的内切葡聚糖酶的类似物，其中该类似物i)与在SEQIDNO.1中所示的序列至少60％同源，ii)与针对所说的内切葡聚糖酶的抗体反应，和/或iii)用与相同于编码所说的内切葡聚糖酶的DNA序列的探针相杂交的DNA序列编码。7.根据权利要求5的方法，其中母体纤维素分解酶含有如在SEQIDNO.2中所示的尖孢镰刀菌内切葡聚糖酶的氨基酸序列或是所说的内切葡聚糖酶的类似物，该类似物i)与在SEQIDNO.2中所示的序列至少60％同源，ii)与针对所说的内切葡聚糖酶的抗体进行反应，和/或iii)用与相同于编码所说的内切葡聚糖酶的DNA序列的探针相杂交的DNA序列编码。8.根据权利要求1-7中任一项的方法，其中纤维素分解酶以对应的纤维素酶活性为每升脱浆液10～5000ECU的量来使用；优选对应于1-10克酶/升的量，更好地是1-5克/升，特别是1-3克/升的量来使用。9.根据权利要求1-8中任一项的方法，其中脱浆是在温度范围为30-100℃，优选30-60℃，和pH范围3-11，优选7-9下来实施的。10.根据权利要求1-9中任一项的方法，其中织物选自由棉布纤维，粘胶丝(人造丝)纤维，Lyocell纤维、棉布，粘胶丝或Lyocell纤维与其它纤维如聚酯纤维的所有混纺物，粘胶丝/棉布纤维混纺物，Lyocell/棉布纤维混纺物，粘胶丝/羊毛纤维混纺物、Lycoell、羊毛纤维、棉布/羊毛纤维混纺物、亚麻布、苎麻、含有纤维素纤维的其它纤维，和含纤维素纤维与其它纤维如羊毛、聚酯、聚酰胺和丙烯酸纤维的所有混纺物制成的纺物。11.一种用于含纤维素织物脱浆的脱浆组合物，含有一种对羧甲基纤维素CMC具有一定活性和在pH8.5时对纤维三糖具有一定催化活性对应的Kcat至少0.01S-1的纤维素分解酶和一种促进淀粉分解的酶。12.根据权利要求11的脱浆组合物，其中纤维素分解酶是从腐质霉属、木霉属、Myceliophthora、青霉属、耙菌属、曲霉属、Scvtalidium或新月孢子菌属的菌株得到或衍生得到的。13.根据权利要求12的脱浆组合物，其中的酶是从Humicolainsolens，尖孢镰刀属或Trichodermereesei的菌株衍生得到的。14.根据权利要求13的脱浆组合物，其中的母体酶含有如在SEQIDNO.1中所示的Humicolainsolens内切葡聚糖酶的氨基酸序列或是所说的内切葡聚糖酶的类似物，该类似物i)与在SEQIDNO.1中所示的序列至少60％同源，ii)与针对所说的内切葡聚糖酶的抗体进行反应，和/或iii)用与相同于编码所说的内切葡聚糖酶的DNA序列的探针相杂交的DNA序列编码。15.根据权利要求13的脱浆组合物，其中母体酶含有如在SEQIDNO.2中所示的尖孢镰刀菌内切葡聚糖酶的氨基酸序列或是所说的内切葡聚糖酶的类似物，该类似物i)与在SEQIDNO.2中所示的序列至少60％同源，ii)与针对所说的内切葡聚糖酶的抗体进行反应，和/或iii)用与相同于编码所说的内切葡聚糖酶的DNA序列的探针相杂交的DNA序列编码。16.根据权利要求11-15中任一项的脱浆组合物，该组合物进一步含有至少一种选自润湿剂、分散剂、多价螯合剂和乳化剂的其它组分。全文摘要将织物用某种类型的纤维素分解酶，例如，对羧甲基纤维素(CMC)具有一定活性和在pH8.5时对纤维三糖具有一定催化活性对应的Kcat至少0.01秒文档编号D06L1/14GK1155306SQ9519461公开日1997年7月23日申请日期1995年8月14日优先权日1995年8月14日发明者H·伦德申请人:诺沃挪第克公司