专利名称：口腔白斑癌变相关基因的制作方法
技术领域：
本发明关于口腔癌变相关基因，特别关于口腔白斑癌变表达持续降低的基因。
背景技术：
口腔鳞癌占全身恶性肿瘤的4％，由于口腔位于呼吸道与消化道的重要位置，病变结果严重影响患者的生活和生存质量。研究口腔鳞癌的发生发展机制是从根本上防治肿瘤的关键。
口腔白斑是口腔鳞癌的主要来源之一，对于白斑癌变机制研究，国内外学者多应用传统病理、免疫组化、电镜及分子生物学技术对单个或多个基因进行研究。随着基因芯片技术的出现，目前，已有许多学者应用芯片技术对膀胱癌、乳腺癌、口腔癌、食道癌等进行基因表达谱研究，并对新发现具有应用潜能的靶点进行专利保护。
传统的分子生物学检测手段一次实验仅检测一个或几个基因，不能总体把握白斑癌变相关靶基因群的作用。虽然已有学者使用芯片技术对口腔癌、食道癌等进行基因表达谱研究，但由于口腔粘膜白斑癌变过程较长，且其癌变不确定性，难以在临床患者中作动态性跟踪研究。因此，对于口腔白斑癌变过程可疑基因的研究缺乏系统报道。且目前常用的芯片数据处理方法Heirarchical clustering在芯片数据量大、数据复杂情况下，常会造成不准确甚至错误聚类影响结果分析。
发明内容
本发明的目的在于提供在口腔白斑癌变过程中，表达持续降低的基因。
本发明的目的是通过以下技术方法来实现的使用基因芯片技术结合CPP-SOM数据分析方法对白斑癌变全过程的基因表达谱进行动态性跟踪研究，从而整体水平上把握白斑癌变相关靶基因群。本发明有以下步骤(1)4NQO诱导的大鼠白斑癌变模型的建立及样本收集；(2)样本总RNA提取和芯片杂交；(3)芯片扫描及数据分析。
口腔白斑癌变过程中，表达持续降低的基因10条，它具有如SEQID1、SEQID2、SEQID3、SEQID4、SEQID5、SEQID6、SEQID7、SEQID8、SEQID9、SEQID10所示的核苷酸序列。
SEQID1基因编码的蛋白是羧酸酯酶1、SEQI D3基因编码的蛋白是白细胞素2受体γ链、SEQID4基因编码的蛋白是CD80抗原、SEQID5基因编码的蛋白是甲状腺激素受体β、SEQID6基因编码的蛋白是ATP酶，Na+K+转运，α1、SEQID7基因编码的蛋白是解聚素及金属蛋白酶domain6、SEQID8基因编码的蛋白是细胞外蛋白酶抑制剂、SEQID9基因编码的蛋白是泛激素类似物3。
本发明所公开口腔白斑癌变相关基因，其优点表现在1、通过对口腔白斑癌变全过程的基因表达谱进行动态性跟踪研究，筛选出白斑癌变过程相关靶基因群，可从整体水平快速、全面把握白斑癌变机制；2、可推动口腔白斑诊治和预后判断等水平的提高；3、以此为基础，设计开发口腔癌前病变诊断、判断预后等用途生物芯片，进一步研究挖掘药物作用靶点，为个体化药物治疗提供依据。
图1显示总RNA提取结果图2显示CPP-SOM动态展示轻度异常增生阶段基因的变化情况，黑色代表基因上调，白色代表基因下调图3显示CPP-SOM动态展示中度异常增生阶段基因的变化情况，黑色代表基因上调，白色代表基因下调图4显示CPP-SOM动态展示重度异常增生阶段基因的变化情况，黑色代表基因上调，白色代表基因下调图5显示CPP-SOM动态展示原位癌阶段基因的变化情况，黑色代表基因上调，白色代表基因下调图6显示CPP-SOM动态展示鳞癌阶段基因的变化情况，黑色代表基因上调，白色代表基因下调具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步描述。
实施例1
1.14NQO诱导的大鼠白斑癌变模型的建立及样本收集1.1-1动物和材料Wistar雄性大鼠20只，体重220±10g，鼠龄160天，每4只一笼，室温23±2℃，湿度30-50％，精制颗粒饲料，24小时光暗循环条件下饲养。
4NQO美国Sigma公司产，用蒸馏水制成0.0002％浓度溶液4℃避光保存备用。
1.1-2分组35只大鼠按随机数字表分为2组，正常对照组5只，普通自来水喂养；实验组17只，4NQO饮水喂养；分别于9周、13周、16周、20周、24周、32周处死。观察大体变化，留取舌标本。将舌背后1/3病损处自中线剖开，一半置10％中性福尔马林溶液中固定，常规石蜡包埋，4um切片，HE染色后光镜观察。一半置于RNAlater(Qiagen公司)中，-80℃保存。
1.1-3组织病理学检查诊断标准根据WHO口腔癌前病变协作中心12项诊断标准(1978)对标本进行分级诊断(包括正常黏膜、轻度异常增生、中度异常增生、重度异常增生、原位癌、鳞癌)，所有诊断均采用双盲法证实。
收集正常组织5例，轻度异常增生4例，中度异常增生6例，重度异常增生6例，原位癌(24周)4例，鳞癌(32周)5例。
1.2样本总RNA提取和芯片杂交1.2-1RNase free(去RNA酶)条件下，使用Trizol法(Trizol试剂一步法的步骤1.冻存组织加入1mltrizol，匀浆器匀浆，室温放置5分钟；2.加0.2ml氯仿，震荡15秒；3.4度12000rpm离心15分钟；4.取上清，加入0.5ml异丙醇，摇匀室温放置10分钟；5.4度12000rpm离心10分钟；6.弃上清，在沉淀中加入1ml 75％乙醇洗涤RNA，4度7500rpm离心5分钟7.自然干燥RNA，溶于甲酰胺或纯水中分装。)提取样本总RNA。样品经分光光度计检测吸光度A值。经琼脂糖凝胶电泳检测28S、18S条带变化.Rneasy试剂盒(Qiagen公司)纯化总RNA。
1.2-2探针的制备和芯片杂交所用芯片为Amersham商品化芯片-codelink Uniset Rat I Bioarry。
利用CodeLink试剂盒制备探针，合成cDNA双链后体外反转成cRNA标记生物素。用T7引物和SuperScript II逆转录酶与10μg总RNA在42℃孵化1小时合成第一链cDNA。第一链cDNA同E.coliDNA聚合酶I和RNaseH混合，在16℃孵化2小时合成第二链cDNA，形成的双链cDNA使用QIAquickTMPCR纯化试剂盒(Qiagen公司)纯化。用T7RNA聚合酶和biotin-11-UTP体外转录合成生物素标记的cRNA。用RNeasy试剂盒(Qiagen公司)纯化cRNA。使用5×fragmentation buffer(片断化缓冲液)94℃加热20分钟片段化cRNA。片段化后的cRNA与Uniset bioarry放置于CodeLink提供的shaker上，摇床调整转速300rpm，37℃孵化过夜。0.75×TNT buffer 46℃洗涤孵化1小时。然后，使用Cy5-Streptavidin(Cy5-抗生物素蛋白链菌素)室温下避光孵化30分钟。1×TNT洗涤芯片4次(每次5分钟)，在0.1×SSC/0.05％TweenTM中冲洗芯片30秒后，2000rpm离心3min甩干。
1.3芯片扫描及数据分析用Array Scanner(Axon公司)扫描芯片。用codelink expressionanalysis software进行图像处理和数据的标准化。然后采用建立在Matlab 5软件包基础之上的CPP-SOM(自组织图结合成分平面展示方法)进行数据的进一步分析和展示。
2.结果2.1总RNA提取结果总RNA紫外分光度OD260/OD280Ratio值介于1.7-2.0之间。总RNA电泳清晰的28S、18S条带，且28S条带的亮度为18S带的两倍。(见图1示)。
CPP-SOM动态展示不同阶段基因的变化情况，黑色代表基因上调，白色代表基因下调。(见图2、3、4、5、6示)。
2.3差异表达基因分析口腔白斑癌变过程中，表达持续降低的基因有10条(表1)。
表1部分表达显著降低的基因
SEQUENCE LISTING<110>上海第二医科大学附属第九人民医院<120>口腔白斑癌变相关基因<130>/<160>10<170>PatentIn version 3.1<210>1<211>1941<212>DNA<213>褐家鼠(norway rat)<400>1caggatccgt gtggtcccct tgtcataggc tggagatctc gctgtccccc aagcctgtag60ccttctatca tgtgcctcta tgctctgatc ctggtgtttc ttgcagcatt cacagcaggg120ggacacccat cgtcactacc cgtagtggac accctgcaag gcaaagtcct cgggaagtac180gtcagcttag aaggattcac acagcctgtg gccgtcttcc tgggagtccc ctttgccaag240ccccctctcg gatctctgag gtttgctcca ccacagcctg cagagccctg gagcttcgta300aagaacacca cctcctaccc tcctatgtgc tcccaagacc ccgtggcagg gcaaatagtc360aatgaccttc taactaactg ggaagagaac atttctctcc agttttctga agactgtctc420tacctaaata tttacacgcc tgctgacttg acaaaacgtg atagactgcc ggtgatggtg480tggatccatg gaggtggact agtgttaggt ggggcatcca cctatgatgg actagccctg540tctactcatg aaaatgtggt ggtagtggtc attcaatacc gtctgggtat ttggggattc600ttcagcacag gggatgaaca cagccggggc aactggggtc acttggacca ggtggctgca660ctgcactggg tccaggacaa cattgacaac tttggagggg acccaggctc tgtgaccatc720tttggagagt cagcaggagg tgaaagtgtc tctgttcttg tgttgtctcc cttggccaag780aatctctttc acaaggccat ttccgaaagt ggcgtggccc tcactgcagg cctggtcaag840aagaacacca ggcccttggc tgagaaaatt gctgttgtat ctggttgtaa aagcacaact900tcagcttcca tggttcactg ccttcgccag aagacagagg aagagctctt ggagaccaca960ctaaaattga atcttttttc gctggatttg cacggagact ccaggcagag ctatccgttt1020gttcccactg tgcttgatgg agtggtgctg ccaaagatgc ctgaggagat cctggctgag1080aaggacttca acactgtgcc ctacatcgtg ggaatcaaca agcaagagtt tggctggatt1140ctgccaacaa tgatgaacta tccaccctct gatatgaaat tggacccgat gacagccaca1200tcgctcttga agaagtcttc ttttcttctt aaccttcctg aagaagcaat tccagtggcc1260
gttgagaagt atttaagaca cacagatgac ccagacagaa ataaagacca acttctggaa1320ttgattgggg atgtgatctt cggtgtccca tcagtgattg tctcccgtgg acatagagat1380gctggagccc gcacatacat gtacgagttt caatatcgcc caagcttctc atcaaaaatg1440aaaccaagta cggtggtagg agatcatgga gacgaaatct actctgtctt tggtgctcca1500attttaagag gtggtacctc aaaagaggag atcaatctca gcaagatgat gatgaaattc1560tgggcaaact ttgctaggaa tgggaatccc aatggacagg gcctgcccca ttggccagag1620tatgaccaaa aggaaggtta tcttcagatt ggagccacca ctcaacaagc ccagaagcta1680aaagaaaaag aagtggcttt ctggtctgag cttctggcta tgaagccact gcatgcagga1740cacactgagc tatgaacggg agctctgcca gcctcatcct cagggcagct cacatggaag1800atggttttgg ccaaggcttt gaggagactt cagaactgtg tggtgggagt gggcagaggc1860cagggagagg atatttgcac atgtggactc aaactgaaaa ataaattttg ttttataaat1920caaaaaaaaa aaaaaaaaaa a 1941<210>2<211>533<212>DNA<213>褐家鼠(norway rat)<400>2agttacaact ggcactcagc ctcagagcac cgacaaggca ctggcacaca gacactatgg60caaatgaagt acaagttctg tcgtccccgc tgaaagggcg gcatgctcca gcagtgaaag120ctggagggat gcgaatttcc aaaaaacaag agatgggcgt tttggaaagg cacacaaaaa180aaacaggatt ggagaaaaca agtgccatca caaatgtggc caagatacag atgctggata240ctctaacgga cacactggac aagctccacc ataaattccc agcaacagtt cacacagcac300atcaaaagcc cacacctgct ctggagaagg ctgcaccact gaagagggcc tacattatcc360agcagcctcg aaaatgttag gccaggatag aaaatacagc cgtcgggtca acttccccac420gatctgacag ctcaacaaaa atggccaaca cttcctgtag gcctgctgcc tttacttggt480aaataaaaac aacttttgta tcttcccttt ccactttaga taataaagtt tcc 533<210>3<211>1611<212>DNA<213>褐家鼠(norway rat)<400>3gaagagcaag cgccatgttg aaaccattat tgccatctag atccttctta ctccttcagc60tgcttctgct gagggtaggg tggagctcca aggtcctcat gtccagtggg aatgaagaca120ccaaatctga tctcttgctg acttctatgg accttaaaca tctcagtgtt cctactctgc180ccctcccaga ggttcaatgc tttgtgttca atgtcgagta tatgaattgc acttggaata240gcagttctga gcctcagccg accaacctca ctatgcacta taggtacaag ggatctgata300ataatacatt ccaggagtgc agccactatc tgttctcaaa agagattact tctggctgtc360
agatacaaaa agaagatatc cagctctacc agacatttgt tgtccagctt caggaccccc420agaaacccca gaggcgagcc gaacagaagc taaacctaca gaatcttgtg atcccatggg480ctccagagaa tctaacactt tataacctga gtgaatctca ggtagaactg aggtggaaaa540gcagatacat agaacgctgt ttacaatact tggtgcagta ccggagcaac cgagatcgaa600gctggacgga acaaatagtg gatcatgagc ctagattctc cctgcctagt gtggatgaac660agaagctgta cacatttcgg gttcggagcc gctttaaccc gatctgtgga agtactcaac720agtggagtaa atggagccaa ccaatccact gggggagcca tactgcagag gagaatcctt780ccttgtttgc actggaagct gtgcttatcc ctgttggcac catggggttg attattaccc840tgatctttgt gtactgttgg ttggaacgaa tgcctcgaat tcccgccatc aagaatctag900aggatctggt tactgaatac catgggaact tttcggcctg gagtggtgtg tctaaagggc960tgactgagag tctgcagcca gactacagtg aacggttctg ccacgtcagt gagattcccc1020cgaaaggagg agccctagga gaggggcctg gaggctctcc ttgcagcctt catagccctt1080actggcctcc cccatgttat tctctgaagc ctgaagcctg agcctccaat cccttgatgg1140aacctcaaag tcctatagcc ctaagtgatg ctaacctccc cctacacatt ttgccaacct1200ggatccaatg cttattgcct cccgctatgg ctaattttca atttcatgtc ccatgtaact1260gcttttccat tccatacgcc ctacttgaga atgccccttg ccccctttcc ctgcacaagc1320cctcccgtgc ctagtctagt actttttcac tttttttttg agagagtctt accctgtagt1380ccggggtggc tgggaactta ctacgtaggc cagattggcc tataactcag aggcgatcat1440cccacttctt cttctcaagt gtcggcgttc ttggcaagca ccaccacatc cagcacggcc1500ctcttctttt acaggattct ccctcccttt ttctacctac cattcaactg ttgccaaatc1560aataagaaat aaagttttta accaataaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa a 1611<210>4<211>1030<212>DNA<213>褐家鼠(norway rat)<400>4tcgagagcat ctgaagccat ggcttacagt tgccagccgc tgcaggaatc accactcctc60gggtttccac gtctcaggtt cattcatctc tttgtgctgc tgctggtagg tcttctccag120atatcttcag gtattgtcgg ccaagtgtcc aagtcggtga gagaaaaggc attgctgtcc180tgtgattaca aattttgttc tgaagagcag tccatacacc gaatctactg gcaaaaacat240gacaaaatgg tgctctctgt catctccggg gtaccggaag tgtggcccaa gtacaagaac300cggactgtat acgacatcgc taacaactac tcctttagcc tcctgggcct gatcctttca360gacaggggca catacacctg tgtcgttcaa aggtacgaag gaggatcgta cgtggtgaaa420cacctgacca ccgtggagct gtctgtcaga gctgacttcc ctacccccaa cataactgag480tatggaaatc catctgctga cataaagagg attacctgct ttgcttccgg gggtttccca540aagcctcgcc tctcttggtt ggaaaatgga agagaattaa atggcatcaa tacaacaatt600tcccaggatc ctgaatctga gctgtacacc attagtagcc aactagactt caacgcgacg660
tacgaccact tcatcgattg tttcattgag tatggagatg ctcacgtgtc acagaacttc720acctgggtaa aacccccaga agaccctcct gatgaaaagc aaacagttcc gtttgcctgg780gcaggacctg atgcagtcaa agccatcatc atcttcttca tcgccatcac cgtcatcgcc840gtcatcgccg ccatcgccat catcatcttc tgcatcactg tcaaattccg acgctgcttc900agaagaagaa atgaggcaag cagagaaaca aacaagaacc tctacatagg gcctgtggaa960gcagcagctg aacagactgt ttgaaggtag ccatttgcct tcctttagct cttctctgcc1020cactcgagca 1030<210>5<211>4535<212>DNA<213>褐家鼠(norway rat)<400>5caccggctgc tcggccgcag ctcgcccgcg cgccgcctcg gggccaccgc caggctccag60cgctccggtt caagaggagc cacactgggg agtcccaagg aagcagccag gcagatgggg120agcccaggat ccgtggtttc cctctcctta gtctgctgga ggacgcgcgt ggtggtacca180agttccacac atgacttaat gaataaggga atgccagagc tgaagaggac ccagcatgac240tactaaccta tgactcctaa cagtatgaca gaaaaatgcc ttccagcctg ggacaaacag300aagccccatc cagaccgagg ccaggactgg aagctggtag gaatgtccga agcctgcctg360cacaggaaga gccatgtgga gaggcgtggt gcattgaaga atgagcaaac atcctcacac420ctcatccagg ccacttgggc gagctctata ttccatctgg atccagacga tgtgaacgat480cagagcgtct caagcgccca gactttccag accgaagaga agaaatgtaa agggtatatc540cccagctatc tagacaagga tgagctctgc gtagtgtgcg gggacaaagc cacggggtac600cactatcgct gcatcacctg tgaaggctgc aagggtttct ttagaagaac cattcagaaa660agtctccatc catcttactc ctgtaaatat gaagggaagt gcatcataga caaagtcacc720cgtaaccagt gccaggaatg tcgctttaag aaatgcatct atgttggcat ggcaacagac780ctggtgctgg atgacagcaa gaggctagcc aagaggaagc tgatagaaga gaaccgtgag840aagaggcggc gggaagagct acagaaatcc attgggcata agccagagcc cacggatgag900gaatgggagc tcatcaagac agtcaccgag gcccacgtgg ccaccaatgc ccagggcagc960cactggaagc agaagcggaa atttctgcct gaagacattg gacaagcacc cattgtgaac1020gccccggaag gtggcaaggt tgatctggaa gccttcagcc attttacaaa aatcatcaca1080ccagcaatca ccagagtggt ggatttcgcc aaaaagttgc ccatgttttg tgagctgccc1140tgtgaagacc agatcatcct cctcaaaggc tgctgcatgg agatcatgtc cctccgagct1200gctgtgcgct atgacccaga cagcgagact ctaaccttga atggggaaat ggcagtgaca1260cggggccagc tgaaaaacgg aggtcttggg gtggtgtcag atgcgatctt tgacctgggc1320atgtctctgt cgtctttcaa cctggatgac acggaggttg ccctgcttca agccgtcctg1380ctgatgtctt cagatcgccc agggctagct tgtgttgaga gaattgagaa ataccaagac1440agtttcctgt tggcctttga acactatatc aattaccgga agcaccatgt gacacacttt1500tggcccaaac tcctgatgaa ggtgacggac ctgcggatga ttggagcgtg ccacgccagc1560
cgcttcctgc acatgaaggt ggagtgcccc accgagctct tcccgcctct cttcttggaa1620gtctttgagg actgaacgga ctggacaggt tcttgtcatt cctgcagcac gactgggtgt1680cgctgcattc cacctgtagc tctttctgtt gtcgtttctt cgtttctttg tgtcaagtga1740gctcatcagt gggtcagcgg gtcatcagtg gcatagactt ggatgaagtg gtcctttgaa1800tgtgggtctt tgtaaccatt gcgtttcgtt ctccagtcct tagtgtgacg gctttgaggg1860gttcacagca gtgcaggccg agtgggggcg atcatctcac cagcaccacg tcgtcaccag1920ctcccatctg tccctgggca gactcaagca agccaaatgg cattacagaa gactaaagaa1980gccttaaaac cgagacgaca gtcatcttga tccaatgcga tccagttctg ttgtttgtaa2040ggtgaagctg gcagagctca ggccacctca ggttgggcgt ggcttttggc gcgtgagggg2100aggagccgtt ccagcttcag gaactcacag ctactcagga gcttaccgct tccagcaccc2160ttactctcca agcaggctga cttggaatgt gcaggatacc cacaccataa caaatcgacg2220ttactttcca tggccttctg taaccttgtg atttacttca agttgcgcaa gagtagaact2280tggagacttg actggtttga ggccacaagg aaagtctcct tttcaggatg cccatagagc2340ttggaaatca tccatgttac agcatagttt ccaaaaatgg tgttacctca agcaggaagg2400cacctttgca gcttagatag attcacaagc cattcccaca gagctcaaac ctgtttacag2460agtgccgtcc ctcttccgat ggcctatgaa ccagccctct ccccagcctg tggctgttga2520gctggtgatg tttccctgta cattgaatct tccaatcaga gagagacgtg ttgaaactcc2580agtcttgttt tggaaaaatc cctggaaaag atcaatgcag gaacaatcag attcaaagga2640aaagaactac tcatgctgta ggctgtccaa ttagggagaa tgctccccgt ggatcggcaa2700ggcgctttac ccattcacaa atgtctccca gtcccatccc gtctctgctc ccaaacccac2760ctcctcagat tctgagacac taaatagctt ctcttctctt ctcttctctt ctcttctctt2820ctcttctctt ctcttctctt ctcttccctt ctcttctctc tctcaacact aactcttctg2880tagcttatac actattacct tggcaaatag tcctcataaa atataggaga ccatgcatag2940gaaacaccat tacgctgccc catccccagt gaccgtgtag agtagatgtc tctaagcaac3000cagtagtgac aacttaccca aaaatgggca gactgtaccc atgcaactga atgtacgact3060cttcactgat gtcacagatg tgaactactt cttgtctgcc tttcactgcc ttagcctgga3120aatgctggga aaaacaagcc atatcagtga gaattaccta aaagcaaagg aagtcactgt3180gaaaagcaag ggaactcact tcttcccacc gggctcggta gagcatcttt ggcctcacag3240caagtcaggg tgcctgcggc ctgggtcatt taggacctta tcagtgttag ttttcttacc3300tcctagtaaa tgagttgatc tccagaaacc cctcttccct tctctagtgt ttgacttttc3360agactaagga gggggcgtct ttgaaagatt ccttttctat tcaaacttct agcttcggaa3420acggaatgca tgtgggtgct catggagtga gaatgaggat ttgattcaga ggaaggcaga3480atgacctcgg aagcagagag gtacagccct gaaagtcttt ggaaataact gaggaaaagg3540gaacagtctg tgcagggaac taaagattta gcctgatgtt ttagcagata aaaacatcgc3600tgtagacttg gtgtggagat taaatagaaa caagaagccc ccagagagtc aagttcaagc3660atctgtctga gatttgcttt cccaggcaac ctgtacccag cctcctccct caggaatttc3720attaaaacat ctgtcccctc tgtcagctct cctggaatgc ctctgtccag acaattaaaa3780cacacttgct gtgagaccag ttctccgtcc aaagagggag agagggaggt gacaggtagg3840
tgagtcccac acaggcatac aaacttctgg ggcaccagag tttctgagga agtttcctga3900tgctgacagt tttcaaatgg catcggaaac cctggcatta gtgcagggtt tgacccaggg3960tcattcagag cgctgtaaag attaagcgct gggcactagc ccggtcctca caatccagcc4020agccacagca cagtgaccct ccctctgtag aggctcacct ttcagggacg aaccaggctg4080tagcaaccgt ggagactgag tactgaacaa gacaagcaag cttcagtctt ctggcgggaa4140ggaacaagaa cggtaggcat tcagaatggc cttcgagaaa ctcattttat gcactagatt4200gtgagggatt tgctcccaat gttttttttt ttcttcttct tcttcttctt tttcaaagtc4260attcccttct aatcttgtcc agactttcaa ttcaagtgtg gacgcggtga caagaacctt4320tacacctgct ccaccgtggg gagactttcc agtcaaggag aacacgctca tcctgctggg4380gcactcactg acaaatggta ttcatgaacg agaaggctgt gcacatgcaa ccgacatgtg4440cgtgtgcacacatgtgcgta catccggtcg ttgcctcaag tgtactt tgc acttcagtta4500aaatgtgcag aacttccaga aactggaaga agaag 4535<210>6<211>3636<212>DNA<213>褐家鼠(norway rat)<400>6ggagcctcgg cgggaggagg cggacacgtg gcagcggcgg cggcagcggc agcagcagcg60gcggcagcag cggcggcctc ggtccggggc gccggccgtc ctccctcttt cctccggcgg120cagccctagt tcccgcctct cggctccccc ggctccactc tcccagccgg gagctgctct180ctcctctttc tagtctccag ccacaggacc cggcgcgggg cccgcagcgc cgccaccatg240gggaaggggg ttggacgaga caagtatgag cccgcagctg tatcagaaca tggggacaag300aagagcaaga aggcgaagaa ggaaagggac atggacgaac tcaagaagga agtgtctatg360gacgaccata aactcagcct ggatgaactc catcgtaaat acggaacaga tttgagccga420ggcctaacac ccgcaagggc cgctgagatc ctggctcggg atggccccaa cgccctcacg480ccccctccca ctactcccga gtgggtcaaa ttctgtcggc agctgttcgg tggcttctcc540atgttactgt ggattggagc cattctttgt ttcttggctt atggcatccg aagtgctaca600gaagaggaac caccaaatga tgatctgtac ctcggggtcg tgctgtctgc tgtcgtcatc660ataactggct gtttctccta ttatcaagaa gcaaaaagct ccaagatcat ggaatccttc720aagaacatgg tccctcagca agccctcgtg attcgaaatg gagagaagat gagcatcaac780gcagaggatg tcgtcgttgg tgatctggtg gaggtgaagg gcggagaccg aatccctgct840gatctcagaa tcatatctgc aaatggctgc aaggtggata actcctcact cactggtgaa900tcagaacccc agactcggtc cccggatttc acaaacgaga accccttgga gacaaggaac960attgccttct tctcaaccaa ctgtgttgaa ggaactgcac gtggcatcgt tgtgtacact1020ggggatcgca ccgtgatggg caggatcgcc acccttgctt ctgggctgga aggcggccag1080acccccattg ctgaagaaat cgagcacttc atccacctca tcacgggtgt ggccgtgttc1140ctgggggtgt ctttcttcat tctctctctg atccttgagt acacctggct cgaggctgtc1200atcttcctca ttggtatcat cgtagccaac gtgccggaag gtttgctggc caccgtcacg1260
gtatgtctga cgctcactgc caagcgcatg gcgaggaaga actgcctggt gaagaacctg1320gaagctgtgg agaccttggg gtccacatcc accatctgct ccgacaagac tggaactctg1380actcagaacc ggatgacagt ggctcacatg tggtttgaca atcaaatcca tgaagctgac1440accacagaga atcagagtgg ggtctccttt gacaagacgt cagccacctg gttcgctctg1500tccagaattg ctggtctctg taacagggca gtgtttcagg ctaaccaaga aaacctgcct1560atccttaagc gtgcagtagc gggagatgct tccgagtcgg cgctcttaaa gtgcatcgag1620gtctgctgtg gctccgtgat ggagatgagg gagaagtaca ccaagatagt ggagattcct1680ttcaactcca ccaacaagta ccagctctcc attcacaaga acccaaacgc atcggagcct1740aagcacctgc tagtgatgaa gggcgcccca gaaaggatcc tggaccgatg cagttctatc1800ctcctccacg gcaaggagca gcccctggac gaagagctga aggacgcctt tcagaatgcc1860tacctagagc tggggggcct tggagagcgt gtgctaggtt tctgccacct ccttctgcct1920gacgaacagt ttcccgaagg cttccagttt gacactgatg aagtcaattt ccccgtggat1980aacctctgct tcgtgggtct tatctccatg attgaccctc ctcgagctgc tgtccccgat2040gctgtgggca aatgccgcag cgctgggatt aaggtcatca tggtcacagg agaccatcca2100atcacagcca aagccattgc taagggggtg ggcattatct cagaaggtaa cgagaccgtg2160gaagacattg ctgcccgcct caacattcca gtgaaccagg tgaaccccag agatgccaag2220gcctgtgtag tacatggcag tgacttgaag gacatgacct ctgaggagct ggatgacatt2280ttgcggtacc acacggagat tgtctttgct aggacctctc ctcaacagaa gctcatcatt2340gtggagggct gccagcggca gggtgccatc gtggctgtca caggggatgg tgtcaatgac2400tctccagctt tgaaaaaggc agatattggg gttgccatgg ggattgttgg ctcggatgtg2460tccaagcaag ctgctgacat gattcttctg gatgacaact ttgcctccat cgtgactgga2520gtagaagaag gtcgtctgat atttgataac ttgaagaaat ccattgctta caccctaaca2580agtaacattc cggaaatcac ccccttcttg atatttatta ttgcaaacat tccactgccc2640ctgggcaccg tgaccatcct ctgcattgac ttgggcactg acatggttcc cgccatctct2700ctggcctatg aacaggctga aagtgacatc atgaagaggc agcccagaaa tcccaaaacg2760gacaaacttg tgaacgagcg tctgatcagc atggcctatg gacagatcgg tatgatccag2820gccctgggag gcttcttcac ttattttgtg attctggctg agaacggttt cctgcccttt2880cacctgttgg gcatccgaga gacctgggat gaccgctgga tcaatgatgt ggaggacagc2940tacgggcagc agtggaccta cgagcagagg aagattgtgg agttcacctg ccacacggcc3000ttctttgtca gtatcgtggt agtgcagtgg gctgacttgg tcatctgcaa gaccagaagg3060aattctgt tccagcaggg aatgaagaac aagatcttaa tatttggcct ctttgaagag3120acagctcttg ctgctttcct gtcctactgc cctgggatgg gtgcagccct taggatgtat3180cccctcaaac ctacttggtg gttctgtgcc ttcccctact cccttctcat cttcgtgtat3240gacgaggtgc ggaagctcat catcaggcga cgccctggcg gctgggtgga gaaggaaacc3300tactactagc ccactgccct gcacgccgtg gaacattgtg ccacacactg cacctacccc3360taccccccct ttgtgtactt caagtcttgg agctcggaac tctaccctgg taggaaagca3420ccaaagcatg tggggatcca gacgtcctgg aatgaagcat gtagctgtaa tggggggcgg3480ggggagggct gcccgaaaaa caccgtggac ggggacgaca gcggggaagg tttatatgtg3540
cctttttgtt tttgtaaaaa aggaaaacct ggaaagactg aaagattacg ttttatatct3600ggatttttac aaataaagat ggctattata acggaa 3636<210>7<211>2508<212>DNA<213>褐家鼠(norway rat)<400>7ggcagtggcc acagcagagg aatatagctt cacccaggat gttatctctg acctggggta60tgaagctagt ggaaagatct gtggtcccca gggtcctcct cttgctcttt gcactctggc120tgctcctcct ggttccagtc cggtgttctg aaggccaccc cacttggcgc tacatctcat180cagaggtggt tattcctcgg aaggagatct accacagcaa aggaattcaa acacaaggac240ggctctccta tagcttgcgt tttaggggcc agagacatat catccacctg cgaagaaaga300cactaatttg gcccagacac ttgttgctga caactcagga tgaccaagga gccttacaga360tggattaccc ttttttccct gtagattgtt actattttgg ctacctagag ggaatccctc420aatccatggt cactgtgaat acttgctatg gaggcctgga agggatcatg atgttggatg480accttgccta tgaaatcaaa cccctcaacg attcacaggg gtttgaacac attgtttctc540agatagtatc agagcctgat gtaacagggc ctacaaatac atggaaacgc ttgaacctta600atacaggtcc tcccttatcc aggacagagt atgccaatgg aactcccaga atgtctagta660agaactacgc ttcacatcca gctgctataa aaggccaatt ccaagcaact aattctatat720ataaggaaag caacaatatt gatactgcgg ccaggtattt gtttgagctc cttagtataa780cggacagctt tctgatcact attcatatgc ggtactatgc tattctctta actgtgttta840ccgagagcga tccatttgca ctagagtata cggtaccagg gggctctatt tataactatt900atgtgtctaa cttttttaat cggttgaggc ctgatgcatc aaccgtactt aataaagatg960ggccctcgga taacgacttt catccagttg aacagagttt atgtactccc gcaggcctga1020cgattgttgg tcaacacaga cgaagttttc tagctctatc tgttatgatc accaatcgta1080ttgcgatgtc tttaggtata aaagctgatg atgagactta ctgcatctgc cacagaagga1140ccacttgcat tatgtacaaa aaccctgaaa taacagatgc tttcagcaat tgctcccttg1200tgcagataaa ccagatactg aatacccctg gtacaatgtc atgccttttc tatgaccacc1260atgtttatca taatataaca aaaacctaca ggttttgtgg aaacttcaag atagatatcg1320gtgagcagtg tgactgtggc tcacataagg catgttacgc agatccctgc tgcggaagta1380attgcaagtt aactgctggt agcatttgtg ataaagaatt atgctgtgca aactgcacct1440acagtccttc tgggacactc tgcagaccga tccagaacat atgtgatctt ccagaatact1500gtagtgggaa taatatcttt tgccctgcag acacttatct gcaagatggg acgccatgct1560cagaagaggg gtactgctat aaaggcaact gcacagatcg cagtgtgcag tgcaaggaaa1620tctttggtat gaatgctaag ggtgctaata tcaagtgcta tgacatcaac aaacaacggt1680ttcgatttgg gcactgcact agagcacaag agagcctcat gtttaatgct tgctctgatc1740atgataaact gtgtggaagg ctgcagtgta ccaacgtcac caatcttcca ttcctgcagg1800aacatgtttc attccatcaa tcggttatct ctgggtttac ctgctttggg cttgatgaac1860
atcgtgggac agaaacaacg gatgctgggc tggtgaaaca tggtacccct tgctcccaaa1920ctaacttctg cgatcgagga gcttgcaatg gaagtttatc tcggttggat tatgactgca1980ccccagaaaa atgcaatttt agaggagtgt gtaataatca tcggcattgc cattgtcatt2040taggttggaa acctcctctg tgcagagagg aggggcctag cgggagcacg gacagtgggt2100cccctccgaa ggaaaggcgc acaataaaac agagcagaga accactgtta tatttaagaa2160tgctctttgg tcgtctttat ttattcattg tctcgctgct ctttggagtg gccactcgcg2220caggagttat taaggtcttt aagtttgaag acttgcaagc tgctctgcgg gctgcacaag2280ccaaggcgac ttaaagatga acgaggtcct cgtaagataa agagaatgca aaaatgcatg2340tcaagagggg acaaggtaga actccagtcc acagttctgg agagccttca tctatatcgt2400ggggacgcaa gaggttttgg atttggatac cacctgacat tggtgggtta ctgatgctca2460cactcgaata aatctttcaa aaccgcaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaa 2508<210>8<211>429<212>DNA<213>褐家鼠(norway rat)<400>8gacagcctca gtcttgcttc tggtggcttt gatcgccgtg ggaatgaaca ttacctatgc60tctgttttct cccacaaaat tagaaaaacc tggaaagtgt cccaagaatc ccccaagaag120tattggcact tgtgttgaat tatgctcagg agatcaatcg tgccccaaca tacagaagtg180ctgttccaat ggctgtggtc atgtttgcaa atctcctgtc ttttaagtta ctaacagcga240tctggaatat ggatttgatc ttcataagca cgactgatgg ccagccccag aagatttctt300ctgaatccct agagcccatg cttggctcct cccttgtcct agaattgcat ccttggaaaa360ggaagatcta tactgtgatg acagcttcct aatgtgtttg tgtccacaaa taaactctcc420ttagcattc429<210>9<211>2722<212>DNA<213>褐家鼠(norway rat)<400>9caggaggcgg ccggggcgtg tgggattgag gagtggagga ggaggcggag agtcagggct60ctgaggggga gctgttccca agctaaggga ggagcccccg gaagacgccg cggaaggcag120cgaggcggag gcggccggag tacggacgcg atgtggcccg acccgcgctg ctgcgctgag180gcgcccgcgg cctgagcccc ccggcgctgc gctcggttcg gctcggcccg gttcggctcg240gctcggcggc cggcgaggtc gatgcccttg agcgcggctg cgcgcagctc ggctgtgcgg300ccccgcggcg cgcgctgagc ttctcggcgg ccccggccgc tctcagctcg gcgctcgatg360tgtagccaca tagttatctg tacacttcgt cgccggggct ttaatgagga cctgagtcgc420
gagcgcgagt gaatcaccgc ctgggccggg gaaagaggac ggcgcattta accccctccc480accccactcc atgtccctgt gtcactcggc tctgtccacc tggcgcggcg ggtcctggag540ctgctactgc tgctgacgat cgactcccct cgcgcctctc gccccagaag ctcttgtgct600cccacgtaac ttctactttt tttttttcct tttgagaaag ctcagcacga accgatcaga660attgtgaagg gtttttgttt tttttttgtt ttttgttttg cttttgggtt ttccgaagct720ccagcacttc tgctcttgtt tttgttttgt tttctgcgta aacctctggc ccactctcaa780aaggcaagat gtccagtcat gtcccggcgg atatgattaa tttgcgcctc atcttggtga840gtggaaagac gaaagagttc ctcttctccc caaacgactc tgcctctgac atcgcaaagc900acgtgtatga caactggccc atggactggg aagaagagca ggtcagcagc ccgaacattc960ttcgactcat ttatcaaggc agatttctac acggaaacgt caccctagga gcattaaaac1020ttccttttgg caaaacaaca gtgatgcatt tggtggccag agagaccctg ccagagccca1080attcacaagg tcagagaaac cgggagaaaa ctggtgagag caactgctgt gtgatcctgt1140aacatcgtcg ccagcgcagg tgtggcagtc tgttaccact gcggggacag aggagactcg1200gcagcttccg acacctgtgg gacagtcgcc cgcacatcca gactgaacca ctcatgagct1260ctgtgatctc tcctcacaaa gtaaaaagaa ccaagaacat ttccagtctg gtcctttatt1320cctgtatctc ttgtctgtgt tgagcagtct gaaatgcaca gtggtctcca ggggaaatag1380caagtctctc aagtctctct ctgcagaaac cgccttgctg ccacaaagac tcctccacag1440aagtcagaag gcgagtgctg caagttcaat ttgcactaaa aacattatta ttttcctcat1500cagcgtaatc tgcacatgtc tgtggcgccc agacgttctc ctgtgtggag ttcaccctgg1560aggacgccca tcatcagtgc agttaatacc aggccagttg gaccggggaa atgggaagga1620atctaacatg ctgggtgaat tctaccaaag tcagccacag tggctgtcct cgaaggatgt1680cagactgggc atgactcttg tcaccacagc aaatgagaag ccatgcctgc tgctcacagc1740actctgtaga gggtgcccct gctgcctgcc caccgagtcc tccccacagg gggctcatgc1800agacagcaca gaggggccgc agtgtgtccc tagccttaat gtggaggggc cagtgtctcg1860gtgccatcac tgtgcagaac tggtgggaag cctcagcggt tgtgtacttg agtatcagaa1920gattgatagc ttgcgccacc atcactcatt cgaaccctgc cgagtgtact cgctcactag1980agcagaggga tccttttaaa gtctccagat gctaattttg ttactttctg tagtttgcat2040tcggaatcag tgcttgcaat tgtattaaaa tcacaagctg agttttaagg catacatgat2100caatagcgcc actcttattt ttaccaataa tttaaagatt gagatgctat aaataaacaa2160tttgcacagc actaaagcat gagctaattt catctaaacc tgtaaaaaaa agattttata2220tttttttcac tgggaagaaa tcttcctgga tgaaattaca aatatgtgta gattatattt2280aataaaaaag acataataaa atatctaact gtagaatgca aatatagatt ggcgtgtagc2340atatagacca gtattccata tcaataactt tatccagcct tttaaaagat gaagttgcag2400actacgttgt gttctgtatt taatgagggt tcttggccct cggcagcatt aaatgtaaat2460ggtctctatg gtcatctttg tttaaatgca atcaggttac tttattcatt gttaatgctt2520ccatgagaag gctttatatg cagtagatct acgaaaatat tgttcatact gatcagaatt2580aaatttgtat agagcagagt tttaaaatga atgtaaatag cactaaacct tttctttctg2640cagcctgtac ttaatagatt tcttctgtaa actaaataaa aaaaaattgt agtgcaaaaa2700aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aa 2722
<210>10<211>3471<212>DNA<213>褐家鼠(norway rat)<400>10ggcacgagga ccggctgagg attttatggt tcttaagcgg acttaagagc gttgtttcgg60attgttaaga ttcccgtttg ctgggttttc ctccctcaat cgtgctctcc cgcggctgcc120tggggactgg ctcggcgaag gaggatggag agggggctgc cgttgctgtg cgccacgctc180gcccttgccc tcgccctggc gggcgctttc cgcagcgata aatgtggcgg gactataaaa240attgaaaacc cggggtacct tacatctccc ggctaccctc attcttacca tccaagtgag300aaatgtgaat ggctaatcca agctccggag ccctaccaga gaatcatgat caacttcaac360ccacatttcg atttggagga cagagactgc aagtatgact atgtggaagt gatcgatgga420gagaatgaag gtggccgcct gtgggggaag ttctgtggga agatcgcacc ttcacctgtg480gtgtcttcag ggccatttct cttcatcaaa tttgtctctg actatgagac ccacggggca540ggattttcca tccgctatga aatcttcaag agagggcccg aatgttctca gaactataca600gcacctactg gagtgataaa gtcccctggg ttccctgaaa aataccccaa cagcttggag660tgcacctaca tcatctttgc accaaagatg tctgagataa tcctagagtt tgaaagtttt720gacctggagc aagactcaaa tcctcccgga ggagtgttct gtcgctatga ccggctggag780atctgggatg gattccctga agttggccct cacattgggc gttactgtgg gcagaaaact840cctggccgga tccgctcctc ttcaggcatt ctatccatgg tcttctacac tgacagcgca900atagcaaagg aaggtttctc agccaactac agcgtgctgc agagcagcat ctctgaagat960ttcaagtgta tggaggctct gggcatggaa tctggagaga tccattctga ccagatcact1020gcatcttccc agtatggtac caactggtct gttgagcgct cccgcctgaa ctaccctgaa1080aacgggtgga caccaggaga ggactcctac agggagtgga tccaggtgga cttgggcctc1140ctgcgattcg ttactgctgt ggggacacag ggtgccattt ccaaggaaac caagaagaaa1200tattatgtca agacttacag agtagacatc agctccaacg gagaggactg gatcaccctg1260aaggagggaa ataaagccat tatctttcag ggaaacacca atcccacgga tgttgtcttt1320ggagttttcc ccaaaccact gataactcga tttgtccgaa tcaaacctgc atcctgggaa1380actggaatat ctatgagatt tgaagtttat ggctgcaaga taacagatta cccttgctct1440ggaatgttgg gcatggtgtc tggacttatt tcagactccc agattacagc atccaaccaa1500ggagacagga actggatgcc agaaaacatc cgcctggtga ccagtcgaac cggctgggcc1560ctgccaccct caccccaccc atacatcaat gaatggctcc aagtggacct gggagatgag1620aagatagtaa gaggtgtcat cattcaaggt gggaagcacc gagaaaacaa agtgttcatg1680aggaagttca agatcgccta cagtaacaat ggttctgact ggaaaatgat catggatgac1740agcaagcgca aggctaagtc ttttgaaggc aacaacaact atgacacacc tgagctccgg1800gcctttacac ctctctccac aagattcatc aggatctacc ccgagagagc cacacatagt1860gggctcggac tgaggatgga gctactgggc tgtgaagtag aagtgcctac agctggaccc1920
acgacaccca atgggaaccc cgtggacgag tgtgacgatg accaggccaa ctgccacagt1980ggcacaggtg atgacttcca gctcacagga ggcaccactg tcctggccac agagaagcca2040accattatag acagcaccat ccaatcagag ttcccgacat acggttttaa ctgcgagttt2100ggctggggct ctcacaagac attctgccac tgggaacatg acagccacgc gcagctcagg2160tggagggtgc tgaccagcaa gacggggccc attcaggacc acacaggaga tggcaacttc2220atctattccc aagctgatga aaatcagaaa ggcaaagtag cccgcctggt gagccctgtg2280gtctattccc agagttctgc ccactgcatg accttctggt atcacatgtc cggctctcat2340gtgggtacac tgagggtcaa actgcactac cagaagccag aggaatatga tcaactggtc2400tggatggtgg tcgggcacca aggagaccac tggaaggaag ggcgtgtctt gctgcacaaa2460tctctgaaac tgtatcaggt tatttttgaa ggtgaaatcg gaaaaggaaa cctcggtggg2520attgctgtgg atgatatcag tattaacaac cacattcctc aggaggactg tgcaaaacca2580acagacctag ataaaaagaa cacagaaatt aaaatagatg aaacagggag caccccagga2640tatgaagaag ggaaaggcga caagaacatc tccaggaagc caggcaatgt gcttaagacc2700ctggacccca tcctgatcac catcatagcc atgagtgccc tgggggtgct cctgggtgca2760gtctgtggag ttgtgctgta ctgtgcctgt tggcacaatg ggatgtcgga aaggaaccta2820tctgccctgg agaactataa ctttgaactt gtggatggtg taaagttgaa aaaagataaa2880ctgaacccac agagtaatta ctcagaggcg tgaaggcacg gagctggagg gaacaaggga2940ggagcgcggc aggagaacag tggaggcgca gggactctgt tactctgctt tcactgtaag3000ctgggaaggg cggggactct gttactccgc tttcactgta agctcggaag ggcatccgcg3060atgccatgcc aggcttttct caggagcttc aatgagcatc acctacagac acaagcaggt3120gactgcggta acaacaggaa tcatgtacag cctgctttct tctcttggtt tcgtttgggt3180aatcagaagc cagttgagac caagtgtgac tgacttcatg gttcatccta cttggccccc3240tttttcctct ctttctcctt accctgtggt ggattcttct cggaaactgc aaaatccaag3300atgctggcac taggcgttgt tcagtgggct ctttcgatgg acatgtgacc tatagcccag3360tgcctagagc atattagcat aaccacattt caggggacac caatgtccgc ttttgcatcg3420ctacgtgcag cgagcacagg aaaaagaaaa aaaaaaaaaa aaaaactcga g 347权利要求
1.口腔白斑癌变相关基因，其特征在于它在口腔白斑癌变中表达降低，它具有如SEQID1、SEQID3所示的核苷酸序列。
2.口腔白斑癌变相关基因，其特征在于它在口腔白斑癌变中表达降低，它具有如SEQID4、SEQID5所示的核苷酸序列。
3.口腔白斑癌变相关基因，其特征在于它在口腔白斑癌变中表达降低，它具有如SEQID6、SEQID7所示的核苷酸序列。
4.口腔白斑癌变相关基因，其特征在于它在口腔白斑癌变中表达降低，它具有如SEQID8、SEQID9所示的核苷酸序列。
5.口腔白斑癌变相关基因，其特征在于它在口腔白斑癌变中表达降低，它具有如SEQID2、SEQID10所示的核苷酸序列。
6.根据权利要求1所述的相关基因，其特征在于SEQID1基因编码的蛋白是羧酸酯酶1、SEQI D3基因编码的蛋白是白细胞素2受体γ链。
7.根据权利要求2所述的相关基因，其特征在于SEQID4基因编码的蛋白是CD80抗原、SEQID5基因编码的蛋白是甲状腺激素受体β。
8.根据权利要求3所述的相关基因，其特征在于SEQID6基因编码的蛋白是ATP酶，Na+K+转运，α1、SEQID7基因编码的蛋白是解聚素及金属蛋白酶domain 6。
9.根据权利要求4所述的相关基因，其特征在于SEQID8基因编码的蛋白是细胞外蛋白酶抑制剂、SEQID9基因编码的蛋白是泛激素类似物3。
全文摘要
本发明涉及在口腔白斑癌变过程中，表达持续降低的基因。口腔白斑癌变过程中，表达持续降低的基因有10条，它具有如SEQID1、SEQID2、SEQID3、SEQID4、SEQID5、SEQID6、SEQID7、SEQID8、SEQID9、SEQID10所示的核苷酸序列。本发明所公开口腔白斑癌变相关基因，其优点表现在设计开发口腔癌前病变诊断、判断预后等用途生物芯片，进一步研究挖掘药物作用靶点，为个体化药物治疗提供依据。
文档编号C07K14/435GK1769455SQ20051002962
公开日2006年5月10日 申请日期2005年9月14日 优先权日2005年9月14日
发明者周曾同, 葛姝云 申请人:上海第二医科大学附属第九人民医院