本发明属于液体肥料的
技术领域：
，更具体地，涉及一种用于水果玉米花芽发育的液体肥料及其制备方法。
背景技术：
：水果玉米是适合生吃的一种超甜玉米，青棒阶段皮薄、汁多、质脆而甜，可直接生吃，薄薄的表皮一咬就破，清香的汁液溢满齿颊，生吃熟吃都特别甜、特别脆，像水果一样，因此被称为"水果玉米"。水果玉米属于甜玉米中的一种，是欧美、韩国和日本等发达国家的主要蔬菜之一，因其具有丰富的营养、甜、鲜、脆、嫩的特色而深受各阶层消费者青睐。生产中的甜玉米可以分为普通玉米、超甜玉米和加强型甜玉米三类，超甜玉米由于含糖量高、适宜采收期长而得到广泛种植。甜玉米在中国也有栽培。植株较矮，分蘖力较强。果穗苞叶上有旗叶。子粒淡黄或白色，胚较大，乳熟期子实柔嫩、富含水溶性多糖、维生素a、维生素c、脂肪和蛋白质等。链霉菌属(streptomyces)是放线菌目的一属。基内菌丝不断裂，气生菌丝通常发育良好，形成长(有时短)的孢子丝。孢子不能运动，外鞘上常有疣、刺或毛发等状饰物。链霉菌广泛存在于土壤中，是丝状的革兰氏阳性细菌，主要通过孢子繁殖，绝大多数链霉菌对人体无害。链霉菌是产生各种抗生素的主要来源，源于链霉菌的抗生素包括红霉素、四环素、链霉素、氯霉素、新霉素、制霉菌素、卡那霉素、放线菌酮和两性霉素等，因此，对于链霉菌的已有研究主要集中于菌株产生抗菌活性物质的能力和大小等方面。花芽分化是由营养生长向生殖生长转变的生理和形态标志，直接影响到植株的开花结果，因此花芽分化期对植株的营养补充直接奠定了结果期和收获期的基础。在水果玉米种植过程中经常出现花芽分化慢，分枝少，导致空果多，果实小。技术实现要素：本发明要解决的技术问题是克服现有水果玉米花芽分化过程中的问题，提供一种用于水果玉米花芽发育的液体肥料及其制备方法。本发明上述目的通过以下技术方案实现：一种用于水果玉米花芽发育的液体肥料，由以下重量份的物质组成：活性液体肥基底制剂1000份、复酞核酸1～10份、壳寡糖0.01～3份、尿素52～65份、碳酸氢氨1～8份、氨基酸18～32份、硫酸钾64～78份、硼酸2～12份、过磷酸钙35～48、葡萄糖酸钙0.1～5份、七水硫酸锌0.1～5份；所述液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g，氨基氮含量≥0.4mg/g，有机质含量为120～165g/l；所述活性液体肥基底制剂由链霉菌属菌株“ty-001#”发酵得到；链霉菌属菌株“ty-001#”的培养基为：取大豆进行浸泡或取豆粕进行预发酵后，进行打浆、过滤；然后往滤液中加入糖后，加水定容至培养基中糖的浓度≥100g/l，ph为7.4～7.6；所述链霉菌属菌株“ty-001#”于2017年3月24日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，分类命名为streptomyces.，其保藏编号为gdmccno.：60152，保藏地址是中国广东省广州市先烈中路100号省微生物所实验楼五楼。优选地，所述液体肥料由以下物质组成：活性液体肥基底制剂1000份、复酞核酸3～6份、壳寡糖0.05～1份、尿素55～60份、碳酸氢氨3～6份、氨基酸23～28份、硫酸钾70～75份、硼酸5～8份、过磷酸钙39～43、葡萄糖酸钙1～3份、七水硫酸锌0.5～3份；所述液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g，氨基氮含量≥0.4mg/g，有机质含量为120～140g/l。优选地，所述液体肥料由以下物质组成：活性液体肥基底制剂1000份、复酞核酸4份、壳寡糖0.1份、尿素58份、碳酸氢氨5份、氨基酸25份、硫酸钾73份、硼酸6份、过磷酸钙41.5份、葡萄糖酸钙2份、七水硫酸锌1份；所述液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g，氨基氮含量≥0.4mg/g，有机质含量为125～130g/l。进一步地，所述液体肥料中n、p、k之比为2～4:1:2～4，优选3:1:3。进一步地，所述氨基酸为甘氨酸、脯氨酸、赖氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、天冬氨酸中的一种或几种。进一步地，所述硼、锌、钙之比为3～5:1:10～40。一种所述用于水果玉米花芽发育的液体肥料的制备方法，包括以下步骤：s1.制备培养基：取大豆进行浸泡或取豆粕进行预发酵后，进行打浆、过滤；然后往滤液中加入糖后，加水定容至培养基中糖的浓度≥100g/l，ph为7.4～7.6；s2.接种：取链霉菌属菌株“ty-001#”的液体菌种，接种到培养基中，搅拌均匀；s3.发酵：在发酵过程中往培养基中持续通入氧气，于20～28℃下持续发酵7～8天后，得到发酵液；s4.终止发酵：将发酵液灌装密闭静置15天，得到所述活性液体肥基底制剂；s5.液体肥料的配置：往所述活性液体肥基底制剂添加复酞核酸、壳寡糖、尿素、碳酸氢氨、氨基酸、硫酸钾、硼酸、过磷酸钙、葡萄糖酸钙、七水硫酸锌，得到所述液体肥料。所述链霉菌属菌株“ty-001#”于2017年3月24日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，其保藏编号为gdmccno.：60152。进一步地，所述预发酵的步骤为：s11.往豆粕中加水，并搅拌充分均匀，直至豆粕用手紧捏达到滴水成线的状态即可；s12.用薄膜覆盖在豆粕表面，不留缝隙，计时开始预发酵过程；s13.预发酵时间为3～5天；开始发酵2天后，将温度计插入豆粕深处，发酵原料内部温度≥40℃时，将预发酵豆粕里外翻转一次，继续发酵2～3天。优选地，所述步骤s1中加水定容至培养基中糖的浓度为100g/l。优选地，所述活性液体肥基底制剂存放15天后其氨基态氮含量≥4.5g/l。优选地，所述液体菌种中每毫升有2亿个活菌；所述液体菌种与培养基的比例为165g:250l。优选地，链霉菌属菌株“ty-001#”的形态特征为：菌落呈圆形，乳白色，边缘光滑，表明有炼乳状光泽；孢子革兰氏染色呈阳性。一种所述链霉菌属菌株(streptomyces)的培养方法，包括以下步骤：y1.取链霉菌属菌株“ty-001#”划线于固体培养基上，25～30℃倒置活化培养3～7天，制得活化后菌株；y2.取步骤y1制得的活化后菌株接种至液体培养基中，在温度为25～30℃、转数为150～220转/分钟的条件下，摇床培养3～7天，得到菌液。优选地，所述液体培养基每升组分如下：取大豆、豆粕100g磨成豆浆过滤，弃渣；白砂糖、蔗糖或红糖100g；水定容至1升，ph为7.4～7.6。优选地，所述液体培养基每升组分如下：牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g，水定容至1升，ph为7.4～7.6。优选地，所述固体培养基每升组分如下：牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g、琼脂15～25g，水定容至1升，ph为7.4～7.6。与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：本发明的液体肥料能够有效促进水果玉米的花芽分化，且有利于果实的品质和果树的营养生长。本发明制备的液体肥料肥效持久，可以在全年生长期不断供应果树生长和结果的需要，能够强化花芽分化质量，增加产量，提高品质。本发明的液体肥料对水果玉米的枝杆长度和粗度都显著作用，长度增加了31.4％，粗度增加了57.9％。该液体肥料对水果玉米的花朵数增加了一倍，取得了意想不到的技术效果。然而，该液体肥料对黑糯玉米的新梢长度和果穗花朵数都没有起到实质的作用。可见，本发明的液体肥料对不同玉米的花芽分化具有选择性，对水果玉米的花芽分化作用、以及生根壮苗具有十分显著的效果，对不同品种的玉米具有较高的选择性。本发明提供的链霉菌属菌株“ty-001#”，该菌株能够适应高渗透压下通气发酵培养。具体实施方式以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本
技术领域：
常规试剂、方法和设备。除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。实施例1链霉菌属菌株(streptomyces)的分离与鉴定1.实验材料和条件(1)在湖南省郴州市某地采集到的土壤样品。(2)液体培养基每升组分如下：牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g，水定容至1升，ph为7.5。固体培养基每升组分如下：牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g、琼脂15～25g，水定容至1升，ph为7.5。培养基分装，高压灭菌锅灭菌(121℃，30min)。(3)无菌操作条件：所有器皿和用具均须经高压灭菌锅灭菌(121℃，30min)，接种等操作均在超净工作台内进行。(4)菌株培养条件：置于25±1℃光照恒温箱(14l：10d)中培养，待菌落形成后，转移到pda斜面，再转入5℃冰箱内保存。2.菌株分离与筛选(1)从湖南省郴州市某地的土壤样品中分离获得一株链霉菌属菌株t0。(2)将分离得到的链霉菌属菌株t0接入固体培养基中斜面继代培养，再转入5℃冰箱内保存。(3)将继代培养的菌株t0于液体培养基中，在振荡摇床上220转/分钟，25℃条件下培养5天。(4)培养5天后的t0液体菌，放置于20瓦紫外线灯25cm处照射2小时。(5)将照射后的t0液体菌接入固体斜面培养基中25℃下培养5天，然后挑出长得最好的存活菌落接入固体培养基继代培养。(6)重复若干遍步骤(2)～(5)的过程循环。在每一遍重复过程循环中，固体培养基和液体培养基中的氯化钠用量都增加1克，直至固体培养基和液体培养基中的氯化钠用量达到25克。将最终存活的健壮菌株进行继代培养，再转入5℃冰箱内保存。(7)将以上筛选出的耐高渗透压菌株t0，进行发酵生产试验。经7天25℃敞开有氧发酵后，测定发酵液中氨基态氮(按甲醛滴定法测定氨基氮标准检测)，挑选出氨基态氮含量(≥0.7mg/l)最高的菌株作为最终生产用菌株，命名“ty-001#”。发酵生产试验所用的培养基如下：取大豆100g磨成豆浆过滤，弃豆渣；白砂糖100g，定容至1000ml，ph为7.5。3.菌株“ty-001#”的鉴定(1)形态学鉴定形态特征为：菌落呈圆形，乳白色，边缘光滑，表明有炼乳状光泽；孢子革兰氏染色呈阳性。形态学鉴定显示，该菌株属于链霉菌属。综上所述，菌株“ty-001#”为链霉菌属，于2017年3月24日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，其保藏编号为gdmccno.：60152，保藏地址是中国广州市先烈中路100号省微生物所实验楼五楼。实施例2一种用于水果玉米花芽发育的液体肥料的制备和应用一种用于水果玉米花芽发育的液体肥料的制备方法包括以下步骤：s1.制备培养基：取1000g大豆浸泡10h后，放入磨浆机中磨成豆浆，滤去豆渣，将滤液置于干净的发酵桶中，然后往滤液中加入白砂糖后，加水定容至培养基中糖的浓度100g/l，ph为7.5；s2.接种：取链霉菌属菌株“ty-001#”的液体菌种，接种到培养基中，搅拌均匀；液体菌种中每毫升有2亿个活菌；液体菌种与培养基的比例为165g:250l；s3.发酵：开启氧气泵，在发酵过程中往发酵桶中持续通入氧气，并根据发酵桶中单独浆液气泡情况，加入适量的消泡剂。发酵桶用透气膜覆盖，以免落入杂物，于25℃下持续发酵7天后，得到发酵液；s4.终止发酵：将发酵液灌装密闭静置15天，得到活性液体肥基底制剂；s5.液体肥料的配置：往1000份活性液体肥基底制剂中添加复酞核酸1份、壳寡糖0.01份、尿素52份、碳酸氢氨1份、氨基酸18份、(赖氨酸8份、酪氨酸2份、苯丙氨酸4份、天冬氨酸4份)、硫酸钾64份、硼酸2份、过磷酸钙35份、葡萄糖酸钙0.1份、七水硫酸锌0.6份得到液体肥料；所得液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g，氨基氮含量≥0.4mg/g，有机质含量为120g/l。链霉菌属菌株“ty-001#”于2017年3月24日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，其保藏编号为gdmccno.：60152。实施例3一种用于水果玉米花芽发育的液体肥料的制备和应用一种用于水果玉米花芽发育的液体肥料的制备方法包括以下步骤：s1.制备培养基：取1000g大豆浸泡10h后，放入磨浆机中磨成豆浆，滤去豆渣，将滤液置于干净的发酵桶中，然后往滤液中加入白砂糖后，加水定容至培养基中糖的浓度100g/l，ph为7.5；s2.接种：取链霉菌属菌株“ty-001#”的液体菌种，接种到培养基中，搅拌均匀；液体菌种中每毫升有2亿个活菌；液体菌种与培养基的比例为165g:250l；s3.发酵：开启氧气泵，在发酵过程中往发酵桶中持续通入氧气，并根据发酵桶中单独浆液气泡情况，加入适量的消泡剂。发酵桶用透气膜覆盖，以免落入杂物，于25℃下持续发酵7天后，得到发酵液；s4.终止发酵：将发酵液灌装密闭静置15天，得到活性液体肥基底制剂。s5.液体肥料的配置：往1000份活性液体肥基底制剂中添加复酞核酸3份、壳寡糖0.05份、尿素55份、碳酸氢氨3份、氨基酸23份(赖氨酸10份、酪氨酸3份、苯丙氨酸4份、天冬氨酸6份)、硫酸钾70份、硼酸5份、过磷酸钙39份、葡萄糖酸钙1份、七水硫酸锌0.8份得到液体肥料；所得液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g，氨基氮含量≥0.4mg/g，有机质含量为123g/l。实施例4一种用于水果玉米花芽发育的液体肥料的制备和应用一种用于水果玉米花芽发育的液体肥料的制备方法包括以下步骤：s1.制备培养基：取1000g大豆浸泡10h后，放入磨浆机中磨成豆浆，滤去豆渣，将滤液置于干净的发酵桶中，然后往滤液中加入白砂糖后，加水定容至培养基中糖的浓度100g/l，ph为7.5；s2.接种：取链霉菌属菌株“ty-001#”的液体菌种，接种到培养基中，搅拌均匀；液体菌种中每毫升有2亿个活菌；液体菌种与培养基的比例为165g:250l；s3.发酵：开启氧气泵，在发酵过程中往发酵桶中持续通入氧气，并根据发酵桶中单独浆液气泡情况，加入适量的消泡剂。发酵桶用透气膜覆盖，以免落入杂物，于25℃下持续发酵7天后，得到发酵液；s4.终止发酵：将发酵液灌装密闭静置15天，得到活性液体肥基底制剂。s5.液体肥料的配置：往1000份活性液体肥基底制剂中添加复酞核酸4份、壳寡糖0.1份、尿素58份、碳酸氢氨5份、氨基酸25份(赖氨酸10份、酪氨酸3份、苯丙氨酸4份、天冬氨酸8份)、硫酸钾73份、硼酸6份、过磷酸钙41.5份、葡萄糖酸钙2份、七水硫酸锌1份得到液体肥料；；所得液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g，氨基氮含量≥0.4mg/g，有机质含量为128g/l。实施例5一种用于水果玉米花芽发育的液体肥料的制备和应用一种用于水果玉米花芽发育的液体肥料的制备方法包括以下步骤：s1.制备培养基：取1000g大豆浸泡10h后，放入磨浆机中磨成豆浆，滤去豆渣，将滤液置于干净的发酵桶中，然后往滤液中加入白砂糖后，加水定容至培养基中糖的浓度100g/l，ph为7.5；s2.接种：取链霉菌属菌株“ty-001#”的液体菌种，接种到培养基中，搅拌均匀；液体菌种中每毫升有2亿个活菌；液体菌种与培养基的比例为165g:250l；s3.发酵：开启氧气泵，在发酵过程中往发酵桶中持续通入氧气，并根据发酵桶中单独浆液气泡情况，加入适量的消泡剂。发酵桶用透气膜覆盖，以免落入杂物，于25℃下持续发酵7天后，得到发酵液；s4.终止发酵：将发酵液灌装密闭静置15天，得到活性液体肥基底制剂。s5.液体肥料的配置：往1000份活性液体肥基底制剂中添加复酞核酸10份、壳寡糖3份、尿素65份、碳酸氢氨8份、氨基酸32份(赖氨酸15份、酪氨酸3份、苯丙氨酸4份、天冬氨酸10份)、硫酸钾78份、硼酸12份、过磷酸钙48份、葡萄糖酸钙5份、七水硫酸锌3份得到液体肥料；所得液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g，氨基氮含量≥0.4mg/g，有机质含量为161g/l。对比例1一种用于水果玉米花芽发育的液体肥料的制备和应用一种用于水果玉米花芽发育的液体肥料的制备方法包括以下步骤：s1.制备培养基：取1000g大豆浸泡10h后，放入磨浆机中磨成豆浆，滤去豆渣，将滤液置于干净的发酵桶中，然后往滤液中加入白砂糖后，加水定容至培养基中糖的浓度100g/l，ph为7.5；s2.发酵：开启氧气泵，在发酵过程中往发酵桶中持续通入氧气，并根据发酵桶中单独浆液气泡情况，加入适量的消泡剂。发酵桶用透气膜覆盖，以免落入杂物，于25℃下持续发酵7天后，得到发酵液；s3.终止发酵：将发酵液灌装密闭静置15天，得到活性液体肥基底制剂。s4.液体肥料的配置：往1000份活性液体肥基底制剂中添加尿素58份、碳酸氢氨5份、硫酸钾73份、硼酸6份、过磷酸钙41.5份、葡萄糖酸钙2份、七水硫酸锌1份。用于水果玉米花芽发育的液体肥料的应用效果评价：液体肥料能快速补充果藤生长所需的养分，促进水果玉米花芽分化。为验证本发明制备的液体肥料在水果玉米上大面积示范应用的实际效果，申请人选择在水果玉米上进行了试验示范。1材料与方法1.1供试地点1设在资兴市某水果玉米基地内，试验地面积12亩，土壤肥力水平较均匀。供试地点2设在建宁市某黑糯玉米基地内，试验地面积12亩，土壤肥力水平较均匀。1.2供试作物1水果玉米，藤行距0.4m*0.8m，长势中庸且一致。供试作物2黑糯玉米，藤行距0.4m*0.8m，长势中庸且一致。1.3供试肥料实施例2～5制得的水果玉米根茎发育的液体肥料，产品剂型为液体。1.4每个供试地点均进行3个试验处理：①实验组：种植后每个月浇施一次供试肥料，每次500ml/亩，稀释200倍。②对照组(ck)：每亩每次以同实验组等量清水同时期进行，其他施肥措施同处理①。③对比例组：每亩每次以同实验组等量的对比例1制备的化肥同时期进行，其他施肥措施同处理①。实验组和对照组、对比例组均按当地常规栽培技术进行管理。试验各处理以每亩为小区，重复3次，管理一致。每个处理随机选取5株果藤，观察藤体新梢生长情况，求得平均值，计算花芽数量，。2结果与分析2.1不同处理对新梢生长、花芽率和花朵数的影响由表1可知，施用该液体肥料后，水果玉米的新梢长度和粗度都显著大于对照组与对比例组，相比对照组长度增加了31.4％，粗度增加了57.9％，果穗花朵数相比对照组增加了100％，取得了意想不到的技术效果。然而，该液体肥料对黑糯玉米的花芽生长都没有起到实质的作用。可见，本发明的液体肥料对不同玉米的花芽分化具有选择性，对水果玉米的花芽分化作用最为显著。表1不同玉米不同处理的新梢生长、果穗花朵数情况结果处理杆长(m)杆粗度(cm)果穗花朵数/朵水果玉米实验组2.013.010水果玉米对照组1.531.95水果玉米对比例组1.732.37黑糯玉米实验组1.872.67黑糯玉米对照组1.681.95黑糯玉米对比例组1.792.46以上所述仅为本发明的优选实施例，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的包含范围之内。当前第1页12