以吲哚或吲哚类似物为母核结构的酰胺类小分子有机化合物、用途及其制备方法与流程

文档序号:17918067发布日期:2019-06-14 23:55
以吲哚或吲哚类似物为母核结构的酰胺类小分子有机化合物、用途及其制备方法与流程

本发明属于药物合成领域,涉及一类基于以吲哚或吲哚类似物为母核结构的酰胺类小分子有机化合物及其合成方法和用途。



背景技术:

表观遗传修饰对于肿瘤的发生、诊断和治疗具有重要意义。主要包括DNA的甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑和非编码RNA调控。异常的表观遗传修饰会使基因错误的表达,引起代谢紊乱和疾病甚至肿瘤的发生。

组蛋白修饰主要包括组蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化以及组蛋白泛素化等。其中研究的最为深入的是组蛋白的乙酰化。在正常情况下,组蛋白的乙酰化和去乙酰化处于动态平衡,由组蛋白乙酰化酶(HAT)和组蛋白去乙酰化酶(HDAC)共同调控。HAT能将乙酰辅酶A的乙酰基转移到组蛋白N端特定的赖氨酸残基上,中和其所带的正电荷,使染色质呈现松散的结构,促进转录的进行。而HDAC能水解乙酰化的赖氨酸,使其去乙酰化,抑制基因的转录。

研究表明,在肿瘤细胞中组蛋白大多呈低乙酰化作用,染色质致密卷曲,导致一些抑癌基因不能正常表达。HDAC抑制剂可抑制高表达的HDACs的活性,恢复HATs和HDACs的动态平衡状态,起到抑制肿瘤细胞生长的功能。随着肿瘤中HDACs的深入研究,越来越多的HDAC抑制剂被应用于肿瘤研究并且表现出多重的抗肿瘤作用机制,如:抑制肿瘤细胞的增殖、促进肿瘤细胞的分化和凋亡、阻滞肿瘤细胞细胞周期的进行、抑制肿瘤细胞的血管新生、降低肿瘤细胞的运动性等。目前由FDA批准上市的HDAC抑制剂有四种:用于皮肤T细胞淋巴癌的SAHA(Merck)和FK228(Celgene),治疗外周T细胞淋巴瘤的PXD101(Spectrum),以及2015通过FDA加速审批程序的LBH589(Novartis),这个药物能与地塞米松和硼替佐米联合用药治疗多发性骨髓瘤。除此之外,还有超过20种化合物处于不同临床阶段。因此HDAC抑制剂是一类非常热门的抗肿瘤靶点,具有广阔的市场前景。

除此之外,(HDACs)抑制剂在预防和治疗自身免疫性疾病、过敏和炎症等疾病方面有着广泛的应用。多个炎症性疾病动物模型的研究表明HDACi具有抗炎作用。HDACi除了通过调控组蛋白乙酰化状态引起炎性细胞因子的表达,还可以通过调控包括转录因子在内的非组蛋白的乙酰化状态,抑制或是激活炎性因子的表达,其中最主要的通过对核转录因子KB的抑制实现的。但是不同的HDACs具有不同的乙酰化模式,调节不同的基因。如系统性红斑狼疮MRL-Ipr/1pr小鼠模型,TSA和SAHA可下调炎性细胞因子IL-12和IL-6mRNA和蛋白的水平;在小鼠的哮喘模型中,TSA可以降低支气管肺泡灌洗液中IL-4、IL-5和lgE的浓度,进而减缓哮喘发展。但也有关于HDACi能促进炎性细胞因子表达的报道。Suuronen等报道,在小胶质N9细胞TSA可以增强由脂多糖诱导的NO和IL-6的产生。因此,HDACi对于炎症反应的调控可以是基因转录激活剂,也可以是抑制剂。系统性硬化是一种主要以广泛的血管病变及皮肤和内脏器官进行性纤维化为特征的自身免疫性疾病。在系统性硬化的发病机制的研究中涉及多种促炎症因子,包括TGF-β1、IL-4、PDGF等,而HDACs活性是系统性硬化的发病和疾病进展的必要因素。Huber等的研究表明在博莱霉素诱导的皮肤纤维化的动物模型中,TSA通过抑制HDACs的活性可减弱皮肤成纤维细胞Ⅰ型胶原以及纤维黏连蛋白的表达,减少皮肤成纤维细胞总胶原蛋白及细胞外基质在皮肤的累积。

本发明立足于SAHA结构,以吲哚及其类似物为母核,设计合成出一系列结构更为新颖、活性更高、特异性更强的抗肿瘤药物。本发明化合物是一类广谱的HDAC抑制剂,不仅在酶水平上表现出较强的抑制活性,还能够抑制多种肿瘤细胞的增殖,



技术实现要素:

本发明提供了一类结构新颖的可作为HDAC抑制剂和具有抗肿瘤效果的以吲哚或吲哚类似物为母核结构的酰胺类小分子有机化合物或水合物或药学上可接受的盐,其结构如式(I)所示:

其中,X为N或C;

m,n,p=0-8;优选地,m,n=0,1,2;p=1,4,5,6,7;

U为CR1或N;

V为CR2或N;

W为CR3或N;

Z为CR4或N;

其中R1,R2,R3,R4独立的选自下列基团中的任意一个,包括氢,C1-8烷基及其异构体,卤素,硝基,氨基,氰基,二氟甲基,三氟甲基,甲氧基,乙氧基,异丙氧基,二氟甲氧基,三氟甲氧基,羟基。

优选地,R1,R2,R3,R4独立的选自下列基团中的任意一个,包括氢,C1-8烷基及其异构体,其中烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔正丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正辛基、正庚基;卤素(F、Cl、Br、I),硝基,氨基,氰基,二氟甲基,三氟甲基,甲氧基,乙氧基,异丙氧基,二氟甲氧基,三氟甲氧基,羟基。

A选自下列基团中的一个或不存在:-O-;-SO-;-SO2-;-CONR-;-NRCO-;-NR-;-CO-,其中R为氢;C1-8烷基及其异构体;C3-8的环烷基。

优选地,A选自下列基团中的一个或不存在:-O-;-SO-;-SO2-;-CONR-;-NRCO-;-NR-;-CO-,其中R为氢;C1-8烷基及其异构体,其中烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔正丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正辛基、正庚基;C3-8的环烷基,环烷基包括单环脂环(包括:环丙基、环丁基、环戊基、环己基及其同分异构体)和稠环脂环,其中环烷基上包含一个或多个杂原子O、N、S或是一个或多个卤素或羟基取代,其中稠环脂环包括1-金刚烷基、2-金刚烷基、二环[2.2.0]戊烷、二环[4.4.0]癸烷等。

R5选自下列基团中的任意一个:C1-8烷基及其异构体;C3-8的环烷基;苯基;杂环芳香基;取代苯基或取代杂环芳香基;苯并杂环基。

优选地,R5选自下列基团中的任意一个:C1-8烷基及其异构体,其中烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔正丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正辛基、正庚基;C3-8的环烷基,环烷基包括单环脂环(包括:环丙基、环丁基、环戊基、环己基及其同分异构体)和稠环脂环,其中环烷基上包含一个或多个杂原子O、N、S或是一个或多个卤素或羟基取代,其中稠环脂环包括1-金刚烷基、2-金刚烷基、二环[2.2.0]戊烷、二环[4.4.0]癸烷等;苯基;杂环芳香基(包括:异唑基、异噻唑基、吡唑基、吡啶基、恶唑基、噻唑、咪唑、三唑、四唑、呋喃基、三嗪基、噻吩、嘧啶、哒嗪、吡嗪);取代苯基或取代杂环芳香基(所述取代的苯基及取代的五元或六元杂环芳香基有一个或多个取代基,包括:F、Cl、Br、I、羟基、甲基、乙基、异丙基、甲氧基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、硝基、-CN、氨基);苯并杂环基,杂环包括C3-6的环烷基,其中环烷基上包含1个或多个杂原子O、N、S或是一个或多个卤素或羟基取代。

选自下列基团中的任意一个:苯基;杂环芳香基;取代苯基或取代杂环芳香基。

优选地,选自下列基团中的任意一个:苯基;杂环芳香基(包括:异唑基、异噻唑基、吡唑基、吡啶基、恶唑基、噻唑、咪唑、三唑、四唑、呋喃基、三嗪基、噻吩、嘧啶、哒嗪、吡嗪);取代苯基或取代杂环芳香基(所述取代的苯基及取代的五元或六元杂环芳香基有一个或多个取代基,包括:F、Cl、Br、I、羟基、甲基、乙基、异丙基、甲氧基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、硝基、-CN、氨基)。

C选自下列基团中的任意一个:-(CH2)q-,其中q=0-3;

优选地,C为

ZBG为锌螯合基团,选自下列基团中的任意一个:其中R6选自下列基团中的任意一个:包括氢,C1-8烷基及其异构体,卤素,硝基,氨基,氰基,二氟甲基,三氟甲基,甲氧基,乙氧基,异丙氧基,二氟甲氧基,三氟甲氧基,羟基;R7选自下列基团中的任意一个:包括C1-8烷基及其异构体,C3-8的环烷基,苯基,杂环芳香基,取代苯基或取代杂环芳香基;R8和R9独立的选自下列基团中的任意一个:包括氢,C1-8烷基及其异构体,或R8和R9连接起来构成3至7个链长的环烷基。

优选地,ZBG为锌螯合基团,选自下列基团中的任意一个:其中R6选自下列基团中的任意一个:包括氢,C1-8烷基及其异构体,其中烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔正丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正辛基、正庚基,卤素,硝基,氨基,氰基,二氟甲基,三氟甲基,甲氧基,乙氧基,异丙氧基,二氟甲氧基,三氟甲氧基,羟基;R7选自下列基团中的任意一个:包括C1-8烷基及其异构体,其中烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔正丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正辛基、正庚基,C3-8的环烷基,环烷基包括单环脂环(包括:环丙基、环丁基、环戊基、环己基及其同分异构体)和稠环脂环,其中环烷基上包含一个或多个杂原子O、N、S或是一个或多个卤素或羟基取代,苯基,杂环芳香基(包括:异唑基、异噻唑基、吡唑基、吡啶基、恶唑基、噻唑、咪唑、三唑、四唑、呋喃基、三嗪基、噻吩、嘧啶、哒嗪、吡嗪),取代苯基或取代杂环芳香基(所述取代的苯基及取代的五元或六元杂环芳香基有一个或多个取代基,包括:F、Cl、Br、I、羟基、甲基、乙基、异丙基、甲氧基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、硝基、-CN、氨基)。R8和R9独立的选自下列基团中的任意一个:包括氢,C1-8烷基及其异构体,其中烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔正丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正辛基、正庚基,或R8和R9连接起来构成3至7个链长的环烷基,其中环烷基上包含一个或多个杂原子O、N、S或是一个或多个卤素或羟基取代。

本发明还提供了一类结构新颖的可作为HDAC抑制剂和具有抗肿瘤效果的以吲哚或吲哚类似物为母核结构的酰胺类小分子有机化合物,其结构如式(Ⅱ)所示:

其中,Y为N或C;m,n,p=0-8;优选地,m,n=0,1,2;p=1,4,5,6,7;

U为CR1或N;

V为CR2或N;

W为CR3或N;

Z为CR4或N;

其中,R1,R2,R3,R4独立的选自下列基团中的任意一个,包括氢,C1-8烷基及其异构体,卤素,硝基,氨基,氰基,二氟甲基,三氟甲基,甲氧基,乙氧基,异丙氧基,二氟甲氧基,三氟甲氧基,羟基。

优选地,R1,R2,R3,R4独立的选自下列基团中的任意一个,包括氢,C1-8烷基及其异构体,其中烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔正丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正辛基、正庚基;卤素(F、Cl、Br、I),硝基,氨基,氰基,二氟甲基,三氟甲基,甲氧基,乙氧基,异丙氧基,二氟甲氧基,三氟甲氧基,羟基。

A选自下列基团中的一个或不存在:-O-;-SO-;-SO2-;-CONR-;-NRCO-;-NR-;-CO-,其中R为氢;C1-8烷基及其异构体;C3-8的环烷基。

优选地,A选自下列基团中的一个或不存在:-O-;-SO-;-SO2-;-CONR-;-NRCO-;-NR-;-CO-,其中R为氢;C1-8烷基及其异构体,其中烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔正丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正辛基、正庚基;C3-8的环烷基,环烷基包括单环脂环(包括:环丙基、环丁基、环戊基、环己基及其同分异构体)和稠环脂环,其中环烷基上包含一个或多个杂原子O、N、S或是一个或多个卤素或羟基取代,其中稠环脂环包括1-金刚烷基、2-金刚烷基、二环[2.2.0]戊烷、二环[4.4.0]癸烷等。

R5选自下列基团中的任意一个:C1-8烷基及其异构体;C3-8的环烷基;苯基;杂环芳香基;取代苯基或取代杂环芳香基;苯并杂环基。

优选地,R5选自下列基团中的任意一个:C1-8烷基及其异构体,其中烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔正丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正辛基、正庚基;C3-8的环烷基,环烷基包括单环脂环(包括:环丙基、环丁基、环戊基、环己基及其同分异构体)和稠环脂环,其中环烷基上包含一个或多个杂原子O、N、S或是一个或多个卤素或羟基取代,其中稠环脂环包括1-金刚烷基、2-金刚烷基、二环[2.2.0]戊烷、二环[4.4.0]癸烷等;苯基;杂环芳香基(包括:异唑基、异噻唑基、吡唑基、吡啶基、恶唑基、噻唑、咪唑、三唑、四唑、呋喃基、三嗪基、噻吩、嘧啶、哒嗪、吡嗪);取代苯基或取代杂环芳香基(所述取代的苯基及取代的五元或六元杂环芳香基有一个或多个取代基,包括:F、Cl、Br、I、羟基、甲基、乙基、异丙基、甲氧基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、硝基、-CN、氨基);苯并杂环基,杂环包括C3-6的环烷基,其中环烷基上包含1个或多个杂原子O、N、S或是一个或多个卤素或羟基取代。

选自下列基团中的任意一个:苯基;杂环芳香基;取代苯基或取代杂环芳香基。

优选地,选自下列基团中的任意一个:苯基;杂环芳香基(包括:异唑基、异噻唑基、吡唑基、吡啶基、恶唑基、噻唑、咪唑、三唑、四唑、呋喃基、三嗪基、噻吩、嘧啶、哒嗪、吡嗪);取代苯基或取代杂环芳香基(所述取代的苯基及取代的五元或六元杂环芳香基有一个或多个取代基,包括:F、Cl、Br、I、羟基、甲基、乙基、异丙基、甲氧基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、硝基、-CN、氨基)。

C选自下列基团中的任意一个:-(CH2)q-,其中q=0-3;

优选地,C为

ZBG为锌螯合基团,选自下列基团中的任意一个:其中R6选自下列基团中的任意一个:包括氢,C1-8烷基及其异构体,卤素,硝基,氨基,氰基,二氟甲基,三氟甲基,甲氧基,乙氧基,异丙氧基,二氟甲氧基,三氟甲氧基,羟基;R7选自下列基团中的任意一个:包括C1-8烷基及其异构体,C3-8的环烷基,苯基,杂环芳香基,取代苯基或取代杂环芳香基;R8和R9独立的选自下列基团中的任意一个:包括氢,C1-8烷基及其异构体,或R8和R9连接起来构成3至7个链长的环烷基。

优选地,ZBG为锌螯合基团,选自下列基团中的任意一个:其中R6选自下列基团中的任意一个:包括氢,C1-8烷基及其异构体,其中烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔正丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正辛基、正庚基,卤素,硝基,氨基,氰基,二氟甲基,三氟甲基,甲氧基,乙氧基,异丙氧基,二氟甲氧基,三氟甲氧基,羟基;R7选自下列基团中的任意一个:包括C1-8烷基及其异构体,其中烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔正丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正辛基、正庚基,C3-8的环烷基,环烷基包括单环脂环(包括:环丙基、环丁基、环戊基、环己基及其同分异构体)和稠环脂环,其中环烷基上包含一个或多个杂原子O、N、S或是一个或多个卤素或羟基取代,苯基,杂环芳香基(包括:异唑基、异噻唑基、吡唑基、吡啶基、恶唑基、噻唑、咪唑、三唑、四唑、呋喃基、三嗪基、噻吩、嘧啶、哒嗪、吡嗪),取代苯基或取代杂环芳香基(所述取代的苯基及取代的五元或六元杂环芳香基有一个或多个取代基,包括:F、Cl、Br、I、羟基、甲基、乙基、异丙基、甲氧基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、硝基、-CN、氨基)。R8和R9独立的选自下列基团中的任意一个:包括氢,C1-8烷基及其异构体,其中烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔正丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正辛基、正庚基,或R8和R9连接起来构成3至7个链长的环烷基,其中环烷基上包含一个或多个杂原子O、N、S或是一个或多个卤素或羟基取代。

本发明的还提供了上述式(I)~(II)所示的以吲哚或吲哚类似物为母核结构的酰胺类小分子有机化合物或其水合物的药学上可接受的盐,包括但不限定于这类酰胺类小分子化合物或其水合物与下列酸形成的酸加成盐,其中,所述酸包括盐酸,氢溴酸,硫酸,磷酸,乙酸,酒石酸,水杨酸,柠檬酸,甲磺酸,对甲苯磺酸,乳酸,丙酮酸,马来酸,琥珀酸。

本发明中,所述酰胺类小分子化合物或其水合物可以与放射性、荧光基团或者生物素结合。

本发明所述式(I)~(II)所示的以吲哚或吲哚类似物为母核结构的酰胺类小分子有机化合物或其水合物或药学上可接受的盐,包括:

(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酸甲酯

(6-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)己酰羟胺

(6-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)己酸甲酯

(7-(3-(环辛基甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(3-(环辛基甲酰基))-吲哚基)庚酸甲酯

(7-(2-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(2-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酸甲酯

(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基)-5-氟)-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基)-5-氟)-吲哚基)庚酸甲酯

(7-(3-((4-氯苄基)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(3-((4-氯苄基)甲酰基))-吲哚基)庚酸甲酯

(7-(2-((2-金刚烷胺)甲酰基)-6-溴)-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(2-((2-金刚烷胺)甲酰基)-6-溴)-吲哚基)庚酸甲酯

(7-(2-((2-金刚烷胺)甲酰基)-5-氯)-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(2-((2-金刚烷胺)甲酰基)-5-氯)-吲哚基)庚酸甲酯

(7-(2-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(2-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酸甲酯

(7-(2-((2-金刚烷胺)甲酰基)-5-甲氧基)-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(2-((2-金刚烷胺)甲酰基)-5-甲氧基)-吲哚基)庚酸甲酯

(7-(2-((4-氟苯基)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(2-((4-氟苯基)甲酰基))-吲哚基)庚酸甲酯

(7-(3-(环已基甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(3-(环已基甲酰基))-吲哚基)庚酸甲酯

(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-7-氮杂吲哚基)庚酰羟胺

(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-7-氮杂吲哚基)庚酸甲酯

(7-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酸甲酯

(5-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)戊酰羟胺

(5-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)戊酸甲酯

(7-(3-(环庚基甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(3-(环庚基甲酰基))-吲哚基)庚酸甲酯

(5-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)戊酰羟胺

(5-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)戊酸甲酯

(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基)-5-氯)-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基)-5-氯)-吲哚基)庚酸甲酯

(7-(3-((2,4-二氯苯基)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(3-((2,4-二氯苯基)甲酰基))-吲哚基)庚酸甲酯

(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基)-5-甲氧基)-吲哚基)庚酰羟胺

(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基)-5-甲氧基)-吲哚基)庚酸甲酯

(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚乙酰巯酯

(6-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)已乙酰巯酯

(6-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)已硫醇

(7-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚乙酰巯酯

(6-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)已乙酰巯酯

(7-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚硫醇

(7-(2-((1-金刚烷胺)甲酰基))-3-氮杂吲哚基)庚酰羟胺

N-(2-金刚烷)-1-(4-羟氨甲酰基苄基)吲哚甲酰胺

本发明还提供了一种药物组合物,其含有上述的式(I)~(II)所示的酰胺类小分子有机化合物或其水合物或药学上可接受的盐,以及药学上可接受的载体。所述药物组合物被配制成可注射流体、气雾剂、乳膏、凝胶剂、丸剂、胶囊剂、糖浆剂、透皮贴剂或赋形剂。本发明所述药物组合物可以单独使用或与其他药物联合使用。

本发明还提供了式(I)~(II)所示的酰胺类小分子有机化合物或其水合物或药学上可接受的盐,或所述药物组合物在制备组蛋白去乙酰化酶(HDACs)抑制剂中的应用;优选地,用于制备HDAC1、HDAC6抑制剂。

本发明还提供了式(I)~(II)所示的酰胺类小分子有机化合物或其水合物或药学上可接受的盐,或所述药物组合物在制备促进细胞组蛋白H3和H4及α-Tubulin的去乙酰化的制剂中的应用。

本发明还提供了式(I)~(II)所示的酰胺类小分子有机化合物或其水合物或药学上可接受的盐,或所述药物组合物在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的应用;其中所述化合物或其水合物或药学上可接受的盐,或所述药物组合物用于抑制肿瘤细胞的增殖、生长、浸润和迁移、克隆形成,促进肿瘤细胞的凋亡,其中所述化合物或其水合物或药学上可接受的盐,或所述药物组合物通过阻滞细胞周期来抑制肿瘤细胞增殖。本发明还提供了所述式(I)~(II)所示的酰胺类小分子有机化合物或其水合物或药学上可接受的盐,或所述药物组合物在制备抗肿瘤治疗药物中的应用,其用于诱发获得性耐药导致化疗失败后的抗肿瘤治疗。其中,所述肿瘤包括但不限于肺癌、乳腺癌、表皮癌、直/结肠癌、肝癌、胃癌、前列腺癌、胰腺癌、白血病、卵巢癌、膀胱癌、肾癌、口腔癌、黑色素瘤、头颈癌、子宫癌、脑肿瘤、食管癌、淋巴癌等;优选地,为非小细胞型肺癌,乳腺癌,胃癌,结肠癌和早幼粒细胞白血病;进一步优选地,所述肿瘤细胞为A549细胞(非小细胞型肺癌),MDA-MB-231细胞(乳腺癌),SGC7901(胃癌),HCT116(结肠癌)和HL60细胞(早幼粒细胞白血病)。

本发明还提供式(I)~(II)所示的酰胺类小分子有机化合物或其水合物或药学上可接受的盐,或所述药物组合物作为组蛋白去乙酰化酶抑制剂在制备预防和/或治疗硫氧还蛋白介导的疾病中的应用,其中,所述疾病包括但不限于自身免疫性疾病、过敏、炎症、神经退行性疾病、阿尔兹海默症、腓骨肌萎缩症、创伤性脑损伤、高血压和中风等;优选地,为自身免疫性疾病、过敏或炎症。

本发明还提供了所述以吲哚或吲哚类似物为母核结构的酰胺类小分子有机化合物、水合物或药学上可接受的盐,或所述药物组合物在制备治疗恶性肿瘤的药物中的应用,所述化合物或其水合物或药学上可接受的盐用于抑制恶性肿瘤的生长、转移与复发;其中,所述恶性肿瘤包括但不限于肝癌、肺癌、前列腺癌、皮肤癌、直/结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、白血病、卵巢癌、胃癌、膀胱癌、肾癌、口腔癌、黑色素瘤、头颈癌、子宫癌、脑肿瘤、食管癌、淋巴癌等;优选地,为非小细胞型肺癌,乳腺癌,胃癌,结肠癌和早幼粒细胞白血病;进一步优选地,所述肿瘤细胞为A549细胞(非小细胞型肺癌),MDA-MB-231细胞(乳腺癌),SGC7901(胃癌),HCT116(结肠癌)和HL60细胞(早幼粒细胞白血病)。

在一个实施方案中,所述肿瘤细胞包括但不限于肺癌细胞、乳腺癌细胞、表皮癌细胞、结肠癌细胞、肝癌细胞、胃癌细胞、前列腺癌细胞、胰腺癌细胞、白血病细胞、卵巢癌细胞、膀胱癌细胞、肾癌细胞、口腔癌细胞。

在一个具体实施方案中,所述组合物被配制成可注射流体、气雾剂、乳膏、凝胶剂、丸剂、胶囊剂、糖浆剂、透皮贴剂或赋形剂。在另一具体实施方案中,其中所述的化合物是放射性、荧光基团或者生物素(Biotin)标记的。

本发明还提供了式(I)和式(II)所示的化合物或其水合物或药学上可接受的盐的前药以及药物代谢物,所述前药是指药物经过化学结构修饰后得到的在体外无活性或活性较小、在体内经酶或非酶的转化释放出活性药物而发挥药效的化合物;所述药物代谢物是指具有生理或药理活性的物质。

本发明还提供了式(I)和/或(II)所示的以吲哚或吲哚类似物为母核结构的酰胺类小分子化合物的制备方法,用于这些反应路线的合适的反应条件是本领域已知的,并且反应条件的适当改变,包括替换溶剂和试剂等,在本领域技术人员的能力之内,且所述制备方法对小试、中试及放大具有指导价值。

方法一,如反应式(i)所示:

首先由各类吲哚或吲哚类似物的羧酸与不同的胺进行缩合反应形成相应的酰胺化合物,然后在二甲基甲酰胺中与氢化钠反应,在冰浴条件下加入溴化物,形成相应的中间体。该中间体在适当的溶剂如二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺中与ZBG偶联生成目标化合物,反应完毕后一般用冰水淬灭,用乙酸乙酯或二氯甲烷等溶剂萃取,分别用水和饱和食盐水洗涤,用无水硫酸钠干燥后,减压蒸馏除去溶剂,经柱层析得到最终产物。得到的产物用核磁共振、质谱、高效液相色谱等方法证明化合物结构和纯度。

方法二,如反应式(ii)所示:

首先由各类吲哚或吲哚类似物的羧酸与不同的胺进行缩合反应形成相应的酰胺化合物,再与含末端烯烃的溴化合反应,形成相应的中间体。该中间体通过自由基反应生成相应的乙酰巯酯,再进一步水解得到硫醇。反应完毕后一般用冰水淬灭,用乙酸乙酯或二氯甲烷等溶剂萃取,分别用水和饱和食盐水洗涤,用无水硫酸钠干燥后,减压蒸馏除去溶剂,经柱层析得到最终产物。得到的产物用核磁共振、质谱、高效液相色谱等方法证明化合物结构和纯度。

近年来肿瘤的发病率逐年上升,抗肿瘤药物的研发市场十分广阔。随着分子肿瘤学、分子药理学的飞速发展,恶性肿瘤的药物治疗已经不再拘泥于普通的化学治疗药物,目前的研究焦点正从传统的细胞毒性药物,向针对机制的多环节作用的新型抗肿瘤药物发展。本发明以组蛋白去乙酰化酶为靶点,立足于SAHA的结构特征和抗肿瘤效果,保留了部分关键的结构骨架和官能团,创造性的获得了一类新型的HDAC抑制剂。实验表明,此类化合物不仅在酶水平上有较强活性,在多种肿瘤细胞中都表现出良好的抑制活性。

本发明的创新性主要体现在以下方面:

(1)本发明提供了一类结构新颖的HDAC抑制剂,包括其药学上可接受的盐、溶剂化合物(如水合物)、代谢物、异构体以及前药等,可作为抗肿瘤药物先导化合物和临床药物候选化合物。

(2)本发明化合物涉及的合成路线简单,原料廉价,反应收率较高。

(3)本发明化合物是一类广谱的HDAC抑制剂,与SAHA相比,在酶水平上有较强的活性提高,此外,在体外抗肿瘤增殖的多个实验中,本发明化合物均表现出良好的活性。

(4)化合物BE018对非小细胞肺癌A549的凋亡具有促进作用,且能够抑制肿瘤细胞的克隆。

(5)化合物BE018能阻断非小细胞肺癌A549的细胞周期,从而抑制肿瘤细胞增殖。

附图说明

图1所示为本发明部分化合物抑制组蛋白H3和H4及α-Tubulin的去乙酰化效果图。

图2所示为本发明部分化合物对非小细胞型肺癌A549凋亡的影响图。其中图2A为非小细胞型肺癌的细胞凋亡情况,图2B是聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)裂解实验图。

图3所示为本发明部分化合物对非小细胞型肺癌A549细胞周期的影响图。其中,图3A为细胞周期的示意图,图3B为统计计算图。

图4所示为本发明化合物在不同浓度下对人非小细胞型肺癌细胞A549克隆形成能力影响的效果图。其中,图4A为效果图,图4B为统计结果图。

具体实施方式

结合以下具体实施例和附图,对本发明作进一步的详细说明,本发明的保护内容不局限于以下实施例。在不背离发明构思的精神和范围下,本领域技术人员能够想到的变化和优点都被包括在本发明中,并且以所附的权利要求书为保护范围。

1H-NMR用Bruker 500MHz型仪测定;MS用Bruker MicroTOF-Q LCMS型仪测定,除注明外均为ESI方式;所有溶剂在使用前均经过重新蒸馏,所使用的无水溶剂均是按标准方法干燥处理获得;除说明外,所有反应均是在氩气保护下进行并用TLC跟踪,后处理时均经饱和食盐水洗和无水硫酸镁干燥过程;产品的纯化除说明外均使用硅胶(200-300目)的柱色谱法;所使用的硅胶,包括200-300目和GF254为青岛海洋化工厂或烟台缘博硅胶公司生产。实施例1-1、化合物(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺(BE001)的制备

取3-吲哚甲酸(806mg,5.0mmol)于二甲基甲酰胺(10ml)中,用冰水浴将反应体系冷却后,加入羰基二咪唑(970mg,6.0mmol),在室温下反应45min后,再加入1-金刚烷胺(1513mg,10.0mmol),在120摄氏度条件下回流过夜。将反应体系置室温冷却,分别用乙酸乙酯和水萃取,取有机相蒸干后过硅胶柱,得中间体N-(1-金刚烷胺)-3-吲哚甲酰胺。

将N-(1-金刚烷胺)-3-吲哚甲酰胺(294mg,1.0mmol)溶于二甲基甲酰胺(5ml)中,在冰浴条件下缓慢加入氢化钠(80mg,2,0mmol),至无气泡生成后,缓慢加入7-溴庚酸甲酯(275mg,1.2mmol),在室温下反应30min。用乙酸乙酯和水萃取,取有机相蒸干后过硅胶柱,得中间体化合物(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酸甲酯。

40摄氏度时在盐酸羟胺(2.55g,36.7mmol)的甲醇(10ml)溶液中加入KOH(2.06g,36.7mmol),反应10min后将反应体系置于冰浴中,30min后抽滤得滤液,再将上述酯(80mg,0.18mmol)加入到滤液中,并在此体系中补加KOH(206mg,3.67mmol),在室温下反应2个小时。减压蒸馏蒸干溶剂后用乙酸乙酯和饱和氯化铵萃取后过柱得产物BE001(34mg,43%)。1HNMR(500MHz,DMSO)δ10.32(s,1H),8.64(s,1H),8.11(d,J=8.0Hz,1H),8.09(s,1H),7.50(d,J=8.0Hz,1H),7.17(dd,J=8.0Hz,7.5Hz,1H),7.10(dd,J=8.0Hz,7.5Hz,1H),7.00(s,1H),4.15(t,J=7.0Hz,2H),2.10–2.07(m,9H),1.92(t,J=7.0Hz,2H),1.78–1.68(m,8H),1.48–1.46(m,2H),1.28–1.24(m,4H).

实施例1-2到1-9、表1所示BE系列化合物的制备(具体过程见后文参考)

表1

实施例1-10、化合物(7-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺(BE010)的制备

取3-吲哚甲酸(323mg,2.0mmol),2-金刚烷胺盐酸盐(376mg,2.0mmol),EDC.HCl(384mg,2.0mmol),HOBt(271mg,2.0mmol)于二甲基甲酰胺(5ml)中。反应4h后得中间体。

取中间体(135mg,0.46mmol)于二甲基甲酰胺(5ml),在冰水浴条件下缓慢加入氢化钠(37mg,0.92mmol),至无气泡产生后,加入7-溴庚酸甲酯(123mg,0.55mmol)。30min后得中间体酯。

在40摄氏度时在盐酸羟胺(3.33g,50.7mmol)的甲醇(10ml)溶液中加入KOH(2.83g,50.7mmol),反应10min后将反应体系置于冰浴中,30min后抽滤得滤液,再将上述酯(118mg,0.27mmol)加入到滤液中,并在此体系中补加KOH(333mg,5.07mmol),在室温下反应2个小时后萃取过柱得产物BE010(65mg,55%)。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.32(s,1H),8.64(s,1H),8.27(s,1H),8.11(d,J=8.0Hz,1H),7.52(d,J=8.5Hz,1H),7.28(d,J=7.0Hz,1H),7.19(dd,J=7.0Hz,7.5Hz,1H),7.12(dd,J=7.5Hz,7.5Hz,1H),4.18(t,J=7.0Hz,2H),4.11-4.07(m,1H),2.14-2.12.(m,2H),1.97-1.74(m,14H),1.57-1.54(m,2H),1.50-1.42(m,2H),1.35-1.25(m,4H).

实施例1-10到1-24、表2所示BE系列化合物的制备(具体过程见后文参考)

表2

实施例1-25、(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚乙酰巯酯(BE025)的制备

取N-(1-金刚烷)-3-吲哚甲酰胺(322mg,1.10mmol)于二甲基甲酰胺(5ml),在冰水浴条件下缓慢加入氢化钠(88mg,2.20mmol),至无气泡产生后,加入7-溴-1-庚烯(244mg,1.30mmol)。反应30min后得中间体(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚烯(187mg,44%)。

将此中间体(187mg,0.48mmol)置于1,4-二氧六环(10ml)中,加入AcSH(365mg,4,80mmol)和AIBN(79mg,0.48mmol),在75摄氏度条件下反应1h。在冰浴条件下将反应体系冷却,加入过量的环己烯,将反应液蒸干后过柱层析得产物(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚乙酰巯酯(140mg,63%)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.89(d,J=7.55Hz,1H),7.66(s,1H),7.37(d,J=7.5Hz,1H),7.27-7.23(m,2H),5.71(s,1H),4.12(t,J=7.0Hz,2H),2.85(t,J=7.0Hz,2H),2.33(s,3H),2.25-7.20(m,6H),2.20-2.13(m,3H),1.90-1.82(m,2H),1.80-1.72(m,6H),1.58-1.50(m,2H),1.40-1.30(m,6H).

实施例1-25到1-30、表3所示BE系列化合物的制备(具体过程见后文参考)

表3

实施例2、本发明化合物对HDAC1和HDAC6酶活性的抑制

将MDA-MB231细胞接种在6厘米的细胞培养皿中,当细胞长到80%的密度时,分别加入本发明化合物和SAHA作为对照组,细胞处理24小时后,去培养基,加入预冷的PBS,然后吸取PBS,加入细胞裂解液,刮下细胞至1.5毫升的离心管中,把离心管放在冰上,每五分钟一次涡旋离心管,共涡旋5次后,在4℃离心机12000转离心15分钟,吸取上清至新的预冷离心管中,BCA法测蛋白浓度,含有40微克蛋白的loading缓冲液,在8%-12%的SDS蛋白分离胶上跑胶,待溴酚蓝跑出胶板后停止,在100伏电压下转膜1小时,在4℃摇床孵育对应HDAC1和HDAC6的一抗过夜,用TBST每次10分钟洗三次,然后孵育对应二抗1小时,用TBST每次10分钟洗三次,用ECL试剂盒,曝光显示各目的条带。

结果如表4所示,在一定浓度的情况下,大部分化合物都具有抑制HDAC1和HDAC6酶活性的效果,与阳性对照SAHA相比抑制效果相当或更好。其中,化合物BE023对HDAC6这种亚型具有一定的选择性。

表4

实施例3、本发明化合物细胞活性初筛

初筛活性较好的部分化合物与阳性化合物(SAHA)在不同类型细胞的细胞毒活性测试都在相应的细胞上进行,每100μL的培养基中有3000-10000个细胞,置于96孔板中(Falcon,CA)孵育过夜。待检测细胞分成10份,用梯度浓度的药物处理,每个浓度至少3个复孔在37℃下培养72h,采用MTS方法检测,即每孔加入20μL CellTiter 96Aqueous One Solution孵育0.5-3h,酶标仪490nm处测OD值。50%的待检测细胞生长抑制时的药物浓度即为IC50,应用GraphPadPrism 5.0软件计算药物的IC50。

结果如表5所示,化合物BE018在A549细胞(非小细胞型肺癌),MDA-MB-231细胞(乳腺癌),SGC7901(胃癌),HCT116(结肠癌)和HL60细胞(早幼粒细胞白血病)中均表现出较强的活性。与阳性药物SAHA相比,其活性具有明显的提高。

表5

aA549细胞(非小细胞型肺癌)

bMDA-MB-231细胞(乳腺癌)

cSGC7901(胃癌)

dHCT116(结肠癌)

eHL60细胞(早幼粒细胞白血病)

实施例4:本发明化合物促进组蛋白H3和H4及α-Tubulin的去乙酰化

试验方法同实施例2,将A549细胞接种在6厘米的细胞培养皿中,当细胞长到80%的密度时,分别加入本发明化合物BE018和SAHA、DMSO作为对照组,细胞处理24小时后,去培养基,加入预冷的PBS,然后吸取PBS,加入细胞裂解液,刮下细胞至1.5毫升的离心管中,把离心管放在冰上,每五分钟一次涡旋离心管,共涡旋5次后,在4℃离心机12000转离心15分钟,吸取上清至新的预冷离心管中,BCA法测蛋白浓度,含有40微克蛋白的loading缓冲液,在8%-12%的SDS蛋白分离胶上跑胶,待溴酚蓝跑出胶板后停止,在100伏电压下转膜1小时,在4℃摇床孵育H3,H4乙酰化抗体过夜,用TBST每次10分钟洗三次,然后孵育对应二抗1小时,用TBST每次10分钟洗三次,用ECL试剂盒,曝光显示各目的条带。

结果如图1所示,本发明化合物BE018可有效促进癌细胞内组蛋白的乙酰化,且促乙酰化水平呈现梯度依赖性,因为α微管蛋白是HDAC6的特异性底物,BE018不仅有助于对H3、H4的乙酰化,还可作用于α微管蛋白,表明本发明化合物BE018对HDAC1和HDAC6均有抑制作用。

实施例5:本发明部分化合物对非小细胞型肺癌A549凋亡的影响

在非小细胞肺癌细胞A549中分别加入DMSO,SAHA(3μM,8μM)和本发明化合物BE018(0.3μM,1μM,3μM and 10μM)。48h后收集细胞,用Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit(eBioscience/Bender MedSystems GmbH,Vienna,Austria)对细胞进行分析。利用Annexin V-FITC和碘化丙啶染色,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,利用western印迹法检测A549细胞内的PARP裂解无判定细胞凋亡情况。

结果如图2A所示,随着本发明化合物BE018在A549细胞中浓度的增大,促凋亡效果逐渐增强,且效果明显好于SAHA。另外,聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)裂解实验结果表明(图2B),当BE018浓度达到3μM和10μM时,在A549细胞中检测到了PARP裂解物,这进一步证明了化合物对癌细胞的促凋亡作用。

实施例6:本发明部分化合物对非小细胞型肺癌A549细胞周期的影响

将A549细胞在DMSO,SAHA(8μm)或BE018(0.3μM,1μM,3μM)处理下24小时后,经碘化丙啶(PI)染色后用美国BD流式细胞仪进行细胞周期检测分析。

结果如图3所示。从图中我们可以发现,当SAHA(8μM)作用于A549细胞后,产生细胞周期阻滞,G2/M期延长,且S期减短。从实验结果我们也可以清楚的看到,化合物BE018对细胞周期阻滞呈现浓度梯度依赖性,且效果好于SAHA。所以,实验证明BE018可以通过阻滞细胞周期抑制肿瘤细胞增殖。

实施例7:本发明化合物在不同浓度下对人非小细胞型肺癌细胞A559克隆形成能力影响

实体瘤是由肿瘤细胞通过自身分裂、增殖而最终形成的。因此可在体外实验模型中测试本发明化合物对肿瘤细胞的克隆形成能力的抑制来评价化合物的抗癌效果。

将非小细胞肺癌细胞A549以1x103个/皿的密度接种于35mm培养皿中,培养24h后分组,分别加入不同浓度的待测化合物,使其终浓度分别为0μmol/L,0.1μmol/L,0.3μmol/L,1.0μmol/L,对照组加入等量的DMSO。继续培养,每3天更换一次培养基和相应浓度化合物。7天后,弃去培养基,PBS洗3遍,4%多聚甲醛室温固定10min,1%结晶紫染色10min,自来水冲洗。显微镜下拍照,计算细胞克隆形成数量。

实验结果如图4所示。本发明化合物BE018可以有效抑制A549细胞的群体的形成,且抑制效果呈现浓度梯度依赖性。与仅用DMSO处理的控制组和用0.3μM的SAHA处理的对照组相比,使用BE018浓度仅为0.1μM时,其抑制细胞克隆形成的效果就已相当明显。当BE018的使用浓度加大到1μM是,几乎完全抑制了A549细胞的克隆形成。

实施例1-2、化合物(6-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)己酰羟胺(BE002)的制备

将7-溴庚酸甲酯置换成6-溴己酸甲酯,按制备化合物BE001的方法制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.35(s,1H),8.67(s,1H),8.11(d,J=8.0Hz,1H),8.08(s,1H),7.51(d,J=8.0Hz,1H),7.17(dd,J=7.0Hz,7.0Hz,1H),7.10(dd,J=7.5Hz,7.0Hz,1H),7.00(s,1H),4.17(t,J=7.0Hz,2H),2.14-204(m,9H),2.00-1.95(m,2H),1.80-1.72(m,4H),1.71-1.55(m,6H),1.51-1.46(m,2H).

实施例1-3、化合物(7-(2-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺(BE003)的制备

将3-吲哚甲酸置换成2-吲哚甲酸,按制备化合物BE001的方法相应制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.23(s,1H),8.53(s,1H),7.62(s,1H),7.59(d,J=8.0Hz,1H),7.49(d,J=8.0Hz,1H),7.22(dd,J=7.5Hz,8Hz,1H),7.06(dd,J=7.5Hz,7.5Hz,1H),6.94(s,1H),4.46(t,J=7.0Hz,2H),2.15–1.99(m,9H),1.91(t,J=7.0Hz,2H),1.74–1.58(m,8H),1.47–1.40(m,2H),1.25–1.19(m,4H).

实施例1-4、化合物(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基)-5-氟)-吲哚基)庚酰羟胺(BE004)的制备

将3-吲哚甲酸置换成5-氟-2-吲哚甲酸,按制备化合物BE001的方法相应制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.23(s,1H),8.54(s,1H),7.70(s,1H),7.54(d,J=9.0Hz,1H),7.36(d,J=9.5Hz,1H),7.07(d,J=9.0Hz,1H),6.92(s,1H),4.46(t,J=7.0Hz,2H),2.21-2.01(m,9H),1.91(t,J=7.0Hz,2H),1.75-1.54(m,8H),1.49-1.39(m,2H),1.26-1.17(m,4H).

实施例1-5、化合物(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-7-氮杂吲哚基)庚酰羟胺(BE005)的制备

将3-吲哚甲酸置换成7-氮杂-3-吲哚甲酸,按制备化合物BE001的方法相应制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.32(s,1H),8.64(s,1H),8.41(d,J=9.0Hz,1H),8.30-8.27(m,2H),7.19-7.16(m,2H),4.25(t,J=7.0Hz,2H),2.10-2.07(m,9H),1.92(t,J=7.5Hz,2H),1.85-1.80(m,2H),1.70-1.65(s,6H),1.49-1.44(m,2H),1.30-1.21(m,4H).

实施例1-6、化合物(5-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)戊酰羟胺(BE006)的制备

将7-溴庚酸甲酯置换成5-溴戊酸甲酯,按制备化合物BE001的方法相应制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.35(s,1H),8.67(s,1H),8.11(d,J=8.0Hz,1H),8.08(s,1H),7.51(d,J=8.0Hz,1H),7.17(dd,J=7.0Hz,7.0Hz,1H),7.10(dd,J=7.5Hz,7.0Hz,1H),7.00(s,1H),4.17(t,J=7.0Hz,2H),2.14-204(m,9H),2.00-1.95(m,2H),1.80-1.72(m,2H),1.71-1,55(m,6H),1.51-1.46(m,2H).

实施例1-7、化合物(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基)-5-氯)-吲哚基)庚酰羟胺(BE007)的制备

将3-吲哚甲酸置换成5-氯-3-吲哚甲酸,按制备化合物BE001的方法制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.32(s,1H),8.64(s,1H),8.19(s,1H),8.13(s,1H),7.56(d,J=8.5Hz,1H),7.19(d,J=8.5Hz,1H),7.12(s,1H),4.16(t,J=7.0Hz,2H),2.15-2.00(m,9H),1.92(t,J=7.5Hz,2H),1.82-1.72(m,2H),1.72-1.60(m,6H),1.50-1.40(s,2H),1.31-1.20(m,4H).

实施例1-8、化合物(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基)-5-甲氧基)-吲哚基)庚酰羟胺(BE008)的制备

将3-吲哚甲酸置换成5-甲氧基-3-吲哚甲酸,按制备化合物BE001的方法制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.32(s,1H),8.64(s,1H),8.06(s,1H),7.65(s,1H),7.39(d,J=9.0Hz,1H),6.96(s,1H),6.80(d,J=9.0Hz,1H),4.10(t,J=6.0Hz,2H),3.77(s,3H),2.15-2.05(m,9H),1.92(t,J=6.5Hz,2H),1.80-1.73(m,2H),1.70-1.50(m,6H),1.50-1.42(m,2H),1.30-1.20(m,4H).

实施例1-9、化合物(7-(2-((1-金刚烷胺)甲酰基))-3-氮杂吲哚基)庚酰羟胺(BE009)的制备

将3-吲哚甲酸置换成3-氮杂-2-吲哚甲酸,按制备化合物BE001的方法制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.23(s,1H),8.53(s,1H),7.59(d,J=8.0Hz,1H),7.49(d,J=8.0Hz,1H),7.22(dd,J=7.5Hz,8Hz,1H),7.06(dd,J=7.5Hz,7.5Hz,1H),6.94(s,1H),4.46(t,J=7.0Hz,2H),2.15-1.99(m,9H),1.91(t,J=7.0Hz,2H),1.74-1.58(m,8H),1.47-1.40(m,2H),1.25-1.19(m,4H).

实施例1-10、化合物(7-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺(BE010)的制备

取3-吲哚甲酸(323mg,2.0mmol),2-金刚烷胺盐酸盐(376mg,2.0mmol),EDC·HCl(384mg,2.0mmol),HOBt·HCl(271mg,2.0mmol)于二甲基甲酰胺(5ml)中。反应在室温下搅拌4h,用乙酸乙酯和水萃取,取有机相蒸干后过柱层析,得中间体N-(2-金刚烷烃)-3-吲哚甲酰胺(302mg,51%)。

取N-(2-金刚烷烃)-3-吲哚甲酰胺(135mg,0.46mmol)于二甲基甲酰胺(5ml),在冰水浴条件下缓慢加入氢化钠(37mg,0.92mmol),至无气泡产生后,加入7-溴庚酸甲酯(123mg,0.55mmol)。30min后用水和乙酸乙酯萃取,取有机相蒸干后过柱层析得中间体(7-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酰甲酯(118mg,55%)。

在40摄氏度时在盐酸羟胺(3.33g,50.7mmol)的甲醇(10ml)溶液中加入KOH(2.83g,50.7mmol),反应10min后将反应体系置于冰浴中,30min后抽滤得滤液,再将上述酯(118mg,0.27mmol)加入到滤液中,并在此体系中补加KOH(333mg,5.07mmol),在室温下反应2个小时。减压蒸馏蒸干溶剂后用乙酸乙酯和饱和氯化铵萃取后过柱得产物BE010(65mg,55%)。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.32(s,1H),8.64(s,1H),8.27(s,1H),8.11(d,J=8.0Hz,1H),7.52(d,J=8.5Hz,1H),7.28(d,J=7.0Hz,1H),7.19(dd,J=7.0Hz,7.5Hz,1H),7.12(dd,J=7.5Hz,7.5Hz,1H),4.18(t,J=7.0Hz,2H),4.11-4.07(m,1H),2.14-2.12.(m,2H),1.97-1.74(m,14H),1.57-1.54(m,2H),1.50-1.42(m,2H),1.35-1.25(m,4H).

实施例1-11、化合物(7-(2-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺(BE011)的制备

将3-吲哚甲酸置换成2-吲哚甲酸,按制备化合物BE010的方法制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.30(s,1H),8.64(s,1H),8.25(s,1H),8.10(s,1H),7.49(s,1H),7.26(s,1H),7.20-7.05(m,2H),4.26-4.05(m,3H),2.20-2.05(m,2H),1.99-1.70(m,14H),1.38-1.17(m,8H).

实施例1-12、化合物(7-(3-(环辛基甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺(BE012)的制备

将2-金刚烷胺盐酸盐置换成环辛胺,按制备化合物BE010的方法制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.26(s,1H),8.55(s,1H),8.14(d,J=8.0Hz,1H),8.06(s,1H),7.52(d,J=8.5Hz,1H),7.50(s,1H),7.18(did,J=7.0Hz,8.0Hz,1H),7.11(dd,J=7.5Hz,7.0Hz,1H),4.17(t,J=7.0Hz,2H),4.07-4.02(m,1H),1.94(t,J=7.5Hz,2H),1.78-1.72(m,4H),1.70-1.60(m,4H),1.61-1.45(m,8H),1.31-1.25(m,6H).K

实施例1-13、化合物(7-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲唑基)庚酰羟胺(BE013)的制备

将3-吲哚甲酸置换成3-吲唑羧酸,按制备化合物BE010的方法制备。1HNMR(500MHz,DMSO)δ10.32(s,1H),8.66(s,1H),8.14(d,J=8.2Hz,1H),7.78(d,J=8.6Hz,1H),7.56(d,J=7.6Hz,1H),7.46(dd,J=7.4Hz,8.2Hz,1H),7.28(dd,J=7.5Hz,8.6Hz,1H),4.48(t,J=7.0Hz,2H),2.04–1.73(m,16H),1.69–1.56(m,2H),1.52–1.39(m,2H),1.37–1.17(m,5H).

实施例1-14、化合物(7-(2-((2-金刚烷胺)甲酰基))-3-氮杂吲哚基)庚酰羟胺(BE014)的制备

将3-吲哚甲酸置换成3-氮杂-2-吲哚甲酸,按制备化合物BE010的方法制备。1HNMR(400MHz,DMSO)δ10.32(s,1H),8.65(s,1H),8.32(s,1H),7.89–7.57(m,2H),7.49–7.21(m,2H),4.74–4.53(m,2H),4.18–3.99(m,1H),2.09–1.37(m,24H).

实施例1-15、化合物(7-(3-((4-氯苄基)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺(BE015)的制备

将2-金刚烷胺盐酸盐置换成对氯苄胺,按制备化合物BE010的方法制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.26(s,1H),8.55(s,1H),8.38(t,J=6.0Hz,1H),8.16(d,J=8.0Hz,1H),8.07(s,1H),7.53(d,J=8.0Hz,1H),7.37(m,4H),7.21(dd,J=7.5Hz,8.0Hz,1H),7.14(dd,J=7.5Hz,7.0Hz,1H),4.47(d,J=6.0Hz,2H),4.19(t,J=7.0Hz,2H),1.93(t,J=7.0Hz,2H),1.85-1.74(m,2H),1.53-1.43(m,2H),1.35-1.25(m,4H).

实施例1-16、化合物(7-(2-((2-金刚烷胺)甲酰基)-6-溴)-吲哚基)庚酰羟胺(BE016)的制备

将3-吲哚甲酸置换成6-溴-2-吲哚甲酸,按制备化合物BE010的方法制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.30(s,1H),8.62(s,1H),8.15(d,J=7.0Hz,1H),7.82(s,1H),7.59(d,J=8.5Hz,1H),7.21(d,J=8.5Hz,1H),7.09(s,1H),4.46(t,J=7.0Hz,2H),4.05-4.03(m,1H),2.13-2.11(m,2H),2.01-1.98(m,2H),1.92-1.79(m,7H),1.74-1.71(m,2H),1.66-1.37(m,6H),1.29-1.11(m,5H).

实施例1-17、化合物(7-(2-((2-金刚烷胺)甲酰基)-5-氯)-吲哚基)庚酰羟胺(BE017)的制备

将3-吲哚甲酸置换成5-氯-2-吲哚甲酸,按制备化合物BE010的方法制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.30(s,1H),8.63(s,1H),8.19(d,J=7.0Hz,1H),7.70(s,1H),7.58(d,J=8.5Hz,1H),7.24(d,J=8.5Hz,1H),7.06(s,1H),4.47(t,J=7.0Hz,2H),4.07-4.00(m,1H),2.14-2.09(m,2H),2.05-1.98(m,2H),1.90-1.80(m,7H),1.73-1.70(m,2H),1.62-1.58(m,2H),1.54-1.52(m,2H),1.45-1.38(m,2H),1.25-1.16(m,5H).

实施例1-18、化合物(7-(2-((2-金刚烷胺)甲酰基)-5-甲氧基)-吲哚基)庚酰羟胺(BE018)的制备

将3-吲哚甲酸置换成5-甲氧基-2-吲哚甲酸,按制备化合物BE010的方法制备。1H NMR(500MHz,DMSO):δ10.30(s,1H),8.63(s,1H),7.99(s,1H),7.45(s,1H),7.14-6.82(m,3H),4.51-4.35(m,2H),4.10-3.98(m,1H),3.77(s,3H),2.14-1.23(m,24H).

实施例1-19、化合物(7-(2-((4-氟苯基)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺(BE019)的制备

将2-金刚烷胺盐酸盐置换成对氯苯胺,按制备化合物BE010的方法制备。1HNMR(500MHz,DMSO):δ10.40(s,1H),10.30(s,1H),8.63(s,1H),7.81-7.78(m,2H),7.70(d,J=8.0Hz,1H),7.59(d,J=8.5Hz,1H),7.31(d,J=8.0Hz,1H),7.29(s,1H),7.21(m,2H),7.13(dd,J=8.0Hz,7.0Hz,1H),4.55(t,J=7.0Hz,2H),1.90(t,J=7.5Hz,2H),1.74-1.65(m,2H),1.47-1.39(m,2H),1.31-1.17(m,4H).

实施例1-20、化合物(7-(3-(环已基甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺(BE020)的制备

将2-金刚烷胺盐酸盐置换成环己胺,按制备化合物BE010的方法制备。1HNMR(500MHz,DMSO):δ10.32(s,1H),8.64(s,1H),8.14(d,J=8.0Hz,1H),8.06(s,1H),7.59(d,J=8.0Hz,1H),7.51(d,J=8.5Hz,1H),7.18(dd,J=7.5Hz,7.5Hz 1H),7.11(dd,J=8.0Hz,7.0Hz 1H),4.17(t,J=7.0Hz,2H),3.80-3.74(m,1H),1.92(t,J=7.5Hz,2H),1.86-1.84(m,2H),1.79-1.74(m,4H),1.68-1.59(m,2H),1.50-1.43(m,2H),1.33-1.24(m,8H).

实施例1-21、化合物(5-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)戊酰羟胺(BE021)的制备

将7-溴庚酸甲酯置换成5-溴戊酸甲酯,按制备化合物BE010的方法制备。1HNMR(500MHz,DMSO):δ10.35(s,1H),8.67(s,1H),8.26(s,1H),8.10(d,J=7.5Hz,1H),7.53(d,J=8.0Hz,1H),7.29(d,J=7.0Hz,1H),7.19(dd,J=7.0Hz,7.0Hz,1H),7.13(dd,J=7.5Hz,7.0Hz,1H),4.20(t,J=7.0Hz,2H),4.09-4.01(m,1H),2.14-2.12(m,2H),2.00-1.97(m,5H),1.89-1.73(m,9H),1.58-1.47(m,4H).

实施例1-22、化合物(7-(3-(环庚基甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺(BE022)的制备

将2-金刚烷胺盐酸盐置换成环庚胺,按制备化合物BE010的方法制备。1HNMR(500MHz,DMSO)δ10.32(s,1H),8.64(s,1H),8.14(d,J=8.0Hz,1H),8.07(s,1H),7.62(d,J=8.0Hz,1H),7.51(d,J=8.0Hz,1H),7.18(dd,J=7.5Hz,7.5Hz,1H),7.11(dd,J=7.5Hz,7.0Hz,1H),4.17(t,J=7.0Hz,2H),4.02-3.93(m,1H),1.97-1.83(m,4H),1.82-1.74(m,2H),1.70-1.42(m,11H),1.30-1.24(m,5H).

实施例1-23、化合物N-(2-金刚烷)-1-(4-羟氨甲酰基苄基)吲哚甲酰胺(BE023)的制备

将7-溴庚酸甲酯置换成4-溴甲基苯甲酸甲酯,按制备化合物BE010的方法制备。1HNMR(500MHz,DMSO)δ11.15(s,1H),9.01(s,1H),8.39(s,1H),8.12(d,J=8.5Hz,1H),7.70(d,J=8.0Hz,2H),7.47(d,J=8.0Hz,1H),7.38(d,J=7.0Hz,1H),7.30(d,J=8.0Hz,2H),7.18-7.10(m,2H),5.52(s,2H),4.13-4.05(m,1H),2.17-2.10(m,2H),2.01-1.96(m,2H),1.90-1.77(m,6H),1.77-1.71(m,2H),1.60-1.53(m,2H).

实施例1-24、化合物(7-(3-((2,4-二氯苯基)甲酰基))-吲哚基)庚酰羟胺(BE024)的制备

将2-金刚烷胺盐酸盐置换成2,4-二氯苯胺,按制备化合物BE010的方法制备。1HNMR(500MHz,DMSO)δ10.32(s,1H),9.42(s,1H),8.64(s,1H),8.35(s,1H),8.16(d,J=7.5Hz,1H),7.80(d,J=8.5Hz,1H),7.71(s,1H),7.60(d,J=8.0Hz,1H),7.46(d,J=8.0Hz,1H),7.27-7.18(m,2H),4.25(m,2H),1.93(t,J=6.5Hz,2H),1.84-1.78(m,2H),1.50-1.48(m,2H),1.30-1.24(m,4H).

实施例1-25、化合物(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚乙酰巯酯(BE025)的制备

取N-(1-金刚烷)-3-吲哚甲酰胺(322mg,1.10mmol)于二甲基甲酰胺(5ml),在冰水浴条件下缓慢加入氢化钠(88mg,2.20mmol),至无气泡产生后,加入7-溴-1-庚烯(244mg,1.30mmol)。30min后用水和乙酸乙酯萃取,取有机相蒸干后过柱层析得中间体(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚烯(187mg,44%)。

取(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚烯(187mg,0.48mmol)于1,4-二氧六环(10ml)中,加入AcSH(365mg,4,80mmol)和AIBN(79mg,0.48mmol),在75摄氏度条件下反应1h。在冰浴条件下将反应体系冷却,加入过量的环己烯,用水和乙酸乙酯萃取,取有机相蒸干后过柱层析得产物(7-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚乙酰巯酯(140mg,63%)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.89(d,J=7.55Hz,1H),7.66(s,1H),7.37(d,J=7.5Hz,1H),7.27-7.23(m,2H),5.71(s,1H),4.12(t,J=7.0Hz,2H),2.85(t,J=7.0Hz,2H),2.33(s,3H),2.25-7.20(m,6H),2.20-2.13(m,3H),1.90-1.82(m,2H),1.80-1.72(m,6H),1.58-1.50(m,2H),1.40-1.30(m,6H).

实施例1-26、化合物(6-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)己乙酰巯酯(BE026)的制备

将7-溴1-庚烯置换成6溴-1-已烯,按制备化合物BE025的方法制备。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.89(d,J=5.8Hz,1H),7.74(s,1H),7.39(d,J=6.0Hz,1H),7.28-7.30(m,2H),6.34(s,1H),4.37-4.35(m,1H),4.14(t,J=7.0Hz,2H),2.84(t,J=7.0Hz,2H),2.32(s,3H),2.12-2.09(m,2H),1.95-1.73(m,14H),1.58-1.50(m,2H),1.41-1.33(m,4H).

实施例1-27、化合物(7-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚乙酰巯酯(BE027)的制备

将1-金刚烷胺置换成2-金刚烷胺,按制备化合物BE025的方法制备。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.27(s,1H),8.10(d,J=8.0Hz,1H),7.51(d,J=8.0Hz,1H),7.28(d,J=7.0Hz,1H),7.18(dd,J=7.5Hz,7.0Hz,1H),7.11(dd,J=7.5Hz,7.5Hz,1H),4.17(t,J=7.0Hz,2H),4.12-4.05(s,1H),2.79(t,J=7.0Hz,2H),2.30(s,3H),2.15-2.10(m,2H),2.00-1.94(m,2H),1.90-1.75(m,7H),1.75-1.70(m,2H),1.60-1.50(s,2H),1.49-1.43(m,2H),1.35-1.15(m,7H).

实施例1-28、化合物(6-(3-((1-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)己乙酰巯酯(BE028)的制备

将7-溴1-庚烯置换成6溴-1-已烯,按制备化合物BE025的方法制备。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.13-8.08(m,2H),7.50(d,J=8.0Hz,1H),7.17(dd,J=7.5Hz,7.5Hz,1H),7.10(dd,J=7.5Hz,7.0Hz,1H),7.00(s,1H),4.15(t,J=7.0Hz,2H),2.81(t,J=7.0Hz,2H),2.31(s,3H),1.92-1.73(m,2H),1.72-1.65(m,6H),1.52-1.45(m,2H),1.38-1.32(m,2H),1.30-1.22(m,2H).

实施例1-29、化合物(6-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)己乙酰巯醇(BE029)的制备

取(6-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)己乙酰巯酯(428mg,0.95mmol)于EtOH(10ml)中,加入氢氧化钠(380mg,9.50mmol),反应过夜后蒸干过柱得产物(268mg,66%)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.91(d,J=8.0Hz,1H),7.77(s,1H),7.42(d,J=6.0Hz,1H),7.32-7.29(m,2H),6.36(s,1H),4.37(d,J=8.0Hz,1H),4.17(t,J=7.0Hz,2H),2.52(q,J=7.5Hz,2H),2.16-2.15(m,2H),2.00-1.77(m,14H),1.64-1.60(m,2H),1.48-1.42(m,2H),1.36-1.32(m,2H).

实施例1-30、化合物(7-(3-((2-金刚烷胺)甲酰基))-吲哚基)庚乙酰巯醇(BE030)的制备

将6溴-1-已烯置换成7-溴1-庚烯,按制备化合物BE029的方法制备.1HNMR(500MHz,DMSO)δ8.28(s,1H),8.11(d,J=8.0Hz,1H),7.53(d,J=8.0Hz,1H),7.30(d,J=7.0Hz,1H),7.19(dd,J=7.5Hz,7.5Hz,1H),7.12(dd,J=7.5Hz,7.5Hz,1H),4.19(t,J=7.0Hz,2H),4.10-4.07(m,1H),2.46-2.41(m,2H),2.14-2.11(m,2H),1.86-1.83(m,2H),1.80-1.73(m,8H),1.79-1.73(m,2H),1.57-1.48(m,4H),1.34-1.30(m,6H).

本发明保护内容不局限于以上实施例。在不背离发明构思的精神和范围下,本领域技术人员能够想到的变化和优点都被包括在本发明中,并且以所附的权利要求书为保护范围。

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