一种提高橡胶草组培苗移栽成活率用营养液及其提高方法与流程

本发明涉及一种提高橡胶草组培苗移栽成活率用营养液及其提高方法。

背景技术：

天然橡胶是重要的战略物资和工业原料，主要产自巴西橡胶树。我国是世界天然橡胶消费大国，每年超过80％需要依赖进口。橡胶草(taraxacumkok-saghyz)又名俄罗斯蒲公英(rubberdandelion)为菊科蒲公英属多年生草本植物，原产于哈萨克斯坦以及中国新疆等地，其根部可合成优质的天然橡胶，其含胶量占根部干重约2.89％-27.89％之间，且与巴西橡胶树所产天然橡胶的结构和性能相似。而且橡胶草具有适应性强、适应区域广，生长收获期短，可在田间储存，并可轮种或间作，适合机械化种植和采收等优点，使其成为极具发展前景的巴西橡胶树橡胶替代作物。同时，橡胶草植株小、易于组织培养和遗传转化、生长周期短，是研究天然橡胶合成的理想模式植物。

橡胶草自交不亲和，种子杂合度高，通过种子繁殖不利于优良品系的保存。因此，橡胶草高效的组织培养繁育技术研发，为橡胶草优良品系的保存和橡胶草转基因研究具有重要的意义。以往橡胶草组培苗移栽炼苗的方法主要有：将生根好的组培苗直接移栽到基质中(覃碧,王锋,张立群,刘实忠,杨玉双,甘霖,高玉尧,徐建欣.一种利用橡胶草叶片再生植株的方法,发明专利,201510488896.7)，或者将生根苗在炼苗室开盖锻炼3～5天后，再移栽至基质中(陈菲,沈光,曲彦婷,张兴,李黎,韩辉,唐焕伟,宫伟,佟斌,熊燕,曾祥俊.一种降低俄罗斯橡胶草组织培养褐化率的组培繁殖方法,发明专利,201510001394.7)。虽然目前橡胶草虽然组培繁殖效率较高，但由于移栽成活率得不到保证，尤其在橡胶草转基因研究中，组培再生植株的移栽成活率低导致珍贵材料的丢失时有发生。

技术实现要素：

针对上述现有技术的不足，本发明提供一种提高橡胶草组培苗移栽成活率用营养液。该方法提高橡胶草的移栽成活率，并促进橡胶草的生根和生长。

一种提高橡胶草组培苗移栽成活率用营养液，所述营养液其其成分包括：硝酸铵412.5～825、硝酸钾475～950、二水氯化钙110～220、七水硫酸镁92.5～185、磷酸二氢钾42.5～85、碘化钾0.2075～0.415、硼酸1.55～3.1、四水硫酸锰5.575～11.15、七水硫酸锌2.15～4.3、二水钼酸钠0.0625～0.125、五水硫酸铜0.0063～0.0125、六水氯化钴0.0063～0.0125、七水硫酸亚铁6.95～13.9、edta钠盐9.325～18.65，其中单位是mg/l，每升营养液中含各成分的毫克数。

本发明还提供一种提高橡胶草组培苗移栽成活率的方法，步骤包括：

将上述配制好的营养液盛到2ml的离心管盒(100孔)或者1ml的吸头盒或者类似形状的水培器皿中，培养液的用量以液面接触到植株的基部为宜，培养15-30天后，将橡胶草组培苗炼苗移栽。

进一步的，所述营养液经1.0mol/lnaoh和1.0mol/lhcl溶液调整ph至5.8-6.0。

进一步的，将橡胶草组培苗炼苗移栽具体为：将橡胶草组培苗直接从培养皿或者组培瓶中取出，用自来水将其根部残留的培养基清洗干净，用抽纸或者脱脂棉或者定植海绵对植株进行固定，将其均匀定植至培养器皿中，行、株距3-5cm，然后放在培养箱或者温室中进行炼苗，温度控制在20-23℃，湿度控制在75％以上，前7天每天给植株喷雾化的水1-2次，15-30天后将其移栽到基质中进行种植。

进一步的，所述基质成分组成包括：泥炭土40％、泡发熟化后的椰糠30％、土壤30％。

有益效果：

利用本发明的方法，采用水培的方法进行组培苗移栽前的过度培养，水培营养液成分与组培苗生根阶段所用的基础培养基接近，保证炼苗阶段的营养供给，该营养液成分中去除了组培苗生根培养基中的有机物和蔗糖成分可避免水培过程有害微生物的繁殖，而且水培能够使植株根系与营养液充分接触并快速获得养分恢复生长状态，从而提高组培苗移栽成活率并促进植株的生根和生长。

本发明使用2ml的离心管盒(100孔)或者类似形状的水培器皿进行移栽，用抽纸或者脱脂棉或者定植海绵对植株进行固定，装置简单、清洁、节省空间，而且价格低廉，经济实用。

同时移栽种植的基质由富含有机质的泥炭土和熟化的椰糠组成，一方面提高土壤透气性，另一方面能够保证橡胶草组培苗移栽后的营养供给，有利于植株生长。

附图说明

图1为本发明实施例一用2ml离心管盒经营养液水培培养30天的橡胶草组培苗生长情况图。

图2为本发明实施例二用1ml吸头盒经营养液水培培养15天的橡胶草组培苗的生长情况图。

图3为本发明实施例二移栽至基质后30天的生长情况图。

具体实施方式

下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。

实施例一

一种提高橡胶草组培苗移栽成活率的方法，步骤包括：

(1)水培营养液储存液配制，所述的水培营养液储存液含量可按照如下表1所示，先将大量元素、微量元素和铁盐分别配制成40倍、200倍和200倍的储存液，mg/l表示每升储存液中含各成分的毫克数，使用时分别量取一定量的储存液稀释成工作液。

表1水培营养液储存液含量

(2)配制水培营养液，分别量取一定量的储存液稀释成0.5倍的工作液，即按1000ml工作液量取12.5ml大量元素储存液、2.5ml微量元素储存液和2.5ml铁盐储存液混合并用蒸馏水定容至1000ml。配成的水培营养液各成分和含量(mg/l，每升营养液中含各成分的毫克数)：硝酸铵412.5、硝酸钾475、二水氯化钙110、七水硫酸镁92.5、磷酸二氢钾42.5、碘化钾0.2075、硼酸1.55、四水硫酸锰5.575、七水硫酸锌2.15、二水钼酸钠0.0625、五水硫酸铜0.0063、六水氯化钴0.0063、七水硫酸亚铁6.95、edta钠盐9.325。

(3)所述的营养液的ph经1.0mol/lnaoh和1.0mol/lhcl溶液调整至5.8-6.0。

(4)炼苗移栽：将上述配制好的营养液盛到2ml的离心管盒(100孔)中，水培培养30天，营养液的用量以液面接触到植株的基部为宜。用2ml离心管盒经营养液水培培养30天的橡胶草组培苗生长情况如图1所示。

将橡胶草组培苗从培养皿或者组培瓶中取出，用自来水将其根部残留的培养基清洗干净，用抽纸对植株进行固定，将其均匀定植至培养器皿中，行、株距3-5cm，然后放在培养箱或者温室中进行炼苗，温度控制在20-23℃，湿度控制在75％以上，前7天每天给植株喷雾化的水1-2次，15天后将其移栽到基质中进行种植。

所述基质由以下成分组成：泥炭土40％、泡发熟化后的椰糠30％、土壤30％。

实施例二

一种提高橡胶草组培苗移栽成活率的方法，步骤包括：

(1)配制水培营养液，按照上述表1配制水培营养液储存液，使用时按1000ml工作液量取25ml大量元素储存液、5ml微量元素储存液和5ml铁盐储存液混合并用蒸馏水定容至1000ml。配成的水培营养液各成分和含量(mg/l，每升营养液中含各成分的毫克数)：硝酸铵825、硝酸钾950、二水氯化钙220、七水硫酸镁185、磷酸二氢钾85、碘化钾0.415、硼酸3.1、四水硫酸锰11.15、七水硫酸锌4.3、二水钼酸钠0.125、五水硫酸铜0.0125、六水氯化钴0.0125、七水硫酸亚铁13.9、edta钠盐18.65。

(2)所述的营养液的ph经1.0mol/lnaoh和1.0mol/lhcl溶液调整至5.8-6.0。

(3)炼苗移栽：将上述配制好的营养液倒入1ml的吸头盒中，水培培养15天，培养液的用量以液面接触到植株的基部为宜，用1ml吸头盒经营养液水培培养15天的橡胶草组培苗的生长情况如图2所示。橡胶草组培苗直接从培养皿或者组培瓶中取出，用自来水将其根部残留的培养基清洗干净，用脱脂棉对植株进行固定，将其均匀定植至培养器皿中，行、株距3-5cm，然后放在培养箱或者温室中进行炼苗，温度控制在20-23℃，湿度控制在75％以上，前7天每天给植株喷雾化的水1-2次，15天后将其移栽到基质中进行种植，移栽至基质后30天的生长情况如图3所示。

所述基质由以下成分组成：泥炭土40％、泡发熟化后的椰糠30％、土壤30％。

实施例三

一种提高橡胶草组培苗移栽成活率的方法，步骤包括：

(1)配制水培营养液，按照上述表1配制水培营养液储存液，使用时按1000ml工作液量取18.75ml大量元素储存液、3.75ml微量元素储存液和3.75ml铁盐储存液混合并用蒸馏水定容至1000ml。配成的水培营养液各成分和含量(mg/l，每升营养液中含各成分的毫克数)：硝酸铵618.75、硝酸钾712.5、二水氯化钙165、七水硫酸镁138.75、磷酸二氢钾63.75、碘化钾0.3113、硼酸2.325、四水硫酸锰8.3625、七水硫酸锌3.225、二水钼酸钠0.0938、五水硫酸铜0.0094、六水氯化钴0.0094、七水硫酸亚铁10.425、edta钠盐13.9875。

(2)所述的营养液的ph经1.0mol/lnaoh和1.0mol/lhcl溶液调整至5.8-6.0。

(3)炼苗移栽：将上述配制好的营养液盛到2ml的离心管盒(100孔)中，培养液的用量以液面接触到植株的基部为宜。橡胶草组培苗直接从培养皿或者组培瓶中取出，用自来水将其根部残留的培养基清洗干净，用脱脂棉对植株进行固定，将其均匀定植至培养器皿中，行、株距3-5cm，然后放在培养箱或者温室中进行炼苗，温度控制在20-23℃，湿度控制在75％以上，前7天每天给植株喷雾化的水1-2次，15天后将其移栽到基质中进行种植。

所述基质由以下成分组成：泥炭土40％、泡发熟化后的椰糠30％、土壤30％。

上述三个实施例中，橡胶草组培苗的移栽成活率分别达到了99％，100％，99.2％。

本发明可用其他的不违背本发明的精神或主要特征的具体形式来概述。因此，无论从哪一点来看，本发明的上述实施方案都只能认为是对本发明的说明而不能限制本发明，权利要求书指出了本发明的范围，而上述的说明并未指出本发明的范围，因此，在与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应认为是包括在本发明的权利要求书的范围内。