一种从腊梅精油加工废弃物中提取蛋白的方法
【专利摘要】本发明公开了一种从腊梅精油加工废弃物中提取蛋白的方法，解决了传统腊梅精油加工中腊梅花提取精油后当做废弃物处理造成资源浪费的问题。其具体步骤为：（1）将提取完精油的腊梅花放入粉碎机中研磨至800-1200目；（2）添加一定量的缓冲溶液，并控制溶液温度和溶解时间，使腊梅蛋白溶解在缓冲溶液中；（3）离心分离溶液，取上清溶液；（4）在上清溶液中滴加酸，调节pH值至适宜值；（5）离心加酸后析出的蛋白质，过滤，干燥。本发明充分利用了腊梅花精油加工的废弃物，操作简单，运行费用低，提取的蛋白符合食品及药品标准，具有较高的经济价值。
【专利说明】—种从腊梅精油加工废弃物中提取蛋白的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种从腊梅精油加工废弃物中提取蛋白的方法，具体涉及一种利用碱溶酸析法，从腊梅精油加工废弃物中提取蛋白的方法。
【背景技术】
[0002]腊梅是腊梅科腊梅属落叶丛生灌木，为我国传统的庭院名花和园林绿化植物，具有色、香、形、姿、韵俱佳的观赏价值。腊梅花除散发清馨的香气外，还具有较高的药用保健价值。
[0003]但是目前腊梅花的开发局限于腊梅花直接制品。对于腊梅花深加工，如中国专利(申请号:201210447070.2)提取了腊梅精油、腊梅花蜡和多糖。遗憾的是，目前暂无腊梅花蛋白提取技术的专利报道。而公开的资料表明，腊梅花中蛋白质含量高达23%~24%，从蛋白质植物资源利用的角度来看，腊梅花蛋白质具有较高的食用和药用价值。因此，我们有必要开发腊梅花蛋白的提取技术。
【发明内容】
[0004]为了充分利用腊梅花精油加工的废弃物，本发明提供了一种从腊梅精油加工废弃物中提取蛋白的方法，具有操作简单的优点，并且提取过程无有毒化合物残留。
[0005]本发明的技术方 案是:
一种从腊梅精油加工废弃物中提取蛋白的方法，其步骤如下:
(1)将提取完精油的腊梅花放入粉碎机中研磨至800-1200目，得到腊梅浆液；
(2)在腊梅浆液中添加一定量的缓冲溶液，并控制溶液温度和溶解时间，使腊梅蛋白溶解在缓冲溶液中，得到腊梅蛋白溶液；
缓冲溶液的用量为腊梅浆液体积的1-5倍；
所述缓冲溶液为磷酸缓冲溶液的复配溶液，具体为=NaH2PO4或者Na2HPO4为0.02mol/L,乙二胺四乙酸二钠为 0-2mol/L, CaCl2 为 0-0.3mol/L, NaCl 为 Ο-lmol/L ；
(3)离心分离腊梅蛋白溶液，取上清溶液，得到腊梅蛋白悬浮液；
(4)在腊梅蛋白悬浮液中滴加酸，调节pH值为4-6；
(5)把加酸后析出的蛋白质静置一定时间，使蛋白质完全沉淀；然后，离心分离，过滤，干燥。
[0006]其中，所述步骤(2)中，溶解温度为25_60°C，溶解时间为1_3小时。
[0007]其中，所述步骤(3)中，离心分离的转速为3000-5000r/min，时间为5-10min。
[0008]其中，所述步骤(5)中，静置时间为15-30min ;离心分离的转速为4000_6000r/min,分离时间为20min。
[0009]本发明的有益效果是:(1)丰富了腊梅花深加工技术，深化了腊梅花开发的价值；
(2)产品原料来自腊梅花精油加工的废弃物，有利于环境保护与资源利用；
(3)具有操作简单，原料廉价，附加值高，并且提取过程无有毒化合物残留，符合食品及药品的要求。
【专利附图】
【附图说明】
[0010]图1为提取腊梅花蛋白的具体工艺流程图。
【具体实施方式】
[0011]如图1所示，本发明一种从腊梅精油加工废弃物中提取蛋白的方法，具体步骤为:
(1)将提取完精油的腊梅花放入粉碎机中研磨至800-1200目，得到腊梅花浆液；
(2)添加一定量的缓冲溶液，并控制溶液温度和溶解时间，使腊梅蛋白溶解在缓冲溶液中，得到腊梅蛋白溶液；缓冲溶液的用量为腊梅浆液体积的1-5倍；所述缓冲溶液为磷酸缓冲溶液的复配溶液，具体为=NaH2PO4或者Na2HPO4S 0.02mol/L,乙二胺四乙酸二钠(EDTA 二钠)为 0-2mol/L, CaCl2 为 0-0.3mol/L, NaCl 为 Ο-lmol/L ；
(3)离心分离溶液，取上清溶液，得到腊梅蛋白悬浮液；
(4)在腊梅蛋白悬浮液中滴加酸调节pH值至4-6；
(5)把加酸后析出的蛋白质静置一定时间，使蛋白质完全沉淀；然后，离心分离，过滤，干燥。
[0012]其中，所述步骤(2)中，溶解温度为25_60°C，溶解时间为1_3小时。
[0013]其中，所述步骤(3)中，离心分离的转速为3000-5000r/min，时间为5_10min。
[0014]其中，所述步骤(5)中，静置时间为15-30min ;离心分离的转速为4000_6000r/min,分离时间为20min。
[0015]下面,列举一些实施例,进一步表达本发明。
[0016]实施例1
将提取完精油的腊梅花10g放入粉碎机中研磨至800目；添加500ml的缓冲溶液(体积比约为1:5)，具体配置为NaH2PO4或Na2HPO4含量为0.02mol/L,乙二胺四乙酸二钠(EDTA二钠)为lmol/L，并控制溶液温度25°C为和溶解时间3小时，使腊梅蛋白溶解在缓冲溶液中，得；(3)离心分离溶液，离心分离转速为4000r/min，时间为6min，然后取上清溶液；(4)在上清溶液中滴加酸调节PH值至4 ;(5)加酸后析出的蛋白质，静置18min，离心分离的转速为5000r/min,时间为20min,过滤,干燥,最终得腊梅蛋白质18.182g。
[0017]实施例2
将提取完精油的腊梅花10g放入粉碎机中研磨至1000目；添加10ml的缓冲溶液(体积比约为1:1)，具体配置为NaH2PO4或Na2HPO4含量为0.02mol/L,乙二胺四乙酸二钠(EDTA二钠)为lmol/L，CaCl2S 0.2mol/L，并控制溶液温度60°C为和溶解时间I小时，使腊梅蛋白溶解在缓冲溶液中；(3)离心分离溶液，离心分离转速为5000r/min，时间为lOmin，然后取上清溶液；(4)在上清溶液中滴加酸调节pH值至5 ; (5)加酸后析出的蛋白质，静置20min，离心分离的转速为4000r/min,时间为20min,过滤,干燥,最终得腊梅蛋白质19.215g。
[0018]实施例3
将提取完精油的腊梅花10g放入粉碎机中研磨至900目；添加200ml的缓冲溶液(体积比约为1:2)，具体配置为NaH2P04/Na2HP04含量为0.02mol/L,乙二胺四乙酸二钠(EDTA 二钠)为lmol/L，CaCl2为0.lmol/L, NaCl为lmol/L，并控制溶液温度60°C为和溶解时间I小时，使腊梅蛋白溶解在缓冲溶液中；(3)离心分离溶液，离心分离转速为5000r/min，时间为lOmin，然后取上清溶液；(4)在上清溶液中滴加酸调节pH值至5 ;(4)加酸后析出的蛋白质，静置20min,离心分离的转速为4000r/min,时间为20min,过滤,干燥,最终得腊梅蛋白质 19.471g。
[0019]实施例4
将提取完精油的腊梅花10g放入粉碎机中研磨至900目；添加500ml的缓冲溶液(体积比约为1:5)，具体配置为NaH2P04/Na2HP04含量为0.02mol/L,乙二胺四乙酸二钠(EDTA 二钠)为lmol/L，CaCl2为0.lmol/L, NaCl为lmol/L，并控制溶液温度50°C为和溶解时间2小时，使腊梅蛋白溶解在缓冲溶液中；(3)离心分离溶液，离心分离转速为4000r/min，时间为1min,然后取上清溶液；(4)在上清溶液中滴加酸调节pH值至4 ; (4)加酸后析出的蛋白质，静置20min,离心分离的转速为6000r/min,时间为30min,过滤,干燥,最终得腊梅蛋白质 20.471g。
[0020]实施例5
将提取完精油的腊梅花500g放入粉碎机中研磨至900目；添加100ml的缓冲溶液(体积比约为1:2)，具体配置为NaH2P04/Na2HP04含量为0.02mol/L,乙二胺四乙酸二钠(EDTA 二钠)为2mol/L，CaCl2为0.3mol/L,NaCl为0.7mol/L，并控制溶液温度60°C为和溶解时间3小时，使腊梅蛋白溶解在缓冲溶液中；(3)离心分离溶液，离心分离转速为5000r/min，时间为lOmin，然后取上清溶液；(4)在上清溶液中滴加酸调节pH值至6 ; (5)加酸后析出的蛋白质，静置20min,离心分离的转速为6000r/min,时间为30min,过滤,干燥,最终得腊梅蛋白质 100.128g。 [0021]实施例6
将提取完精油的腊梅花500g放入粉碎机中研磨至1200目；添加1500ml的缓冲溶液(体积比约为1:3)，具体配置为NaH2P04/Na2HP04含量为0.02mol/L,乙二胺四乙酸二钠(EDTA 二钠)为2mol/L，并控制溶液温度25°C为和溶解时间3小时，使腊梅蛋白溶解在缓冲溶液中；(3)离心分离溶液，离心分离转速为5000r/min，时间为lOmin，然后取上清溶液；
(4)在上清溶液中滴加酸调节pH值至6 ; (5)加酸后析出的蛋白质，静置25min，离心分离的转速为4000r/min,时间为30min,过滤,干燥,最终得腊梅蛋白质102.315g。
[0022]实施例7
将提取完精油的腊梅花1500g放入粉碎机中研磨至1000目；添加2500ml的缓冲溶液(体积比约为1:1.7)，具体配置为NaH2P04/Na2HP04含量为0.02mol/L,并控制溶液温度50°C为和溶解时间3小时，使腊梅蛋白溶解在缓冲溶液中；(3)离心分离溶液，离心分离转速为5000r/min，时间为lOmin，然后取上清溶液；(4)在上清溶液中滴加酸调节pH值至6 ; (5)加酸后析出的蛋白质，静置25min,离心分离的转速为4000r/min,时间为30min,过滤,干燥，最终得腊梅蛋白质301.825g。
[0023]本发明中，滴加酸调节pH值是常规手段，酸通常选用盐酸或乙酸，也可以是其它类型的酸，只要能调整pH值(降低pH值)就可以。
【权利要求】
1.一种从腊梅精油加工废弃物中提取蛋白的方法，具体步骤如下: (1)将提取完精油的腊梅花放入粉碎机中研磨至800-1200目，得到腊梅浆液； (2)在腊梅浆液中添加一定量的缓冲溶液，并控制溶液温度和溶解时间，使腊梅蛋白溶解在缓冲溶液中，得到腊梅蛋白溶液； 缓冲溶液的用量为腊梅浆液体积的1-5倍； 所述缓冲溶液为磷酸缓冲溶液的复配溶液，具体为=NaH2PO4或者Na2HPO4为0.02mol/L,乙二胺四乙酸二钠为 0-2mol/L, CaCl2 为 0-0.3mol/L, NaCl 为 Ο-lmol/L ； (3)离心分离腊梅蛋白溶液，取上清溶液，得到腊梅蛋白悬浮液； (4)在腊梅蛋白悬浮液中滴加酸，调节pH值为4-6； (5)把加酸后析出的蛋白质静置一定时间，使蛋白质完全沉淀；然后，离心分离，过滤，干燥。
2.根据权利I所述的一种从腊梅精油加工废弃物中提取蛋白的方法，其特征在于:所述步骤(2)中，溶解温度为25-60°C，溶解时间为1-3小时。
3.根据权利I所述的一种从腊梅精油加工废弃物中提取蛋白的方法，其特征在于:其特征在于所述步骤(3)中，离心分离的转速为3000-5000r/min，时间为5_10min。
4.根据权利I所述的一种从腊梅精油加工废弃物中提取蛋白的方法，其特征在于所述步骤( 5)中，静置时间为15-30min ;离心分离的转速为4000_6000r/min，时间为20min。
【文档编号】C07K1/30GK104031116SQ201410293824
【公开日】2014年9月10日 申请日期:2014年6月27日 优先权日:2014年6月27日
【发明者】楼汉华, 田耀庆 申请人:湖北五柳源生物科技有限责任公司