无水结晶游离碱形式的6‑{2‑[1‑(6‑甲基‑3‑哒嗪基)‑4‑哌啶基]乙氧基}‑3‑乙氧基‑1，2‑苯并异噁唑的制作方法

本申请要求于2014年6月20日提交的序列号为62/015,126的美国临时申请的权益，所述申请通过引用并入本文。
技术领域：
本发明一般涉及结晶游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑，并且特别涉及其新的无水游离碱结晶形式及其在生产药物组合物中的用途、生产无水结晶形式的方法、包含该结晶形式的药物组合物，以及使用该形式及其药物组合物的治疗方法。
背景技术：
：在申请人早期提交的WO2002/050045(‘045公布)中公开了作为化合物35的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑，其具有以下一般结构。6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑还以其国际非专有名称(INN)“vapendavir”被熟知。vapendavir是一种抗病毒剂，如之前所描述，已发现其在治疗和/或预防小核糖核酸病毒感染如人鼻病毒(HRV)和肠道病毒感染，以及治疗和/或缓解哮喘和/或慢性阻塞性肺病(COPD)的症状及减少哮喘和/或COPD加重的发生率和/或预防加重为哮喘和/或COPD中是特别有用的(参见WO2002/050045、WO2011/127538和WO2011/160191)。人鼻病毒是小核糖核酸病毒科的鼻病毒属成员，并被认为是40-50％的常见感冒感染的原因。人鼻病毒包括一组超过100种血清型不同的病毒。因此，已经表明，vapendavir对于还以肠道病毒为代表的小核糖核酸病毒科的病毒是有效的。这个属包括脊髓灰质炎病毒1-3、柯萨奇病毒A(23种血清型)和B(6种血清型)、echo病毒(31种血清型)和编号的肠道病毒68-71。由肠道病毒引起的临床综合征包括脊髓灰质炎、脑膜炎、脑炎、胸膜痛、疱疹性咽峡炎、手足口病、结膜炎、心肌炎和新生儿疾病如呼吸道疾病和发热疾病。小核糖核酸病毒科病毒的特征在于由蛋白质外壳(或衣壳)包裹的单链(+)RNA基因组，该蛋白质外壳(或衣壳)具有假二十面体对称性。衣壳的表面包含“峡谷”，所述峡谷围绕二十面体的每个五折轴，并且认为细胞受体结合到峡谷底上的残基。WO2002/050045中的一个示例(示例6)，描述了使用聚合物负载的三苯基膦试剂通过Mitsunobu偶联，小规模合成6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑，并以梯度洗脱柱色谱分离毫克量的白色粉末(参见示例6，第36页)。WO2009/143571(′571PCT公布)特别公开了vapendavir优选的盐形式，包括双-磷酸二氢盐结晶盐形式的vapendavir，该形式被描述为具有理想的溶解性和/或稳定性。然而，在大规模药物产品生产后，发明人发现这种理想的结晶盐形式的vapendavir双磷酸盐遭受了已知为“过程诱导转变”或“水诱导相变”的现象，由此观察到产生了显著量的至少一种其它结晶相，例如倍半磷酸盐半水合物。发明人还发现，双-磷酸二氢盐的vapendavir的方形平面晶体习性具有差的流动性及在生产期间形成聚集物的倾向，这两者的结合阻碍了活性药物的可重现制剂。在化合物制剂领域，生产特定结晶形式的化合物是困难的追求，并且关于可预测和可重复的结晶形式的生产存在许多不确定性。例如，Variankaval等人的文章“从形式到功能：活性药物成分的结晶”，AIChE杂志，54卷第7期，1682-1688(2008)(“FromFormtoFunction：CrystallizationofActivePharmaceuticalIngredients”，AIChEJournal，Vol.54，No.7，1682-1688(2008))描述了在制备具有所需制剂性质的所需(药物或其它制剂)结晶的挑战，其通过引用并入本文。在该领域中难以克服的问题包括关于晶体形状和尺寸、粒径分布、溶解性和高效和有用的晶体形式生产所必需的许多其它物理属性方面的不期望的品质或过度的可变性，尤其是其涉及大规模生产。如该文章所示的，本领域的大多数技术“远不能处理在大规模设备中从实际工艺流中结晶的药物分子的复杂性。”参见Variankaval等，第1687页。此外，在这个领域中的稳定性问题使得难以得到有效的制剂，该有效的制剂能够制成悬浮液剂。主要关于儿科患者的护理，悬浮液剂通常是必要的治疗途径，但是开发有合适的稳定性和溶解性的活性成分的问题极大地限制了有效的悬浮液剂的数量，该悬浮液剂可由活性成分制备。此外，仍然存在抗小核糖核酸病毒的化合物的未满足的需求，所述小核糖核酸病毒化合物特别用于治疗和/或预防感染，包括小核糖核酸病毒感染，例如那些由人鼻病毒或肠道病毒引起的感染，并且其还是安全有效的。此外，需要开发新的药物组合物，其能够容易地制成固体片剂形式和其它有用的形式如悬浮液剂，所述形式可以克服前述关于生产和重复性的问题，例如确保安全和稳定的口服药物所需的均匀粒径。进一步地，需要新的有用的药物形式，其能够在高效的生产工艺中获得，该生产工艺可用于大规模生产并最小化总成本。本发明人发现无水(即非水合物)结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的游离碱形式(即非盐形式)，其被认为具有一个或多个优点，包括例如允许更稳定高效和不那么贵的大规模生产药物组合物，该药物组合物包含6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑。此外，本发明人已经开发了用于递送活性成分的有用制剂，包括片剂、胶囊、悬浮液和其它形式。技术实现要素：本发明提供了无水(即非水合物)游离碱结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑(或vapendavir)，其在治疗感染方面是有用的，所述感染包括小核糖核酸病毒感染(例如那些由人鼻病毒或肠道病毒引起的感染)，其在治疗、缓解、预防或减轻哮喘或慢性阻塞性肺病(COPD)的症状或加重方面是有用的，或在治疗、缓解、预防或减轻手足口病的症状方面是有用的。本发明还提供了大规模生产6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的方法，其中所述方法包括形成无水结晶游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的步骤，例如具有如附图所示的XRPD图谱的那些。本发明还提供了制备无水结晶游离碱6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的方法，其中所述方法包括微粉化步骤，该微粉化使得平均粒径更均匀并且提供了更适合于药物组合物的vapendavir形式，包括片剂和悬浮液剂。本发明还提供了无水结晶游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的用途，例如具有如附图所示的XRPD图谱的那些的用途，用于生产包含6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的药物组合物。在一个实例中，该药物组合物是干粉组合物。在另一个实例中，该药物组合物适于口服给药，特别是口服肠内给药。在这点上，该药物组合物可以形成悬浮液剂、片剂、囊片或胶囊，或其它适于口服给药的形式。还有其它合适的形式是那些对患者进行其它方式的给药形式，例如在某些儿科病例中优选的栓剂、用于静脉内给药的溶液等。该组合物还可以是可重悬的小药囊或粉末形式。在一个实例中，无水结晶形式具有针状晶体习性。这与其他先前版本的vapendavir(例如具有板状晶体习性的磷酸盐)有很大不同。在一个示例性实施例中，无水结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的XRPD图谱显示主峰(2θ)，该主峰选自由以下近似值组成的组：4.5、11.0、13.6、20.3、20.6、22.1、23.1、24.5和25.7。此外，无水结晶游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑可能有具有峰(d-间距，)的XRPD图谱，该峰(d-间距，)选自由大约以下值组成的组：19.5、8.0、6.5、4.4、4.3、4.0、3.8、3.6和3.5。无水结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的XRPD图谱也可能具有峰(2θ)，该峰(2θ)选自由以下近似值组成的组：4.6、10.4、11.1、13.7、16.1、16.7、17.8、20.4、20.8、21.6、22.1、22.3、22.4、23.4和24.8。无水结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑也可有具有峰(d-间距，)的XRPD图谱，该峰(d-间距，)选自由大约以下值组成的组：19.2、8.5、8.0、6.5、5.5、5.3、5.0、4.35、4.27、4.12、4.03、3.99、3.96、3.80和3.60。在本发明的一个示例性实施例中，本发明游离碱结晶形式的vapendavir的XRPD图谱显示在附图1中。如图1所示，观察到以下峰：在另一个实例中，无水结晶(游离碱)形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑可以配制成药物组合物，该药物组合物包含合适的药物载体。在某些实例中，该药物组合物是片剂或悬浮液剂，其可包含组合物重量约40-60％之间的无水结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑。该药物组合物可以用于治疗病毒感染，例如小核糖核酸病毒或肠道病毒感染。此外，游离碱结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑可以用于治疗和/或缓解哮喘和/或慢性阻塞性肺病(COPD)的症状并减少加重的发生和/或预防哮喘和/或COPD加重。在一个实例中，结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑可以用于治疗性处理，向需要处理的个体施用以治疗和/或预防各种病毒感染，例如但不限于小核糖核酸病毒如人鼻病毒(HRV)或肠道病毒，例如一种或多种以下种类的血清型：人肠病毒A、人肠道病毒B、人肠道病毒C和人肠道病毒D，包括脊髓灰质炎病毒和非脊髓灰质炎病毒，其包括柯萨奇病毒A(例如血清型1-22和24)、柯萨奇病毒B(例如血清型1-6)、echo病毒(例如血清型1-7，9，11-27，29-34)和肠道病毒(例如血清型EV68-71)。在其它实施例中，无水结晶形式的vapendavir可用于治疗、缓解和/或预防手足口病。该药物组合物还可用于治疗、缓解、预防或减轻哮喘或慢性阻塞性肺病(COPD)的症状或加重，其中肺功能减退通常是有症状的。使用如下更详细阐述的适当的重结晶溶剂和条件，还可以提供无水结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的重结晶形式。例如，6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑可以从醇中重结晶，例如乙醇，或者如下文进一步描述的合适的浆料或重结晶溶剂的范围中的任一种。无水结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑还可以以微粉化形式提供，该微粉化形式具有非常小的粒径，这有助于其在某些药物组合物中的使用，如悬浮液剂，如下文更详细地阐述。例如，微粉化形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑可以具有小于5μm的平均粒径。微粉化工艺还可以使用合适的润湿剂或表面活性剂，其进一步增强了vapendavir的溶解速率。附图说明图1A和1B显示了本发明公开的无水结晶游离碱6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的XRPD峰的示例性实施例；图2A和2B说明了本发明公开的无水结晶游离碱6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的XRPD峰的另一个示例性实施例；图3是本发明公开的无水结晶游离碱6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的另一个XRPD峰(2θ)图谱；图4的图显示了初始制剂的溶解比较；图5的动态蒸气吸附曲线图显示了本发明公开的无水结晶游离碱6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的重量百分比变化及相对湿度特征；图6的图表显示了本发明公开的无水结晶游离碱6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑与先前双-磷酸二氢盐形式的vapendavir之间的XRPD比较。图7A至7C显示了各种尺度的一系列扫描电子显微镜(SEM)图像，显示了根据本发明的一个实施例(右侧)，在湿磨之后的无水游离碱结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑(此处，XRPD特征在其它地方定义，其具有针状晶体习性)，以及6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑双磷酸二氢盐的板状晶体习性，其具有根据WO2009/143571的XRPD特征；图8显示了一个示例性片剂的制造方法，该片剂可用于生产药物组合物，组合物包括结晶6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑游离碱活性成分与合适的药物载体；图9显示了现有磷酸盐形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的XRPD峰(2θ)图谱；图10是微粉化的结晶游离碱vapendavir与Vapendavir300mg片剂的XRPD图谱的对比图，如下文更详细地阐述；图11是微粉化的结晶游离碱vapendavir与未微粉化的结晶游离碱vapendavir的XRPD图谱的对比图，如下文更详细地阐述；图12是如本发明进一步描述的粒径分析图；图13是如本发明进一步描述的粒径分析图；图14是如本发明进一步描述的粒径分析图；图15的显微照片显示了微粉化前本发明化合物的颗粒具有针状晶体习性；图16的显微照片显示了微粉化后本发明化合物的颗粒；图17的显微照片显示了现有vapendavir的磷酸盐的颗粒具有板状晶体习性；图18A显示了如本文进一步描述的溶解速率(dissolutionrate)；图18B显示了如本文进一步描述的溶解速率；图18C显示了如本文进一步描述的溶解速率；图18D显示了如本文进一步描述的溶解速率；图19的显微照片显示了微粉化前本发明化合物的颗粒具有针状晶体习性；图20的显微照片显示了微粉化后本发明化合物的颗粒；图21是如本发明进一步描述的悬浮液安慰剂的粒径分析图；图22是如本发明进一步描述的根据本发明的悬浮液的粒径分析图；图23A是如本发明进一步描述的溶解比较图；图23B是如本发明进一步描述的溶解比较图；图24A是如本发明进一步描述的溶解比较图；图24B是如本发明进一步描述的溶解比较图；图25显示了本发明的化合物未微粉化和微粉化的XRDP图谱的重叠。详细说明本发明涉及无水、游离碱结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑(称为“vapendavir”)。本发明的游离碱结晶形式可以用在药物组合物中以治疗如下文更详细阐述的病毒感染和其它病症。在一个示例性实施例中，游离碱结晶形式的vapendavir的XRPD图谱可以具有如下所示的XRPD峰：该实施例的XRDP图谱如图1A和1B所示。如其中所示，该实施例包括至少在以下近似(2θ)值的主峰：4.5、11.0、13.6、20.3、20.6、22.1、23.1、24.5和25.7。在该图谱中，无水结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑还显示出主峰具有大约以下值(d-间距，)的图谱：19.5、8.0、6.5、4.4、4.3、4.0、3.8、3.6和3.5。在另一个示例性实施例中，游离碱结晶形式的vapendavir还可以有具有峰(d-间距，)的XRPD图谱，所述峰(d-间距，)选自由大约以下值组成的组：19.2、8.5、8.0、6.5、5.5、5.3、5.0、4.35、4.27、4.12、4.03、3.99、3.96、3.80和3.60。在一个实例中，本发明结晶的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑具有如图2A、2B和3所示的XRPD峰(d-间距，)图谱。该实施例的主峰显示在下表中并且包括近似值19.2、8.5、8.0、6.5、5.5、5.3、5.0、4.35、4.27、4.12、4.03、3.99、3.96、3.80和3.60。游离碱结晶形式的vapendavir的XRPD图谱也能够以其2θ峰显示，该2θ峰选由自大约以下值组成的组：4.6、10.4、11.1、13.7、16.1、16.7、17.8、20.4、20.8、21.6、22.1、22.3、22.4、23.4和24.8。本发明的结晶游离碱6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑可以具有如图2A、2B和3显示的XRPD峰(2θ)图谱。主峰显示在下表中并包括近似值4.6、11.1、13.7、16.1、20.4、20.8、22.3和24.8。根据本发明的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑具有下式(I)：该化合物可以通过多种常规方式制成，包括在WO02/50045中公开的那些，通过引用并入本文。在一种合适的方法中，通过将具有下式的化合物：与具有下式的化合物：在合适的反应介质中结合以形成vapendavir化合物。在一些实施例中，这些反应物可以使用N-甲基吡咯烷作为溶剂来结合。可以加入其它材料，例如碳酸铯和碘化钾，以及四氢呋喃，和还可能需要使用的水。乙醇可用于洗涤反应后得到的滤饼。该反应可直接生产所需的游离碱结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑。本发明的另一方面，游离碱形式的vapendavir，如上获得的，也可以以多种合适的方式重结晶。本发明的其它方面，本发明的游离碱晶体形式可以微粉化至非常小的粒径，如下文更详细地阐述。在一个示例性实施例中，使用重结晶方法还可以提供重结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑，该重结晶方法包括合适的溶剂，如醇，例如乙醇，或其它合适的重结晶溶剂。除了醇例如乙醇之外，重结晶溶剂可以是适于浆料或重结晶的任何适当的溶剂，例如选自适合的溶剂的组的那些，所述适合的溶剂包括但不限于丙酮、乙腈、二氯甲烷、1，4-二噁烷、甲基乙基酮、1-丙醇、2-丙醇、四氢呋喃和甲苯。此外，可以从一种或多种溶剂的水性混合物(包括丙酮、乙腈、乙醇、1-丙醇和四氢呋喃)中分离出结晶游离碱形式的vapendavir。在重结晶根据本发明的无水结晶游离碱形式的化合物6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的一个示例性方法中，通过使用活性炭处理和一系列溶剂，包括二氯甲烷和乙醇，来获得重结晶的vapendavir。重结晶的过程可以包括将vapendavir、二氯甲烷和乙醇装入反应器中并在合适的温度(例如Ta＝20℃)和时间下搅拌混合物的步骤。可选地，活性炭(其随后通过过滤除去)也可以用于帮助杂质控制。在初始步骤结束时，可以使用例如nutsche过滤器和在线(inline)过滤器(例如，0.45μm在线过滤器)过滤存在的悬浮物。然后可以将过滤的悬浮液转移到干净的反应器用于另外的步骤。这些可以包括用二氯甲烷/乙醇溶液(例如，1/1v/v)的冲洗步骤，并将冲洗溶液经由过滤器转移至经过滤的反应溶液。然后，可以有多个蒸馏步骤，包括逐步添加乙醇和真空蒸馏。最后，可以加热新形成的悬浮液，并且确认蒸馏完成，此时冷却悬浮液并过滤得到固体滤饼。滤饼可以例如用在线过滤的预冷却乙醇洗涤，然后在恒定的氮气或空气流下干燥。将任何湿饼在真空例如最大浴温度(例如45℃)下干燥至恒重(例如，在30分钟内失去的重量小于净重的0.5％)。在另一个示例性方法中，可以首先通过将3-[4-(2-氯乙基)-1-哌啶基]-6-甲基-哒嗪作为固体逐部分地加入到在N-甲基吡咯烷酮中搅拌的3-乙氧基-6-羟基-1，2-苯并噁唑、碳酸铯和碘化钾混合物中，在合适的温度如90℃下制备vapendavir。在该温度下将混合物搅拌延长的时间，例如至少10小时。一旦确认反应完成(通过HPLC，＞95％转化)后，将混合物冷却至合适的温度(例如65℃)。在该温度下(例如，约65℃，或在任何情况下低于70℃)将水和THF的混合物加入到悬浮液中。将混合物搅拌合适的时间段(例如，至少1小时)，然后将混合物冷却(例如至5℃)。然后过滤冷却的悬浮液，得到滤饼，滤饼用水和THF的混合物洗涤，然后再用乙醇洗涤，然后干燥得到vapendavir。当需要时，重结晶无水游离碱晶体vapendavir的方法可以通过向vapendavir和炭中加入二氯甲烷和乙醇的混合物完成。搅拌(例如在20℃)所得的混合物，然后通过过滤除去固体，例如在助滤剂床上和通过在线过滤器。然后用二氯甲烷和乙醇的混合物洗涤滤饼，通过在减压下浓缩至二氯甲烷的水平降低(例如降低至低于1％w/w)，所得滤液可以溶剂交换为乙醇。这得到vapendavir的乙醇悬浮液，可将其加热至回流，然后冷却例如至20℃。在一个合适的实施例中，湿磨通过装备有湿式研磨泵头的在线泵进行再循环而进行，然后加热(例如至40℃至少10分钟)，接着冷却(例如至20℃)，然后过滤。然后用乙醇或另一种合适的溶剂洗涤所得的结晶固体vapendavir，并干燥至残余的溶剂含量(例如乙醇)为所需水平，例如低于约1000ppm。除了醇如乙醇外，能够使用许多合适的重结晶溶剂，包括丙酮、乙腈、二氯甲烷、1，4-二噁烷、甲基乙基酮、1-丙醇、2-丙醇、四氢呋喃、甲苯和水。根据本发明的晶体游离碱形式的vapendavir也能够从丙酮、乙腈、乙醇、1-丙醇和四氢呋喃的水性混合物中分离。如下将更详细地描述，然后通过加工例如湿磨或喷射研磨来微粉化所得到的vapendavir，在该加工中以确保更均匀的粒径的方式减小粒径，以便最大化药物产品生产中药物物质属性的合适性和一致性。微粉化将针状破碎至更小的纵横比，该纵横比更适合于药物产品生产，但不影响游离碱晶体形式的活性成分和治疗性质。在某些实施例中，本发明游离碱结晶vapendavir可以微粉化以减小平均粒径。通常第一次生产时，在微粉化前，游离碱vapendavir的针状晶体具有通常约15-100μm的粒径，更多的颗粒落在约70-100μm内。通过微粉化方法，颗粒减少成较小的尺寸，平均粒径在约2-5μm范围内，并且通常小于5μm。微粉化可以使用任何合适的方法进行，例如本领域已知的喷射研磨或湿磨方法。例如，使用常规的喷射研磨设备，例如由Sturdevant，Inc制造的NGMP-2喷射研磨机，可以获得微粉化形式的结晶游离碱vapendavir。上述方法的结果，生产了包含无水结晶游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑或3-乙氧基-6-{2-[1-(6-甲基-哒嗪-3-基)-哌啶-4-基]-乙氧基}-苯并[d]异噁唑的化合物，如上式(I)所示。该结晶游离碱形式的特征在于针状晶体习性，如附图所示，该晶体形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑可以具有XRPD峰(d-间距，)，所述XRPD峰选自由大约以下值组成的组：19.5、8.0、6.5、4.4、4.3、4.0、3.8、3.6和3.5。2θXRPD峰可以选自由大约以下值组成的组：4.5、11.0、13.6、20.3、20.6、22.1、23.1、24.5和25.7。因此，该结晶形式可以具有如图1A、1B、2A、2B和3所示的XRPD图谱。在另一个示例性实施例中，根据本发明的结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑可以配制成药物组合物，该药物组合物包含合适的药物载体。合适的药物载体是指一系列物理形式中的任一，其中活性成分，在此情况下是结晶游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑，可以以包括本领域熟知的多种药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂中的任何一种施用。因此，合适的药物载体可以包括溶剂、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗和吸收增强剂或延迟剂等。“药学上可接受的”通常理解为是指所述载体与组合物或制剂中的活性成分及其它成分基本上相容，并且对接受其治疗的患者基本上无害。合适的载体的一般实例包括麦芽糖糊精、碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、黄蓍胶、纤维素、甲基纤维素、硅化微晶纤维素、甘露醇(如甘露醇400)、乙醇酸盐(如淀粉羟乙酸钠)、羧甲基纤维素(例如羧甲基纤维素钠)、低熔点蜡，可可脂等。其它合适的载体包括那些vapendavir通过其可以形成溶液、凝胶、乳膏、洗剂、软膏、滴剂等的材料。通常，本发明考虑药物载体用于以任何合适的方式递送本发明的活性vapendavir化合物，包括口服、肠内、胃肠外、局部、舌下、静脉内、皮下、肌内、经皮和吸入。本发明的药物组合物的一种合适的形式是悬浮液剂。提供悬浮液剂形式的药物组合物的能力非常重要，特别是对于儿科医学，因为这种形式向年幼患者施用活性成分可能是必需的。在这方面，本发明人确定，可以生产合适形式的结晶游离碱vapendavir，其中晶体的针状颗粒微粉化成更小但更均匀的粒径。结晶游离碱被微粉化并仍然保持其活性形式的能力是对先前形式的vapendavir的改进，所述先前形式例如磷酸盐形式，其形成板状晶体形式且不能微粉化并保持其活性性质。因此，在本发明的另一个示例性实施例中，将本发明结晶游离碱vapendavir微粉化以配制成悬浮液剂。在评估最有利的pH条件的测试中，本发明结晶游离碱vapendavir在pH5.0-8.0之间看来具有最低的溶解性，表明该pH范围对于悬浮液制剂是最理想的。在某些实例中，使用在形成药物悬浮液时任何有用的常规成分可以获得悬浮液制剂。例如，除了活性成分，悬浮液可以包括其他材料，例如缓冲液、防腐剂和/或粘度增强剂。在一个示例性实施例中，柠檬酸缓冲液与防腐剂一起使用，防腐剂如苯甲酸钠或优选对羟基苯甲酸丁酯，以便在目标pH下更有效地保存组合物。另外，可以加入黄原胶以增加悬浮液剂的粘度。为了实现微粉化，使用常规的喷射研磨设备，例如由Sturdevant，Inc.制造的NGMP-2喷射磨机喷射研磨结晶游离碱vapendavir。所得的微粉化的结晶游离碱vapendavir将具有更均匀的粒径分布，并且所得形式可以具有小于5μm的平均粒径。这种更小的粒径可以提供更大的表面积，以增强溶解并且提供对于加工稳定的游离碱形式，例如在大规模操作中。作为上述方法的结果，可以获得包含微粉化结晶游离碱vapendavir的儿科悬浮液剂，该悬浮液剂包括关于外观、粘度、pH、药物悬浮度和感官特性方面的期望特征。下面是根据本发明的有用的悬浮液剂的实例：样品制剂BTA-798游离碱(微粉化)2-3％微晶纤维素和羧甲基纤维素钠1-2％黄原胶0.01-1％聚山梨醇酯800.01-1％丙二醇0.1-2％对羟基苯甲酸丁酯0.001-0.05％甘油1-10％香料0.01-.50％蔗糖30-50％0.1M柠檬酸40-60％本领域的普通技术人员应当理解，使用上述制剂中的一些或所有成分可制备合适的悬浮液剂，并且这些成分的范围能够不同于上面提供的示例性实例。在另一个示例性实施例中，本发明的结晶游离碱可以以可重悬的小药囊或粉末形式提供。在本发明的另一个示例性实施例中，提供了固体药物剂型，例如片剂，其可以适用于口服给药本发明的结晶游离碱vapendavir。在该实施例中，微粉化的结晶游离碱vapendavir用于制备固体药物剂型。在制备剂型中表明，用润湿剂或表面活性剂(例如十二烷基硫酸盐)代替材料如甘露醇改善了药物的润湿和总体溶解性。本领域普通技术人员应当理解，润湿剂或表面活性剂通常已知是化学品，其可以添加到液体中以降低其表面张力并使其在表面上的扩散和渗透表面更有效。在这方面，测试了以下制剂的溶解性能，以评价润湿剂在制备固体药物剂型中的作用：表1：API微粉化和剂型比较：溶解结果显示微粉化和未微粉化的vapendavir游离碱制剂之间溶解速率可忽略的差异。因此，为了进一步改善药物、制剂的表面润湿，评价了各种表面活性剂/润湿剂。表2：润湿剂比较：测试显示，具有泊洛沙姆和聚山梨醇酯80的制剂对溶解速率具有最显着的影响。Soluplus对溶解速率提供了最适度的改进，而聚维酮K29/32没有提高溶解速率。这很有可能是由于在溶解篮内形成的水凝胶引起的缓慢崩解。无穷点数据支持这样的理论：观察到的聚维酮制剂的缓慢溶解图谱是由缓慢崩解引起的，因为在无穷点处的药物释放与其它润湿剂相当。增加的篮速度加速了水凝胶的崩解并且使得药物释放到溶液中。评价的润湿剂之一是泊洛沙姆，并且制备了根据本发明的制剂以评价泊洛沙姆与微粉化和未微粉化的结晶游离碱vapendavir的使用。此外，制备制剂以评价各种水平的泊洛沙姆，如下表所示：表3：微粉化的API和泊洛沙姆水平比较基于微粉化和泊洛沙姆水平的溶解比较显示在附图4中。不同水平的泊洛沙姆之间的溶解图谱没有差异，表明制剂中泊洛沙姆的使用水平可以降低。因此，本领域技术人员可以最小化最终剂型的尺寸以有助于潜在地符合药物规定。此外，无穷点确定显示，使用微粉化vapendavir游离碱的制剂的释放程度大于含有未微粉化材料的制剂。Vapendavir游离碱固体口服制剂的溶解速率和程度比先前生产的片剂制剂显著增加。示例性引导(lead)和备份(backup)制粒制剂如下所列：根据上述测试，因此显示，在微粉化方法中加入润湿剂进一步有助于获得具有本发明结晶游离碱vapendavir的合适的药物组合物，并且是开发本发明合适的片剂形式的另一个有效的步骤。本发明结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的另一个示例性优点是含有这种新结晶形式的片剂的物理尺寸或质量小于双-磷酸盐形式，因为本发明的结晶形式比磷酸盐形式具有更低的分子量。因此，如上所述，本发明的一个示例性实施例，其中6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑形成片剂。在一个示例性实例中，无水结晶游离碱的vapendavir的药物组合物是干粉组合物。在另一个实例中，药物组合物适于口服给药，特别是口服肠内给药。在这方面，再次，药物组合物可形成片剂或胶囊。组合物还可以是可重悬的小药囊或粉末形式。在另一个示例性实例中，无水游离碱晶体形式的vapendavir可以形成片剂，该片剂适合对需要的患者口服给药。在图8的示意图中显示了形成片剂的示例性方法。在该示例性方法中，将游离碱晶体vapendavir与麦芽糖糊精、淀粉钠和合适的乙醇酸酯组合成混合物，向其中加入纯净水，将成分混合并造粒，然后送入流化床干燥器中干燥。干燥后，通过筛网将组分研磨，然后将筛选的成分与合适的试剂(如甘露醇400和硅化微晶纤维素)共混。接着，将组分进一步与硬脂酸镁共混适当的时间，然后压缩并包衣以生产最终的片剂。该片剂可以用工业中任何合适的药学上可接受的包衣包裹，包括聚(乙烯醇)或PVA包衣，如Opadry包衣，例如Opadry03F2300015。这些合适的聚合物包衣通常包括PVA和聚乙二醇(PEG)，其用作增塑剂以增强PVA膜的柔性。根据本发明的片剂的活性成分的剂量通常为制备口服给药的量，例如100mg、200mg、300mg、500mg等。在一个示例性实施例中，这种片剂可以具有20-80％重量的vapendavir，或40-70％重量、或54-60％重量的vapendavir，由合适的药学上可接受的媒介物、赋形剂和/或载体形成。一种具有300mg剂量vapendavir的合适的片剂可以具有以下成分：赋形剂％w/wVapendavir游离碱56麦芽糖糊精20硅化微晶纤维素14甘露醇4006淀粉羟乙酸钠1.5硬脂酸镁0.7Opadry(橙色)qs此外，本发明结晶形式的另一个优点是，由于其为无水形式，因此，新的结晶6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑不吸水并且抗使用磷酸二氢盐形式时观察到的药物制剂期间的形式变化。由于该新的结晶游离碱形式，本发明的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑能够提供在稳定性和流动性方面改善的性能。其还可以提供6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的形式，该形式易于生产并具有比现有技术更高效和有效地掺入固体片剂形式或悬浮液剂中的合适的特性。此外，本发明的益处和优点可以包括对小核糖核酸病毒改善的治疗，例如HRV，因为等剂量的本发明的游离碱vapendavir比现有技术中使用的双-磷酸二氢盐的形式具有更小的片剂尺寸，导致潜在的改善的患者依从性。游离碱vapendavir的新的结晶形式构成了vapendavir的最低能量/最热力学稳定形式，并且当在水性溶剂系统中进行重结晶时没有显示出水合物形成。因此，该形式是不可水合的，即vapendavir游离碱的无水结晶形式。该形式确认为具有低吸湿性(DVS＜0.1％重量增加)，并且由于在水性条件下没有观察到水合物形成，所以游离碱vapendavir的新的结晶形式在配制如口服片剂、悬浮液剂、或适于口服给药的类似形式期间是有利的，通常涉及湿法制粒/用于生产稳健性和安全性粉末处理的方法。因此，不存在水合物形成时，新的晶体形式在生产/配制期间将不倾向于经历水诱导/形式变化(“工艺诱导的变化”)，这是现有技术片剂生产的问题，例如与先前的双-磷酸二氢盐结晶盐形式的vapendavir相关。与先前双-磷酸二氢盐的板状晶体习性相比，本发明新的结晶形式还具有针状晶体习性。此外，在流动性方面，针状晶体习性将有有利于生产，因为晶体习性能够影响粉末的压缩容易性和固态药物的流动性。例如，甲苯磺丁脲的板状晶体导致在压片机的料斗中粉末桥接以及在压片期间的项裂问题。在其他晶体习性的甲苯磺丁脲中这些问题都不会发生。此外，颗粒形状还影响流动性质，且尺寸类似但是形状不同的颗粒可以具有明显不同的流动性质，因为颗粒间的接触面积不同。因此，本发明新的结晶形式的重要优点是，其比现有技术更适合大规模药物产品生产，因为其是非水合物即无水的，因此预期不会遭受“过程诱导转化”或“水诱导相变”。如上所述，这与通过湿法制粒/喷雾干燥方法步骤的片剂制备的现有经验相反，包括活性成分的先前形式，例如上述vapendavir的双-磷酸二氢盐。此外，根据本发明的无水游离碱结晶形式的vapendavir显示出化学稳定性，并且显示为热力学最稳定的形式。根据本发明的药物组合物可用于治疗病毒感染，如小核糖核酸病毒例如人鼻病毒(HRV)。在一个优选的实施例中，本发明的药物组合物可以以适于口服给药的形式向需要其的患者施用。这种组合物可以是固体片剂形式，但是也可以考虑其它形式，例如填充的胶囊或囊片，及还有其它形式，例如用于口服给药的悬浮液剂和其它合适的形式。这种单位剂型通常含有有效量的结晶活性成分6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑，其中所使用的预期日剂量范围如下文进一步描述。此外，本发明的化合物和组合物还可用于治疗、缓减、预防或减轻哮喘或慢性阻塞性肺病(COPD)的症状或加重。另外，本发明的化合物和组合物可用于治疗手足口病。在这些方法中，向需要所述处理的患者施用治疗有效量的根据本发明的化合物或组合物。根据本发明的结晶6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑组合物和药物组合物的示例性施用剂量是有效预防或治疗折磨患者病症的量，包括病毒感染，例如但不限于鼻病毒或手足口病，或治疗、缓解、预防或减轻哮喘或慢性阻塞性肺疾病(COPD)的症状或加重的有效量。如技术人员容易认识到的，该量将根据感染的性质和患者的状况极大地变化。因此，结晶6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑或含有根据本发明的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的药剂/组合物的“有效量”或“治疗有效量”，是指任何无毒但产生所需预防或治疗效果的足够量的化合物、组合物或试剂。因此，本领域技术人员应当容易理解，根据主体感染的病毒的种类、年龄和主体的一般条件、接受治疗的病症的严重性、所使用的具体载体或佐剂及其给药方式等，所需组合物或特定试剂的准确的量将根据主体的不同而不同。类似地，给药方案也应当调整以适应施用组合物的个体，并且将再次随个体的年龄、体重、代谢等变化。因此，任何特定的化合物、组合物或试剂的“有效量”将基于具体情况而变化，本领域普通技术人员仅使用常规实验就可确定适当的有效量。例如，根据本发明制剂的每剂量单位可以包含0.1-500mg活性成分，并且每天的总剂量可以在100-1500mg/天的范围内。在其它实施例中，结晶6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的施用剂量可以是300-1200mg/天，或600-1000mg/天。在示例性剂量单位中，可以获得含有200-400mg(例如300mg)的量的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的片剂。在另一个示例性剂量单位中，组合物中可以包含药物组合物总重量的约40-60％的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑。如上所述，实际剂量方案是如上所述对有需要的患者施用有效量的活性化合物。根据本发明，还提供了治疗病毒感染的方法，如小核糖核酸病毒，包括向需要所述治疗的患者施用如上所述治疗有效量的结晶游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑。如上所述，此结晶游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑具有针状晶体习性并具有如图1A、1B、2A、2B和3所示的XRPD图谱。该方法可以实施以治疗或预防小核糖核酸病毒如人鼻病毒(HRV)。如上所述，该化合物可以以多种固体形式(例如片剂)中的任一种施用，且在示例性实施例中，可以以300-1500mg/天的量施用。在其它示例性治疗方案中，6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的施用量可以是100-1500mg/天、300-1200mg/天或600-1000mg/天。在另一个实施例中，6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑可以以药物组合物施用，该药物组合物包含6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑和合适的药物载体。此外，提供了根据本发明的方法，用于治疗、缓解、预防或减轻哮喘或慢性阻塞性肺病(COPD)的症状或加重，其中肺功能减退通常是有症状的，包括向需要所述处理的患者施用如上所述的治疗有效量的无水结晶游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑。本发明的化合物还可以提供益处，包括改善的哮喘控制，在预料的症状性鼻病毒感染期间，其可以通过例如ACQ-5测量，降低β-激动剂的使用频率，降低恶化的频率，改善肺功能(FEV1)，以及患者完成生活问卷的质量。其他改进的治疗结果包括减少患者住院、降低感冒症状的严重性和持续时间以及减少并发症，例如中耳炎、继发感染和相关的抗生素使用的减少。总之，本发明的结果，在比先前形式的vapendavir更小尺寸的片剂中能够实现有效的治疗剂量。此外，本发明是有利的，因为新的晶体形式在生产/配制期间没有经历水诱导/形式变化(“过程诱导变化”)的倾向，而这在现有技术中是一个问题，并且针状晶体习性在流动性方面提供了优点，因为晶体习性可以影响粉末压缩的容易性和固体状态下药物的流动性。应该理解，在不脱离本发明所公开的主题范围的情况下，可以改变当前公开主题的各种细节。此外，前面的描述及随后的实施例仅仅是为了说明的目的，而不是限制的目的。实施例现在将参考具体实施例、包括附图和结果的实验数据描述本发明，其提供对本发明更深入的理解。提供的实施例、实验数据和结果仅用于示例性目的，而非意图限制本发明的范围。此外，本领域的普通技术人员应该容易理解，通过常规实验和已知和/或常规技术可以获得其它的生产、药物配制和治疗的方法。实施例1：生产结晶游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的工艺生产根据本发明的无水结晶游离碱形式的vapendavir的示例性工艺显示在以下反应概述中：在该反应方案中，Ac＝缩醛，BTEAC＝苄基三乙基氯化铵，CDI＝1，1′-羰基二咪唑，DCM＝二氯甲烷，DES＝硫酸二乙酯，Et＝乙基，iPr＝异丙基，NMP＝N-甲基吡咯烷及THF＝四氢呋喃。简而言之，vapendavir的生产通过将具有式(II)的化合物：与具有下式(III)的化合物：在合适的反应介质中反应获得。反应介质可以是可能包含碳酸铯、碘化钾和N-甲基吡咯烷的溶液。四氢呋喃、乙醇和水也可用于后处理反应中获得的游离碱晶体。该反应产生了根据本发明的游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑。鉴定为上式(II)的化合物可以在以下反应中生产：如上述示例性反应进一步所示，生产根据本发明的无水结晶游离碱形式的化合物6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的工艺还可以包括用合适的溶剂重结晶的步骤。在一个实施例中，本发明无水游离碱结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的重结晶的进行是使用活性炭处理来除去杂质及使用一系列溶剂来生产重结晶的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑无水游离碱结晶形式。实施例2：生产晶体游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的另一工艺以下提供了生产根据本发明的无水结晶游离碱形式的vapendavir的另一示例性工艺。在此实施例中，将3-[4-(2-氯乙基)-1-哌啶基]-6-甲基-哒嗪(14.6kg)固体逐部分加入到在90℃N-甲基吡咯烷酮(87L)中的3-乙氧基-6-羟基-1，2-苯并噁唑(10.9kg)、碳酸铯(29.7kg)和碘化钾(2.0kg)的搅拌的混合物中。将混合物在90℃搅拌至少10小时。确认反应完成(通过HPLC，转化＞95％)后，将混合物冷却至65℃。然后将水和THF(4/1v/v，240L)的混合物加入到悬浮液中，同时维持温度低于70℃。将混合物搅拌至少1小时，然后冷却至5℃。过滤冷却的悬浮液，用水和THF的混合物(4/1v/v，2×55L)洗涤滤饼，再用乙醇(2×27L)洗涤，然后干燥，得到vapendavir(19.4kg，产率83％)。将二氯甲烷(100L)和乙醇(73L)的混合物加入到上面获得的vapendavir(18.2kg)和炭(1.8kg)中。混合物在20℃搅拌至少10小时，然后通过在助滤剂床上及通过在线过滤器过滤除去固体。接着用二氯甲烷和乙醇(1/1v/v，2×18L)的混合物洗涤滤饼。通过减压浓缩直至二氯甲烷的水平低于1％w/w，将所得滤液的溶剂交换为乙醇。将所得的vapendavir乙醇悬浮液加热至回流，然后冷却至20℃。通过装备有湿研磨泵头的在线泵再循环，将所得悬浮液湿磨。将悬浮液加热至40℃至少10分钟，然后冷却至20℃，接着过滤。用乙醇(2×28L)洗涤所得结晶固体并干燥至残余乙醇含量低于1000ppm(16.6kg，91％产率)。实施例3：结晶游离碱与磷酸盐形式的Vapendavir的固态特性和水溶性测定进行测试以评估本发明结晶游离碱的vapendavir(也称为BTA-798)以及现有技术版本的vapendavir(包括药物物质的磷酸盐形式)的固态特性和水溶性确定。这些测试还总结了配制成药物产品的这些药物物质的比较溶解曲线。I.测试的样品：A.BTA-798游离碱药物物质，批次#NE-021602-BATCH-01-2013B.BTA-798磷酸盐物质，批次#DB330701.2C.300mgBTA-798游离碱片剂，批次#C14011D.200mgBTA-798磷酸盐胶囊，批次#PPP.14.098E.300mgBTA-798游离碱片剂，批次#C14002BF.132mgBTA-798游离碱胶囊，批次#CU05-087&CU05-093II.仪器：A.X射线衍射仪：RigakuMiniflex600，具有铜X射线源B.粒径分析仪：MalvernMastersizer3000C.扫描电子显微镜：JEOLJCM-6000NeoScopeBenchtopD.溶解浴：DistekDissolutionSystemEvolution6100E.溶解自动进样器：DistekAutosamplerEvolution4300III.程序：A.粉末X射线衍射1.将BTA-798游离碱(图1A和1B)和BTA-798磷酸盐(图9)施加于单独的进样器支架并原样分析。2.在研钵中研磨一片片剂(批次#C14011)。将所研磨片剂的粉末施加到进样器支架并分析。将片剂与BTA-798游离碱API比较(图10)。3.将批次#NE-021602-BATCH-01-2013的BTA-798游离碱药物物质送至MicronTechnologies以微粉化。将该微粉化的药物物质与未微粉化的BTA-798游离碱药物物质比较(图11)。4.仪器参数：B.粒径分析1.将药物物质分散在约400mL水中。粒径分析结果显示在图12、13和14以及表4中。表4：药物物质粒径分析总结2.仪器参数C.扫描电镜(SEM)1.将少量的BTA-798游离碱(图15和16)和BTA-798磷酸盐(图17)施加到分开的销座上。2.用金溅射涂覆样品，直到均匀涂覆一薄层。3.销座以45°角安装。D.溶解性研究1.在各种缓冲体系中制备几种0.6mg/mL的BTA-798游离碱溶液(表5)。将溶液置于37℃水浴中约24小时。表5：缓冲体系缓冲液pH0.1MHCl1.20.1M磷酸二氢钠2.10.1M柠檬酸3.00.1M醋酸4.00.1M柠檬酸5.00.1M磷酸二氢钾6.00.1M磷酸二氢钾7.00.1M磷酸二氢钾8.02.将每种溶液的一部分过滤并通过HPLC测定。3.仪器参数(HPLC)：时间(min)％MPB04025852785284032404.对BTA-798磷酸盐重复该研究。溶解性研究的结果总结在下表6中。表6：药物物质溶解性总结ND＝未检测到E.溶解1.通过HPLC测定各种片剂和胶囊在pH1.2和2.1溶解介质中的溶解速率。2.溶解参数：3.仪器参数(HPLC)：溶解研究的结果显示在图18A-18D中并总结在下表7-10中。表7：(参见图18A)50RPM下在pH2.1缓冲液中的溶解速率(％标示量)表8：(参见图18B)100RPM下在pH2.1缓冲液中的溶解速率(％标示量)表9：(参见图18C)50RPM下在pH1.2缓冲液中的溶解速率(％标示量)表10：(参见图18D)100RPM下在pH1.2缓冲液中的溶解速率(％标示量)IV.结果和结论：本发明游离碱结晶vapendavir的XRDP图谱显示具有如图1A和1B中观察到的以下峰：No.2θ(度)No.2θ(度)No.2θ(度)14.5311120.2652130.082210.2591220.6242231.86310.9951321.432332.68413.5601422.1242434.61515.181523.1392535.64615.9421623.8572637.18716.591724.5312742.83817.0021825.7412843.72917.701927.4202944.711018.332029.083047.61本发明游离碱结晶vapendavir的XRDP图谱的更详细分析显示以下图谱细节：观察到，本发明游离碱结晶vapendavir的XRDP图谱显示出与现有版本的磷酸二氢盐形式的vapendavir不同。磷酸盐具有如图9中观察到的形式并具有以下峰：No.2θ(度)No.2θ(度)No.2θ(度)13.3501121.0292131.22026.6561221.3712232.575313.2851322.832333.01414.071424.2192433.60515.141524.602536.24616.6261625.812638.02717.991726.7382739.540818.3681827.8182841.47919.161930.082942.361019.9682030.7813042.92因此，关于粉末X射线衍射，发现本发明的游离碱晶体具有与先前磷酸盐形式的vapendavir明显不同的晶体结构。在比较测试中，为了评估晶体学的维持，将300mg的vapendavir与BTA-798游离碱比较，并且片剂和API的衍射图谱表明，在片剂生产期间晶体学没有改变。此外，将微粉化的BTA-798结晶游离碱vapendavir与未微粉化的BTA-798游离碱进行比较。微粉化和未微粉化的衍射图谱表明，在微粉化期间晶体学没有改变。关于粒径，本发明的BTA-798游离碱晶体比先前的双-磷酸盐形式具有均匀得多的粒径分布。结晶游离碱vapendavir具有D50为21.7μm、D90为52.8μm的单峰粒径分布，微粉化的BTA-798游离碱具有D50为2.14μm、D90为4.19μm的单峰粒径分布。另一方面，BTA-798磷酸盐具有D50为29.4μm、D90为665μm的三峰粒径分布。关于显微图谱，此处包括的SEM显微照片显示，BTA-798游离碱具有针状晶体结构，其在微粉化前的尺寸范围为约25-100μm。微粉化后，微粉化的BTA-798游离碱药物物质具有约2-5μm尺寸范围的晶体结构。再次，与本发明的结晶游离碱vapendavir形成鲜明对比，先前磷酸盐形式的vapendavir具有板状晶体结构，其多峰粒径分布具有比本发明结晶游离碱形式大得多的范围。测试表明，磷酸盐形式的vapendavir具有约2-150μm的粒径。关于溶解度，尽管在pH5.0及以下，BTA-798磷酸盐的溶解度似乎大于BTA-798游离碱的溶解度，但是游离碱在pH5.0的溶解度及两种药物物质在pH6.0-8.0的溶解度都低于HPLC测定方法的检测限。HPLC方法的LOD为0.00006mg/mL。关于溶解，在两种不同的篮速度(50、100RPM)及pH2.1下测试了四种成品的溶解速率。a.200mgBTA-798磷酸盐胶囊i.在15min时，药物在两个篮速度下接近或完全释放。b.132mgBTA-798游离碱胶囊i.45min后，药物没有完全释放(33至35％LC)。两个篮速度下的图谱相似。c.300mgBTA-798游离碱片剂i.测试两个批次的片剂。45min后，两个批次在两个篮速度下释放小于15％。由于在45min后游离碱胶囊表现出比游离碱片剂明显更大的释放，可以得出这样的结论：药物产品制剂对药物释放图谱具有显著的影响。用pH1.2的溶解介质重复该溶出实验，其之前用于质量控制测试。d.200mgBTA-798磷酸盐胶囊i.在15min时，药物在两个篮速度下接近或完全释放。e.132mgBTA-798游离碱胶囊i.在15min时，药物在两个篮速度下接近或完全释放。f.300mgBTA-798游离碱片剂i.测试两个批次数量的片剂。两个批次的溶解图谱在每个篮速度下相似。在100RPM篮速度下，两种片剂均滞后于胶囊制剂，但在45min后完全释放。在50RPM篮速度下，片剂制剂在45min后没有完全释放。游离碱胶囊和磷酸盐胶囊在pH1.2的溶解介质中没有区别。实施例4A：无水结晶游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的XRPD分析如前所述，本发明结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑由具有针状习性的晶体组成。本发明的结晶形式不同于先前形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑，例如具有板状晶体习性的双-磷酸二氢盐形式的vapendavir。此外，本发明的结晶6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑是无水化合物，这使其极其有利于用在药物组合物中，因为无水化合物是稳定的(例如其抗吸水)且在润湿和研磨时不改变形式。结果，本发明的晶体6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑形式是6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑用于掺入药物组合物中极其有益和有利的形式。除了上述测试外，还使用X射线晶体粉末衍射分析了无水结晶的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑，使用以下仪器和方法：仪器：RigakuCorporation的Miniflx，使用硅低背景样品架(直径24mm，凹口0.2mm)。管是Cu，15kV方法：角2θ＝2°至2θ＝40°，取样宽度0.02[2θ]作为这些测试的结果，本发明无水结晶的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑显示具有图2A和2B所示的XRPD峰(2θ)图谱。以下所示的主要XRPD峰(d-间距，)选自由大约以下值组成的组：19.2、8.5、8.0、6.5、5.5、5.3、5.0、4.35、4.27、4.12、4.03、3.99、3.96、3.80和3.60。2θXRPD峰可以选自由大约以下值组成的组：4.6、10.4、11.1、13.7、16.1、16.7、17.8、20.4、20.8、21.6、22.1、22.3、22.4、23.4和24.8。实施例4B：无水结晶游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的XRPD分析使用X射线粉末衍射(XRPD)再次分析无水结晶6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑，并且所观察到的峰显示在图3中。下面的表提供了观察到的峰的列表及主峰的列表。选择高达约30°2θ范围内的峰，并且使用舍入算法将每个峰圆整到最接近的0.01°2θ。用Optix长微焦源产生的Cu辐射入射光束，使用PANalyticalX′PertPROMPD衍射仪收集XRPD图谱。使用椭圆形梯度多层反射镜将CuKαX射线聚焦通过样本并且到达检测器上。在分析之前，分析硅样本(NISTSRM640d)以验证观察的Si111峰位置与NIST认证的位置一致。将样品的样本夹在3μm厚的膜之间并以透射几何学进行分析。使用波束-停止、短抗散射延伸和防散射刀刃来最小化由空气产生的背景。用于入射和衍射光束的Soller狭缝用于最小化来自轴向发散的变宽。使用位于距离样本240mm的扫描位置敏化检测器(X′Celerator)和数据收集软件v.2.2b来收集衍射图谱。表1.BTA798形式A观察到的峰，批次NE-021602-E-5-33原料2-1，XRPD文件627932实施例4C：晶体吸湿性和化学稳定性研究还进行了研究以评价本发明的游离碱6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的性质。如图3所反映，相对于％相对湿度测量游离碱结晶vapendavir的重量(在％变化方面)。这些结果表明动态蒸汽吸附(DVS)增加的重量是＜0.1％，从而反映低吸湿性。关于本发明游离碱6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的化学稳定性进行的试验中，将样品置于LDPE袋、层压箔袋和HDPE桶内并监测外观、水含量(KF)、测定(1H-NMR)、纯度和相关物质(HPLC)。本研究显示，在36个月内在超过25℃/60％rH和在6个月内超过40℃/75％rH的测量属性没有显著的变化。由于这些性质，本发明结晶形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑的一个优点是，含有这种新的晶体形式的片剂的物理尺寸或质量小于双-磷酸二氢盐形式，因为本发明的结晶形式可以制成有效的组合物或片剂，其具有比等效现有技术的双磷酸盐形式更少的量。此外，如这些测试所示，本发明的结晶形式的另一个优点是，由于其为无水形式，新的结晶6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑不吸水，并且抵抗在使用双-磷酸二氢盐形式其间观察到的药物制剂过程中的形式变化。实施例5：对结晶游离碱vapendavir和双-磷酸二氢盐形式的vapendavir的物理性质和比较研究的其他研究测定本发明游离碱6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑形式的其它物理和化学性质，包括某些关于比较数据的研究。进一步分析如上制备的本发明的无水结晶游离碱vapendavir，包括HPLC和NMR数据。HPLC(相对保留时间)和NMR数据都能够确认与参考标准的相关性。所得NMR数据的具体1HNMR细节如下：1HNMR(CDCl3)：δ7.47(d，1H，J＝9Hz)，7.06(d，1H，J＝9Hz)，6.88-6.85(m，2H)，6.84(s，1H)，4.47(q，2H，J＝7Hz)，4.33(d，2H，J＝13Hz)，4.08(t，2H，J＝6Hz)，2.92(t，2H，J＝13Hz)，2.53(s，3H)，1.75-1.90(m，5H)，1.50(t，3H，J＝7Hz)，1.34-1.38(m，2H).作为本发明的无水游离碱结晶形式的结果，对小核糖核酸病毒如HRV改善的治疗是可能的，因为本发明的游离碱vapendavir的等效剂量比现有技术中使用的双磷酸盐形式片剂尺寸更小，导致潜在提高病人依从性。其它测试进一步证实了本发明的无水结晶游离碱vapendavir与先前的双-磷酸二氢盐形式的vapendavir之间的不同。在两者之间的XPRD数据中显示了差异(参见图4)，并且扫描电子显微图片证实，先前的双-磷酸二氢盐vapendavir具有板状晶体形式(参见图7A-7C，左侧)，而本发明的无水游离碱结晶vapendavir具有针状形式(参见图7A-7C，右侧)。实施例6：生产结晶游离碱形式的6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑片剂的工艺根据本发明，将无水游离碱晶体形式的vapendavir制成片剂，该片剂适于对需要的患者口服施用。该过程的示意图包括在图8中。在该示例性工艺中，将游离碱晶体vapendavir与麦芽糖糊精和淀粉羟乙酸钠混合成混合物，然后加入纯净水，将成分混合并造粒，然后喂料进入流化床干燥器中干燥。干燥后，将组分通过1.14mm筛网研磨，然后用甘露醇400和硅化微晶纤维素共混筛分成分20min。接着，将组分进一步与硬脂酸镁共混，然后压缩并包衣以生产最终的片剂。用PVA包衣Opadry03F2300015包裹片剂。片剂可以制成任何合适的尺寸，例如，具有300mg剂量的片剂。在一个示例性实施例中，游离碱无水结晶vapendavir形成300mg剂量的片剂，其制剂如下：赋形剂％w/wVapendavlr游离碱56麦芽糖糊精20硅化微晶纤维素14甘露醇4006淀粉羟乙酸钠1.5硬脂酸镁0.7Opadry(橙色)qs实施例7：多态性研究本发明的无水游离碱6-{2-[1-(6-甲基-3-哒嗪基)-4-哌啶基]乙氧基}-3-乙氧基-1，2-苯并噁唑形式还进行了多态性研究。实验包括诸如快速蒸发、碰撞冷却、热/冷浆液以及熔融和冷冻测试。收集的数据表明，无水结晶游离碱vapendavir优选的单一多晶型(形式A)是从基于溶剂的实验获得的，并且没有观察到溶剂合物或水合物。具有替代的但不完全表征的多晶型物的形式A的竞争性浆料测试也确认，形式A是最稳定的热力学形式。实施例8：结晶游离碱Vapendavir的悬浮液剂提供悬浮液剂形式的药物组合物的能力非常重要，特别是对于儿科医学，因为向年幼患者施用活性成分时，这种形式可能是必需的。在这方面，本发明人确定能够生产适合形式的结晶游离碱vapendavir，其中针状颗粒的晶体微粉化成更小但更均匀的粒径。结晶游离碱被微粉化但仍然继续保持其活性形式的能力是对先前形式的vapendavir的改进，所述先前形式例如磷酸盐形式，该形式形成板状晶体形式且不能微粉化并保持其活性性质。在制剂开发中使用表11中列出的下列材料：表11：原材料鉴定在开发制剂前，在几种pH缓冲液中测定了结晶游离碱形式的vapendavir(或“BTA-798”)API的溶解度。详细的溶解度测定结果在此显示，包括在下表12中：表12：药物物质溶解度总结ND＝未检测到在这些测试中，结晶游离碱vapendavir(BTA-798)在pH5.0-8.0之间具有最低的溶解度，表明该pH范围对于悬浮液制剂是最理想的。评价了不含vapendavir的初始安慰剂制剂的物理外观和粘度。表13：外观：表14：粘度(@25℃主轴S18)：样品批次#粘度(cP)悬浮液安慰剂CLF13-106-2318.1对于后续的制剂，向悬浮液中加入0.1M柠檬酸缓冲液以达到pH5.5。测定安慰剂悬浮液的pH以确定处理后悬浮液是否保持5.5。防腐剂从苯甲酸钠变为对羟基苯甲酸丁酯，其对于目标pH是更有效的防腐剂。另外，加入黄原胶以增加悬浮液的粘度。在确定0.1M柠檬酸缓冲液提供了足够的缓冲，但确定需要降低粘度之后，评估微粉化版本的结晶游离碱vapendavir。使用常规的喷射研磨设备喷射研磨vapendavir，在这种情况下使用由Sturdevant，Inc.制造的NGMP-2喷射研磨机，使用柔性密封单元。运行条件和产率计算数据如下所示：I.运行和粒径数据II.产率计算未微粉化产品750.0g微粉化产品692.0g滤袋残留3.0g残留产品30.0g粒径样品3.81g1.可用产率计算：92.8％2.总产率计算：97.2％这些测试表明结晶游离碱vapendavir成功微粉化，且所得形式具有小于5μm的平均粒径，其产生更小的颗粒，具有更大的表面积以增强溶解。游离碱形式对该加工是稳定的。在微粉化前结晶游离碱形式的显微图片示于图19中，在图20中显示了平均粒径小于5μm的微粉化版本的显微图片。在微粉化之前，粒径从约15-100μm，如下图表所示：数据库：BTA-798累积分布密度分布(log.)然而，微粉化后，粒径从约2-5μm，如下图表所示：数据库：BTA-798累积分布密度分布(log.)如下所示，测试该微粉化版本的结晶游离碱vapendavir的物理外观、粘度、粒径、pH和分散性/沉降速率：表15：制剂比较：表16：批次PS01-06/PS01-10工艺程序：1此工艺步骤仅用于PS01-10表17：pH分析：表18：外观：表19：粘度(@25℃主轴S18)：使用MastersizerTM3000激光衍射粒径分析仪进行活性成分和安慰剂之间的粒径比较。粒径分析可在图21和22中观察到。如附图中所示，微粉化的vapendavir的游离碱悬浮液剂比安慰剂具有均匀得多的粒径。BTA-798游离碱悬浮液剂观察到的D10/50/90(85.0/129/190μm)略微高于在安慰剂悬浮液(44.2/87.6/150μm)观察到的。该观察可以表明在悬浮液中API聚合。如果发生API聚合，基于分散性/沉降速率数据，不认为对产品具有负面影响。对BTA-798游离碱悬浮液剂进行分散性/沉降速率评价。该测试检测了摇晃后悬浮液中API的均匀性以及API随后在悬浮液中的沉降速率。在摇晃(T＝0)后立即从悬浮液瓶的顶部和底部取样，然后在1小时和4天后再次取样。通过HPLC测定所有样品。表20HPLC参数表21分散性/沉降速率评价顶部和底部样品T＝0的测定结果接近一致，表明在摇晃后悬浮液是均匀的。另外，在1小时和4天后取样的样品接近一致，表明在4天时间内没有发生API的显著沉降。作为上述工艺的结果，开发了含有微粉化结晶游离碱vapendavir的儿科悬浮液剂，提供了关于外观、粘度、pH、药物可悬浮性和感官性质的所需特征。下面是根据本发明的有用的悬浮液剂的实例：样品引导制剂BTA-798游离碱(微粉化)2.40％微晶纤维素和羧甲基纤维素钠1.50％黄原胶0.34％聚山梨醇酯800.20％丙二醇1.00％对羟基苯甲酸丁酯0.02％甘油5.00％香料0.10％蔗糖40.000.1M柠檬酸49.44实施例9：vapendavir游离碱固体口服剂型根据本发明，期望获得其它固体药物剂型，例如适合用于本发明的结晶游离碱vapendavir口服给药的片剂。在这方面，测试未微粉化和微粉化的晶体游离碱vapendavir以试图开发合适的口服剂型并具有足够的溶解性质，该剂型能够保持活性成分的性质。使用以下材料进行测试：表22：原材料鉴定在制剂开发之前，发展了溶解方法，以提供比先前观察到的vapendavir制剂溶解图谱之间更好的区别性的溶解方法，其使用为标准质量控制目的设计的方法。在测试中使用的溶解参数总结如下：表23：溶解参数溶解装置：装置1(篮)溶解介质：pH2.1缓冲液溶解体积：900mLRPM50时间点15，30，和45分钟测试了以下制剂的溶解性，以提供使用区别性溶解参数的先前生产的制剂的初始比较。制剂批次#CU05-095(4)代表在先前的人临床研究中研究的vapendavir磷酸盐胶囊制剂。制备制剂批次#CU05-093以评价vapendavir磷酸盐制剂相对于比较的vapendavir游离碱制剂。制剂批次C14011和C14002B是vapendavir游离碱片剂批次，其先前生产用于人临床试验。批次CU05-093和CU05-095(4)是具有两种组分的制剂。将这两种组分在V型混合器中混合并装入00EL明胶胶囊中。表24：初始制剂比较：初始制剂的溶解比较显示在图23A中。在初步表征后，制备了类似于先前生产的vapendavir游离碱片剂的制剂，然而这些制剂省略了使用甘露醇而加入了十二烷基硫酸钠作为表面活性剂以改善药物的润湿。使用该碱制剂，生产了四批以评价微粉化/未微粉化药物物质和片剂/胶囊剂型的效果。表25：API微粉化和剂型比较：表26：批次#CU05-128/129工艺程序1CU05-XXX-122CU05-XXX-01API微粉化和剂型的溶解比较显示在附图23B中。溶解结果表明微粉化和未微粉化的vapendavir游离碱制剂之间可以忽略的溶解速率差异。由于药物物质微粉化而增加的表面积的潜在溶解益处可能由于其疏水性而被药物颗粒的聚集所抵消。为了改善药物的表面润湿，评价了含有各种表面活性剂/润湿剂的制剂。表27：润湿剂比较：表28：批次#CLF13-112/113/114/115工艺程序1泊洛沙姆，Soluplus，和PVPk29/322该步骤仅对聚山梨醇酯80制剂进行。3用于聚山梨醇酯80制剂的水是PS80和水的混合物。使用各种润湿剂的溶解比较显示在附图24A中。具有泊洛沙姆和聚山梨醇酯80的制剂对溶解速率具有最显著的效果。Soluplus提供了对溶解速率最适度的提高，而聚维酮K29/32没有提高溶解速率。这最有可能是由于在溶解篮内形成的水凝胶引起缓慢崩解。在取样前通过增加篮速度至150rpm30分钟将无限时间点加入溶解图谱中。表29：溶解比较润湿剂(无限点)无限点数据支持这样的理论：聚维酮制剂观察到的缓慢溶解图谱是由缓慢崩解引起的，因为在无限点的药物释放与其它润湿剂相当。增加篮速度加速了水凝胶的分解并且允许药物释放到溶液中。从评价的润湿剂中，选择泊洛沙姆用于进一步研究。制备制剂以评价泊洛沙姆与微粉化和未微粉化药物物质的使用。此外，制备制剂以评价泊洛沙姆更低的使用水平。表30：微粉化的API和泊洛沙姆水平比较表31：批次#CLF13-112/113/114/115工艺程序基于微粉化和泊洛沙姆水平的溶解比较显示在附图24B中。不同水平的泊洛沙姆之间的溶解图谱没有差异，表明可以降低制剂中泊洛沙姆的使用水平。这将最小化最终剂型的尺寸并潜在地符合FDA的非活性成分指南(口服胶囊中泊洛沙姆的限制是含糊的)。当与未微粉化的药物物质相比时，使用微粉化药物物质降低了溶解速率。这最可能是由于用微粉化/未微粉化材料生产的颗粒的物理差异。微粉化材料生产的颗粒大于未微粉化材料。这些更大的颗粒可能更致密并且崩解更慢，导致更慢的溶解速率。收集这些制剂的无限点。表32：微粉化和泊洛沙姆水平的溶解比较(无限点)无限点测定表明使用微粉化的vapendavir游离碱的制剂的释放程度大于含有未微粉化材料的制剂。Vapendavir游离碱固体口服制剂的溶解速率和程度比先前制备的片剂显著增加。引导和备用颗粒制剂列于下表：根据上述测试，表明在微粉化过程中使用润湿剂进一步有助于获得合适稳定的药物组合物，该药物组合物具有本发明的结晶游离碱vapendavir。实施例10：微粉化前后XRPD图谱的评价根据本发明，进行测试以确认本结晶游离碱vapendavir的多晶型物在上述微粉化工艺之后是相同的。在这方面，在以下测量条件下测试微粉化前和微粉化后结晶游离碱vapendavir化合物：XRDP图谱的重叠显示在图25的图中。如其中观察到的，游离碱多晶型物在微粉化前和微粉化后都相同，因此本发明的多晶型物对机械加工非常稳定。当前第1页1 2 3