专利名称：2,3,4,5－四取代的苯丙烯类衍生物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及有机化学、药物化学和药理学领域，具体而言，本发明涉及2，3，4，5-四取代的苯丙烯类衍生物及其关键中间体的制备方法，以及针对这系列化合物进行的六种肿瘤细胞株，如人前列腺癌细胞(PC-3)、鼻咽癌细胞(CNE)、口腔上皮癌细胞株(KB)、人肺癌细胞(A549)、人肝癌细胞(BEL-7404)、人子宫颈癌细胞(Hela)的肿瘤细胞生长抑制活性筛选。该类化合物被发现具有一定的抑制肿瘤细胞生长活性，可预期作为抗肿瘤药物用途。
背景技术：
目前，由于工业发展中带来的环境污染等问题，人类的生存环境质量不断下降，肿瘤疾病的发病率和致死率也不断上升。然而治疗肿瘤疾病的药物的疗效并不能令人满意，目前临床所用抗肿瘤药切一般为细胞毒性药物，其选择性不高导致对正常细胞的恶性杀伤，限制了该类药物的普遍适用性。因此，寻找和发现新的选择性高的细胞毒性抗肿瘤药物是世界范围内的研究热点。2002年赵昱等从菊科莲叶橐吾中分离得到三取代的苯丙烯类化合物，并对其作了细胞毒性试验，发现某些化合物对KB细胞有一定的细胞毒性(Y Zhao，XJ Hao，W Lu，JC Cai，H Yu，T Sevénet，FGuéritte，(2002)J Nat Prod 65，902-908)。本发明的目的在于对这类化合物进行合成和结构改造，以期寻找对肿瘤细胞株生长产生更强抑制作用的2，3，4，5-四取代的苯丙烯类衍生物。体外细胞毒活性评价指标选择了人前列腺癌细胞(PC-3)、鼻咽癌细胞(CNE)、口腔上皮癌细胞(KB)、人肺癌细胞(A549)、人肝癌细胞(BEL-7404)、人子宫颈癌细胞(Hela)六株肿瘤细胞，并对2，3，4，5-四取代的苯丙烯类系列衍生物进行细胞毒活性测试，据此完成本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有细胞毒活性的化合物，具体而言，本发明提供了一种具有式(1)所示的具有细胞毒活性的2，3，4，5-四取代的苯丙烯类衍生物及其可药用盐
式(1)其中R1可以是羟基，卤素，硝基，氨基，含1～8个碳的饱和或不饱和烃基或烷氧基，R2，R3或R4可以相同或不同，可以是氢，含1～15个碳的饱和或不饱和烃基，取代或未取代的芳烷基。其中用于芳烷基中芳基上取代的取代基可以是含1～8个碳的烷基或烷氧基，卤素，羟基，氨基，硝基，含1～8个碳的烷胺基。
R可以是-COOH，-CH2OH，-CHO，-COOR5，-CONHNH2，-CONH2，-CONHR5，-CON(R5)2，其中R5是含1～8个碳的链烷基。
其中，当R2，R3，R4同时为甲基时，R1不能为溴或硝基或甲氧基取代；当R2，R3，R4同时为氢，R1为羟基时，R不能为羧基；当R2，R4同时为甲基，R为羧基，取代基R1为羟基时，R3不能为氢；当R2，R4同时为甲基，R为羧基而取代基R1为硝基时，R3不能为苄基；当R2，R4同时为甲基，R为醛基而R1为氯时，R3不能为氢；本发明进一步的实施方案是当取代基R是CO2R5时，为式(I)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯酸酯类化合物 式(I)其中，基团R1，R2，R3，R4及R5的定义与式(1)中的相同。
本发明优选的式(I)化合物是I-a.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]2-丙烯酸乙酯(2E)；I-b.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-c.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-d.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]2-丙烯酸乙酯(2Z)；I-e.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]2-丙烯酸乙酯(2E)；I-f.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2Z)；I-g.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-h.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸乙酯(2Z)；I-i.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-j.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-k.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯酸乙酯(2Z)； 本发明另外一个实施方案是当式(1)中的取代基R是羧基时，为式(II)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯酸类化合物 式(II)
其中，基团R1，R2，R3，R4的定义与式(1)中的相同。
本发明优选的式(II)化合物是II-a.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-b.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-c.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-d.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-e.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-f.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，1 1-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸(2E)； 本发明进一步的实施方案是当式(1)中的取代基R是羟甲基时，为式(III)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯醇类化合物
式(III)其中，基团R1，R2，R3，R4的定义与式(1)中的相同。
本发明优选的式(III)化合物是III-a.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-b.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-c.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯1-醇(2E)；III-d.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-e.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-f.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯-1-醇(2E)；III-g.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)； 本发明进一步的实施方案是当式(1)中的取代基R是醛基时，为式(IV)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯醛类化合物
式(IV)其中，基团R1，R2，R3或R4的定义与式(1)中的相同。
本发明优选的式(IV)化合物是IV-a.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-b.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-c.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯醛(2E)；IV-d.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-e.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-f.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-g.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯醛(2E)； 本发明的另一目的是提供了具有细胞毒活性如式(V)所示的式(1)的关键中间体2，3，4，5-四取代的苯甲醛系列化合物及其可药用盐 式(V)其中基团R1，R2，R3，R4的定义除与式(1)中的相同外，当R2，R3，R4同时为氢时，R1不能为羟基；当R2，R4同时为甲基时，R3不能为氢、甲基、未取代苄基；当R2，R4中有一个为甲基，而另一个为氢或未取代苄基时，R3不能为氢、甲基、未取代苄基。
本发明中优选的式(V)化合物是V-a.2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)-苯甲醛；V-b.2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)-苯甲醛；V-c.2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)-苯甲醛；V-d.2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)-苯甲醛；V-e.2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧-苯甲醛；V-f.2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧-苯甲醛； 本发明的另一目的是提供一种由式(V)化合物为起始物的制备式(1)化合物的途径。该合成工艺路线特征是式(V)化合物通过与三苯基乙氧羰基次甲基膦烷经历魏悌锡(wittig)反应制备得到化合物(I)，得到的产物经过碱水解得到化合物(II)；化合物(I)通过氢化锂铝还原得到化合物(III)与少量2，3位双键还原的产物；化合物(IV)可以由化合物(V)与乙醛的缩合作用制备得到；具体路线见下图(以稀键反式化合物为例) 其中，基团R1，R2，R3及R4的定义与式(1)化合物中的相同。
本发明的又一目的是提供了式(1)及式(V)化合物的用于制备防治肿瘤疾病药物的用途。
本发明的另一个目的是提供了一种含有式(1)及式(V)化合物的用于抗肿瘤疾病的药物组合物。
具体实施例方式
下面通过实施例进一步说明本发明，其中OMe代表甲氧基(OCH3)，OEt代表乙氧基(OCH2CH3)。实施例给出了代表性化合物的合成及相关结构鉴定数据，以及部分活性数据。必须说明的是下述实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制，根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。除非另有说明，本发明中的百分数是重量百分数。
实施例1V-c(2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯甲醛)的制备 本例涉及到一类如式(V)所示的具有细胞毒活性的2，3，4，5-四取代的苯丙烯类衍生物关键中间体2，3，4，5-四取代的苯甲醛系列化合物的一般合成方法。具体涉及化合物2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯甲醛的合成。将化合物2-溴-4-羟基-3，5-二甲氧基苯甲醛(0.85克，3.28mmol)溶解在20毫升丙酮中，加入无水碳酸钾(1.13克，8.22mmol)，搅拌10分钟，后加入3，4-二氯苄溴(0.6毫升，3.61mmol)的10毫升丙酮溶液，回流4小时。经薄层色谱(TLC)显示原料点基本反应完全，冷却至室温，抽滤除去碳酸钾，蒸去溶剂丙酮。浓缩所得固体经柱层析分离得到白色固体0.92克，产率为67.0％。
化合物V-cRf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.55；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ10.30(1H，s，CHO)，7.62(1H，s，H-2′)，7.44(1H，d，J＝8.0Hz，H-6′)，7.31(1H，d，J＝8.0Hz，H-5′)，7.30(1H，s，H-6)，5.10(2H，s，H-7′)，3.91(6H，s，OCH3-3，5)。
实施例2化合物V-a(2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯甲醛)的制备 本例涉及到一类如式(V)所示的具有细胞毒活性的2，3，4，5-四取代的苯丙烯类衍生物关键中间体2，3，4，5-四取代的苯甲醛系列化合物的一般合成方法。具体涉及化合物2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯甲醛的合成。在一个100毫升的三颈瓶中依次加入对乙氧基溴苄(0.51克，2.37mmol)碘化钠(59毫克，0.40mmol)和丙酮(15毫升)，再加入碳酸钾(0.82克，5.94mmol)和4-羟基-2，3，5-三甲氧基苯甲醛(420毫克，1.98mmol)，回流3小时。冷至室温，过滤，滤液浓缩，柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝15∶1，粗品/硅胶＝1∶30)得白色固体363毫克，收率为53％。
化合物V-aRf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.51；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ10.28(1H，s，CHO)，7.36(2H，d，J＝8.4Hz，H-2′，6′)，7.09(1H，s，H-6)，6.86(2H，d，J＝8.4Hz，H-3′，5′)，5.10(2H，s，H-7′)，4.02(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4′)，3.94(3H，s，OCH3-2)，3.87(6H，s，OCH3-3，5)，1.41(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4′)。
根据与实施例1-2之一的方法制备以下表一所示实施例3-6化合物 表一 下面列出表一中各化合物的理化数据化合物V-b白色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.57；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ10.29(1H，s，CHO)，7.62(1H，d，J＝2.0Hz，H-2′)，7.43(1H，d，J＝8.0Hz，H-5′)，7.29(1H，m，J＝8.0，2.0Hz，H-6′)，7.11(1H，s，H-6)，5.11(2H，s，H-7′)，3.93(3H，s，OCH3-2)，3.86(6H，s，OCH3-3，5)。
化合物V-d白色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.51；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ10.26(1H，s，CHO)，7.34(2H，d，J＝8.8Hz，H-3′，5′)，7.26(1H，s，H-6)，6.84(2H，d，J＝8.8Hz，H-2′，6′)，5.05(2H，s，H-7′)，4.00(2H，q，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4′)，3.87(6H，s，OCH3-3，5)，1.38(3H，t，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4′)。
化合物V-e无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.61；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ10.30(1H，s，CHO)，7.28(1H，s，H-6)，5.53(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2′)，5.08(2H，m，H-6′，10′)，4.65(2H，s，H-1′)，3.87(6H，s，OCH3-3，5)，2.03(8H，m，H-4′，5′，8′，9′)，1.68(3H，brs，H-15′)，1.66(3H，brs，H-14′)，1.60(3H，brs，H-13′)，1.58(3H，brs，H-12′)。
化合物V-f无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.61；1H-NMR(400MHz，CD3COCD3)δ10.30(1H，s，CHO)，7.28(1H，s，H-6)，5.53(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2′)，5.08(2H，m，H-6′，10′)，4.65(2H， s，H-1′)，3.95(3H，s，OCH3-2)，3.87(6H，s，OCH3-3，5)，2.03(8H，m，H-4′，5′，8′，9′)，1.68(3H，brs，H-15′)，1.66(3H，brs，H-14′)，1.60(3H，brs，H-13′)，1.58(3H，brs，H-12′)。
实施例7化合物I-a(3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E))的制备
本例涉及到一类具有细胞毒活性的如式(I)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯酸酯的一般合成方法。具体涉及到化合物(3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E))的制备。在烧瓶中加入化合物VI-a(1.08克，3.12mmol)和25毫升的苯，搅拌溶解，然后加入三苯基乙氧羰基次甲基膦烷(1.30克，3.74mmol)，回流2小时，冷至室温，浓缩得粗品，柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝20∶1，粗品/硅胶＝1∶10)得无色油状液体化合物350毫克，收率为23.5％。
化合物I-a无色油状液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.17；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.92(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.37(2H，d，J＝8.4Hz，H-2″，6″)，6.86(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.78(1H，s，H-6′)，6.39(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.02(2H，s，H-7″)，4.26(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，4.03(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，3.86(3H，s，OCH3-2′)，3.83(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.41(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，1.34(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
根据实施例7的方法制备以下表二所示实施例8-17化合物，表中化合物编号后未加括号的化合物为2，3-烯键反式(E)构型化合物
表二
下面列出表二中各化合物的理化数据化合物I-b白色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯6/1)0.30；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.91(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.63(1H，d，J＝2.0Hz，H-2″)，7.43(1H，d，J＝8.4Hz，H-5″)，7.29(1H，t，J＝8.4Hz，2.0Hz，H-6″)，6.79(1H，s，H-6′)，6.40(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.04(2H，s，H-7″)，4.27(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.89(3H，s，OCH3-2′)，3.84(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.34(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-c白色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.57；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.62(1H，s，H-2″)，7.44(1H，d，J＝8.4Hz，H-6″)，7.30(1H，d，J＝8.0Hz，H-5″)，6.94(1H，s，H-6′)，6.31(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.02(2H，s，H-7″)，4.28(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.88(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.35(3H， t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-d白色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.58；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.64(1H，s，H-2″)，7.43(1H，d，J＝8.0Hz，H-6″)，7.31(1H，d，J＝8.0Hz，H-5″)，7.07(1H，s，H-6′)，7.05(1H，d，J＝12.0Hz，H-3)，6.03(1H，d，J＝12.0Hz，H-2)，5.01(2H，s，H-7″)，4.12(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.88(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.34(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-e白色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.52；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.38(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.93(1H，s，H-6′)，6.87(2H，d，J＝8.8Hz，H-2″，6″)，6.30(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，4.98(2H，s，H-7″)，4.28(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，4.03(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，3.87(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.40(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，1.35(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-f白色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.53；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.50(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，7.17(1H，d，J＝12.0Hz，H-3)，7.05(1H，s，H-6′)，6.87(2H，d，J＝8.8Hz，H-2″，6″)，6.15(1H，d，J＝12.0Hz，H-2)，5.03(2H，s，H-7″)，4.24(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，4.03(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，3.87(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.43(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，1.34(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-g无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.63；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.93(1H，s，H-6′)，6.30(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.53(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.08(2H，m，H-6″，10″)，4.65(2H，d，J＝6.8Hz，H-1″)，4.28(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.89(6H，s，OCH3-3′，5′)，2.06(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.66(3H，brs，H-14″)，1.60(3H，brs，H-13″)，1.58(3H，brs，H-12″)，1.38(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-h无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.64；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.05(1H，d，J＝12.0Hz，H-3)，6.93(1H，s，H-6′)，6.03(1H，d，J＝12.0Hz，H-2)，5.53(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.08(2H，m，H-6″，10″)，4.65(2H，d，J＝7.2Hz，H-1″)，4.12(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.87(6H，s，OCH3-3′，5′)，2.04(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.69(3H，brs，H-15″)，1.66(3H，brs，H-14″)，1.61(3H，brs，H-13″)，1.58(3H，brs，H-12″)，1.38(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-i无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.63；1H-NMR(400MHz，CD3COCD3)δ8.05(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.93(1H，s，H-6′)，6.30(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.53(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.08(2H，m，H-6″，10″)，4.65(2H，d，J＝6.8Hz，H-1″)，4.28(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.89(3H，s，OCH3-2′)，3.84(6H，s，OCH3-3′，5′)，2.06(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.66(3H，brs，H-14″)，1.60(3H，brs，H-13″)，1.58(3H，brs，H-12″)，1.38(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-j无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.39；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.94(1H，s，H-6′)，6.31(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，4.28(2H，q，OCH2CH3-1)，3.90(9H，s，OCH3-3′，4′，5′)，1.35(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-k无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.40；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.05(1H，s，H-6′)，7.05(1H，d，J＝12.0Hz，H-3)，6.02(1H，d，J＝12.0Hz，H-2)，4.12(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.88(9H，s，OCH3-3′，4′，5′)，1.22(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
实施例18化合物II-a(3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E))的制备 本例涉及到一类具有细胞毒活性的如式(II)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯酸的一般合成方法。具体涉及到化合物II-a(3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E))的制备。将化合物I-a(203毫克，0.57mmol)加到50毫升的烧瓶中，用25毫升乙醇溶解，加入氢氧化钾水溶液(120毫克，2.00mmol，10毫升水)，回流3小时，冷至室温，浓缩至无醇味，然后加入10毫升水，用稀盐酸调至酸性，可见有大量白色的固体析出，用乙醚(15毫升×3)萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥过夜，过滤，浓缩得白色固体206毫克，收率93.1％。
化合物II-a白色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.17；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.57(1H，d，J＝13.6Hz，H-3)，7.23(2H，d，J＝8.4Hz，H-2″，6″)，6.76(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.64(1H，s，H-6′)，6.38(1H，d，J＝13.6Hz，H-2)，4.74(2H，s，H-7″)，3.94(2H，q，J＝6.8Hz，OCH3CH3-4″)，3.66(3H，s，OCH3-2′)，3.52(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.36(3H，t，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)；根据实施例18的方法制备以下表三所示实施例19-23化合物
下面列出表三中各化合物的理化数据化合物II-b白色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯/甲酸3/1/0.1)0.22；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.00(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.62(1H，d，J＝1.6Hz，H-2″)，7.43(1H，d，J＝8.4Hz，H-5″)，7.28(1H，m，J＝8.4Hz，1.6Hz，H-6″)，6.80(1H，s，H-6′)，6.42(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.04(2H，s，H-7″)，3.88(3H，s，OCH3-2′)，3.81(6H，s，OCH3-3′，5′)。
化合物II-c白色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯/甲酸3/1/0.1)0.20；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.09(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.48(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.93(1H，s，H-6′)，6.87(2H，d，J＝8.8Hz，H-2″，6″)，6.35(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.06(2H，s，H-7″)，4.03(2H，q，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)，3.89(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.35(3H，t，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)。
化合物II-d白色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯/甲酸3/1/0.1)0.21；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.65(1H，s，H-2″)，7.44(1H，d，J＝8.4Hz，H-6″)，7.39(1H，d，J＝8Hz，H-5″)，6.94(1H，s，H-6′)，6.68(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.12(2H，s，H-7″)，3.88(6H，s，OCH3-3′，5′)。
化合物II-e无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯/甲酸3/1/0.1)0.23；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.93(1H，s，H-6′)，6.40(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.56(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.08(2H，m，H-6″，10″)，4.65(2H，d，J＝7.2Hz，H-1″)，3.89(6H，s，OCH3-3′，5′)，2.06(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.66(3H，brs，H-14″)，1.61(3H，brs，H-13″)，1.59(3H，brs，H-12″)。
化合物II-f无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯/甲酸3/1/0.1)0.23；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.93(1H，s，H-6′)，6.40(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.56(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.08(2H，m，H-6″，10″)，4.65(2H，d，J＝7.2Hz，H-1)，3.92(6H，s，OCH3-3′，5′)，3.88(3H，s，OCH3-2′)，2.06(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.66(3H，brs，H-14″)，1.61(3H，brs，H-13″)，1.59(3H，brs，H-12″)。
实施例24化合物III-a(3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E))的制备 本例涉及到一类具有细胞毒活性的如式(III)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯醇的一般合成方法。具体涉及到化合物III-a(3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]2-丙烯-1-醇(2E))的制备。在一个三口烧瓶中依次加入氢化锂铝(28毫克，0.72mmol)和8毫升乙醚，冰盐浴冷至0℃，加入溶于2毫升乙醚的化合物I-a(122毫克，0.29mmol)，搅拌30分钟。加水分解过量的氢化锂铝，而后用稀盐酸调至酸性，乙醚(10毫升×3)来萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥过夜，过滤，滤液浓缩得粗品，柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝3∶1，粗品/硅胶＝1∶50)得3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)86毫克，收率为78.1％。
化合物III-a黄色油状液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.17；1H-NMR(400MHz，CDCl30δ7.38(2H，d，J＝8.4Hz，H-2″，6″)，6.87(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.83(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.73(1H，s，H-6′)，6.31(1H，dt，J＝16.0，6.0Hz，H-2)，4.98(2H，s，H-7″)，4.34(2H，t，J＝6.0Hz，H-1)，4.03(2H，q，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)，3.87(6H，s，OCH3-3′，5′)，3.79(3H，s，OCH3-2′)，1.41(3H，t，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)。
根据与实施例24相同的方法制备以下表四所示实施例25-30化合物
表四 下面列出表四中各化合物的理化数据化合物III-b)白色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.16；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.63(1H，d，J＝2.0Hz，H-2″)，7.42(1H，t，J＝8.4Hz，2.0Hz，H-6″)，7.31(1H， d，J＝8.4Hz，H-5″)，6.84(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.74(1H，s，H-6′)，6.32(1H，dt，J＝16.0，6.8Hz，H-2)，5.00(2H，s，H-7″)，4.34(2H，d，J＝6.8Hz，H-1)，3.88(3H，s，OCH3-2′)，3.86(6H，s，OCH3-3′，5′)。
化合物III-c无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.16；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.62(1H，s，H-2″)，7.40(1H，d，J＝8.4Hz，H-6″)，7.30(1H，d，J＝8.0Hz，H-5″)，6.64(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.74(1H，s，H-6′)，6.35(1H，dt，J＝16.0，6.8Hz，H-2)，5.00(2H，s，H-7″)，4.23(2H，brd，J＝6.8Hz，H-1)，3.86(6H，s，OCH3-3′，5′)。
化合物III-d无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.12；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38(2H，dd，J＝8.4，2.0Hz，H-3″，5″)，6.59(1H，s，H-6′)，6.55(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.84(2H，dd，J＝8.8，2.0Hz，H-2″，6″)，6.28(1H，dt，J＝16.0，4.8Hz，H-2)，4.94(2H，s，H-7″)，4.32(2H，brd，J＝4.8Hz，H-1)，4.01(2H，q，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)，3.89(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.41(3H，t，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)。
化合物III-e无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.24；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.54(1H，d，J＝15.6Hz，H-3)，6.60(1H，s，H-6′)，6.30(1H，dt，J＝16.0，7.2Hz，H-2)，5.57(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.10(2H，m，H-6″，10″)，4.63(2H，d，J＝6.8Hz，H-1″)，4.53(2H，d，J＝7.2Hz，H-1)，3.86(6H，s，OCH3-3′，5′)，2.04(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.65(3H，brs，H-14″)，1.60(3H，brs，H-13″)，1.59(3H，brs，H-12″)。
化合物III-f无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.17；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.90(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.98(1H，s，H-6′)，6.35(1H，dt，J＝16.0，6.8Hz，H-2)，4.23(2H，brd，J＝6.8Hz，H-1)，3.93(9H，s，OCH3-3′，4′，5′)。
化合物III-g无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.18；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.54(1H，d，J＝15.6Hz，H-3)，6.60(1H，s，H-6′)，6.30(1H，dt，J＝16.0，7.2Hz，H-2)，5.57(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.10(2H，m，H-6″，10″)，4.64(2H，d，J＝6.8Hz，H-1″)，4.53(2H，d，J＝7.2Hz，H-1)，3.86(6H，s，OCH3-3′，5′)，3.75(3H， s，OCH3-2′)，2.04(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.65(3H，brs，H-14″)，1.60(3H，brs，H-13″)，1.59(3H，brs，H-12″)。
实施例31化合物IV-a(3-[2-溴-3，5-二甲氢基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E))的制备 本例涉及到一类具有细胞毒活性的如式(IV)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯醛的一般合成方法。具体涉及到化合物IV-a(3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E))的制备。在反应瓶中用1.5毫升乙醇将化合物V-a(50毫克，0.12mmol)溶解，加入2.5毫升0.05％氢氧化钠水溶液，然后缓慢加入40％的乙醛溶液(39微升，0.36mmol)，并在室温下搅拌24小时。反应结束后加入氯化钠使溶液达饱和并用乙醚萃取(8毫升×3)，有机层用无水硫酸钠干燥过夜，过滤，滤液浓缩得粗品，柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝8∶1，粗品/硅胶＝1∶50)得34毫克，收率为65.0％。
化合物IV-a橙黄色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.38；1H-NMR(400MHZ，CDCl3)δ9.79(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.74(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.65(1H，s，H-2″)，7.44(1H，d，J＝8.4Hz，H-6″)，7.39(1H，d，J＝8.4Hz，H-5″)，6.94(1H，s，H-6′)，6.68(1H，dd，J＝16.0，7.6Hz，H-2)，5.12(2H，s，H-7″)，3.88(6H，s，OCH3-3′，5′)。
根据实施例31的方法制备以下表五所示实施例32-37化合物 表五 下面列出表五中各化合物的理化数据化合物IV-b橙红色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.37；1H-NMR(400MHZ，CDCl3)δ9.69(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.50(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.48(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.93(1H，s，H-6′)，6.87(2H，d，J＝8.8Hz，H-2″，6″)，6.35(1H，d，J＝16.0，7.2Hz，H-2)，5.06(2H，s，H-7″)，4.03(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，3.89(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.35(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)。
化合物IV-c橙红色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.34；1H-NMR(400MHZ，CDCl3)δ9.69(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.40(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.80(1H，s，H-6′)，6.64(1H，dd，J＝16.0，7.6Hz，H-2)，3.93(9H，s，OCH3-3′，4′，5′)。
化合物IV-d微黄色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯6/1)0.30；1H-NMR(400MHZ，CD3COCD3)δ9.72(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.86(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.76(1H，d，J＝2.0Hz，H-2″)，7.60(1H，d，J＝8.4Hz，H-5″)，7.50(1H，t，J＝8.4，2.0Hz，H-6″)，7.19(1H，s，H-6′)，6.79(1H，dd，J＝16.0，7.6Hz，H-2)，5.15(2H，s，H-7″)，3.88(6H，s，OCH3-3′，5′)，3.81(3H，s，OCH3-2′)。
化合物IV-e白色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.17；1H-NMR(400MHZ，CDCl3)δ9.71(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.77(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.37(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.87(2H，d，J＝8.4Hz，H-2″，6″)，6.80(1H，s，H-6’)，6.66(1H，dd，J＝16.0，7.6Hz，H-2)，5.03(2H，s，H-7″)，4.03(2H，q，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)，3.87(6H，s，OCH3-3′，5′)，3.85(3H，s，OCH3-2′)，1.41(3H，t，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)。
化合物IV-f橙红色固体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.40；1H-NMR(400MHZ，CDCl3)δ9.68(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.40(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.79(1H，s，H-6′)，6.64(1H，dd，J＝16.0，7.6Hz，H-2)，5.56(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.09(2H，m，H-6″，10″)，4.58(2H，d，J＝7.2Hz，H-1″)，3.90(6H，s，OCH3-3′，5′)， 2.02(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.69(3H，brs，H-15″)，1.67(3H，brs，H-14″)，1.60(3H，brs，H-13″)，1.59(3H，brs，H-12″)。
化合物IV-g无色液体，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.63；1H-NMR(400MHZ，CDCl3)δ9.70(1H，d，J＝8.0Hz，H-1)，7.80(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.80(1H，s，H-6′)，6.66(1H，dd，J＝16.0Hz，8.0Hz，H-2)，5.55(1H，s，H-2″)，5.09(2H，m，H-6″，10″)，4.65(2H，d，J＝6.8Hz，H-1″)，3.94(3H，s，OCH3-2′)，3.88(3H，s，OCH3-3′)，3.86(3H，s，OCH3-5′)，2.06(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.66(3H，brs，H-14″)，1.60(3H，brs，H-13″)，1.58(3H，brs，H-12″)。
式(1)化合物吸其中间体式(V)化合物具有重要的生物活性，对六株肿瘤细胞，包括人前列腺癌细胞(PC-3)、鼻咽癌细胞(CNE)、口腔上皮癌细胞株(KB)、人肺癌细胞(A549)、人肝癌细胞(BEL-7404)、人子宫颈癌细胞(Hela)的体外细胞毒活性试验表明此类具有苯丙烯结构的新化合物及其中间体系列式(V)化合物对肿瘤细胞生长具有抑制作用，有可能发展成为新的防治肿瘤药物。
本发明的式(1)化合物及式(V)化合物或其可药用盐及其溶剂化物可以与药学上常用的辐料或载体结合，制备得到具有肿瘤细胞生长抑制活性从而可以用于防治肿瘤的药物组合物。上述各类药物组合物可以采用注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂等剂型药物，还可以采用现代制药界所公知的控释或缓释剂型或纳米制剂。
本发明的式(1)化合物及式(V)化合物或其可药用盐及其溶剂化物可以与现已上市的抗肿瘤药物如铂类药物顺铂(DDP)、喜树碱类药物伊立替康(Irinatecan，CPT-11)、长春花碱类药物失碳长春花碱(Vinorebine，NVB诺维本)、脱氧胞昔类药物吉西他滨(Gemcitabine，Gemzar，健择)、足叶乙甙(Etoposide)、紫杉醇(Paclitaxel)等联合使用，制备得到具有肿瘤生长抑制活性的细胞毒性组合物，可用于治疗肿瘤疾病。该类药物组合物可以采用注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂等剂型药物，还可以采用现代制药界所公知的控释或缓释剂型或纳米制剂。
为了更好地哩解本发明的实质，下面分别用该类对六种肿瘤细胞株生长的抑制作用的药理实验结果，说明其在抗肿瘤药物研究领域中的新用途。药理实施例给出了代表性化合物的部分活性数据。必须说明，本发明的药理实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。
药理实施例1化合物IV-c对KB细胞的细胞毒活性KB(口腔上皮癌)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的浓度加入到96孔阪中，在37℃含5％CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法。细胞经过24小时的孵育后，分别将新配的化合物IV-c的二甲亚砜溶液以浓度梯度加入到各孔中，使孔中化合物最终浓度分别为100ug/mL，33.3ug/mL，11.1ug/mL和3.7ug/mL。72小时后，加入10μL MTT(5mg/mL)的磷酸盐缓冲液，再继续在37℃培养4小时后，离心5分钟除去未转化的MTT，每孔中加入200μL二甲亚砜，以溶解还原的MTT晶体甲臜(formazan)，所形成的formazan用酶标仪在570nm波长下比色，细胞存活率由样品相对于对照品的比值计算。其中化合物IV-c对KB细胞半抑制浓度IC50由剂量效应曲线得到。
化合物IV-c的IC50为2.99×10-5M；而阳性对照顺铂对KB细胞的IC50为2.78×10-5M。
实验结论KB细胞是测试化合物对肿瘤细胞的细胞毒性的有效工具和评价指标。本实验表明此类2，3，4，5-四取代的苯丙烯类衍生物及其中间体对KB细胞具有较强的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗肿瘤作用的药物。
药理实施例2化合物II-c对PC-3细胞的细胞毒活性PC-3(前列腺癌)细胞用F-12培养基培养，培养基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的浓度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法如药理实施例1。
化合物II-c的IC50为8.88×10-5M；而阳性对照顺铂对PC-3细胞的IC50为5.66×10-5M。
实验结论本实验表明此类2，3，4，5-四取代的苯丙烯类衍生物及其中间体对PC-3细胞具有较强的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗肿瘤作用的药物。
药理实施例3化合物I-j对CNE细胞的细胞毒活性CNE(鼻咽癌)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。以每孔5×103细胞的浓度加入到96孔板中，在37℃含5％ CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法如药理实施例1。
化合物I-j的IC50为8.12×10-5M；而阳性对照顺铂对CNE细胞的IC50为5.66×10-5M。
实验结论本实验表明此类2，3，4，5-四取代的苯丙烯类衍生物及其中间体对CNE细胞具有较强的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗肿瘤作用的药物。
药理实施例4化合物II-c对A549细胞的细胞毒活性A549(人肺癌)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的浓度加入到96孔板中，在37℃含5％ CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法如药理实施例1。
化合物II-c的IC50为5.89×10-5M；而阳性对照顺铂对CNE细胞的IC50为2.53×10-5M。
实验结论本实验表明此类2，3，4，5-四取代的苯丙烯类衍生物及其中间体对A549细胞具有较强的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗肿瘤作用的药物。
药理实施例5化合物IV-c对BEL-7404细胞的细胞毒活性
BEL-7404(人肝癌)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的深度加入到96孔板中，在37℃含5％ CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法如药理实施例1。
化合物IV-c的IC50为5.01×10-5M；而阳性对照顺铂对BEL-7404细胞的IC50为1.07×10-5M。
实验结论本实验表明此类2，3，4，5-四取代的苯丙烯类衍生物及其中间体对BEL-7404细胞具有较强的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗肿瘤作用的药物。
药理实施例6化合物I-j对Hela细胞的细胞毒活性Hela(人子宫颈癌)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的浓度加入到96孔板中，在37℃含5％ CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法如药理实施例1。
化合物I-j的IC50为8.53×10-5M；而阳性对照顺铂对CNE细胞的IC50为5.27×10-5M。
实验结论本实验表明此类2，3，4，5-四取代的苯丙烯类衍生物及其中间体对Hela细胞具有较强的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗肿瘤作用的药物。
权利要求
1.一种具有式(1)所示结构的2，3，4，5-四取代的苯丙烯类衍生物及其可药用的盐 式(1)其中R1可以是羟基，卤素，硝基，氨基，含1～8个碳的饱和或不饱和烃基或烷氧基；R2，R3或R4可以相同或不同，可以是氢，含1～15个碳的饱和或不饱和烃基，取代或未取代的芳烷基；其中用于芳烷基中芳基上取代的取代基可以是含1～8个碳的烷基或烷氧基，卤素，羟基，氨基，硝基，含1～8个碳的烷胺基；R可以是-COOH，-CH2OH，-CHO，-COOR5，-CONHNH2，-CONH2，-CONHR5，-CON(R5)2，其中R5是含1～8个碳的链烷基；当R2，R3，R4同时为甲基时，R1不能为溴或硝基或甲氧基取代；当R2，R3，R4同时为氢，R1为羟基时，R不能为羧基；当R2，R4同时为甲基，R为羧基，取代基R1为羟基时，R3不能为氢；当R2，R4同时为甲基，R为羧基而取代基R1为硝基时，R3不能为苄基；当R2，R4同时为甲基，R为醛基而R1为氯时，R3不能为氢。
2.根据权利要求1的式(I)所示化合物及其可药用盐，其特征是取代基R是CO2R5； 式(I)其中，基团R1，R2，R3，R4及R5的定义与权利要求1中的相同。
3.根据权利要求1的式(II)所示化合物及其可药用盐，其特征是取代基R是羧基； 式(II)其中，基团R1，R2，R3，R4的定义与权利要求1中的相同。
4.根据权利要求1的式(III)所示化合物及其可药用盐，其特征是取代基R是羟甲基； 式(III)其中，基团R1，R2，R3，R4的定义与权利要求1中的相同。
5.根据权利要求1的式(IV)所示化合物及其可药用盐，其特征是取代基R是醛基； 式(IV)其中，基团R1，R2，R3或R4的定义与权利要求1相同。
6.一种具有式(V)所示的2，3，4，5-四取代的苯甲醛化合物及其可药用盐 式(V)其中基团R1，R2，R3，R4的定义除与权利要求1的相同外，当R2，R3，R4同时为氢时，R1不能为羟基；当R2，R4同时为甲基时，R3不能为氢、甲基、未取代的苄基；当R2，R4中有一个为甲基，而另一个为氢或未取代的苄基时，R3不能为氢、甲基、未取代的苄基。
7.一种由式(V)化合物为起始物制备式(1)化合物的方法，其特征是由式(V)化合物通过与三苯基乙氧羰基次甲基膦烷经历魏悌锡(wittig)反应制备得到化合物(I)，得到的产物经过碱水解得到化合物(II)；化合物(I)通过氢化锂铝还原得到化合物(III)与少量2，3位双键还原的产物；化合物(IV)可以由化合物(V)与乙醛的缩合作用制备得到；具体路线见下图(以烯键反式化合物为例) 其中，基团R1，R2，R3及R4的定义与权利要求1～6之一的相同。
8.根据权利要求1～7的化合物，它们是I-a.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-b.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-c.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-d.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2Z)；I-e.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-f.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2Z)；I-g.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-h.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸乙酯2(Z)；I-i.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-j.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-k.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯酸乙酯(2Z)；II-a.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-b.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-c.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-d.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-e.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2(E)-丙烯酸；II-f.3-[2，3，5-三甲氧基4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2(E)-丙烯酸；III-a.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-b.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-c.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-d.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-e.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-f.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-g.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯-1-醇(2E)；IV-a.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-b.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-c.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯醛(2E)；IV-d.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-e.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-f.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-g.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯醛(2E)；V-a.2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)-苯甲醛；V-b.2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)-苯甲醛；V-c.2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)-苯甲醛；V-d.2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)-苯甲醛；V-e.2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧-苯甲醛；V-f.2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧-苯甲醛。
9.根据权利要求1～8之一的化合物或者它们的组合物及其可药用的盐用于制备防治口腔上皮癌、前列腺癌、鼻咽癌、肺癌、肝癌、子宫颈癌及其相关肿瘤疾病的药物用途及药物组合物；还可以与其他抗肿瘤药物以一定比例组成的混合物和可药用辅料制备肿瘤疾病防治药物；其含有作为活性成分的治疗有效量的权利要求1～8所述之化合物或其可药用盐或者它们的混合物和可药用辅料。
全文摘要
本发明涉及药物化学、药物先导化合物的发现领域。具体涉及一类具有细胞毒活性的2，3，4，5－四取代的苯丙烯类衍生物及其可药用的盐，本发明还涉及其制备方法及其药物组合物和医药用途。本发明的化合物具有体外抑制六种人体肿瘤细胞株，如人前列腺癌细胞(PC－3)、鼻咽癌细胞(CNE)、口腔上皮癌细胞(KB)、人肺癌细胞(A549)、人肝癌细胞(BEL－7404)、人子宫颈癌细胞(Hela)的生物活性，可预期作为抗肿瘤药物用途。
文档编号C07C47/52GK101050179SQ200710068540
公开日2007年10月10日 申请日期2007年5月15日 优先权日2007年5月15日
发明者赵昱, 张丽娟, 曾苏, 巫秀美, 白骅 申请人:浙江海正天华新药研发有限公司