用于治疗代谢疾病和癌症的新的线粒体解偶联剂的制作方法

本申请要求于2016年5月18日提交的美国临时申请no.62/338,190，名称为“novelmitochondrialuncouplersfortreatmentofmetabolicdiseasesandcancer”的权益和优先权，其内容以其整体在此引入作为参考。

发明领域

本发明涉及苯甲酰胺化合物，该化合物的前药，包含该化合物和/或前药的药物组合物和使用该化合物、前药和药物组合物治疗与脂类代谢相关的疾病(包括糖尿病)、非酒精性脂肪性肝疾病(nafld)、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、异常细胞增殖引起的疾病(包括癌症和牛皮癣)和传染病的方法。

技术实现要素：

各种实施方案提供用于预防和治疗代谢疾病、癌症、牛皮癣和传染病的化合物、组合物和方法。本文所述的化合物显示线粒体解偶联、活化ampk和抑制细胞增殖的活性。

本发明一些实施方案涉及式(i)的化合物:

或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药,

其中,

r^1a选自氢；任选取代的c1-c6烷基；任选取代的c2-c6烯基；任选取代的c2-c6炔基；任选取代的c3-c10环烷基；((c1-c6烷基磺酰基)氨基)c1-c6烷基；任选取代的c3-c10杂环基；任选取代的c3-c10芳基；任选取代的c3-c10杂芳基；c1-c6全氟烷基；卤素；氰基；硝基；任选取代的氨基；-c(o)nhr⁵；-c(o)nr⁵r⁶；-c(o)h；-c(o)r⁷；-c(o)oh；和-c(o)or⁵；

r^1b、r^1c和r^1d各自独立地选自：氢；c1-c6全氟烷基；c1-c6烷基；c2-c6烯基；c1-c6炔基；c3-c10环烷基；氰基和卤素；

r²选自氢；单糖；二糖；c(o)nr⁵r⁶；c(o)r⁷；-p(o)(oh)2；和-p(o)(ona)2；其中所述单糖和二糖连接至位于异头中心处的酚氧以形成糖苷键；

r³为氢，或者，r²和r³一起为羰基，且与它们连接的原子一起形成6元杂环状氨基甲酸酯基；

r^4a、r^4b、r^4c和r^4d各自独立地选自氢；c1-c6全氟烷基；氰基；硝基；-chf2、c1-c6烷基、-oc1-c6烷基、-ocf3、c3-c10环烷基、-cf3、-so2ch3和卤素；

r⁵和r⁶各自独立地选自任选取代的c1-c6烷基；和c1-c6烷基磺酰基；或者r⁵和r⁶连同它们连接的氮一起形成任选取代的c3-c6杂环基；且

r⁷选自：任选取代的(烷基氨基)c1-c6烷基；和任选取代的c3-c6杂环基。

一些实施方案涉及式(iii)的化合物

或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药,

其中,

r⁸选自：c(o)nr⁹r¹⁰和c(o)r¹¹；

r⁹和r¹⁰各自独立地选自任选取代的c1-c6烷基；和c1-c6烷基磺酰基；或者r⁹和r¹⁰连同它们连接的氮一起形成任选取代的c3-c6杂环基；

r¹¹选自：任选取代的(烷基氨基)c1-c6-烷基；和任选取代的c3-c6杂环基；且

r¹²选自：c1-6全氟烷基；卤素；氰基；和硝基。

一些实施方案涉及式(iv)的化合物

或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药,

其中,

r¹³和r¹⁴各自独立地选自任选取代的c1-c6烷基；和c1-c6烷基磺酰基；或者r¹³和r¹⁴连同它们连接的氮一起形成任选取代的c3-c6杂环基；且

r¹⁵选自c1-c6-全氟烷基；硝基；卤素和氰基。

本文的实施方案描述了药物组合物，其包含：根据上述实施方案任一个的化合物，或其药学上可接受的盐或前药；和药学上可接受的载体或稀释剂。

一些实施方案描述了在受试者中治疗特征为高血糖或胰岛素抵抗或组织中脂质异常积聚的代谢疾病或障碍的方法，其中高血糖或胰岛素抵抗或组织中脂质异常积聚为症状，包括向受试者给药治疗有效量的本文所述的化合物或药物组合物。

一些实施方案描述了在受试者中治疗癌症或增生的方法，包括向受试者给药治疗有效量的本文所述的化合物或药物组合物。

一些实施方案描述了用于代谢疾病或障碍的长期疾病处理，或用于癌症的长期疾病处理的方法，包括向需要该长期处理的受试者给予有效量的本文所述的化合物或药物组合物。

一些实施方案描述了在受试者中治疗或预防皮肤病学疾病的方法，包括向受试者给药治疗有效量的本文所述的化合物或药物组合物。

一些实施方案描述了在受试者中治疗或预防细菌感染的方法，包括向受试者给药治疗有效量的本文所述的化合物或药物组合物。

一些实施方案描述了本文所述的化合物在制备用于治疗代谢疾病或障碍的药物中的用途。在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍可选自糖尿病、肥胖症、非酒精性脂肪性肝疾病、酒精性脂肪性肝疾病、血脂障碍、其中高血糖或胰岛素抵抗或组织中异常脂质聚集为症状的疾病、或相关疾病或并发症。在一些实施方案中，本文所述的化合物可用于制备治疗癌症、其中细胞增殖(增生)为症状的疾病、或癌症或增生相关的并发症的药物。在一些实施方案中，本文所述的化合物可用于制备传染病药物。

附图描述

图1显示了在海马细胞的测定中线粒体解偶联剂的典型ocr(耗氧率)曲线。线a表示加入寡霉素；线b表示添加测试化合物。线c表示添加电子传递链抑制剂抗霉素/鱼藤酮。

图2显示了在用对线粒体解偶联有效的浓度的所示实施例化合物处理后磷酸化ampk(图2a，活化)和磷酸化acc(活性抑制，图2b)的增加。

图3a-c显示实施例化合物(化合物28)对血糖(a)、血液胰岛素(b)、胰岛素耐受(c)和脂肪肝(d)的影响。

图4显示了实施例化合物(化合物28)对细胞周期进展的影响。用化合物28(2.5μm)处理panc2(上图)或panc1(下图)细胞48小时，并通过流式细胞术测定细胞周期图。

图5显示了实施例化合物对胰腺癌肝转移的影响。在nod-scid-γ小鼠的脾脏部位注射250,000个panc2细胞。在图5a中，未处理的小鼠具有大量肝肿瘤转移。图5b，测试化合物处理的小鼠，显示很少或没有肝肿瘤转移。

图6是测试化合物(化合物28)对胰腺癌肝转移的影响的量化。测量并比较肿瘤体积(左)和数量(右)。**，p<0.01；***，p<0.001；每组n＝6，学生t检验。

图7显示了表v，实施例化合物对一系列细菌的mic(最小抑制浓度)：mic分类为：***≤1.0μg/ml；**>1.0μg/ml但<2.0μg/ml；*≥2.0μg/ml但≤8.0μg/ml，或具有mic浓度(μg/ml数)。万古霉素的mic列为参考。

发明详述

线粒体是细胞代谢的中心，其提供维持生物活性的能量和用于真核细胞生物合成的代谢中间体。线粒体功能对细胞氧化葡萄糖和脂质以及细胞增殖至关重要。线粒体功能的修饰可以有效地改变脂质和葡萄糖的氧化速率，并影响人和动物的正常细胞、异常细胞如癌细胞和寄生生物细胞的细胞增殖。因此，修饰线粒体活性的化合物可用于治疗与葡萄糖或脂质代谢相关的疾病、与细胞增殖有关的疾病和感染性生物的疾病。

葡萄糖和脂质的线粒体代谢如下所述。葡萄糖以及脂质如甘油三酯是细胞中最重要的燃料。葡萄糖首先通过糖酵解代谢成丙酮酸。然后，丙酮酸进入线粒体，在其中转化为乙酰辅酶a。类似地，甘油三酸酯首先被水解成甘油和脂肪酸，其进入线粒体，在那里它们被氧化成乙酰辅酶a。在线粒体基质中，来自葡萄糖代谢以及脂质代谢的乙酰辅酶a然后通过tca循环进行氧化。从氧化反应释放的能量以nadh和fadh2分子中高能电子的形式储存。然后来自nadh和fadh2的电子进入线粒体电子转运链，其定位在线粒体的内膜上。随着电子通过电子转运链传播并达到电子供体氧分子，释放能量并用于将质子从线粒体基质泵送穿过线粒体内膜，从而跨膜形成质子梯度。最后，质子通过fof1-atp合酶穿过线粒体内膜，并驱使可以被各种细胞机构直接使用的能量分子atp的合成。在正常条件下，线粒体氧化提供超过90％的细胞atp。此外，线粒体氧化提供并调节生物合成大分子如rna、dna、脂质所需的代谢中间体的可用性。因此，线粒体代谢在葡萄糖和脂质氧化控制以及支持细胞增殖中起重要作用。

在通常情况下，乙酰辅酶a的线粒体氧化和atp合成响应于细胞能量需要而偶联。然而，线粒体氧化可以通过线粒体解偶联剂从atp合成中解偶联。线粒体解偶联剂促进质子向内转移穿过线粒体内膜(不通过fof1-atp合酶)，从而消散或降低质子梯度而不产生atp。线粒体解偶联可以通过蛋白质线粒体解偶联剂如ucp1蛋白或化学解偶联剂如dnp(二硝基苯酚)介导。因此，线粒体解偶联剂通常导致以下效果：(1)降低线粒体能量效率，(2)增加脂质和葡萄糖氧化，(3)激活ampk酶，(4)改变细胞增殖所需的生物质生物合成的代谢中间体的可用性。因此，线粒体解偶联减少细胞内脂质聚集，并抑制细胞增殖。

代谢疾病是以异常葡萄糖和/或脂质代谢症状为特征的疾病家族，其具有多种组织细胞的细胞内脂质异常积累和胰岛素抵抗的共同起因。更具体地，所提及的代谢疾病包括但不限于：肥胖症(脂肪组织细胞中过度脂肪积累)、代谢综合征(外周组织中的胰岛素抵抗，通常由肝脏、肌肉或脂肪组织的细胞中的异常脂肪积累引起)、2型糖尿病(通常由肝脏、肌肉或脂肪组织细胞中的异常脂肪积累引起的外周组织中的胰岛素抵抗和由胰岛素抵抗引起的高血糖)、由2型糖尿病、酒精性脂肪肝病引起的多种已知并发症(肝细胞中的异常脂质积累)、非酒精性肝脏脂肪肝病的多个阶段(或nafld，由肝细胞中异常脂质积累引起，所述阶段包括肝脂肪变性、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、肝硬化和nafld诱导的肝细胞癌(hcc))，和各种类型的血脂异常(在肝脏、肌肉、心脏的细胞中的异常脂质积累，这是由于脂质从脂肪组织再分配到其他组织)。降低能量效率和促进无效脂质氧化的线粒体解偶联剂将有效减少脂质的细胞积累。此外，最近的研究已经证明脂质在肝脏和肌肉中的异常细胞内积累以及脂肪组织中脂质的过度积累是各种形式的代谢疾病中胰岛素抵抗的根本原因(samuelv.t.，等人，lancet，2010，375:2267-77)。实际上，最近的研究表明化学线粒体解偶联剂在预防和治疗代谢疾病方面是有效的(tao,h.,zhang,y.,zeng,x.,shulman,g.i.,andjin,s.naturemedicine20:1263-1269,2014；perryrj,zhangd,zhangxm,boyerjl,shulmangi.,science2015mar13；347(6227):1253-6)，导致：(1)减少包括脂肪组织在内的各种组织中的脂质积累，(2)胰岛素抵抗降低，(3)血糖浓度降低，(4)血糖控制改善和疾病进展减缓。重要的是，使用线粒体解偶联剂治疗代谢疾病具有许多吸引人的特征；例如，由于它们校正了胰岛素抵抗(异常脂质积累)的原因，所以这种方法可以为一些代谢疾病提供治愈。尽管有令人兴奋的优势，目前没有解偶联药物已被批准用于临床使用或临床试验。发现具有有利的药物动力学和药效学特性的组合的新型化学线粒体解偶联剂对于开发用于治疗上述代谢疾病的线粒体解偶联药物是至关重要的。

癌症是一类疾病家族，其特征在于由致癌基因和肿瘤抑制基因中的遗传突变的组合产生的各种组织类型的细胞的不受控制的生长和增殖。众所周知，肿瘤发生的一个要求是细胞代谢的改变。对于快速增殖和生长，癌细胞不仅需要能量，而且还需要用于生物合成大分子如dna和rna的构建块(代谢中间体)。癌细胞中的代谢以这样的方式发生改变，它可以支持能量需求和各种代谢中间体(构建块)对大分子生物合成的巨大需求(vanderheidenmg,cantleylc,thompsoncb.science.2009may22；324(5930):1029-33)。因此，大多数癌症表现出独特的细胞代谢模式，称为warburg效应或需氧糖酵解，其防止葡萄糖或脂质的完全氧化，并允许生产用于大分子生物合成的葡萄糖代谢物(vanderheidenmg，等人，同上)。线粒体解偶联会降低能量效率，从而剥离癌细胞的能量需求。此外，线粒体解偶联促进葡萄糖和脂质的完整线粒体氧化，从而减少细胞增殖所需的大分子生物合成所必需的代谢中间体的产生。此外，线粒体解偶联可导致ampk活化，这是抑制细胞生长的已知事件。事实上，以前的文献显示线粒体解偶联剂表现出抗癌活性(94697ep(315500)_wo_2004_006906))。通过线粒体解偶联靶向癌细胞将剥夺对癌细胞生长和增殖绝对必需的能量以及生物合成代谢中间体。再次，尽管新的抗癌策略具有吸引力的特征，但目前尚未批准用于癌症治疗的线粒体解偶联药物且没有一种已知通过线粒体解偶联的机理作用的药物处于临床试验。发现具有有利的药代动力学和药效学特性的组合的新型化学线粒体解偶联剂对于开发治疗各种类型的癌症和其它疾病的药物是至关重要的。

异常细胞增殖也是许多其他病理状况的根本原因，包括但不限于皮肤病如牛皮癣和湿疹。例如，牛皮癣和湿疹是免疫疾病，其中免疫细胞异常渗透到皮肤，在那里它们刺激周围表皮干细胞的增殖。这些疾病的症状的特征在于过度的表皮细胞增殖，其类似于伤口愈合。因此，化学解偶联剂可用于控制异常细胞增殖，从而治疗这些疾病。

此外，寄生生物细胞的线粒体解偶联可以阻止这些感染因子的增殖，因此线粒体解偶联是治疗人和动物传染病的有效方法。事实上，线粒体解偶联剂氯硝柳胺是fda批准的用于治疗人类扁虫感染的驱虫药。此外，其他类型的线粒体解偶联剂如羟氯扎胺(oxyclonazide)是用于治疗牛和马等家畜寄生虫的驱虫药。因此，该专利中描述的化合物可有效治疗非病毒寄生虫的感染性疾病。

线粒体是与宿主细胞形成共生关系的古细菌。细菌质膜含有与线粒体相似的电子传递链和atp合酶，因此影响线粒体解偶联的化合物可能是细菌生长的有用抑制剂。

各种实施方案提供具有线粒体解偶联活性的化合物。这些化合物可用于预防和治疗细菌感染；皮肤病学疾病；非病毒寄生物；代谢疾病或障碍和癌症，包括，但不限于，肥胖症、代谢综合征、2型糖尿病、酒精性脂肪性肝疾病、非酒精性脂肪性肝疾病、血脂障碍、各种组织起源的原发性癌和转移性癌症。

化合物

在一个实施方案中，本发明描述了式(i)的化合物:

或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。

式(i)的取代基r^1a选自氢；任选取代的c1-c6烷基；任选取代的c2-c6烯基；任选取代的c2-c6炔基；任选取代的c3-c10环烷基；((c1-c6烷基磺酰基)氨基)c1-c6烷基；任选取代的c3-c10杂环基；任选取代的c3-c10芳基；任选取代的c3-c10杂芳基；c1-c6全氟烷基；卤素；氰基；硝基；任选取代的氨基；-c(o)nhr⁵；-c(o)nr⁵r⁶；-c(o)h；-c(o)r⁷；-c(o)oh；和-c(o)or⁵。

式(i)的取代基r^1b、r^1c和r^1d各自独立地选自：氢；c1-c6全氟烷基；c1-c6烷基；c2-c6烯基；c1-c6炔基；c3-c10环烷基；氰基和卤素。

式(i)的取代基r²选自氢；单糖；二糖；c(o)nr⁵r⁶；c(o)r⁷；-p(o)(oh)2；和-p(o)(ona)2；其中所述单糖和二糖连接至位于异头中心处的酚氧以形成糖苷键。取代基r⁵和r⁶各自独立地选自任选取代的c1-c6烷基；和c1-c6烷基磺酰基。或者r⁵和r⁶连同它们连接的氮一起形成任选取代的c3-c6杂环基。式(i)的取代基r⁷选自：任选取代的(烷基氨基)c1-c6烷基；和任选取代的c3-c6杂环基。

式(i)的取代基r³为氢，或者，式(i)的取代基r²和r³一起为羰基，且与它们连接的原子一起形成6元杂环状氨基甲酸酯基。

取代基r^4a、r^4b、r^4c和r^4d各自独立地选自氢；c1-c6全氟烷基；氰基；硝基；-chf2、c1-c6烷基、-oc1-c6-烷基、-ocf3、c3-c10环烷基、-cf3、-so2ch3和卤素。

进一步的实施方案描述了根据式(ii)的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药，其中式(ii)的r^1a、r²、r^4b和r^4d各自如之前对式(i)的描述。

在一些实施方案中，式(i)或(ii)的r^1a选自氢；c1-c6烷基；c3-c6环烷基；氰基；羟基c1-c6烷基；(n,n-二甲基氨基)c1-c6烷基；卤素；和((c1-c6烷基磺酰基)氨基)c1-c6烷基。

在一些实施方案中，式(i)或式(ii)的r²选自氢；c(o)nr⁵r⁶；c(o)r⁷；-p(o)(oh)2；和-p(o)(ona)2。取代基r⁵和r⁶连同它们连接的氮一起形成任选取代的c3-c6杂环基。取代基r⁷选自(二甲基氨基)甲基和2-吡咯烷基。或者，r²和r³一起为羰基，且与它们连接的原子一起形成6元杂环状氨基甲酸酯基。

在一些实施方案中，式(i)或式(ii)的取代基r^4b和r^4d各自独立地选自：氢；三氟甲基；-ocf3；-so2ch3和卤素。

在一些实施方案中，式(i)或式(ii)的r^1a和r²不都为氢。

一些实施方案描述了式(i)的化合物，其中：

r^1a选自氢、甲基、乙基、异丙基、环丙基、氰基、羟基甲基、卤素、-ch2n(ch3)2、-ch2ch2n(ch3)2和-ch2ch2ch2n(ch3)2、-ch2ch2ch2nhs(o)2ch3；

r^1b、r^1c和r^1d各自独立地选自氢和卤素；

r²选自氢、-p(o)(oh)2、-p(o)(ona)2；

r³为氢，或者，r²和r³一起为羰基，且与它们连接的原子一起形成6元杂环状氨基甲酸酯基；且

r^4a、r^4b、r^4c和r^4d各自独立地选自氢、氟、ocf3、-so2ch3和三氟甲基。

本发明的一些实施方案涉及式(i)的化合物，其选自:

及其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。

一些实施方案描述了选自以下的化合物

及其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。

一些实施方案描述了式(iii)的化合物

或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。

式(iii)的取代基r⁸选自：c(o)nr⁹r¹⁰和c(o)r¹¹。

式(iii)的取代基r⁹和r¹⁰各自独立地选自任选取代的c1-c6烷基；和c1-c6烷基磺酰基。或者r⁹和r¹⁰连同它们连接的氮一起形成任选取代的c3-c6杂环基。

式(iii)的取代基r¹¹选自：任选取代的(烷基氨基)c1-c6-烷基；和任选取代的c3-c6杂环基。

式(iii)的取代基r¹²选自：c1-6全氟烷基；卤素；氰基；和硝基。在一些实施方案中，式(iii)的r¹²选自cf3；卤素；氰基；和硝基。

在一些实施方案中，式(iii)的r⁸选自c(o)nr⁹r¹⁰；和c(o)r¹¹。取代基r⁹和r¹⁰连同它们连接的氮一起形成任选取代的c3-c6杂环基。取代基r¹¹选自(二甲基氨基)甲基和2-吡咯烷基。

在一些实施方案中，式(iii)的化合物选自

及其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。

在一个实施方案中，本发明描述下式的化合物

及其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。

在一个实施方案中，本发明描述了式(iv)或式(v)的化合物

或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。

式(iv)或式(v)的取代基r¹³和r¹⁴各自独立地选自任选取代的c1-c6烷基；和c1-c6烷基磺酰基。或者r¹³和r¹⁴连同它们连接的氮一起形成任选取代的c3-c6杂环基。

取代基r¹⁵选自c1-c6-全氟烷基；硝基；和氰基。

在一个实施方案中，式(iv)的化合物为:

及其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。

在一个实施方案中，本发明描述了选自以下的化合物

及其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。

本发明化合物可具有一个或者多个不对称碳原子，且因此能够以旋光异构体的形式以及以其外消旋或者非外消旋混合物的形式存在。本发明化合物可在本发明中以单一异构体或者以立体化学异构体形式的混合物来使用。非对映异构体，即，不能重叠的立体化学异构体，可通过常规方式分离，诸如色谱法、蒸馏、结晶或者升华。该旋光异构体可根据常规方法通过外消旋混合物的拆分而获得，例如通过用旋光活性的酸或者碱处理来形成非对映异构体盐。适当酸的实例包括但不限于酒石酸、二乙酰基酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二甲苯酰基酒石酸以及樟脑磺酸。非对映异构体的混合物可通过结晶接着通过由这些盐解离出旋光活性的碱来分离。用于分离旋光异构体的替代方法包括使用最理想选择的手性色谱柱以最大化该对映异构体的分离。另一个可行的方法涉及共价非对映异构体分子的合成，其通过使本发明化合物与在活化形式的旋光纯的酸或者旋光纯的异氰酸盐反应。所合成的非对映异构体可通过常规方式诸如色谱法、蒸馏、结晶或者升华来分离，然后水解以获得对映异构体纯的化合物。本发明的旋光活性化合物也可通过利用旋光的起始物质来获得。这些异构体可为游离酸、游离碱、酯或者盐的形式。

本发明化合物可为药学上可接受的盐形式。本发明的化合物的药学上可接受的盐包括酸加成盐和碱加成盐。药学上可接受的盐涵盖通常用于形成碱金属盐以及用于形成游离酸或者游离碱的加成盐的盐。只要该盐是可药用的，其性质不是关键。本发明化合物的适当的药用酸加成盐可由无机酸或者有机酸制备。这种无机酸的实例包括但不限于盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、碳酸、硫酸以及磷酸。适当的有机酸可选自脂肪族类的、环脂肪族类的、芳香族类的、芳基脂肪族类的、杂环类的、羧酸类的以及磺酸类的有机酸，其实例包括但不限于甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、葡萄糖酸、马来酸、扑酸(双羟萘酸)、甲磺酸(methanesulfonicacid)、乙磺酸、2-羟基乙磺酸、泛酸、苯磺酸、甲苯磺酸、对氨基苯磺酸、甲磺酸(mesylicacid)、环己基氨基磺酸、硬脂酸、藻酸、β-羟基丁酸、丙二酸、半乳酸(galacticacid)以及半乳糖醛酸。本文所述的化合物的药学上可接受的碱加成盐可从无机和有机碱制备。衍生自无机碱的盐，包括仅作为实例，钠、钾、锂、铵、钙和镁盐。衍生自有机碱的盐包括，但不限于，伯胺、仲胺和叔胺的盐，如烷基胺、二烷基胺、三烷基胺、取代的烷基胺、二(取代的烷基)胺、三(取代的烷基)胺、烯基胺、二烯基胺、三烯基胺、取代的烯基胺、二(取代的烯基)胺、三(取代的烯基)胺、环烷基胺、二(环烷基)胺、三(环烷基)胺、取代的环烷基胺、二取代的环烷基胺、三取代的环烷基胺、环烯基胺、二(环烯基)胺、三(环烯基)胺、取代的环烯基胺、二取代的环烯基胺、三取代的环烯基胺、芳基胺、二芳基胺、三芳基胺、杂芳基胺、二杂芳基胺、三杂芳基胺、杂环胺、二杂环胺、三杂环胺、混合的二胺和三胺(其中胺上至少两个取代基不同且选自烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、芳基、杂芳基、杂环等)。还包括其中两个或三个取代基与氨基氮一起形成杂环基或杂芳基的胺。合适的胺的实例包括，仅作为实例，异丙基胺、三甲基胺、二乙基胺、三(异丙基)胺、三(正丙基)胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、缓血酸胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、n-烷基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、吗啉、n-乙基哌啶等。还应理解其它羧酸衍生物可用于本发明的实践，例如，羧酸酰胺、包括甲酰胺、低级烷基甲酰胺、二烷基甲酰胺，等。

可以使用本领域熟知的标准方法获得可接受的盐，例如通过用合适的酸处理足够碱性的化合物如胺，得到生理学上可接受的阴离子。还可以制备有机(例如羧酸)酸的碱金属(例如，钠、钾或锂)或碱土金属(例如钙)盐。

本发明化合物可具有前药形式。将在体内转化以提供生物活性剂的任何化合物都是本发明范围和精神内的前药。各种形式的前药在本领域中是众所周知的(参见，例如，medicinalchemistry:principlesandpractice,f.d.king,ed.,theroyalsocietyofchemistry,cambridge,uk,1994；hydrolysisindrugandprodrugmetabolism.chemistry,biochemistryandenzymology,b.testa,j.m.mayer,vchaandwiley-vch,zurich,switzerland,2003；thepracticeofmedicinalchemistry,c.g.wermuth,2nded.,academicpress,sandiego,ca,1999)。

在一些实施方案中，本发明的化合物的前药形式可为氨基甲酸酯。例如，式(i)的化合物可具有的r²为c(o)ra，其中ra为氨基(-nh2)、烷基氨基或芳基氨基。该烷基氨基可为单取代的或二取代的烷基氨基。在一些实施方案中，烷基具有1-10个碳。在另一实例中，ra可为任选取代的c3-c6杂环基。ra的非限制性实例包括–nhch3、–nhch2ch3、–nhch2ch2ch3、n(ch3)2、–n(ch2ch3)和

方案i示出了合成本发明的苯甲酰胺化合物的酯和氨基甲酸酯前药的建议的化学方案:

向空烧瓶添加5-氯-n-(5-氰基吡嗪-2-基)-2-羟基苯甲酰胺(200.0mg，0.728mmol)，然后添加thf(5.0ml)和hunig碱(0.26ml，1.456mmol)。向该溶液添加[1,4'-联哌啶]-1'-碳酰氯(202mg，0.874mmol)。将反应在70℃搅拌16小时，然后添加硅胶。然后去除溶剂且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到[1,4'-联哌啶]-1'-甲酸4-氯-2-((5-氰基吡嗪-2-基)氨基甲酰基)苯基酯(183.0mg，54％产率)。

一些实施方案描述了本文实施方案的苯甲酰胺化合物、其药学上可接受的盐、其水合物或其前药，其中所述苯甲酰胺化合物包含苯并噻唑部分。方案ii示出了与苯并噻唑合成相关的建议的合成反应。

本发明还包括分离的化合物。分离的化合物是指表示至少10％，优选至少20％，更优选至少50％且最优选至少80％的化合物存在于混合物中的化合物。

在本发明的一些实施方案中，一个或多个氢原子被氘替代。众所周知，生理活性化合物的氘化提供了保持其氢对应物的药理学特征同时积极影响其代谢结果的优点。在本发明化合物中用氘选择性替代一个或多个氢相比于其所有氢对应物可以改善化合物的安全性、耐受性和功效。

已经很好地建立了将氘掺入化合物中的方法。使用本领域建立的代谢研究，可以测试本发明的化合物以鉴定选择性替代氘同位素的位点，其中在该位点同位素不会被代谢。此外，这些研究将代谢的位点确定为放置氘原子的位置。

一些实施方案描述了药物组合物，其包含：根据本文所述实施方案的化合物，其药学上可接受的盐、其水合物或其前药；和药学上可接受的载体或稀释剂。

可配制化合物或其药学上可接受的盐用于口服、静脉内、肌肉内、皮下或肠胃外给药，用于治疗或预防本文所述的疾病、障碍或感染。对于口服或肠胃外给药，本发明化合物可与常规药物载体和赋形剂混合，并以片剂、胶囊、酏剂、悬浮液、糖浆、糯米纸囊剂(wafer)等形式使用。包含本发明化合物的组合物含有约0.1至约99重量％的活性化合物，更通常约10至约30％。

本申请披露的药物制剂依照标准操作制备，且以所选择的剂量给药以降低、预防或者消除感染(参见，例如，remington'spharmaceuticalsciences,mackpublishingcompany,easton,pa.和goodmanandgilman's.thepharmaceuticalbasisoftherapeutics,pergamonpress,newyork,n.y.，将其内容通过引用的方式并入本申请，作为对用于人类疗法的给药各种抗微生物剂的方法的概括描述)。本发明的组合物可使用控制的(例如，胶囊)或持续释放递送系统(例如，生物可蚀的基质)递送。

本发明的药学上可接受的组合物包含一种或多种本发明化合物以及一种或多种无毒的、药学上可接受的载体和/或稀释剂和/或佐剂和/或赋形剂，它们在此统称为“载体”材料，且如果需要还包含其它活性成分。该组合物可包含通常的载体和赋形剂，如玉米淀粉或明胶、乳糖、蔗糖、微晶纤维素、高岭土、甘露醇、磷酸二钙、氯化钠和海藻酸。该组合物可包含交联羧甲基纤维素钠、微晶纤维素、玉米淀粉、羟乙酸淀粉钠和海藻酸。

可包括的片剂结合剂为阿拉伯胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮(聚维酮)、羟丙基甲基纤维素、蔗糖、淀粉和乙基纤维素。

可使用的润滑剂包括硬脂酸镁或者其它金属硬脂酸盐、硬脂酸、硅酮流体、滑石、蜡、油以及胶体二氧化硅。

也可使用调味剂诸如薄荷油、冬青油、樱桃香料等。也可能预期加入着色剂以使该剂型的外观更加美观或者帮助识别该产品。

对于口服使用，固体制剂诸如片剂以及胶囊剂是特别有用的。也可设计出持续释放或者肠溶包衣的制剂。对于儿科和老年病学的应用，混悬剂、糖浆剂以及嚼用片剂是特别合适的。对于口服给药，该药物组合物为例如片剂、胶囊剂、混悬剂或者液体的形式。该药物组合物优选制成剂量单位的形式，该剂量单位含有治疗有效量的活性成分。这种剂量单位的实例为片剂以及胶囊剂。对于治疗目的，除了活性成分外，片剂和胶囊剂可含有常规载体，诸如结合剂例如阿拉伯胶、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、山梨糖醇或者黄蓍胶；填充剂例如，磷酸钙、甘氨酸、乳糖、玉米淀粉、山梨糖醇或者蔗糖；润滑剂例如，硬脂酸镁、聚乙二醇、二氧化硅或者滑石；崩解剂例如，马铃薯淀粉、香料或者着色剂，或者可接受的润湿剂。口服的液体制剂一般为水性溶液剂或者油性溶液剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂或者酏剂，可含有常规添加剂，例如助悬剂、乳化剂、非水试剂、防腐剂、着色剂以及调味剂。用于液体制剂的添加剂的实例包括阿拉伯胶、杏仁油、乙醇、分馏椰子油、明胶、葡萄糖浆、甘油、氢化食用脂、磷脂、甲基纤维素、对羟基苯甲酸甲酯或者对羟基苯甲酸丙酯、聚丙二醇、山梨糖醇或者山梨酸。

对于静脉内(iv)使用，本发明的化合物可溶解于或者悬浮于任何常用的静脉内流体中，并通过输注给药。静脉内流体包括但不限于生理食盐水或者林格(ringer’s)溶液。静脉内给药可通过非限制性使用注射器、微泵或者静脉内管线(intravenousline)来完成。

肠胃外给药的制剂可为水性或非水性等渗无菌注射溶液或悬浮液形式。这些溶液或悬浮液可由无菌粉末或颗粒制备，所述无菌粉末或颗粒具有一种或多种用于口服给药制剂的载体。可以将化合物溶解在聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、苄醇、氯化钠、和/或多种缓冲液中。

对于肌内制剂，可将化合物的无菌制剂或者该化合物适当的可溶性盐形式(例如盐酸盐)溶解并在药物稀释剂诸如注射用水(wfi)、生理盐水或者5％葡萄糖中给药。该化合物的适当不可溶形式可作为在水性基质或者药用油性基质中的混悬液来制备及给药，所述油性基质例如长链脂肪酸的酯(诸如油酸乙酯)。

化合物的静脉内、肌内或者肠胃外制剂的剂量可作为推注或者缓慢输注来给药。推注是在少于30分钟内给药的剂量。在一个优选实施方案中，推注是在少于15分钟或者少于10分钟内给药。在更优选实施方案中，推注是在少于5分钟内给药。在更优选实施方案中，推注是在1分钟或者更少的时间内给药。输注以30分钟或者更高的速率进行。在一个优选实施方案中，输注进行一小时或者更长的时间。在另一个具体实施例中，输注基本上是恒速的。

对于局部使用，本发明的化合物也可以适当的形式制备以施用于皮肤或者鼻子与喉咙的黏膜，且可使用乳膏剂、软膏剂、液体喷雾剂或者吸入剂、锭剂或者涂咽剂的形式。这种局部制剂还可包括化学化合物诸如二甲基亚砜(dmso)以促进活性成分的表面渗透。

对于眼睛或者耳朵的应用，本发明的化合物可呈液体或者半液体形式，在疏水性或者亲水性基质中配制为软膏剂、乳膏剂、乳剂、涂剂或者粉末剂。

对于直肠给药，本发明的化合物可以栓剂的形式给药，其中混合有常规载体如可可脂、蜡或其它甘油酯。

可替换地，本发明的化合物可为粉末形式，其用于在递送时在适当的药用载体中重构。在另一个实施方案中，化合物的单位剂型可为在无菌密封安瓿或者无菌注射器中在适当的稀释剂中的化合物(或优选其盐)的溶液。该单位剂量中的化合物的浓度可从例如约1％至约50％，取决于所使用的化合物及其溶解度以及医师所需的剂量。

治疗方法

在一些实施方案中，在受试者中治疗特征为胰岛素抵抗或组织中脂质异常积聚的代谢疾病或障碍或其中胰岛素抵抗或组织中脂质异常积聚为症状的疾病或障碍，或治疗癌症或增生的方法，包括向该受试者给药治疗有效量的根据本文所述实施方案的化合物或药物组合物。在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍为2型糖尿病，或特征为胰岛素抵抗或高血糖的疾病。

在一些实施方案中，所述代谢疾病为2型糖尿病引起的并发症，其选自糖尿病-诱导的心血管疾病、神经退行性疾病、动脉粥样硬化、高血压、冠心病、肾病、视网膜病、神经病和糖尿病性心力衰竭。在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍为肥胖症或肥胖症相关的并发症。

在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍为非酒精性脂肪性肝疾病(nafld)，包括选自以下的该疾病的至少一个预后阶段：肝性脂肪变性、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、肝硬化、和nafld诱导的肝细胞癌(hcc)。在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍为酒精性脂肪性肝疾病，或酒精性脂肪性肝疾病引起的并发症。在一些实施方案中，所述酒精性脂肪性肝疾病的并发症包括酒精性肝炎、肝硬化、或其组合。

在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍为血脂障碍，或血脂障碍引起的并发症。在一些实施方案中，该癌症为原发性癌，其选自肝细胞癌、结肠直肠癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、黑素瘤、卵巢癌和肺癌。在一些实施方案中，所述癌症为源自其它组织类型的原发性肿瘤的转移性癌症。在一些实施方案中，所述转移性部位选自肝、肺和腹腔内腔。

在一些实施方案中，本文所述实施方案的化合物与指示用于上述障碍或疾病的第二药剂组合给药，其在第二药剂给药的同时、之前或之后给药。在一些实施方案中，所述第二药剂为抗糖尿病药剂，其选自二甲双胍、胰岛素、胰岛素类似物、磺酰脲、双胍、氯茴苯酸、噻唑烷二酮、α葡萄糖苷酶抑制剂、glp-1激动剂、sglt2抑制剂和dpp-4抑制剂。在一些实施方案中，所述第二药剂为抗肥胖症药剂。在一些实施方案中，所述第二药剂为抗非酒精性脂肪性肝疾病药剂。在一些实施方案中，所述第二药剂为抗酒精性脂肪性肝疾病药剂。在一些实施方案中，所述第二药剂为抗血脂障碍药剂。

在一些实施方案中，所述线粒体解偶联剂与第二抗非酒精性脂肪性肝疾病药剂组合给药。在一些实施方案中，所述线粒体解偶联剂与第二抗酒精性脂肪性肝疾病药剂组合给药。在一些实施方案中，所述线粒体解偶联剂与第二抗血脂障碍药剂组合给药。

在一些实施方案中，该化合物可与第二抗癌剂或抗癌方案组合给药。在一些实施方案中，该化合物可在第二抗代谢疾病或抗癌剂给药的之前、同时、或之后给药。

在一些实施方案中，所述受试者为哺乳动物。在一些实施方案中，所述受试者为人。在一些实施方案中，所述本文所述的化合物用作兽医药物以治疗糖尿病或糖尿病-相关的疾病，且该受试者为哺乳动物。

一些实施方案涉及代谢疾病或障碍的长期疾病处理的方法，包括向需要该长期处理的受试者给予有效量的本文所述的化合物或组合物。在一些实施方案中，长期疾病处理代谢疾病或障碍、或长期疾病处理癌症的方法，包括向需要该长期处理的受试者给予有效量的根据本文所述实施方案任一个的化合物或药物组合物。在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍为肥胖症，肥胖症-相关的并发症、2型糖尿病或2型糖尿病相关的并发症。在一些实施方案中，所述癌症为任何原发性肿瘤或转移性肿瘤。

在一些实施方案中，本发明描述根据本文所述实施方案任一个的化合物在制备用于治疗糖尿病、肥胖症、非酒精性脂肪性肝疾病、酒精性脂肪性肝疾病、血脂障碍、或其中胰岛素抵抗或组织中的异常脂质聚集为症状的疾病、或相关疾病或并发症的药物中的用途，所述相关疾病或并发症包括，但不限于，肝性脂肪变性、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、肝硬化、或nafld诱导的肝细胞癌(hcc)。在一些实施方案中，本文的实施方案的化合物可用于制备治疗癌症、其中细胞增殖(增生)为症状的疾病或癌症或增生相关的并发症的药物。

本文一些实施方案涉及在受试者中治疗或预防代谢疾病或障碍的方法，包括向受试者给药治疗有效量的本文所述化合物或药物组合物。

本文一些实施方案提供了治疗和缓解以下疾病的症状的方法：肥胖(特征在于脂肪细胞中脂质过度积累)，2型糖尿病前期(pre-type2diabetes)(其特征在于通常由肝脏和肌肉的细胞中的脂质的异常积累引起的胰岛素抵抗)，2型糖尿病(以胰岛素抵抗和高血糖症为特征)，非酒精性脂肪性肝病或酒精性脂肪性肝病(以肝脏脂质异常积累为特征)，血脂异常(特征为在脂肪之外的组织中的异常脂质沉积)，以及上述代谢疾病的一种或多种并发症，包括但不限于高血压、心血管疾病、肾病和神经病变，包括向受试者给药治疗有效量的本文所述的化合物或药物组合物。这些疾病或障碍可能由饮食、环境、医学和/或遗传因素引起。本文所述的方法也可以用于预防具有危险因素的受试者的上述代谢性疾病，所述危险因素包括但不限于饮食、环境、医学和遗传倾向。此外，一些实施方案提供通过降低血液中的胰岛素抵抗或降低血糖水平以长期慢性病管理和长寿管理的方法。

在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍为2型糖尿病，或导致胰岛素抵抗或高血糖的相关疾病。在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍为肥胖症或一种或多种肥胖症相关的并发症。

在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍为非酒精性脂肪性肝疾病，(nafld)，包括非酒精性脂肪性肝炎(nash)和肝硬化或酒精性脂肪性肝疾病(afld)。在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍为肝性脂肪变性，非酒精性脂肪性肝炎(nash)、肝硬化或nafld诱导的肝细胞癌(hcc)。

在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍为2型糖尿病的一种或多种并发症，包括，但不限于，2型糖尿病诱导的高血压、心血管疾病、肾病、动脉粥样硬化、血脂障碍、视网膜病、神经退行性疾病、糖尿病性心力衰竭和神经病。在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍为2型糖尿病前期。在一些实施方案中，所述代谢疾病或障碍为血脂障碍。

在一些实施方案中，待治疗的疾病可为线粒体障碍。在一些实施方案中，所述代谢疾病可为lhon(莱伯遗传性视神经病变)，melas(线粒体肌病，线粒体性脑肌病，乳酸性酸中毒和中风样发作)，merrf(肌阵挛性癫痫和破裂红肌纤维)，leigh综合征，mils(母体遗传性leigh综合征)，narp(神经源性肌无力，共济失调和色素性视网膜炎)，fbsn(家族性双侧纹状体坏死)或kss(卡恩斯-塞尔综合征，kearnssayresyndrome)。

一些实施方案涉及在受试者中治疗或预防癌症的方法，包括向受试者给药治疗有效量的本文所述的线粒体解偶联剂或组合物。在一些实施方案中，所述癌症可为原发性癌或转移性癌症。在一些实施方案中，所述癌症为原发性癌，包括但不限于肝细胞癌、结肠直肠的癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、黑素瘤、卵巢癌、肺癌。在一些实施方案中，所述癌症为源自其它组织类型的原发性肿瘤的转移性肝癌。在一些实施方案中，所述癌症为源自其它组织类型的原发性肿瘤的转移性肺癌。在一些实施方案中，所述癌症为至其它位置(包括腹腔内腔)的转移性癌症。

一些实施方案涉及在受试者中治疗或预防皮肤病学疾病的方法，包括向受试者给药治疗有效量的线粒体解偶联剂或本文所述的组合物。在一些实施方案中，所述皮肤病学疾病为湿疹、汗疱疹、皮脂溢性湿疹、牛皮癣、酒渣鼻、皮炎和特应性皮炎。

一些实施方案涉及在受试者中治疗或预防非病毒寄生物的传染病的方法，包括向受试者给药治疗有效量的线粒体解偶联剂或本文所述的组合物。

在一些实施方案中，待治疗的疾病可为心脏病，包括向受试者给药治疗有效量的本文所述的化合物或药物组合物。在一些实施方案中，所述心脏病可为高血压或心血管疾病。在一些实施方案中，待治疗的疾病可为中枢神经系统(cns)疾病。在一些实施方案中，所述cns疾病可为中风，阿尔茨海默病，帕金森病，亨廷顿病或als(肌萎缩性侧索硬化)。

在一些实施方案中，待治疗的疾病可以是与增加的ros(活性氧物质)产生相关的病症，包括向受试者给药治疗有效量的本文所述的化合物或药物组合物。增加的ros与老化、阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿舞蹈病、als(肌萎缩性侧索硬化)、线粒体疾病和多种癌症有关。

本文所述的化合物和组合物可以通过口服、胃肠外(例如，肌内、腹膜内、静脉内、icv、脑池内注射或输注、皮下注射或移植)、吸入喷雾、眼部、经鼻、阴道、直肠、舌下或局部给药途径给予，并且可以单独或一起配制于包含适合于每种给药途径的常规无毒药学上可接受的载体、助剂和媒介物的适合的单位剂量制剂中。本文所述的化合物和组合物也可配制为控释制剂。

本文所述的化合物可以局部给药，并且可以配制成各种局部给药的组合物，其包含活性成分和皮肤病学可接受的基质和/或眼科上可接受的基质。这些组合物可以配制成例如溶液、悬浮液、喷雾剂、洗剂、凝胶、糊剂、药用棒、香脂、洗发剂、皂条、液体皂、乳膏或软膏。在一个实施方案中，所述组合物是软膏剂的形式，其可以施用于哺乳动物(包括人)的眼睛中或眼睛周围。

在一些实施方案中，皮肤病学和/或眼科上可接受的基质包括药学上可接受的软膏基质。合适的软膏基质的实例包括，但不限于油质软膏基质如矿脂(例如，液体矿脂或白色矿脂)、液体石腊和聚乙烯的复合软膏基质(plastibase)、硬石蜡、白色软石蜡、黄色软石蜡、液体石蜡、乳化蜡、微晶蜡、白色蜂蜡、黄色蜂蜡、巴西棕榈蜡、羊毛蜡(羊毛脂)、矿物油、橄榄油、纯化羊毛脂、无水羊毛脂和水溶性软膏基质如聚乙二醇(例如，聚乙二醇400或聚乙二醇3350)、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯、或其任意组合。

在一些实施方案中，皮肤病学和/或眼科上可接受的基质包括一种或多种作为悬浮剂的聚合物。可用的聚合物包括，但不限于，水溶性聚合物如纤维素聚合物，例如，羟丙基甲基纤维素，和水不溶性聚合物如包含交联羧基的聚合物。皮肤病学和/或眼科上可接受的基质也可包括皮肤病学和/或眼科上可接受的粘膜粘着聚合物，例如，羧基甲基纤维素、卡波姆(丙烯酸聚合物)、卡波普(共聚物或与聚烯基聚醚交联的丙烯酸)、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚丙烯酰胺、聚卡波非、丙烯酸/丙烯酸丁酯共聚物、藻酸钠、或葡聚糖。

在一些实施方案中，皮肤病学和/或眼科上可接受的基质包括一种或多种粘度增强剂。合适的粘度增强剂的实例包括，但不限于，甲基纤维素、黄原胶、黄蓍胶、羧基甲基纤维素、二氧化硅、聚硅氧烷、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基甲基乙酸纤维素硬脂酸酯、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、卡波姆、聚乙烯醇、藻酸盐、阿拉伯胶、脱乙酰壳多糖、阿拉伯胶、玉米淀粉、明胶、或其组合。

在一些实施方案中，皮肤病学和/或眼科上可接受的基质包括一种或多种皮肤病学和/或眼科上可接受的ph调节剂或缓冲剂，包括，但不限于，酸、如乙酸、硼酸、柠檬酸、乳酸、磷酸和盐酸；碱如氢氧化钠、磷酸钠、硼酸钠、柠檬酸钠、乙酸钠、乳酸钠和三羟甲基氨基甲烷；和缓冲剂、如柠檬酸盐/右旋糖、碳酸氢钠和氯化铵。包含这些酸、碱和缓冲剂的量是将组合物的ph维持在皮肤病学和/或眼科学上可接受的范围内所需的量。

在一些实施方案中，皮肤病学和/或眼科学上可接受的碱包括一种或多种皮肤病学和/或眼科学上可接受的盐，其量为使组合物的重量克分子渗透压浓度达到皮肤病学和/或眼科学上可接受的范围所需的量。这些盐包括但不限于具有钠、钾或铵阳离子和氯、柠檬酸根、抗坏血酸根、硼酸根、磷酸根、碳酸氢根、硫酸根、硫代硫酸根或亚硫酸氢根阴离子的盐；具体的盐包括例如氯化钠、氯化钾、硫代硫酸钠、亚硫酸氢钠和硫酸铵。

在一些实施方案中，皮肤病学和/或眼科上可接受的基质包括一种或多种皮肤病学和/或眼科上可接受的防腐剂以抑制微生物活性。合适的防腐剂包括，但不限于，含汞物质如硼酸苯汞(merfen)和硫柳汞；稳定的二氧化氯；和季铵化合物如苯扎氯铵、鲸蜡基三甲基溴化铵和鲸蜡基吡啶鎓氯化物。

在其它实施方案中，皮肤病学和/或眼科上可接受的基质包括一种或多种皮肤病学和/或眼科上可接受的表面活性剂以增强物理稳定性，或用于其它目的。合适的非离子表面活性剂包括异十六烷、环二甲基硅酮、乙二醇和丙二醇的共聚物、聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和植物油，例如，聚氧乙烯(60)氢化蓖麻油；和聚氧乙烯烷基醚和烷基苯基醚，例如，辛基酚聚醚10，辛基酚聚醚40。

在其它实施方案中，皮肤病学和/或眼科上可接受的基质包括一种或多种皮肤病学和/或眼科上可接受的渗透增强剂以增强物理稳定性，或用于其它目的。渗透增强剂是增强局部施用的化合物进入皮肤角层、角质层以及由此进入表皮和真皮的物质。实例包括，但不限于：二甲基异山梨醇酯、乙氧基二甘醇、1-十二烷基氮杂环庚-2-酮、丙二醇、油醇、聚氧乙烯酯、单-9-十八碳烯酸脱水山梨醇酯、聚(氧基-1,2-乙烷二基)及其衍生物、乙醇、甘油基单乙醚、单甘油酯、豆蔻酸异丙酯、月桂醇、月桂酸、乳酸月桂基酯、萜品醇、薄荷醇、d-柠檬烯、β-环糊精、dmso(二甲基亚砜)、聚山梨酯、脂肪酸(例如，油酸)、胆汁盐、n-甲基吡咯烷酮、聚糖基化甘油酯、1-十二烷基氮杂环庚-2-酮环十五内酯烷基-2-(n,n-二取代的氨基)-链烷酸酯2-(正壬基)-1,3-二氧戊环和以下所示的渗透增强剂，例如u.s.pat.nos.3,909,816；4,405,616；4,801,586；4,861,764；4,886,783；4,983,396；5,118,845；5,196,410，8486,374和8,741,265，其全部内容通过引用明确地并入本文。

在其它实施方案中，皮肤病学和/或眼科上可接受的基质包括一种或多种皮肤病学和/或眼科上可接受的渗透增强剂以增强物理稳定性，或用于其它目的。多类化合物都可充当根据本发明所述的适合的渗透增强剂。第一类包括脂肪酸及其盐和酯，包括甘油一酯、甘油二酯和甘油三酯。中等链长度的脂肪酸，特别是c8和c10酸及其盐和酯是特别有用的。合适的具体的例子包括辛酸钠、癸酸钠、甘油酯类(可得自abitecofcolumbus，ohio)、甘油酯类(peg-8辛酸/癸酸甘油酯类，可得自gattefossesasofsaintpriest，cedex，france)、44/14(peg-32甘油基月桂酸盐ep，可得自gattefosse)、其它的甘油酯类&脂肪酸酯类、克列莫佛(basf，ludwigshafen，germany)、d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸盐、植物油、聚氧乙烯甘油酯(polyoxylglycerides)和中等链单和二酰基甘油酯。

这类的一个例子，mcml8(单辛酸甘油酯)(可得自abitecofcolumbus，ohio)由中链脂肪酸(主要是辛酸，还有一些癸酸)的甘油一酯和甘油二酯和最大7％的游离甘油组成。它含有至少44％的α甘油一酯(作为辛酸酯)。

这类增强剂的其它的例子包括gattefosse组合物61a至61h，该组合物由gattefossesas所有，但是通常由含有不同量的一个或更多中链甘油一酯、甘油二酯和甘油三酯、聚山梨酯衍生物、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚乙二醇衍生物包括聚乙二醇甘油酯、聚氧乙烯醚、植物油、甘油和相似的gras(公认安全的)脂类成分的混合物组成。这些成分是个体商业化的产品的一部分如capryol^tm90、capryol^tmpgmc、lauroglycol^tm90、44/14、plurololeiquecc497、m1944cs(杏仁油peg-6酯)、transcutolhp、peceol和maisine35-1，所有这些可购自gattefossesas。

虽然甘油自身不直接落入这类里，但是甘油自身被发现具有优良的渗透增强作用，特别是对神经氨酸酶抑制剂。由于甘油并不被认为是一种渗透增强剂，所以没有预料到这个结果。

第二类增强剂包括具有甾体结构的表面活性剂，诸如胆汁酸盐。适合的化合物的例子包括胆酸钠、脱氧胆酸钠、甘胆酸盐、甘油脱氧胆酸盐(glycoursodeoxycholate)、牛磺胆酸盐、牛磺脱氧胆酸盐和类固醇洗涤剂/胆盐。其它的表面活性剂也可以是适合的渗透增强剂，包括阳离子、阴离子和非离子表面活性剂。例子包括聚山梨醇80、十六烷基二甲基苄基氯化铵、溴代n-十六烷基吡啶、十二烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基溴化铵、十四烷基-β-d-麦芽糖苷、辛基葡糖苷、甘草次酸、3-(n,n-二甲基棕榈基铵基)丙磺酸盐和十二烷基硫酸钠。

环糊精也可用作合适的增强剂。实例包括β-环糊精，羟丙基-β-环糊精，γ-环糊精和羟丙基-γ-环糊精。

多种其它化合物也可用作增强剂。实例包括水杨酸钠、乙二胺四乙酸(edta)、柠檬酸、脱乙酰壳多糖和脱乙酰壳多糖衍生物、n-三甲基脱乙酰壳多糖氯化物、单羧基甲基-脱乙酰壳多糖、棕榈酰基肉毒碱氯化物、酰基肉毒碱、乙二醇四乙酸(egta)、3-烷基酰胺基-2-烷氧基丙基-磷酸胆碱衍生物、烷酰基胆碱、n-乙酰化氨基酸(基于α-和非α-氨基酸)、粘膜粘着聚合物、磷脂、胡椒碱、1-甲基哌嗪、α-氨基酸和矿物油。

因此多种增强剂化合物可选自脂肪酸、脂肪酸酯、脂肪酸盐、甘油、表面活性剂、环糊精、水杨酸钠、乙二胺四乙酸、柠檬酸、脱乙酰壳多糖、脱乙酰壳多糖衍生物、n-三甲基脱乙酰壳多糖氯化物、单羧基甲基-脱乙酰壳多糖、棕榈酰基肉毒碱氯化物、酰基肉毒碱、乙二醇四乙酸、3-烷基酰胺基-2-烷氧基丙基-磷酸胆碱衍生物、烷酰基胆碱、n-乙酰化氨基酸、粘膜粘着聚合物、磷脂、胡椒碱、1-甲基哌嗪、α-氨基酸和矿物油。

渗透增强剂和极性药剂可以任何比例混合，只要提供治疗有效量的极性药剂和渗透增强量的增强剂化合物。局部给药的极性药剂的皮肤生物利用度的提高可取决于与该药剂一起配制的增强剂化合物的性质和浓度。因此应当预料到，所需治疗量可被包含在单一的剂型中或在意图在同一时间或连续施用的一个或更多个剂量之间分配。

渗透增强剂相对独立于极性药剂的浓度发挥作用。不同渗透增强剂可在宽的浓度范围达到最佳或最大的增强作用，这取决于它们特别固有的增强潜能。常常，增强剂在存在的增强剂浓度和增加的极性药剂的吸收量之间具有非线性剂量响应关系。要与极性药剂一起在口服剂型利用的增强剂的量最初基于在各种固定的增强剂浓度下在caco-2细胞测定中观察到的增强性质。基于这些结果，采用制剂领域技术人员熟知的方法不需要过度的实验就可估计、证明和优化用于人制剂的增强剂化合物的有效体内量，以达到期望的药物动力学体内分布。

在配制本发明的组合物中，对制剂领域技术人员显而易见的是，更有效的增强剂化合物将需要比有效性较低的渗透增强剂更少的极性药剂，以达到目标药物动力学分布。假定那些考虑和变化，增强剂的量可以是增强剂和极性药剂结合重量的至少约0.1wt％，更优选地增强剂和极性药剂结合重量的至少约50wt％和更优选地增强剂和极性药剂结合重量的至少约70wt％。该量优选为增强剂和极性药剂结合重量至多95wt％，更优选地至多80wt％，更优选地至多75wt％。因此，如实施例中所示，取决于化合物自身及其在提高口服后极性药剂的通透性中的效力，典型的剂型可含有宽范围浓度的增强剂化合物。按重量计低如0.001％直至20％的浓度都被证明在提高极性药剂的通透性方面是有效的。

在其它实施方案中，在需要时，皮肤病学和/或眼科上可接受的基质包括一种或多种抗氧化剂以增强化学稳定性。合适的抗氧化剂包括，仅作为实例，丁基羟基甲苯(bht)、抗坏血酸钠、抗坏血酸、偏亚硫酸氢钠和生育酚。在某些实施方案中，抗氧化剂在需要时增强化学稳定性。

除了上面列举的那些之外，可用于局部组合物的任何其他表面活性剂、保湿剂、胶凝剂、防腐剂、着色剂或颜料、抗氧化剂、自由基清除剂、乳化剂、保湿剂、ph调节剂、螯合剂或其他通常已知的皮肤病学上可接受的赋形剂考虑可用于本文所述的组合物中。此外，任何无毒、惰性和有效的局部载体可用于配制本文所述的组合物。

用于配制用于人类给药的其他局部治疗组合物的众所周知的载体可用于这些组合物中。本领域技术人员公知的这些组分的实例描述于themerckindex，thirteenthedition，budavari等人，eds.，merck&co.，inc.，rahway，n.j.(2001)；thectfa(cosmetic，toiletry，andfragranceassociation)internationalcosmeticingredientdictionaryandhandbook，tenthedition(2004)；和"inactiveingredientguide"，u.s.foodanddrugadministration(fda)centerfordrugevaluationandresearch(cder)officeofmanagement，http://www.accessdata.fda.gov/scripts/cder/iig/index.cfm，其内容通过引用整体并入本文。这些有用的药学上可接受的赋形剂、载体和稀释剂的实例包括蒸馏水，生理盐水，林格氏溶液，右旋糖溶液，hank溶液和dmso，它们是本文优选使用的那些。

这些另外的其他非活性组分以及有效的制剂和给药方法是本领域熟知的并且在标准教科书中描述，例如goodmanandgillman's:thepharmacologicalbasesoftherapeutics,8thed.,gilmanetal.eds.pergamonpress(1990)andremington'spharmaceuticalsciences,17thed.,mackpublishingco.,easton,pa.(1990)，它们都通过引用整体并入本文。

该组合物可以立即使用或储存以供以后用于本领域技术人员已知的任何类型的容器中，例如袋、罐、瓶、管、安瓿和预填充注射器。最后，组合物可以通过本领域技术人员已知的任何方法灭菌，例如γ辐射。

本文所述的化合物和组合物可以预防有效剂量水平施用，以预防上述病症和障碍，以及预防以胰岛素抗性或高血糖症为特征的其他病症和障碍。

本文实施方案的药物组合物和化合物可以多种剂型给药，包括例如固体剂型和液体剂型。固体剂型可包括粉末、片剂、丸剂、胶囊、栓剂或可分散的颗粒。固体载体可以是一种或多种用作稀释剂、调味添加剂、溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解物质或包封材料的物质。在粉末形式中，载体可以是细粉碎的固体，包括乳糖、羟丙基甲基纤维素和pvp，与适量的活性成分混合。用于粉末和片剂形式的合适载体包括例如碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、糖、乳糖、果胶、糊精、加强剂、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素和羧甲基纤维素钠。

液体剂型包括例如溶液、悬浮液和乳液。还包括固体形式的组合物，其意味着在食用前不久转化为液体形式。除活性成分外，这些形式还可包括人造色素、香料、稳定剂、缓冲剂、天然或人造甜味剂、分散剂、增稠剂、溶解剂等。

溶液或混合物可以使用常规方法例如滴剂或喷雾剂直接施用于鼻腔。组合物可以单或多剂量形式制备。多剂量形式将包括递送预定体积的组合物的滴管、吸量管或雾化器。

本文实施方案的药物组合物和化合物可以包含适量的活性成分的单个剂量单位提供。各个剂量可以提供在包装中，或作为包括测量装置的试剂盒，例如用于测量口服或可注射剂量的装置(即量杯、针或注射器)。该试剂盒还可以包括其他材料，如缓冲液、稀释剂、过滤器和具有用法指示的包装说明书。标签可能存在于试剂盒上，以表明该组合物用于特定治疗，也可以指示使用方向。

如果需要，本发明的组合物还可以包含一种或多种另外的活性剂。适当的情况下，任何活性剂可以以化合物本身的形式，和/或以盐、多晶型物、酯、酰胺、前药、衍生物等的形式施用，条件是盐、多晶型物、酯、酰胺、前药或衍生物在药理学上是合适的。在合适的情况下，活性剂的盐、酯、酰胺、前药和其它衍生物可以使用合成有机化学领域技术人员已知的标准方法制备，并且描述于例如j.march，advancedorganicchemistry：reactions，mechanismsandstructure，第4版(newyork:wiley-interscience，1992)中。对于可以以对映体形式存在的任何活性剂，所述活性剂可以作为外消旋体或以对映异构体富集的形式掺入本发明组合物中。

施用的活性化合物的剂量将取决于待治疗的病症、特定化合物和其他临床因素，例如被治疗的受试者的年龄、性别、体重和健康状况，化合物给药途径和给药的组合物的类型(片剂、凝胶帽、胶囊、溶液、悬浮液、吸入剂、气溶胶、酏剂、锭剂、注射剂、贴剂、软膏、乳膏等)。应当理解，本发明具有人和动物使用的应用。用于治疗所需的化合物或其活性盐或衍生物的量将最终由巡诊医生或临床医生决定。

如上所述，本发明的化合物可用于预防、治疗、控制、改善或减少本文所述的疾病、病症和病况的风险。可以改变本发明组合物中作为活性成分的化合物的剂量，从而获得合适的剂型。活性成分可以以将提供最佳药物功效的剂量施用于需要这种治疗的患者(动物和人)。选择的剂量取决于所需的治疗效果、给药途径和治疗持续时间。取决于疾病的性质和严重性、患者的体重、患者随后遵循的具体饮食、并行治疗的药物和本领域技术人员将认识的其它因素，剂量将随患者的不同而变化。通常，将每日0.001至100mg/kg体重的剂量水平给予患者，例如人和老年人。治疗有效量通常为每个患者每天约0.5mg至10g，其可以以单剂量或多剂量施用。在一些实施方案中，治疗有效量在以下之间：下限为0.5mg、10mg、1mg、500.0mg、1000mg、1500mg、2000mg、2500mg、3000mg、3500mg、4000mg、4500mg、5000mg、5500mg、6000mg、6500mg、7000mg、7500mg、8000mg、8500mg、9000mg、9500mg和10000mg；且上限为10000mg、9500mg、9000mg、8500mg、8000mg、7500mg、7000mg、6500mg、6000mg、5500mg、5000mg、4500mg、4000mg、3500mg、3000mg、2500mg、2000mg、1500mg、1000mg、500.0mg、100mg、10mg和0.5mg。在一些实施方案中，所述治疗有效量为每患者每天约0.5mg至2500mg；在一些实施方案中，每患者每天约0.5mg至200mg；在一些实施方案中，每患者每天约0.5mg至500mg；在一些实施方案中每患者每天约0.5mg至1000mg；且在一些其它实施方案中每患者每天约5mg至50mg。本发明的药物组合物可以固体剂型提供，如包含约0.5mg至500mg活性成分，或包含约1mg至250mg活性成分。该药物组合物可以固体剂型提供，包含例如约1mg、5mg、10mg、25mg、50mg、100mg、200mg、250mg、500mg或1000mg活性成分。对于口服给药，该组合物可以片剂提供，包含1.0至1000毫克活性成分，如1、5、10、15、20、25、50、75、100、150、200、250、300、400、500、600、750、800、900、1000和2000毫克活性成分，以用于待治疗患者剂量的症状调节。该化合物可以每天1至4次的方案给药，如每天1次、2从、3次或4次。

定义

当在本申请中使用时，除非另有所述，分子术语具有它们的通常含义。

除非另有说明，否则本文所用的冠词“一”和“一个”是指“一个或多个”或“至少一个”。也就是说，通过不定冠词“一”和“一个”提及本发明的任何元素不排除存在多于一种元素的可能性。

如本文所述，术语"烷基"预期包括具有指定数量的碳原子的支链和直链的饱和脂族烃基。例如，"c1-c10烷基"或"c1-10烷基"(或亚烷基)，预期包括c1、c2、c3、c4、c5、c6、c7、c8、c9和c10烷基。此外，例如，"c1-c6烷基"或"c1-6烷基"表示具有1至6个碳原子的烷基。烷基可为未取代的或取代的，其中至少一个氢被另一化学基团替代。在一些实施方案中，一个或多个氢原子被选自羟基和二甲基氨基的化学基团替代。烷基的实例包括，但不限于，甲基(me)、乙基(et)、丙基(例如，正丙基和异丙基)、丁基(例如，正丁基、异丁基、叔丁基)、戊基(例如，正戊基、异戊基、新戊基)。取代的烷基的实例包括，但不限于，-ch2n(ch3)2、-ch2ch2n(ch3)2和-ch2ch2ch2n(ch3)2。

"烯基"预期包括直链或支链构型的烃链，其具有指定数量的碳原子和1个或多个，优选1至3个碳-碳双键，所述碳-碳双键可在沿着链的任何稳定的点出现。例如，"c2-c6烯基"或"c2-6烯基"(或亚烯基)，预期包括c2、c3、c4、c5和c6烯基。烯基的实例包括、但不限于、乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、2-甲基-2-丙烯基和4-甲基-3-戊烯基。

"炔基"预期包括直链或支链构型的烃链，其具有1个或多个，优选1至3个碳-碳三键，所述碳-碳三键可在沿着链的任何稳定的点出现。例如，"c2-c6炔基"预期包括c2、c3、c4、c5和c6炔基；如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基和己炔基。

术语"烷氧基"或"烷基氧基"是指-o-烷基。"c1-c6烷氧基"或"c1-6烷氧基"(或烷基氧基)，预期包括c1、c2、c3、c4、c5和c6烷氧基。烷氧基的实例包括，但不限于，甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如，正丙氧基和异丙氧基)，和叔丁氧基。

"芳基"基团是指单环或多环芳香烃，包括，例如，苯基和萘基。"c6-c10芳基"或"c6-10芳基"是指苯基和萘基。除非另有所述，"芳基"、"c6-c10芳基"、"c6-10芳基"或"芳族残基"可为未取代或取代有1至5个选自以下的基团：-oh、-och3、-ci、-f、-br、-i、-cn、-no2、-nh2、-nh(ch3)、-n(ch3)2、-cf3、-ocf3、-c(o)ch3、-sch3、-s(o)ch3、-s(o)2ch3、-ch3、-ch2ch3、-co2h和-co2ch3。

术语"苄基"，如本文所述，是指其中一个氢原子被苯基取代的甲基，其中所述苯基可以任选地被1至5个，优选1至3个取代基取代，所述取代基独立地选自甲基、三氟甲基(-cf3)、羟基(-oh)、甲氧基(-och3)、卤素、氰基(-cn)、硝基(-no2)、-co2me、-co2et和-co2h。苄基的代表性实例包括，但不限于，phch2-、4-meo-c6h4ch2-、2,4,6-三甲基-c6h2ch2-和3,4-二-cl-c6h3ch2-。

本文所用的“化合物”是指通常被认为是用作药物的药物或候选物的任何类型的物质或药剂，以及上述的组合和混合物。当提及本发明的化合物时，除非另有说明，术语“化合物”旨在不仅包括指定的分子实体，而且还包括其药学上可接受的、药理学活性的类似物，包括但不限于盐、多晶型物、酯、酰胺、前药、加合物、缀合物、活性代谢物等，其中对分子实体的这种修饰是合适的。

如本文所用，化合物的“衍生物”是指可以在一个或多个步骤中由另一种类似结构的化合物制备的化合物。非限制性实例包括用烷基、酰基或氨基取代h。

如本文所用，“有效量”或“治疗有效量”是指足以产生选定效果的量，例如减轻疾病或病症的症状的量。在给予组合形式的化合物例如多种化合物的情况下，当与另一种化合物组合施用时，每种化合物的量可以不同于该化合物单独施用时的量。因此，虽然各化合物的实际量可能变化，但有效量的化合物的组合整体统称为组合。术语“更有效”意味着一种治疗所达到的选择的效果相比于与其进行比较的第二治疗，更大程度上缓解了。

术语"式"和"结构"在此可互换使用。

术语"卤"或"卤素"是指氟、氯、溴和碘。"卤代烷基"预期包括具有指定数量的碳原子的支链和直链的饱和脂族烃基，其取代有一个或多个卤素。卤代烷基的实例包括，但不限于，氟甲基、二氟甲基、三氟甲基和三氯甲基。

"卤代烷氧基"或"卤代烷基氧基"表示通过氧桥连接的具有指定数量碳原子的如上定义的卤代烷基。例如，"c1-c6卤代烷氧基"或"c1-6卤代烷氧基"，预期包括c1、c2、c3、c4、c5和c6卤代烷氧基。卤代烷氧基的实例包括，但不限于，三氟甲氧基、三氯甲氧基和2,2,2-三氟乙氧基。

如本文所述，术语"杂芳基"预期是指稳定的单环和多环芳香烃，其包含至少一个杂原子环成员，如硫、氧或氮。杂芳基包括，但不限于，吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、呋喃基、喹啉基、异喹啉基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、吲哚基、吡咯基、噁唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、异噁唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、吲唑基、1,2,4-噻二唑基、异噻唑基、嘌呤基、咔唑基、苯并咪唑基、二氢吲哚基、苯并二氧杂环戊烷基和苯并二噁烷。除非另有所述，杂芳基可为未取代或取代有1至5个选自以下的基团：-oh、-och3、-ci、-f、-br、-i、-cn、-no2、-nh2、-nh(ch3)、-n(ch3)2、-cf3、-ocf3、-c(o)ch3、-sch3、-s(o)ch3、-s(o)2ch3、-ch3、-ch2ch3、-co2h和-co2ch3。氮原子为取代或未取代的(即，n或nr，其中r为h或另一取代基，如果有定义的话)。所述氮和硫杂原子可任选被氧化(即，n→o和s(o)p，其中p为0、1或2)。

术语“杂环基”、“杂环”或“杂环基环”定义为包含1至4个选自o、n、nh、-n(r^z)-、-s(o)-或–s(o)2-的杂原子或杂基团的饱和或部分不饱和环，其中r^z选自烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、环烷基、任选取代的杂环基，以具有3至13个环成员的单环或稠合杂环体系。在一个优选实施方案中，杂环基为具有3至7个环成员的环体系。杂环基的实例包括，但不限于，吗啉基、哌啶基和吡咯烷基。

术语“线粒体解偶联”也被称为“解偶联”，是指质子通过独立于atp合成酶的途径进入线粒体基质的过程，从而使营养物质氧化与atp生产脱离。该过程可以通过小分子线粒体质子载体(protonophore)药理学诱导，其直接将质子穿过线粒体内膜输送基质。需氧细胞能量产生的主要途径涉及线粒体中营养物(包括脂肪、碳水化合物和氨基酸)的氧化，其促进质子流出线粒体基质。该过程产生跨过线粒体内膜的ph和电化学梯度。质子通常通过atp合酶重新进入线粒体基质，导致atp产生。质子也可以通过独立于atp合酶的途径重新进入线粒体基质，其将营养物质氧化和质子的流出与atp生产“解偶联”。

术语“眼科学上可接受的”在本文中用于指在合理的医学判断范围内适合用于与人和动物眼接触的那些化合物、材料、组合物和/或剂型，而没有过多的毒性、刺激、过敏反应和/或其他问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。

术语“全氟烷基”是指其中烷基的所有h取代基已被f原子替代的烷基。

术语“药学上可接受的”在本文中用于指在合理的医学判断范围内适合用于与人以及动物的组织接触的那些化合物、材料、组合物和/或剂型，其没有过多的毒性、刺激性、过敏反应和/或其他问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。

如本文所用，“药学上可接受的盐”是指所公开的化合物的衍生物，其中母体化合物通过制备其酸或碱盐进行修饰。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性基团例如胺的无机酸或有机酸的盐；和酸性基团如羧酸的碱金属盐或有机盐。药学上可接受的盐包括常规的无毒盐或由例如无毒无机酸或有机酸形成的母体化合物的季铵盐。例如，这种常规的无毒盐包括衍生自无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸的那些；由有机酸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸和羟乙磺酸制备的盐。

本发明的药学上可接受的盐可以通过常规的化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，这些盐可以通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量的适当的碱或酸在水或有机溶剂中或两者的混合物中反应来制备；通常，非水性介质如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈是优选的。合适的盐的列表在remington'spharmaceuticalsciences，第18版，mackpublishingcompany，easton，pa，1990中找到，其公开内容通过引用并入本文。

如本文所述，术语"药学上可接受的载体"包括标准药物载体的任一种，如磷酸盐缓冲盐水溶液、水、乳液如油/水或水/油乳液，和各种类型的湿润剂。该术语还包括由美国联邦政府的监管机构批准或在美国药典中列为用于动物(包括人类)的任何试剂。

“前药”是指在体内转化为母体药物的药剂。前药通常是有用的，因为在某些情况下，它们可能比母体药物更易于施用。例如，它们通过口服给药可能具有生物利用度，而母体则不是。前药还可以在药物组合物中比母体药物具有改善的溶解度，或可以显示增加的适口性或更容易配制。

本文所用的术语“受试者”、“个体”或“患者”可互换使用，且旨在包括人和非人动物。非人类动物包括所有脊椎动物，例如哺乳动物和非哺乳动物，例如非人灵长类动物、绵羊、狗、猫、牛、马、鸡、两栖动物和爬行动物，但哺乳动物是优选的，例如非人灵长类动物、绵羊、狗、猫、牛和马。优选的受试者包括需要增强免疫应答的人类患者。该方法特别适用于治疗具有本文所述的疾病或障碍的人类患者。

术语“施用”和/或“给予”化合物应理解为意指向需要治疗的个体提供本文所述的化合物或其前药。

本文所用的术语“治疗”或“治疗”是指将化合物或药剂施用于患有疾病或有发展疾病风险的受试者，其目的是对疾病、疾病的症状、继发于疾病的疾病状态或对疾病的易感性进行治愈、缓解、改善、补救、延缓发作、预防或改善。

实施例

制备本发明化合物(例如式i至v)或制备用于制备本发明式i至v或其它式的化合物的中间体的方法作为本发明的进一步实施方案提供或在本领域中已知。虽然以下文本可以举例说明具体化合物和相应的合成途径，但并不意图将本发明的范围限制于这些特定的参考或实施例。考虑到实际和经济方面的考虑，例如试剂的来源和反应的具体条件，本领域技术人员可以进行各种修改。

实施例1

5-氯-2-羟基-3-甲基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(1)

在环境温度向5-氯-2-甲氧基苯甲酸(1.86g，10mmol)在硫酸(3.4ml)和三氟乙酸(6.8ml)中的搅拌溶液中添加n-溴代琥珀酰亚胺(1.96g，11mmol)。将该浅色溶液在环境温度搅拌3小时。将所得浅色悬浮液小心倒在碎冰上。将混合物用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯层用硫酸钠干燥且在减压下浓缩。将淡黄色残余物悬浮于最少量的二氯甲烷。收集固体，用冷二氯甲烷洗涤且真空干燥以得到3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸，其为白色固体(1.7g，64％)。¹hnmr(300mhz，丙酮-d6)δ7.86(d，1h，j＝3.0hz)，7.78(d，1h，j＝3.0hz)，3.91(s，3h)。

将3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸(430mg，1.62mmol)、甲基硼酸(291mg，4.86mmol)、pd(dppf)cl2(23mg，0.032mmol)和碳酸铯(1.58g，4.86mmol)的混合物在四氢呋喃(10ml)中在氮气下回流过夜。将反应用1nhcl酸化至ph为1且用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酸，其为白色固体(220mg，68％)。

将5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酸(220mg，1.1mmol)溶于二氯甲烷(5.0ml)，然后分别添加催化量的二甲基甲酰胺(3滴)和草酰氯(114ul，1.32mmol)。将反应在室温搅拌30分钟且真空浓缩。将残余物重溶于四氢呋喃(8.0ml)，且添加hunig碱(230ul，1.31mmol)和6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(240mg，1.1mmol)。将混合物在室温搅拌48小时，然后添加硅胶以淬灭反应。将溶剂蒸发且所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-2-甲氧基-3-甲基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(120mg，28％产率)。¹hnmr(300mhz，丙酮-d6)δ11.60(s，1h)，8.45(s，1h)，7.96(d，j＝8.5hz，1h)，7.88–7.72(m，2h)，7.57(d，j＝2.8hz，1h)，4.00(s，3h)，2.43(s，3h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z401.03，实测值m/z400.75.

将5-氯-2-甲氧基-3-甲基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(55mg，0.137mmol)与吡啶鎓氯化物(1.0g)混合。将混合物加热至210℃，搅拌15分钟且冷却至室温。所得固体溶于水且用乙酸乙酯萃取。有机层真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-2-羟基-3-甲基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺1，其为黄色固体(33.0mg，62％产率)。¹hnmr(300mhz，丙酮-d6)δ8.42(s，1h)，8.10(d，j＝8.5hz，1h)，7.92–7.82(m，2h)，7.42(d，j＝2.8hz，1h)，2.27(s，3h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z387.02，实测值m/z386.85.

实施例2

5-氯-3-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(2)

在室温向5-氯-2-甲氧基苯甲酸(5.58g，30mmol)在硫酸(10ml)和(20ml)中的搅拌溶液中添加n-溴代琥珀酰亚胺(5.88g，33mmol)。将浅色溶液在室温搅拌3小时。所得浅色悬浮液小心倒在500g碎冰上。将混合物用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯层用硫酸钠干燥且在减压下浓缩。淡黄色残余物悬浮于最少的二氯甲烷。收集固体，用冷二氯甲烷洗涤且真空干燥过夜以得到3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸(7g，89％)，其为白色固体。¹hnmr(300mhz，丙酮-d6)δ7.86(d，1h，j＝3.0hz)，7.78(d，1h，j＝3.0hz)，3.91(s，3h)。

向3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸(6g，22.6mmol)在二甲基甲酰胺(30ml)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(31g，226mmol)，然后添加ch3i(1.4ml，22.6mmol)。将混合物在室温搅拌24小时。添加水且用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机层用水和盐水洗涤且用硫酸钠干燥。将有机层过滤且将溶剂真空去除以得到淡黄色油状物(6.18g，97％)。

将3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(6.18g，22.07mmol)、(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)三氟硼酸钾(16.6g，66.21mmol)、pd(dppf)cl2(968mg，1.32mmol)和碳酸铯(21.5g，66.21mmol)添加至烧瓶。将该烧瓶抽真空且再用氮气填充三次。随后，在氮气下将甲苯(75ml)和水(25ml)添加至烧瓶。然后将混合物在80℃在氮气下搅拌过夜。添加饱和氯化铵溶液且所得混合物用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机层真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为黄色油状物(1.51g，20％产率)。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ7.64(d，j＝2.7hz，1h)，7.31(d，j＝2.7hz，1h)，3.90(s，3h)，3.81(s，3h)，3.34(brs，2h)，2.82(t，j＝6.9hz，2h)，1.41(s，9h)。ms(esi)[m+na]⁺要求m/z366.11，实测值m/z365.95.

将3-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(1.12g，3.26mmol)溶于4nhcl的二噁烷溶液(5ml)中且所得混合物在室温搅拌2小时。添加饱和碳酸氢钠溶液且用二氯甲烷萃取。有机层用水和盐水洗涤且用硫酸钠干燥。将有机层过滤且将溶剂真空去除以得到淡黄色油状物(475mg，60％)。¹hnmr(500mhz，氯仿-d)δ7.61(d，j＝2.7hz，1h)，7.30(d，j＝2.7hz，1h)，3.87(s，3h)，3.78(s，3h)，2.92(t，j＝7.5hz，2h)，2.75(t，j＝7.1hz，2h)，1.61(s，2h)。

向3-(2-氨基乙基)-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(100mg，0.411mmol)在甲醇(3ml)中的搅拌溶液中添加甲醛(122ul，1.64mmol，37％wt在水中)、氰基硼氢化钠(103mg，1.64mmol)和乙酸(117ul，2.06mmol)。所得混合物在室温搅拌过夜。添加饱和碳酸氢钠且用二氯甲烷萃取两次。将合并的有机层真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为黄色油状物(88mg，82％产率)。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ7.66(d，j＝2.5hz，1h)，7.36(d，j＝2.6hz，1h)，3.92(s，3h)，3.84(s，3h)，2.86(t，j＝7.5hz，2h)，2.58(t，j＝7.5hz，2h)，2.34(s，6h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z272.10，实测值m/z272.05.

向5-氯-3-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯(88mg，0.324mmol)在甲醇(5ml)中的搅拌溶液中添加1n氢氧化钾(91mg，1.62mmol，1.62ml)溶液。将混合物在60℃加热过夜。添加1nhcl以将ph调节至1。将混合物真空浓缩。将残余物溶于二甲基甲酰胺(3ml)。添加n,n,n’,n’-四甲基-o-(1h-苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(71mg，0.324mmol)，然后添加n,n-二异丙基乙基胺(282ul，1.62mmol)。所得混合物在室温搅拌15分钟，然后添加6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(71mg，0.324mmol)。所得混合物在100℃搅拌过夜。添加饱和氯化铵溶液且用乙酸乙酯萃取两次。合并的乙酸乙酯层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为黄色粉末(34mg，23％)。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ8.16(s，1h)，8.05(d，j＝2.7hz，1h)，7.91(d，j＝8.6hz，1h)，7.71(dd，j＝8.5，2.0hz，1h)，7.50(d，j＝2.7hz，1h)，3.97(s，3h)，2.99–2.93(m，2h)，2.75–2.66(m，2h)，2.43(s，6h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z458.08，实测值m/z458.15.

5-氯-3-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-甲氧基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(34mg，0.074mmol)与吡啶鎓氯化物(1.0g)混合。将混合物加热至210℃，搅拌15分钟且冷却至室温。将所得固体溶于水且用乙酸乙酯萃取。有机层真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化至5-氯-3-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺2，其为黄色粉末(10.0mg，34％产率)。¹hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.11–7.98(m，2h)，7.85(d，j＝9.3hz，1h)，7.66(d，j＝8.2hz，1h)，7.17(s，1h)，3.06(m，2h)，3.01(m，2h)，2.79(s，6h)。lrms(esi)[m+na]⁺要求m/z466.06，实测值m/z465.75.

实施例3

5-氯-2-羟基-3-(2-(甲基亚磺酰氨基)乙基)-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(3)

向3-(2-氨基乙基)-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(94mg，0.387mmol)在二氯甲烷(3ml)中的搅拌溶液中添加三甲基胺(6ul，0.426mmol)和甲磺酰氯(33ul，0.426mmol)。所得混合物在室温搅拌2hs。将混合物用二氯甲烷稀释且随后用1nhcl、水和盐水洗涤。有机层用na2so4干燥且在减压下浓缩以得到黄色油状物(124mg，100％)，其用于下一步而不用进一步纯化。

向5-氯-2-甲氧基-3-(2-(甲基亚磺酰氨基)乙基)苯甲酸甲酯(124mg，0.387mmol)在甲醇(5ml)中的搅拌溶液中添加1n氢氧化钾(2.02ml)溶液。所得混合物在50℃搅拌过夜。添加1nhcl以将ph调节至1。将混合物用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩以得到黄色油状物(101mg，80％)，其用于下一步而不用进一步纯化。ms(esi)[m+na]⁺要求m/z330.02，实测值m/z329.85.

将5-氯-2-甲氧基-3-(2-(甲基亚磺酰氨基)乙基)苯甲酸(101mg，0.329mmol)溶于二甲基甲酰胺(3ml)。添加n,n,n’,n’-四甲基-o-(1h-苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(149mg，0.394mmol)，然后添加n,n-二异丙基乙基胺(172ul，0.98mmol)。所得混合物在室温搅拌15分钟，然后添加6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(86mg，0.394mmol)。所得混合物在110℃搅拌过夜。添加饱和氯化铵溶液且用乙酸乙酯萃取两次。合并的乙酸乙酯层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-2-羟基-3-(2-(甲基亚磺酰氨基)乙基)-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺3，其为黄色粉末(55mg，38％)。¹hnmr(300mhz，丙酮-d6)δ8.43(s，1h)，8.13(d，j＝2.6hz，1h)，7.93(d，j＝8.2hz，1h)，7.84(d，j＝6.9hz，1h)，7.49(d，j＝2.6hz，1h)，3.46(t，j＝7.0hz，2h)，2.99(t，j＝7.0hz，2h)，2.91(s，3h)。ms(esi)[m+na]⁺要求m/z516.00，实测值m/z515.75.

实施例4

吗啉-4-甲酸4-氯-2-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯(4)

向5-氯-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(37mg，0.1mmol)在吡啶(3.0ml)中的搅拌溶液中添加吗啉-4-碳酰氯(24μl，0.2mmol)。将反应加热至50℃保持7h。冷却之后，添加3nhcl。将混合物用乙酸乙酯萃取两次。有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到吗啉-4-甲酸4-氯-2-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯4，其为白色固体(35.0mg，76％产率)。¹hnmr(400mhz，丙酮-d6)δ8.45–8.41(m，1h)，7.89(d，j＝2.6hz，1h)，7.86(d，j＝8.5hz，1h)，7.71(dd，j＝8.5，1.5hz，1h)，7.64(dd，j＝8.7，2.6hz，1h)，7.37(d，j＝8.7hz，1h)，3.75(s，4h)，3.63(s，2h)，3.45(s，2h)。ms(esi)对[m+h]⁺计算的精确质量，要求m/z485.0，实测值m/z484.8.

实施例5

吗啉-4-甲酸4-氯-2-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基甲酰基)苯基酯(5)

向5-氯-2-羟基-n-(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)苯甲酰胺(29mg，0.092mmol)在吡啶(3.0ml)中的搅拌溶液中添加吗啉-4-碳酰氯(22μl，0.184mmol)。将反应加热至50℃保持7h。冷却之后，添加3nhcl。将混合物用乙酸乙酯萃取两次。有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到吗啉-4-甲酸4-氯-2-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基甲酰基)苯基酯5，其为白色固体(20.0mg，52％产率)。¹hnmr(400mhz，丙酮-d6)δ10.44(s，1h)，9.65(d，j＝1.2hz，1h)，8.87(dd，j＝1.3，0.6hz，1h)，7.89(d，j＝2.6hz，1h)，7.65(dd，j＝8.7，2.7hz，1h)，7.38(d，j＝8.8hz，1h)，3.82–3.49(m，6h)，3.41(s，2h)。ms(esi)[m+na]⁺要求m/z453.06，实测值m/z453.15.

实施例6

4-甲基哌嗪-1-甲酸4-氯-2-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯(6)

向5-氯-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(37mg，0.1mmol)在吡啶(3.0ml)中的搅拌溶液中添加4-甲基哌嗪-1-碳酰氯(28μl，0.2mmol)。将反应加热至50℃保持7h。冷却之后，添加3nhcl。将混合物用乙酸乙酯萃取两次。有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到4-甲基哌嗪-1-甲酸4-氯-2-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯6，其为黄色固体(26.0mg，60％产率)。¹hnmr(400mhz，氯仿-d)δ8.03(s，1h)，7.64(d，j＝2.6hz，1h)，7.55–7.46(m，2h)，7.38(dd，j＝8.7，2.6hz，1h)，7.15(d，j＝8.7hz，1h)，3.84(brs，2h)，3.67(brs，2h)，2.67(brs，2h)，2.53(brs，2h)，2.39(s，3h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z499.08，实测值m/z498.85.

实施例7

6-氯-3-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-2h-苯并[e][1,3]噁嗪-2,4(3h)-二酮(7)

向5-氯-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(55mg，0.15mmol)在二氯甲烷(3ml)中的搅拌溶液中添加三甲基胺(62ul，0.44mmol)，然后添加4-硝基氯甲酸苯基酯(44mg，0.22mmol)。所得黄色澄清溶液在室温搅拌过夜。添加饱和nh4cl溶液且用乙酸乙酯萃取两次。合并的乙酸乙酯层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到6-氯-3-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-2h-苯并[e][1,3]噁嗪-2,4(3h)-二酮7，其为白色固体(10mg，20％)。¹hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.28–8.19(m，2h)，8.11(d，j＝2.5hz，1h)，7.84–7.78(m，1h)，7.76(dd，j＝8.8，2.6hz，1h)，7.37(d，j＝8.8hz，1h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z398.98，实测值m/z398.75.

实施例8

5-氯-2-(三氟甲基)-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-1h-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺(8)

在0℃向2-氨基-5-氯苯甲酸(5.13g，30mmol)在二噁烷(20ml)中的搅拌溶液中添加三氟乙酸酐(6ml，43mmol)且所得混合物在室温搅拌过夜。反应完成后，混合物在乙酸乙酯和水之间分离。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥且真空浓缩以得到5-氯-2-(2,2,2-三氟乙酰氨基)苯甲酸(8.0g，100％)，其为淡黄色固体，将其用于下一步而不用进一步纯化。

在0℃向5-氯-2-(2,2,2-三氟乙酰氨基)苯甲酸(8.0g，30mmol)在浓硫酸(30ml)中的搅拌溶液中添加硝酸钾(12.1g，120mmol)且所得混合物在室温搅拌过夜。反应完成后，将混合物倒入冰中且将所得固体过滤。滤饼用水洗涤以得到5-氯-3-硝基-2-(2,2,2-三氟乙酰氨基)苯甲酸(8.4g，90％)，其为黄色固体，将其用于下一步而不用进一步纯化。

向5-氯-3-硝基-2-(2,2,2-三氟乙酰氨基)苯甲酸(624mg，2mmol)在乙酸(10ml)中的搅拌溶液中添加铁粉(560mg，10mmol)且将反应混合物在100℃搅拌1h。冷却至室温后，将反应过滤且用水和乙酸乙酯洗涤。将滤液真空浓缩且通过柱色谱法纯化得到5-氯-2-(三氟甲基)-1h-苯并[d]咪唑-7-甲酸，其为淡黄色固体(300mg，57％)。¹hnmr(400mhz，丙酮-d6)δ8.12(d，j＝1.9hz，1h)，8.02(d，j＝1.9hz，1h)。

向5-氯-2-(三氟甲基)-1h-苯并[d]咪唑-7-甲酸(60mg，0.23mmol)的搅拌溶液添加n,n,n’,n’-四甲基-o-(1h-苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(121mg，0.32mmol)和n,n-二异丙基乙基胺(278ul，1.6mmol)。将混合物搅拌10分钟，然后添加6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(54mg，0.25mmol)。所得反应在80℃加热2小时。冷却至室温后，将混合物在乙酸乙酯和饱和氯化铵溶液之间分离。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥且真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到5-氯-2-(三氟甲基)-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-1h-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺8，其为淡黄色固体(40mg，38％)。¹hnmr(500mhz，丙酮-d6)δ7.95(s，1h)，7.74(s，1h)，7.60(s，1h)，7.50(d，j＝8.3hz，1h)，7.42(s，0.5h)，7.30(d，j＝8.3hz，1h)，6.97(s，0.5h)。ms(esi)对[m+h]⁺计算的精确质量，要求m/z465.0，实测值m/z464.7.

实施例9

2,4-二(三氟甲基)-5-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基)苯酚(9)

将溴(5.61ml，109mmol)在二氯甲烷(50ml)中的溶液滴加至3,5-二(三氟甲基)苯胺(8.34g，36.4mmol)、碳酸钠(4.63g，43.7mmol)和铁粉(100mg，1.8mmol)在二氯甲烷(50ml)中的搅拌溶液中。将混合物回流3天。冷却后，将混合物过滤且滤液在水和二氯甲烷之间分离。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥且真空浓缩以得到标题化合物，其为淡黄色固体(13.38g，95％)，将其用于下一步而不用进一步纯化。¹hnmr(400mhz，氯仿-d)δ7.35(s，1h)，5.24(宽的单峰，2h)。

将硫酸(4.35ml)添加至2,6-二溴-3,5-二(三氟甲基)苯胺(1.16g，3mmol)在乙醇(95％，9ml)中的溶液中，然后添加亚硝酸钠(414mg，6mmol)在水(1ml)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌2h。将混合物用水稀释且用醚萃取。有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到标题化合物，其为白色固体(692mg，62％)。¹hnmr(400mhz，氯仿-d)δ8.11(s，1h)，7.95(s，1h)。

向1,5-二溴-2,4-二(三氟甲基)苯(330mg，0.89mmol)在二甲基甲酰胺(5ml)中的搅拌溶液中添加碘化亚铜(i)(17mg，0.089mmol)和0.5n甲醇钠在甲醇中的溶液(1.76ml)。将反应混合物在80℃在n2下搅拌6hs。将混合物用水稀释且用醚萃取。有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到标题化合物，其为无色油状物(198mg，69％)。¹hnmr(400mhz，氯仿-d)δ7.85(s，1h)，7.33(s，1h)，3.98(s，3h)。ms(esi)对[m]⁺计算的精确质量，要求m/z321.95，实测值m/z321.85.

将1-溴-5-甲氧基-2,4-二(三氟甲基)苯(45mg，0.14mmol)、mo(co)6(111mg，0.42mmol)、6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(92mg，0.42mmol)、k3po4(149mg，0.70mmol)、4-二甲基氨基吡啶(34mg，0.28mmol)、乙酸钯(ii)(4mg，0.014mmol)和xantphos(16mg，0.028mmol)在二噁烷(3ml)中的混合物在120℃在氮气下微波处理30mins。添加饱和氯化铵溶液且用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到标题化合物，其为白色固体(42mg，63％)。¹hnmr(400mhz，氯仿-d)δ8.37(s，1h)，8.02–7.96(m，1h)，7.83(s，1h)，7.78(d，j＝8.5hz，1h)，7.70–7.63(m，1h)，4.05(s，3h)。

n-(5-甲氧基-2,4-二(三氟甲基)苯基)-6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(43mg，0.088mmol)与吡啶鎓氯化物(1.0g)混合。将混合物加热至210℃，搅拌15分钟且冷却至室温。所得固体溶于水且用乙酸乙酯萃取。有机层真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到2,4-二(三氟甲基)-5-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基)苯酚9，其为淡黄色粉末(20.0mg，34％产率)。¹hnmr(400mhz，丙酮-d6)δ8.17(s，1h)，8.12(s，1h)，7.85(s，1h)，7.69(s，2h)。ms(esi)对[m+h]⁺计算的精确质量，要求m/z447.01，实测值m/z446.70.

实施例10

5-羟基-2,4-二(三氟甲基)-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺

将正丁基锂溶液(1.27ml，2.5m在己烷中)滴加至之前形成的1-溴-5-甲氧基-2,4-二(三氟甲基)苯(940mg，3mmol)在四氢呋喃(10ml)中的溶液中。在-78℃搅拌30min后，将200mg含碳干冰引入反应中。在混合物温热至室温后，盐用2m氢氧化钠溶液萃取3次。该溶液用2mhcl进一步酸化至ph为1。所得白色沉淀通过过滤回收，真空干燥。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为白色粉末(550.0mg，66％产率)。¹hnmr(400mhz，丙酮-d6)δ7.98(s，1h)，7.66(s，1h)，4.14(s，3h)。

将5-甲氧基-2,4-二(三氟甲基)苯甲酸(400mg，1.39mmol)溶于二氯甲烷(5.0ml)，然后分别添加催化量的二甲基甲酰胺(3滴)和草酰氯(143ul，1.67mmol)。将反应在室温搅拌30分钟且真空浓缩。将残余物重溶于四氢呋喃(8.0ml)，且添加hunig碱(291ul，1.67mmol)和6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(244mg，1.12mmol)。将混合物在室温搅拌48小时，然后添加硅胶以淬灭反应。将溶剂蒸发且所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为白色固体(290mg，53％产率)。¹hnmr(500mhz，丙酮-d6)δ8.48(s，1h)，8.05(s，1h)，7.98–7.91(m，2h)，7.79(dd，j＝8.5，1.4hz，1h)，4.16(s，3h)。ms(esi)对[m+h]⁺计算的精确质量，要求m/z489.03，实测值m/z488.60.

将5-甲氧基-2,4-二(三氟甲基)-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(100mg，0.205mmol)与吡啶鎓氯化物(1.8g)混合。将混合物加热至210℃，搅拌15分钟且冷却至室温。所得固体溶于水且用乙酸乙酯萃取。有机层真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-羟基-2,4-二(三氟甲基)-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺10，其为白色粉末(65.0mg，67％产率)。¹hnmr(500mhz，丙酮-d6)δ8.47(s，1h)，8.01(s，1h)，7.92(d，j＝8.5hz，1h)，7.78(dd，j＝8.2，0.9hz，1h)，7.57(s，1h)。ms(esi)对[m+h]⁺计算的精确质量，要求m/z475.02，实测值m/z474.70.

实施例11

吗啉-4-甲酸4-氯-2-((2-氯-4-氰基苯基)氨基甲酰基)苯基酯(11)

向5-氯-n-(2-氯-4-氰基苯基)-2-羟基苯甲酰胺(90mg，0.293mmol)在吡啶(3.0ml)中的搅拌溶液中添加吗啉-4-碳酰氯(69μl，0.586mmol)。将反应加热至60℃保持7h。冷却之后，添加3nhcl。将混合物用乙酸乙酯萃取两次。有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到吗啉-4-甲酸4-氯-2-((2-氯-4-氰基苯基)氨基甲酰基)苯基酯11，其为白色固体(98mg，83％产率)。¹hnmr(500mhz，丙酮-d6)δ9.34(s，1h)，8.58(d，j＝8.6hz，1h)，8.01(d，j＝1.8hz，1h)，7.92–7.77(m，2h)，7.63(dd，j＝8.7，2.6hz，1h)，7.35(d，j＝8.7hz，1h)，3.69(bs，2h)，3.62(bs，4h)，3.44(bs，2h)。ms(esi)对[m+na]⁺计算的精确质量，要求m/z442.03，实测值m/z441.95.

实施例12

吗啉-4-甲酸4-氯-2-((2-氯-4-(三氟甲基)苯基)氨基甲酰基)苯基酯(12)

向5-氯-n-(2-氯-4-(三氟甲基)苯基)-2-羟基苯甲酰胺(40mg，0.114mmol)在吡啶(3.0ml)中的搅拌溶液中添加吗啉-4-碳酰氯(27μl，0.228mmol)。将反应加热至60℃保持7h。冷却之后，添加3nhcl。将混合物用乙酸乙酯萃取两次。有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到吗啉-4-甲酸氯-2-((2-氯-4-(三氟甲基)苯基)氨基甲酰基)苯基酯12，其为白色固体(42mg，80％产率)。¹hnmr(400mhz，丙酮-d6)δ9.31(s，1h)，8.56(d，j＝8.7hz，1h)，7.89(d，j＝1.8hz，1h)，7.86(d，j＝2.7hz，1h)，7.77(dd，j＝8.7，1.6hz，1h)，7.62(dd，j＝8.7，2.7hz，1h)，7.34(d，j＝8.8hz，1h)，3.69(brs，2h)，3.62(brs，4h)，3.45(brs，2h)。ms(esi)对[m+na]⁺计算的精确质量，要求m/z485.03，实测值m/z484.95.

实施例13

吗啉-4-甲酸4-氯-2-((2-氯-4-硝基苯基)氨基甲酰基)苯基酯(13)

向5-氯-n-(2-氯-4-硝基苯基)-2-羟基苯甲酰胺(327mg，1mmol)在吡啶(5.0ml)中的搅拌溶液中添加吗啉-4-碳酰氯(233μl，2mmol)。将反应加热至60℃保持7h。冷却之后，添加3nhcl。将混合物用乙酸乙酯萃取两次。有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到吗啉-4-甲酸4-氯-2-((2-氯-4-硝基苯基)氨基甲酰基)苯基酯13，其为白色固体(356mg，81％产率)。¹hnmr(400mhz，丙酮-d6)δ9.44(s，1h)，8.68(d，j＝9.2hz，1h)，8.41(d，j＝2.6hz，1h)，8.32(dd，j＝9.2，2.6hz，1h)，7.88(d，j＝2.6hz，1h)，7.65(dd，j＝8.7，2.6hz，1h)，7.36(d，j＝8.7hz，1h)，3.74–3.56(m，6h)，3.45(brs，2h)。ms(esi)对[m+na]⁺计算的精确质量，要求m/z462.02，实测值m/z462.00.

实施例14

5-氯-n-(2-氯-4-(三氟甲基)苯基)-2-羟基苯甲酰胺(14)

将5-氯水杨酸(508.4mg，2.946mmol)溶于亚硫酰氯(4.0ml)。使反应在75℃回流且搅拌30分钟，然后将其真空浓缩。将残余物重溶于二氯甲烷，然后添加三氟甲基苯胺(0.37ml，2.651mmol)。将反应在室温搅拌14h，然后将其真空浓缩。固体残余物通过硅胶柱色谱法纯化(20％丙酮/己烷)以得到5-氯-n-(2-氯-4-(三氟甲基)苯基)-2-羟基苯甲酰胺14，其为灰白色固体(222.8mg，24％产率)。¹hnmr(500mhz，氯仿-d)δ11.37(s，1h)，8.54(d，j＝3.4hz，1h)，8.52(s，1h)，7.67(d，j＝2.1hz，1h)，7.55(dd，j＝8.8，2.0hz，1h)，7.46(d，j＝2.4hz，1h)，7.38(dd，j＝8.9，2.4hz，1h)，6.96(d，j＝8.9hz，1h)。ms(esi)对[m+h]计算的精确质量(c14h9cl2f3no2)要求m/z350.0，实测值m/z349.8.

实施例15

5-氯-n-(2-氯-4-氟苯基)-2-羟基苯甲酰胺(15)

将5-氯-2-羟基苯甲酸(543.4mg，3.149mmol)溶于亚硫酰氯(4.0ml)。使反应在75℃回流且搅拌30分钟，然后将其真空浓缩。将残余物重溶于二氯甲烷，然后添加氟苯胺(0.36ml，3.149mmol)。将反应在0℃搅拌2h，然后将其真空浓缩。固体残余物通过硅胶柱色谱法纯化(20％丙酮/己烷)以得到5-氯-n-(2-氯-4-氟苯基)-2-羟基苯甲酰胺15，其为灰白色固体(94.5mg，10％产率)。¹hnmr(500mhz，甲醇-d4)δ8.33(dd，j＝9.2，5.7hz，1h)，8.04(d，j＝2.7hz，1h)，7.41(dd，j＝8.8，2.7hz，1h)，7.33(dd，j＝8.3，2.9hz，1h)，7.13(ddd，j＝9.2，8.0，2.9hz，1h)，6.98(d，j＝8.7hz，1h)。ms(esi)对[m+h]⁺计算的精确质量，要求m/z300.0，实测值m/z299.9.

实施例16

5-氯-n-(2-氯-4-氰基苯基)-2-羟基苯甲酰胺(16)

将5-氯水杨酸(561.0mg，3.251mmol)溶于四氢呋喃(8.0ml)，然后分别添加催化量的二甲基甲酰胺(10μl)和草酰氯(0.33ml，3.901mmol)。将反应在室温搅拌30分钟，然后真空浓缩。将残余物重溶于邻二甲苯，然后添加氰基苯胺。然后将混合物加热至128℃且在该温度搅拌14小时，然后将其冷却至室温且过滤。滤饼用冷乙醚洗涤以得到粗氰基酰胺，其进一步通过硅胶柱色谱法纯化(25％丙酮/己烷)以得到5-氯-n-(2-氯-4-氰基苯基)-2-羟基苯甲酰胺16，其为灰白色固体(519.0mg，52％产率)。¹hnmr(500mhz，丙酮-d6)δ8.44(d，j＝9.2hz，1h)，8.29(d，j＝2.6hz，1h)，8.22(dd，j＝9.2，2.6hz，1h)，7.92(d，j＝2.2hz，1h)，7.62(dd，j＝8.2，2.2hz，1h)，7.43(d，j＝8.2hz，1h)。ms(esi)对[m+h]⁺计算的精确质量，要求m/z307.0，实测值m/z306.9.

实施例17

5-氯-n-(2-氯-4-氰基苯基)-2-羟基苯甲酰胺--2-氨基乙醇(1:1)(17)

在烧瓶中将5-氯-n-(2-氯-4-氰基苯基)-2-羟基苯甲酰胺(211.6mg，0.689mmol)悬浮于甲醇(25.0ml)且将2-氨基乙醇(50μl，0.827mmol)添加至混合物。将反应加热至60℃且在该温度搅拌30分钟。将反应冷却至室温且过滤以去除未反应的4-氰基酰胺。将滤液置于-10℃冰箱达14小时，且收集撞碎的固体且用乙醚洗涤以得到5-氯-n-(2-氯-4-氰基苯基)-2-羟基苯甲酰胺盐与2-氨基乙醇(1:1)17，其为淡黄色结晶固体(221.0mg，60％产率)。¹hnmr(500mhz，dmso-d6)δ8.87(d，j＝8.7hz，1h)，7.93(d，j＝2.0hz，1h)，7.65(dd，j＝8.7，2.0hz，1h)，7.62(d，j＝3.1hz，1h)，7.26(brs，3h)，6.98(dd，j＝8.9，3.1hz，1h)，6.42(d，j＝8.9hz，1h)，5.05(brs，2h)，3.54(t，j＝5.4hz，2h)，2.80(t，j＝5.4hz，2h)。

实施例18

[1,4'-联哌啶]-1'-甲酸4-氯-2-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯(18)

¹hnmr(400mhz，dmso-d6)δ10.37(brs，1h)，8.54(s，1h)，7.98(d，1h，j＝8.8hz)，7.89(d，1h，j＝2.8hz)，7.81-7.78(m，1h)，7.73-7.70(m，1h)，7.38(d，1h，j＝8.8hz)，4.36-3.97(m，3h)，3.36-2.99(m，4h)，2.83-2.67(m，3h)，2.33-1.29(m，10h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z567.14，实测值m/z.567.7.

实施例19

二甲基甘氨酸4-氯-2-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯

实施例20

脯氨酸4-氯-2-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯盐酸盐(20)

¹hnmr(400mhz，dmso-d6)δ12.54(brs，1h)，10.09(brs，1h)，8.46(s，1h)，8.05(d，j＝8.4hz，1h)，7.82(d，j＝2.8hz，1h)，7.45(dd，j1＝8.8hz，j2＝2.8hz，1h)，6.99(d，j＝8.8hz，1h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z470.06，实测值m/z.470.4.

实施例21

5-氯-n-(4-氟-6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-2-羟基苯甲酰胺(21)

¹hnmr(400mhz，dmso-d6)δ12.59(brs，1h)，8.44(s，1h)，7.91(s，1h)，7.76(d，j＝10.8hz，1h)，7.55(d，j＝8.4hz，1h)，7.10(d，j＝8.8hz，1h)。ms(esi)[m-h]^-要求m/z388.98，实测值m/z.389.4.

实施例22

n-(4,6-二(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-5-氯-2-羟基苯甲酰胺(22)

¹hnmr(400mhz，dmso-d6)δ13.00(brs，1h)，8.90(s，1h)，8.05(s，1h)，7.89(d，j＝2.4hz，1h)，7.54-7.51(m，1h)，7.07(d，j＝8.8hz，1h)。ms(esi)[m-h]-要求m/z438.97，实测值m/z.439.6.

实施例23

5-氯-n-(4,6-二氟苯并[d]噻唑-2-基)-2-羟基苯甲酰胺(23)

¹hnmr(400mhz，dmso-d6)δ12.25(brs，1h)，7.91-7.82(m，2h)，7.54-7.38(m，2h)，7.09(d，1h，j＝8.8hz)。ms(esi)[m+h]+要求m/z341.00，实测值m/z.341.2.

实施例24

5-氯-n-(6-氟-4-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-2-羟基苯甲酰胺(24)

¹hnmr(400mhz，dmso-d6)δ12.54(brs，1h)，11.79(brs，1h)，8.34(d，j＝6.0hz，1h)，7.89(d，j＝2.8hz，1h)，7.77-7.75(m，1h)，7.54-7.51(m，1h)，7.08(d，j＝9.2hz，1h)。ms(esi)[m-h]-要求m/z388.98，实测值m/z.389.4.

实施例25

5-氯-2-羟基-n-(5-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(25)

¹hnmr(400mhz，dmso-d6)δ11.18(brs，1h)，8.42(d，j＝2.0hz，1h)，8.13(dd，j1＝8.8hz，j2＝2.4hz，1h)，8.05(d，j＝8.8hz，1h)，7.82(d，j＝2.4hz，1h)，7.46(dd，j1＝8.8hz，j2＝2.8hz，1h)，7.00(d，j＝8.8hz，1h)。ms(esi)[m-h]^-要求m/z370.99，实测值m/z.370.8.

实施例26

5-氯-2-羟基-n-(7-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(26)

¹hnmr(400mhz，dmso-d6)δ11.29(brs，1h)，8.42(d，j＝2.0hz，1h)，8.12(dd，j1＝8.4hz，j2＝2.0hz，1h)，8.05(d，j＝8.4hz，1h)，7.82(d，j＝2.8hz，1h)，7.45(dd，j1＝8.8hz，j2＝2.8hz，1h)，6.99(d，j＝8.8hz，1h)。ms(esi)[m-h]^-要求m/z370.99，实测值m/z.371.3.

实施例27

5-氯-3-乙基-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(27)

在n2下向3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸(355mg，1.34mmol)、pd(dppf)cl2(20mg，0.027mmol)和cs2co3(1.31g，4.02mmol)在thf(10ml)中的搅拌溶液中添加三乙基硼烷(4.02ml，1m的thf溶液)。将混合物在n2下回流6h。冷却之后，将反应使用1nhcl酸化至ph＝1且用ea萃取。ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-2-甲氧基-3-乙基苯甲酸，其为白色固体(100mg，36％)。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ7.89(d，j＝2.7hz，1h)，7.44(d，j＝2.7hz，1h)，3.91(s，3h)，2.73(q，j＝9.0hz，2h)，1.28(t，j＝9.0hz，3h)。

将5-氯-2-甲氧基-3-乙基苯甲酸(100mg，0.467mmol)溶于dmf(5ml)。添加hbtu(213mg，0.561mmol)，然后添加dipea(244ul，1.40mmol)。所得混合物在室温搅拌15分钟，然后添加6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(102mg，0.467mmol)。所得混合物在120℃搅拌24h。添加饱和nh4cl溶液且用ea萃取两次。合并的ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为黄色粉末(115mg，62％)。¹hnmr(300mhz，丙酮-d6)δ8.40(s，1h)，8.10(s，1h)，7.90(d，j＝8.7hz，1h)，7.81(d，j＝8.1hz，1h)，7.39(s，1h)，2.72(q，j＝9.0hz，2h)，1.24(t，j＝9.0hz，3h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z401.03，实测值m/z400.6.

实施例28

5-氯-2-羟基-3-甲基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺乙醇胺

向mb1-37(200mg，0.517mmol)在meoh(5ml)中的搅拌溶液中添加乙醇胺(35ul，0.569mmol)且所得混合物回流1h。冷却至室温后，将未反应的mb1-37过滤出且将滤液浓缩且抽真空以得到mb1-47(200mg，87％)，其为淡黄色固体。¹hnmr(300mhz，甲醇)δ8.11(s，1h)，7.77-7.73(m，2h)，7.62–7.59(m，1h)，7.16-7.14(m，1h)，3.73(t，j＝6.0hz，2h)，3.01(t，j＝6.0hz，2h)，2.22(s，3h)。

实施例29

5-氯-n-(6-氟苯并[d]噻唑-2-基)-2-羟基-3-甲基苯甲酰胺(29)

将5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酸(100mg，0.498mmol)溶于dmf(5ml)。添加hbtu(228mg，0.60mmol)，然后添加dipea(261ul，1.50mmol)。所得混合物在室温搅拌15分钟，然后添加6-氟苯并[d]噻唑-2-胺(84mg，0.498mmol)。所得混合物在120℃搅拌24h。添加饱和nh4cl溶液且用ea萃取两次。合并的ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为黄色固体(58mg，35％)。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ8.02(d，j＝2.4hz，1h)，7.64(dd，j＝8.9，4.5hz，1h)，7.47(dd，j＝7.9，2.6hz，1h)，7.25(dd，j＝1.8，0.9hz，1h)，7.16(td，j＝8.8，2.5hz，1h)，2.23(s，3h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z337.02，实测值m/z336.6.

实施例30

3,5-二氯-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(30)

将3,5-二氯水杨酸(104mg，0.5mmol)溶于thf(3.0ml)，然后分别添加催化量的dmf(1滴)和草酰氯(51ul，0.6mmol)。将反应在室温搅拌30分钟且真空浓缩。将残余物重溶于二噁烷(5.0ml)且添加6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(109mg，0.5mmol)。将混合物回流过夜。将溶剂蒸发且所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(35mg，18％)，其为白色固体。¹hnmr(400mhz，丙酮-d6)δ8.66(s，1h)，8.33(d，j＝8.6hz，1h)，8.12(d，j＝2.5hz，1h)，8.04(d，j＝2.5hz，1h)，7.96(dd，j＝8.6，1.4hz，1h)。ms(esi)[m-h]⁺要求m/z404.96，实测值m/z405.20.

实施例31

5-氯-2-羟基-3-甲基-n-(4-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(31)

将5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酸(71mg，0.355mmol)溶于dmf(5ml)。添加hbtu(162mg，0.426mmol)，然后添加dipea(248ul，1.42mmol)。所得混合物在室温搅拌15分钟，然后添加4-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(77mg，0.355mmol)。所得混合物在120℃搅拌24h。添加饱和nh4cl溶液且用ea萃取两次。合并的ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为黄色固体(55mg，40％)。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ8.05(d，j＝8.0hz，1h)，7.78(d，j＝7.7hz，1h)，7.53(s，1h)，7.44(t，j＝8.0hz，1h)，7.34(s，1h)，2.29(s，3h)。ms(esi)[m+na]⁺要求m/z409.00，实测值m/z408.4.

实施例32

5-氯-2-羟基-n-(4-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺乙醇胺(32)

向5-氯-2-羟基-n-(4-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(29mg，0.078mmol)在meoh(5ml)中的搅拌溶液中添加乙醇胺(5.2ul，0.086mmol)且所得混合物回流1h。冷却至室温后，将未反应的起始材料过滤出且将滤液浓缩且抽真空以得到标题化合物(30mg，91％)，其为淡黄色固体。¹hnmr(300mhz，甲醇-d4)δ8.08(d，j＝7.9hz，1h)，7.88(d，j＝2.9hz，1h)，7.69(d，j＝7.6hz，1h)，7.35(t，j＝7.8hz，1h)，7.22(dd，j＝8.8，3.0hz，1h)，6.79(d，j＝8.9hz，1h)，3.80–3.70(m，2h)，3.02(t，j＝5.2hz，2h)。

实施例33

5-氯-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺乙醇胺(33)

向5-氯-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(235mg，0.632mmol)在meoh(6ml)中的搅拌溶液中添加乙醇胺(42ul，0.695mmol)且所得混合物回流1h。冷却至室温后，将未反应的起始材料过滤出且将滤液浓缩且抽真空以得到标题化合物(246mg，90％)，其为淡黄色固体。¹hnmr(300mhz，甲醇-d4)δ8.16(s，1h)，7.89(s，1h)，7.78(d，j＝8.6hz，1h)，7.64(d，j＝8.5hz，1h)，7.23(d，j＝8.9hz，1h)，6.80(d，j＝8.8hz，1h)，3.82–3.67(m，2h)，3.07–2.95(m，2h)。

实施例34

5-氯-2-羟基-3-甲基-n-(4-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺乙醇胺(34)

向5-氯-2-羟基-3-甲基-n-(4-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(20mg，0.0517mmol)在meoh(5ml)中的搅拌溶液中添加乙醇胺(3.5ul，0.0569mmol)且所得混合物回流1h。冷却至室温后，将未反应的起始材料过滤出且将滤液浓缩且抽真空以得到标题化合物(20mg，87％)，其为淡黄色固体。¹hnmr(300mhz，甲醇-d4)δ8.06(d，j＝7.9hz，1h)，7.75(d，j＝2.9hz，1h)，7.67(d，j＝7.7hz，1h)，7.32(t，j＝7.4hz，1h)，7.15(d，j＝2.9hz，1h)，3.77–3.69(m，2h)，3.03–2.96(m，2h)。

实施例35

5-氯-n-(4,6-二氟苯并[d]噻唑-2-基)-2-羟基苯甲酰胺乙醇胺(35)

向5-氯-n-(4,6-二氟苯并[d]噻唑-2-基)-2-羟基苯甲酰胺(49mg，0.144mmol)在meoh(5ml)中的搅拌溶液中添加乙醇胺(10ul，0.158mmol)且所得混合物回流1h。冷却至室温后，将未反应的起始材料过滤出且将滤液浓缩且抽真空以得到标题化合物(50mg，88％)，其为淡黄色固体。¹hnmr(300mhz，甲醇-d4)δ7.87(t，j＝2.9hz，1h)，7.47–7.36(m，1h)，7.21(dd，j＝8.9，2.9hz，1h)，7.07–6.92(m，1h)，6.79(d，j＝8.8hz，1h)，3.69(t，j＝5.3hz，2h)，2.92(t，j＝5.4hz，2h)。

实施例36

5-氯-3-环丙基-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(36)

在100℃将3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(280mg，1mmol)、环丙基硼酸(258mg，3mmol)、pd(oac)2(22mg，0.1mmol)、三环己基膦(56mg，0.2mmol)和磷酸钾(743mg，3.5mmol)在甲苯(10ml)和水(2ml)中的混合物搅拌过夜。将反应冷却后，添加饱和nh4cl溶液且用ea萃取两次。合并的ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-3-环丙基-2-甲氧基苯甲酸甲酯，其为无色油状物(177mg，74％)。¹hnmr(500mhz，氯仿-d)δ7.53(d，j＝2.7hz，1h)，6.90(d，j＝2.6hz，1h)，3.90(s，4h)，3.88(s，3h)，2.21(tt，j＝8.5，5.3hz，1h)，1.05-1.00(m，2h)，0.69-0.66(m，2h)。

向5-氯-3-环丙基-2-甲氧基苯甲酸甲酯(177mg，0.74mmol)在meoh(5ml)中的搅拌溶液中添加3.6ml1nkoh溶液。所得混合物在60℃搅拌过夜。将溶剂蒸发出且残余物在ea和1nnaoh溶液之间分配。将水层酸化至ph＝1且用ea萃取。该有机相用na2so4干燥且真空浓缩以得到5-氯-3-环丙基-2-甲氧基苯甲酸，其为白色固体(120mg，76％)，将其用于下一步而不用进一步纯化。

向5-氯-3-环丙基-2-甲氧基苯甲酸(120mg，0.53mmol)和hbtu(243mg，0.64mmol)在dmf(5ml)中的搅拌溶液中添加dipea(277ul，1.59mmol)。将混合物搅拌10分钟，然后添加6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(92mg，0.42mmol)。所得反应在120℃加热24小时。冷却至室温后，将混合物在ea和水之间分离。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥且真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到标题化合物，其为黄色固体(45mg，26％)。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ8.11(s，1h)，7.70-7.63(m，2h)，6.98(d，j＝3.0hz，1h)，6.71(d，j＝3.0hz，1h)，2.20-2.10(m，1h)，1.05-1.00(m，2h)，0.70-0.65(m，2h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z413.03，实测值m/z413.15.

实施例37

5-氯-2-羟基-3-甲基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺化合物与(2r,3r,4r,5s)-6-(甲基氨基)己烷-1,2,3,4,5-戊醇(1:1)(37)

向5-氯-2-羟基-3-甲基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(100mg，0.248mmol)在meoh(5ml)中的搅拌溶液中添加n-甲基-d-葡糖胺(48mg，0.248mmol)且将所得混合物回流1h。冷却至室温后，将未反应的起始材料过滤出且将滤液浓缩且抽真空以得到标题化合物(125mg，84％)，其为淡黄色固体。¹hnmr(300mhz，甲醇-d4)δ8.10(s，1h)，7.74(d，j＝7.4hz，2h)，7.59(d，j＝8.8hz，1h)，7.13(s，1h)，4.08–3.89(m，2h)，3.87–3.52(m，6h)，3.11(d，j＝6.0hz，2h)，2.67(s，3h)，2.22(s，3h)。

实施例38

5-氯-2-羟基-3-异丙基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(38)

在n2下，将3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(280mg，1mmol)一次性添加至二异丙基锌(2ml，1m的甲苯溶液)在二噁烷(10ml)中的溶液中，然后添加pd(dppf)cl2(82mg，0.1mmol)。将混合物加热至回流保持3h。冷却至室温后，将混合物用1nhcl淬灭且用ea稀释。分离的有机层用1nhcl、水、盐水洗涤，干燥，过滤且在减压下浓缩。残余物通过柱色谱纯化以得到5-氯-3-异丙基-2-甲氧基苯甲酸甲酯(100mg，42％)，其为淡黄色油状物。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ7.62(d，j＝2.7hz，1h)，7.37(d，j＝2.7hz，1h)，3.93(s，3h)，3.83(s，3h)，3.38(p，j＝6.9hz，1h)，1.23(d，j＝6.9hz，7h)。

向5-氯-3-异丙基-2-甲氧基苯甲酸甲酯(100mg，0.413mmol)在meoh(5ml)中的搅拌溶液中添加2.0ml1nkoh溶液。所得混合物在60℃搅拌过夜。将溶剂蒸发出且残余物在ea和1nnaoh溶液之间分配。将水层酸化至ph＝1且用ea萃取。该有机相用na2so4干燥且真空浓缩以得到5-氯-3-异丙基-2-甲氧基苯甲酸，其为无色油状物(90mg，96％)，将其用于下一步而不用进一步纯化。

向5-氯-3-异丙基-2-甲氧基苯甲酸(90mg，0.395mmol)和hbtu(180mg，0.474mmol)在dmf(5ml)中的搅拌溶液中添加dipea(206ul，1.185mmol)。将混合物搅拌10分钟，然后添加6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(86mg，0.395mmol)。所得反应在120℃加热24小时。冷却至室温后，将混合物在ea和水之间分离。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥且真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到标题化合物，其为黄色固体(35mg，22％)。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ8.17(s，1h)，7.66(s，2h)，7.50(d，j＝2.5hz，1h)，7.34(d，j＝1.7hz，1h)，3.51-3.35(m，1h)，1.28(d，j＝6.9hz，6h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z415.05，实测值m/z415.05.

实施例39

[1,4'-联哌啶]-1'-甲酸4-氯-2-甲基-6-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯盐酸盐(39)

向5-氯-2-羟基-3-甲基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(60mg，0.155mmol)在thf(5ml)中的搅拌溶液中添加dipea(81ul，0.465mmol)和[1,4'-联哌啶]-1'-碳酰氯(72mg，0.31mmol)。将混合物在70℃搅拌16h。冷却至室温后，反应物在ea和水之间分配。ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为黄色油状物(40mg，45％)。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ8.08(s，1h)，7.75(d，1h，j＝6.0hz)，7.62(d，1h，j＝6.0hz)，7.56(d，1h，j＝3.0hz)，7.36(d，1h，j＝3.0hz)，4.53-4.41(m，3h)，3.18-2.75(m，9h)，2.27(s，3h)，1.83-1.69(m，7h)。ms(esi)[m+h]+要求m/z581.15，实测值m/z580.85.

向[1,4'-联哌啶]-1'-甲酸4-氯-2-甲基-6-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯(40mg，0.069mmol)在thf(3ml)中的搅拌溶液中添加4.0nhcl在二噁烷中的溶液(18ul，0.07mmol)。将混合物在室温搅拌20mins。将所得沉淀过滤且用乙醚洗涤以得到标题化合物，其为黄色固体(42mg，100％)。

实施例40

5-氯-n-(4,6-二氟苯并[d]噻唑-2-基)-2-羟基-3-甲基苯甲酰胺(40)

将5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酸(100mg，0.498mmol)溶于dmf(5ml)。添加hbtu(228mg，0.60mmol)，然后添加dipea(261ul，1.50mmol)。所得混合物在室温搅拌15分钟，然后添加4,6-二氟苯并[d]噻唑-2-胺(90mg，0.498mmol)。所得混合物在120℃搅拌24h。添加饱和nh4cl溶液且用ea萃取两次。合并的ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为白色固体(40mg，22％)。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ7.41(d，j＝3.0hz，1h)，7.39-7.36(m，1h)，7.33(d，j＝3.0hz，1h)，7.00-6.95(m，1h),2.29(s，3h)。ms(esi)[m+h]+要求m/z355.01，实测值m/z354.4.

实施例41

5-氯-2-羟基-3-甲基-n-(5-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(41)

将5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酸(71mg，0.354mmol)溶于dcm(3.0ml)，然后分别添加催化量的dmf(2滴)和草酰氯(37ul，0.425mmol)。将反应在室温搅拌30分钟且真空浓缩。将残余物重溶于thf(5.0ml)，且添加hunig碱(74ul，0.425mmol)和5-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(62mg，0.283mmol)。将混合物在室温搅拌48小时，然后添加硅胶以淬灭反应。将溶剂蒸发且所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-2-甲氧基-3-甲基-n-(5-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(90mg，80％产率)，其为白色固体。¹hnmr(500mhz，氯仿-d)δ9.86(s，1h)，7.97(s，1h)，7.80-7.71(m，2h)，7.67(d，j＝8.6hz，1h)，7.18(s，1h)，3.66(s，3h)，2.16(s，3h)。ms(esi)[m+h]+要求m/z401.03，实测值m/z400.7.

5-氯-2-甲氧基-3-甲基-n-(5-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(90mg，0.225mmol)与吡啶鎓氯化物(1.0g)混合。将混合物加热至210℃，搅拌15分钟且冷却至室温。所得固体溶于水且用乙酸乙酯萃取。有机层真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为黄色固体(43.0mg，50％产率)。¹hnmr(500mhz，氯仿-d)δ11.50(s，1h)，7.97-7.89(m，2h)，7.79-7.70(m，2h)，7.20(s，1h)，7.16(s，1h)，2.11(s，3h)。ms(esi)[m+h]+要求m/z387.02，实测值m/z386.70.

实施例42

5-氯-2-羟基-3-甲基-n-(7-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(42)

将5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酸(74mg，0.369mmol)溶于dcm(3.0ml)，然后分别添加催化量的dmf(2滴)和草酰氯(38ul，0.443mmol)。将反应在室温搅拌30分钟且真空浓缩。将残余物重溶于thf(5.0ml)，且添加hunig碱(78ul，0.443mmol)和7-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(64mg，0.295mmol)。将混合物在室温搅拌48小时，然后添加硅胶以淬灭反应。将溶剂蒸发且所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-2-甲氧基-3-甲基-n-(7-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(102mg，86％产率)，其为白色固体。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ10.09(s，1h)，8.19(d，j＝2.4hz，1h)，8.06-7.84(m，3h)，7.40(dd，j＝2.8，0.8hz，1h)，3.88(s，3h)，2.39(s，3h)。ms(esi)[m+h]+要求m/z401.03，实测值m/z401.70.

5-氯-2-甲氧基-3-甲基-n-(7-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(102mg，0.255mmol)与吡啶鎓氯化物(1.0g)混合。将混合物加热至210℃，搅拌15分钟且冷却至室温。所得固体溶于水且用乙酸乙酯萃取。有机层真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为黄色固体(40mg，41％产率)。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ11.85(s，1h)，8.10(s，1h)，7.96(s，1h)，7.90-7.77(m，2h)，7.38(s，1h)，7.32(s，1h)，2.29(s，3h)。ms(esi)[m+h]+要求m/z387.02，实测值m/z386.70.

实施例43和实施例44

磷酸二氢4-氯-2-甲基-6-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯(43)

磷酸钠4-氯-2-甲基-6-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯(44)

磷酸4-氯-2-甲基-6-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯二乙基酯

在0℃向mb1-37(163mg，0.42mmol)在chcl3(8ml)和thf(2ml)中的搅拌溶液中添加亚磷酸二乙酯(66ul，0.51mmol)、ccl4(0.3ml)、dmap(7mg，0.051mmol)和dipea(0.17ml)。将混合物逐渐温热至室温且在室温搅拌14h，然后将其真空浓缩。残余物通过硅胶纯化以得到产物，其为淡黄色固体(130mg，62％)。ms(esi)[m+h]+要求m/z523.05，实测值m/z523.8.

磷酸二氢4-氯-2-甲基-6-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯(43)

在室温向磷酸4-氯-2-甲基-6-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯二乙基酯(63mg，0.12mmol)在无水dcm(4ml)中的搅拌溶液中滴加三甲基碘硅烷(86ul，0.6mmol)。将混合物在室温搅拌2天。将溶剂蒸发出且将meoh(10ml)添加至残余物且将混合物在室温搅拌30min。将反应混合物过滤且将滤液浓缩以得到棕色固体。该棕色固体用醚洗涤三次，然后用少量水洗涤以得到产物，其为黄色固体(43mg，86％)。1hnmr(300mhz，甲醇)δ8.25(s，1h)，7.81(brs，1h)，7.68(brs，1h)，7.52(s，1h)，7.47(s，1h)，2.39(s，3h)。ms(esi)[m+h]+要求m/z466.98，实测值m/z466.45.

磷酸钠4-氯-2-甲基-6-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯(44)

向磷酸二氢4-氯-2-甲基-6-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯(20mg，0.043mmol)在meoh(2ml)中的搅拌溶液中添加naoh(3.4mg，0.086mmol)在meoh(1.5ml)中的溶液。将混合物在室温搅拌30min且去除溶剂以得到黄色固体，将其用醚和少量水洗涤以得到mb1-70，其为淡黄色固体(20mg，95％)。

实施例45

吗啉-4-甲酸4-氯-2-甲基-6-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯(45)

向5-氯-3-甲基-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(47mg，0.121mmol)在吡啶(3.0ml)中的搅拌溶液中添加吗啉-4-碳酰氯(28μl，0.243mmol)。将反应加热至50℃保持7h。冷却之后，添加3nhcl。将混合物用ea萃取两次。有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为白色固体(42.0mg，70％产率)。¹hnmr(300mhz，丙酮-d6)δ11.62(s，1h)，8.48(s，1h)，8.02-7.89(m，1h)，7.85-7.71(m，2h)，7.66-7.54(m，1h)，3.87-3.38(m，8h)，2.32(s，3h)。ms(esi)[m+h]+要求m/z500.07，实测值m/z499.6.

实施例46

4-甲基哌嗪-1-甲酸4-氯-2-甲基-6-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯盐酸盐(46)

向5-氯-3-甲基-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(48mg，0.124mmol)在吡啶(3.0ml)中的搅拌溶液中添加4-甲基哌嗪-1-碳酰氯(34μl，0.248mmol)。将反应加热至50℃保持7h。冷却之后，添加3nhcl。将混合物用ea萃取两次。合并的有机层用3nhcl、水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，真空浓缩。所得白色固体用己烷洗涤两次以得到标题化合物，其为白色固体(42.0mg，67％产率)。¹hnmr(300mhz，甲醇-d4)δ8.35(s，1h)，7.96(d，j＝8.5hz，1h)，7.74(d，j＝2.7hz，2h)，7.62(s，1h)，3.01(s，3h)，2.32(s，3h)，1.30(brs，8h)。ms(esi)[m+na]⁺要求m/z535.08，实测值m/z535.45.

实施例47

哌嗪-1-甲酸4-氯-2-甲基-6-((6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酰基)苯基酯盐酸盐(47)

向5-氯-3-甲基-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(59mg，0.152mmol)在吡啶(3.0ml)中的搅拌溶液中添加4-(氯羰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(46mg，0.183mmol)。将反应加热至50℃保持7h。冷却之后，去除溶剂且残余物在ea和水之间分配。有机层用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，真空浓缩。所得黄色油状物用在二噁烷(5ml)中的4nhcl处理且将混合物在室温搅拌2h。去除溶剂且剩余白色固体用乙醚洗涤三次以得到标题化合物，其为白色固体(70.0mg，86％产率)。¹hnmr(500mhz，甲醇-d4)δ8.20(brs，1h)，7.78(brs，1h)，7.58(brs，2h)，7.45(brs，1h)，3.77(brs，4h)，3.51(brs，4h)，2.18(s，3h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z499.08，实测值m/z498.85.

实施例48

5-氯-3-氰基-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(48)

将3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(279mg，1mmol)、zn(cn)2(117mg，1mmol)、pd(pph3)4(35mg，0.03mmol)的混合物在120℃在n2下微波处理30min。冷却至室温后，将混合物在ea和水之间分离。分离的有机层用水、盐水洗涤，干燥，过滤且在减压下浓缩。残余物通过柱色谱纯化以得到5-氯-3-氰基-2-甲氧基苯甲酸甲酯(180mg，80％)，其为白色固体。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ7.97(d，j＝2.7hz，1h)，7.70(d，j＝2.7hz，1h)，4.06(s，3h)，3.95(s，3h)。

向5-氯-3-氰基-2-甲氧基苯甲酸甲酯(86mg，0.382mmol)在meoh(3ml)中的搅拌溶液中添加2.0ml1nkoh溶液。所得混合物在60℃搅拌过夜。将溶剂蒸发出且将4nhcl的二噁烷溶液(1ml)添加至残余物。将混合物再搅拌10min，然后将其浓缩且真空干燥。向该残余物添加hbtu(172mg，0.456mmol)、dmf(3ml)和dipea(330ul，1.9mmol)。将混合物搅拌10分钟，然后添加6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(83mg，0.38mmol)。所得反应在120℃加热24小时。冷却至室温后，将混合物在ea和水之间分离。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥且真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到5-氯-3-氰基-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺，其为黄色固体(62mg，42％)。¹hnmr(300mhz，丙酮-d6)δ8.31(dt，j＝1.6，0.9hz，1h)，7.85(d，j＝3.0hz，1h)，7.79-7.65(m，2h)，7.14(d，j＝3.0hz，1h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z398.00，实测值m/z397.95.

实施例49

5-氯-2-羟基-3-(羟基甲基)-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(49)

向5-氯-3-(羟基甲基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯(106mg，0.46mmol)在dcm(5ml)中的搅拌溶液中添加dipea(240ul，1.38mmol)、momcl(105ul，1.38mmol)，然后添加dmap(3mg，0.023mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。反应完成后，添加dcm和饱和氯化氨溶液。将有机层干燥且浓缩，残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-2-甲氧基-3-((甲氧基甲氧基)甲基)苯甲酸甲酯(122mg，97％)，其为黄色油状物。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ7.72(d，j＝2.8hz，1h)，7.58(d，j＝2.9hz，1h)，4.73(s，2h)，4.64(s，2h)，3.90(s，3h)，3.83(s，3h)，3.40(s，3h)。

向5-氯-2-甲氧基-3-((甲氧基甲氧基)甲基)苯甲酸甲酯(122mg，0.445mmol)在meoh(5ml)中的搅拌溶液中添加2.2ml1nkoh溶液。所得混合物在60℃搅拌过夜。冷却至室温后，反应在ea和2％柠檬酸之间分离。ea层用盐水洗涤，用na2so4干燥且真空浓缩。向该残余物添加hbtu(98mg，0.258mmol)、dmf(3ml)和dipea(187ul，1.075mmol)。将混合物搅拌10分钟，然后添加6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(47mg，0.215mmol)。所得反应在120℃加热24小时。冷却至室温后，将混合物在ea和水之间分离。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥且真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到5-氯-2-羟基-3-((甲氧基甲氧基)甲基)-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2基)苯甲酰胺，其为黄色固体(37mg，39％)。¹hnmr(400mhz，氯仿-d)δ8.16(s，1h)，7.99(d，j＝2.5hz，1h)，7.91(d，j＝6.1hz，1h)，7.72(d，j＝6.1hz，1h)，7.48(d，j＝2.5hz，1h)，4.80(s，2h)，4.78(s，2h)，3.47(s，3h)。ms(esi)[m+na]⁺要求m/z469.02，实测值m/z468.55.

向5-氯-2-羟基-3-((甲氧基甲氧基)甲基)-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2基)苯甲酰胺(37mg，0.083mmol)在异丙基(4ml)中的搅拌溶液中添加浓hcl(4ml)。所得混合物在室温搅拌过夜。反应完成后，将水添加至反应且用ea萃取。有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥且真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到5-氯-2-羟基-3-(羟基甲基)-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺，其为黄色固体(20mg，61％)。¹hnmr(400mhz，氯仿-d)δ8.24(s，1h)，7.86–7.61(m，4h)，4.67(s，2h)。ms(esi)[m+na]⁺要求m/z425.00，实测值m/z424.40.

实施例50

n-(4,6-二(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-5-氯-2-羟基-3-甲基苯甲酰胺

将5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酸(74mg，0.369mmol)溶于dcm(3.0ml)，然后分别添加催化量的dmf(1滴)和草酰氯(38ul，0.44mmol)。将反应在室温搅拌30分钟且真空浓缩。将残余物重溶于thf(5.0ml)，且添加hunig碱(78ul，0.45mmol)和4,6-二(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(105mg，0.369mmol)。将混合物在室温搅拌48小时，然后添加硅胶以淬灭反应。将溶剂蒸发且所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-n-(2-氯-4-(三氟甲基)苯基)-2-甲氧基-3-甲基苯甲酰胺(80mg，60％产率)，其为白色固体。¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ11.46(s，1h)，8.33(s，1h)，8.04(d，j＝2.7hz，1h)，7.99(s，1h)，7.47(d，j＝2.7hz，1h)，3.98(s，3h)，2.43(s，3h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z469.02，实测值m/z469.45.

在-78℃，向n-(4,6-二(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酰胺(80mg，0.176mmol)在无水dcm(5ml)中的搅拌溶液中滴加bbr3(1.0m的dcm溶液，0.528ml)。添加后，反应缓慢温热至室温且将混合物在室温搅拌2h。反应完成后，将反应混合物在冰浴中冷却且添加meoh和水以淬灭反应。将混合物在dcm和水之间分离。有机层用水、盐水洗涤且用硫酸钠干燥，真空浓缩，残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(60mg，78％)，其为白色固体。¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ11.15(s，1h)，8.35(s，1h)，8.03(s，1h)，7.51(d，j＝2.0hz，1h)，7.40(dd，j＝2.4，0.8hz，1h)，2.32(s，3h)。ms(esi)[m+h]+要求m/z455.01，实测值m/z455.45.

实施例51

5-氯-2-羟基-3-甲基-n-(6-(三氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(51)

在室温向5-氯-2-甲氧基苯甲酸(5.59g，30mmol)在硫酸(10.2ml)和tfa(20.4ml)中的搅拌溶液中添加nbs(5.87g，33mmol)。将浅色溶液在室温搅拌过夜。所得浅色悬浮液小心倒在碎冰上。将混合物用ea萃取。ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。将淡黄色残余物悬浮于最少量的dcm。收集固体，用冷dcm洗涤且真空干燥以得到3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸，其为白色固体(8.00g，100％)。¹hnmr(300mhz，丙酮)δ7.86(d，1h，j＝3.0hz)，7.78(d，1h，j＝3.0hz)，3.91(s，3h)。

将3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸(2.65g，10.0mmol)、甲基硼酸(1.79g，30mmol)、pd(dppf)cl2(163mg，0.2mmol)和cs2co3(9.77g，30mmol)的混合物在thf(30ml)中在n2下回流过夜。使用1nhcl将反应酸化至ph＝1且用ea萃取。ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酸，其为白色固体(1.80g，90％)。¹hnmr(300mhz，氯仿)δ7.94(d，1h，j＝3.0hz)，7.43(d，1h，j＝3.0hz)，3.94(s，3h)，2.38(s，3h)。

将5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酸(96mg，0.48mmol)溶于dcm(3.0ml)，然后分别添加催化量的dmf(1滴)和草酰氯(68ul，0.58mmol)。将反应在室温搅拌30分钟且真空浓缩。将残余物重溶于thf(5.0ml)，且添加hunig碱(125ul，0.72mmol)和6-(三氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-胺(135mg，0.576mmol)。将混合物在室温搅拌48小时，然后添加硅胶以淬灭反应。将溶剂蒸发且所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-2-甲氧基-3-甲基-n-(6-(三氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(60mg，31％产率)，其为白色固体。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ11.46(s，1h)，8.05(d，j＝2.8hz，1h)，7.83(d，j＝8.9hz，1h)，7.74(dd，j＝2.4，1.1hz，1h)，7.44(d，j＝2.8hz，1h)，7.39–7.31(m，1h)，3.96(s，3h)，2.40(s，3h)。ms(esi)[m+h]+要求m/z417.03，实测值m/z417.20.

将5-氯-2-甲氧基-3-甲基-n-(6-(三氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(60mg，0.144mmol)在dmf(3ml)中的溶液与乙烷硫醇钠(60mg，0.721mmol)混合且所得悬浮液在130℃加热过夜。反应完成后，将1nhcl添加至反应且用ea萃取两次。合并的ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(47mg，83％)，其为白色固体。¹hnmr(300mhz，丙酮-d6)δ11.37(brs，2h)，8.09(d，j＝2.6hz，1h)，8.04(s，1h)，7.83(d，j＝8.8hz，1h)，7.48(d，j＝8.8hz，1h)，7.40(d，j＝2.6hz，1h)，2.26(s，3h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z403.01，实测值m/z403.20.

实施例52

5-氯-3-(3-(二甲基氨基)丙基)-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(52)

3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸

在室温向5-氯-2-甲氧基苯甲酸(5.58g，30mmol)在硫酸(10ml)和tfa(20ml)中的搅拌溶液中添加nbs(5.88g，33mmol)。将浅色溶液在室温搅拌3小时。所得浅色悬浮液小心倒在500g碎冰。将混合物用ea萃取。ea层用硫酸钠干燥且在减压下浓缩。淡黄色残余物悬浮于最少的dcm。收集固体，用冷dcm洗涤且真空干燥过夜以得到3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸(7g，89％)，其为白色固体。¹hnmr(300mhz，丙酮)δ7.86(d，1h，j＝3.0hz)，7.78(d，1h，j＝3.0hz)，3.91(s，3h)。

3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯

向3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸(6g，22.6mmol)在dmf(30ml)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(31g，226mmol)，然后添加ch3i(1.4ml，22.6mmol)。将混合物在室温搅拌24小时。添加水且用ea萃取两次。合并的有机层用水和盐水洗涤且用硫酸钠干燥。将有机层过滤且将溶剂真空去除以得到淡黄色油状物(6.18g，97％)。

5-氯-3-(3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯

在n2下，将3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(1.02g，3.65mmol)、n,n-二甲基丙-2-炔-1-胺(1.19ml，10.94mmol)、pdcl2(pph3)2(51mg，0.073mmol)、cui(14mg，0.073mmol)在三乙胺(15ml)中的混合物在60℃加热过夜。添加水且用ea萃取两次。合并的有机层用水和盐水洗涤且用硫酸钠干燥，真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为黄色油状物(1.02g，100％)。¹hnmr(300mhz，chcl3)δ7.67(d，1h，j＝3.0hz)，7.50(d，1h，j＝3.0hz)，3.96(s，3h)，3.90(s，3h)，3.54(s，2h)，2.38(s，6h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z282.09，实测值m/z282.05.

5-氯-3-(3-(二甲基氨基)丙基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯

将5-氯-3-(3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯(1.02g，3.65mmol)和pd-c(200mg)在甲醇(20ml)中的混合物在h2下在室温搅拌过夜。反应完成后，过滤出催化剂且将滤液浓缩。所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为黄色油状物(556mg，55％)。¹hnmr(300mhz，chcl3)δ7.64(d，1h，j＝3.0hz)，7.34(d，1h，j＝3.0hz)，3.93(s，3h)，3.83(s，3h)，2.68(t，2h，j＝6.0hz)，2.37(t，2h，j＝6.0hz)，2.28(s，6h)，1.85-1.75(m，2h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z286.1，实测值m/z285.7.

5-氯-3-(3-(二甲基氨基)丙基)-2-甲氧基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺

向5-氯-3-(3-(二甲基氨基)丙基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯(90mg，0.32mmol)在meoh(5ml)中的搅拌溶液中添加1.5ml1nkoh溶液。所得混合物在室温搅拌过夜。将溶剂蒸发出且将4nhcl的二噁烷溶液(1ml)添加至残余物。将混合物再搅拌10min，然后将其浓缩且真空干燥。向该残余物添加hbtu(144mg，0.38mmol)、dmf(3ml)和dipea(275ul，1.58mmol)。将混合物搅拌10分钟，然后添加6(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(69mg，0.32mmol)。所得反应在80℃加热24小时。冷却至室温后，将混合物在ea和水之间分离。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥且真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到标题化合物，其为淡黄色固体(50mg，34％)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z472.1，实测值m/z471.6.

5-氯-3-(3-(二甲基氨基)丙基)-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(52)

5-氯-3-(3-(二甲基氨基)丙基)-2-甲氧基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(50mg，0.11mmol)与吡啶鎓氯化物(1.0g)混合。将混合物加热至210℃，搅拌15分钟且冷却至室温。所得固体溶于水且用乙酸乙酯萃取。有机层真空浓缩且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物mb5-3，其为淡黄色粉末(15.0mg，30％产率)。¹hnmr(300mhz，甲醇)δ8.21(s，1h)，7.82-7.78(m，2h)，7.68(d，1h，j＝3.0hz)，7.25(d，1h，j＝3.0hz)，2.94(t，2h，j＝6.0hz)，2.89(s，6h)，2.80(t，2h，j＝6.0hz)，2.12-2.03(m，2h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z458.1，实测值m/z458.2.

实施例53

5-氯-3-((二甲基氨基)甲基)-2-羟基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(53)

向5-氯-3-甲酰基-2-甲氧基苯甲酸甲酯(210mg，0.921mmol)在meoh(5ml)中的搅拌溶液中添加二甲基胺(0.921ml，2.0m的thf溶液)，然后添加nabh3cn(116mg，1.842mmol)和乙酸(200ul，3.5mmol)。所得混合物在室温搅拌过夜。反应完成后，添加饱和碳酸氢钠溶液且水相用ea萃取两次。将合并的有机层干燥且通过柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为黄色油状物(94mg，40％)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z258.09，实测值m/z257.40.

向5-氯-3-((二甲基氨基)甲基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯(94mg，0.365mmol)在meoh(5ml)中的搅拌溶液中添加1.83ml1nkoh溶液。所得混合物在60℃搅拌过夜。将溶剂蒸发出且将4nhcl的二噁烷溶液(1ml)添加至残余物。将混合物再搅拌10min，然后将其浓缩且真空干燥。向该残余物添加hbtu(166mg，0.438mmol)、dmf(5ml)和dipea(318ul，1.825mmol)。将混合物搅拌10分钟，然后添加6(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-胺(80mg，0.365mmol)。所得反应在120℃加热24小时。冷却至室温后，将混合物在ea和水之间分离。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥且真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到标题化合物，其为黄色固体(15mg，10％)。¹hnmr(300mhz，氯仿-d)δ8.13(dd，j＝4.3，2.3hz，2h)，7.87(d，j＝8.5hz，1h)，7.68(d，j＝8.6hz，1h)，7.18(d，j＝2.7hz，1h)，3.94(s，2h)，2.60(s，6h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z430.06.，实测值m/z429.70.

实施例54

5-氯-3-((二甲基氨基)甲基)-2-羟基-n-(6-(三氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(54)

在室温向5-氯-2-甲氧基苯甲酸(5.59g，30mmol)在硫酸(10.2ml)和tfa(20.4ml)中的搅拌溶液中添加nbs(5.87g，33mmol)。将浅色溶液在室温搅拌过夜。所得浅色悬浮液小心倒在碎冰上。将混合物用ea萃取。ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。淡黄色残余物悬浮于最少量的dcm。收集固体，用冷dcm洗涤且真空干燥以得到3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸，其为白色固体(8.00g，100％)。¹hnmr(300mhz，丙酮)δ7.86(d，1h，j＝3.0hz)，7.78(d，1h，j＝3.0hz)，3.91(s，3h)。

向3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸(6g，22.6mmol)在dmf(30ml)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(31g，226mmol)，然后添加ch3i(1.4ml，22.6mmol)。将混合物在室温搅拌24小时。添加水且用ea萃取两次。合并的有机层用水和盐水洗涤且用硫酸钠干燥。将有机层过滤且将溶剂真空去除以得到淡黄色油状物(6.18g，97％)。

将3-溴-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(756mg，2.7mmol)、甲基硼酸(324mg，5.4mmol)、pd(oac)2(24mg，0.11mmol)、三环己基膦(68mg，0.24mmol)和磷酸钾(1.9g，8.96mmol)的混合物在甲苯(10ml)和水(1ml)中在n2下回流过夜。将反应冷却后，添加饱和nh4cl溶液且用ea萃取两次。合并的ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酸甲酯(520mg，91％)，其为黄色油状物。¹hnmr(300mhz，氯仿)δ7.62(d，1h，j＝3.0hz)，7.32(d，1h，j＝3.0hz)，3.92(s，3h)，3.82(s，3h)，2.30(s，3h)。

向火焰干燥的烧瓶添加nbs(183mg，1.03mmol)、aibn(15mg，0.093mmol)和5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酸甲酯(201g，0.93mmol)在ccl4(10ml)中的溶液。将悬浮液在黑暗中回流过夜。将混合物冷却至室温且浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-3-(溴甲基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯，其为无色油状物(236mg，87％)。¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ7.76(d，j＝2.7hz，1h)，7.54(d，j＝2.7hz，1h)，4.51(s，2h)，3.96(s，3h)，3.94(s，3h)。

向5-氯-3-(溴甲基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯(236mg，0.805mmol)在2-甲氧基乙醇(10ml)中的搅拌溶液中添加2nnaoh溶液(7ml)。所得混合物在75℃搅拌过夜，然后真空浓缩。将残余物溶于ea且所得溶液用2nhcl洗涤，用硫酸钠干燥且真空浓缩。残余物用醚研磨以得到5-氯-2-甲氧基-3-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯甲酸(204mg，93％)，其为黄色油状物。¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ10.02(brs，1h)，7.86(d，j＝2.8hz，1h)，7.66(d，j＝1.4hz，1h)，4.62(s，2h)，3.87(s，3h)，3.75–3.67(m，2h)，3.66–3.56(m，2h)，3.41(s，3h)。ms(esi)[m+na]⁺要求m/z297.05，实测值m/z296.6.

将5-氯-2-甲氧基-3-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯甲酸(170mg，0.62mmol)溶于dmf(5ml)。添加hbtu(280mg，0.74mmol)，然后添加dipea(540ul，3.1mmol)。所得混合物在室温搅拌15分钟，然后添加6-(三氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-胺(145mg，0.62mmol)。所得混合物在120℃搅拌24h。添加水且用ea萃取两次。合并的ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，其为黄色粉末(80mg，31％)。¹hnmr(300mhz，丙酮-d6)δ7.99(s，1h)，7.93(d，j＝3.1hz，1h)，7.81(d，j＝8.7hz，1h)，7.40(d，j＝8.8hz，1h)，7.22(d，j＝3.0hz，1h)，4.35(s，2h)，3.04(s，6h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z446.06，实测值m/z446.10.

实施例55

5-氯-2-羟基-3-甲基-n-(6-(甲基磺酰基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(55)

将5-氯-2-甲氧基-3-甲基苯甲酸(100mg，0.5mmol)溶于dcm(3.0ml)，然后分别添加催化量的dmf(1滴)和草酰氯(52ul，0.6mmol)。将反应在室温搅拌30分钟且真空浓缩。将残余物重溶于thf(5.0ml)，且添加hunig碱(105ul，0.6mmol)和6-(甲基磺酰基)苯并[d]噻唑-2-胺(92mg，0.4mmol)。将混合物在室温搅拌48小时，然后添加硅胶以淬灭反应。将溶剂蒸发且所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到5-氯-2-甲氧基-3-甲基-n-(6-(甲基磺酰基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(75mg，46％产率)，其为白色固体。hnmr(500mhz，cdcl3)δ11.44(s，1h)，8.48(d，j＝1.7hz，1h)，8.06–8.02(m，1h)，8.00(dd，j＝8.5，1.9hz，1h)，7.94(d，j＝8.5hz，1h)，7.45(dd，j＝2.7，0.7hz，1h)，3.95(s，3h)，3.13(s，3h)，2.40(s，3h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z411.02，实测值m/z411.20.

将5-氯-2-甲氧基-3-甲基-n-(6-(甲基磺酰基)苯并[d]噻唑-2-基)苯甲酰胺(75mg，0.183mmol)在dmf(5ml)中的溶液与乙烷硫醇钠(77mg，0.915mmol)混合且所得悬浮液在130℃加热过夜。反应完成后，将1nhcl添加至反应且用ea萃取两次。合并的ea层用na2so4干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(62mg，87％)，其为白色固体。¹hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.64(d，j＝1.9hz，1h)，7.99(dd，j＝8.5，1.9hz，1h)，7.97–7.90(m，1h)，7.86(d，j＝8.5hz，1h)，7.45(d，j＝2.7hz，1h)，3.25(s，3h)，2.21(s，3h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z397.01，实测值m/z397.20.

实施例56

5-氯-2-甲基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-1h-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺(56)

¹hnmr(400mhz，dmso-d6)δ13.58(brs，1h)，13.28(brs，1h)，8.55(s，1h)，8.00-7.91(m，3h)，7.78(d，j＝8.8hz，1h)，2.68(s，3h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z411.03，实测值m/z.411.4.

化合物57

5-氯-2-乙基-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-1h-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺

¹hnmr(400mhz，dmso-d6)δ13.74(brs，1h)，13.26(brs，1h)，8.02(d，j＝8.8hz，1h)，7.92(s，2h)，7.79(d，j＝9.2hz，1h)，3.05(q，j＝7.6hz，2h)，1.45(t，j＝8.0hz，3h)。ms(esi)[m+h]⁺要求m/z425.05，实测值m/z.425.4.

实施例58

5-氯-n-(6-(三氟甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-7-甲酰胺(58)

¹hnmr(400mhz，dmso-d6)δ14.77(brs，1h)，8.57(s，1h)，8.42(s，1h)，8.32(s，1h)，7.98(d，j＝8.8hz，1h)，7.80(d，j＝8.0hz，1h)。ms(esi)[m-h]^-要求m/z395.99，实测值m/z.396.4.

实施例59

5-氯-n-(4,6-二氟苯并[d]噻唑-2-基)-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-7-甲酰胺

在0℃，向5-氯-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-7-甲酸(29mg，0.15mmol)和4,6-二氟苯并[d]噻唑-2-胺(28mg，0.15mmol)在吡啶(2ml)和乙腈(2ml)中的搅拌溶液中添加pocl3(42ul，0.45mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。将混合物在ea和水之间分离。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥且真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到标题化合物，其为黄色固体(25mg，46％)。hnmr(300mhz，丙酮-d6)δ8.39-8.37(m，2h)，7.77-7.74(m，1h)，7.27-7.20(m，1h)。ms(esi)[m+na]⁺要求m/z387.98，实测值m/z387.30.

化合物60

5-氯-n-(6-氟苯并[d]噻唑-2-基)-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-7-甲酰胺

在0℃，向5-氯-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-7-甲酸(29mg，0.15mmol)和6-氟苯并[d]噻唑-2-胺(25mg，0.15mmol)在吡啶(2ml)和乙腈(2ml)中的搅拌溶液中添加pocl3(42ul，0.45mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。将混合物在ea和水之间分离。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥且真空浓缩。通过柱色谱法纯化得到标题化合物，其为黄色固体(20mg，38％)。hnmr(300mhz，丙酮-d6)δ8.50(brs，2h)，7.98-7.95(m，1h)，7.82(brs，1h)，7.37-7.32(m，1h)。ms(esi)[m+na]⁺要求m/z369.99，实测值m/z369.45.

线粒体解偶联活性测试

实施例61

使用seahorsexf96或seahorsexf24仪器进行耗氧量测定。

根据定义，线粒体解偶联是通过线粒体atp合酶将线粒体电子传递链活性(线粒体氧化)从atp合成中解耦。从技术上讲，线粒体解偶联活性的定义是化合物在线粒体atp合酶抑制剂如寡霉素存在下诱导细胞或分离的线粒体耗氧的能力。因此，我们使用seahorsexf96或seahorsexf24仪器按照供应商的说明，使用在含有10％胎牛血清的培养基中生长的小鼠成肌细胞c2c12细胞，通过耗氧率(ocr)测试确定线粒体解偶联活性。在正常生长条件下首先测量ocr；然后用寡霉素(终浓度2.5μm)处理后测量ocr；然后在加入寡霉素和不同浓度的合成化合物后测量ocr。图1显示了使用线粒体解偶联剂的seahorseocr测定的典型曲线。测定在寡霉素存在下诱导ocr的每种化合物的最小浓度(cmin)。下表(表i)总结了化合物的线粒体活性。

表i.线粒体解偶联活性总结，通过cmin(诱导atp合酶-非依赖性ocr增加的最小浓度)分类

¹，最小浓度诱导atp合酶非依赖性ocr：***，<10μm；**≥10但≤25μm；*>25μm。

实施例62

线粒体膜电位测试

线粒体解偶联也可能导致线粒体膜电位降低。我们使用tmre(四甲基罗丹明乙酯)染色法对培养的哺乳动物细胞、nih-3t3细胞或hepg2细胞进行线粒体膜电位测定。将细胞接种到6孔板上，并在补充有10％胎牛血清和2mm谷氨酰胺的dmem培养基中培养。在实验之前使细胞生长至对数生长期。用各种浓度的各个化合物处理细胞2小时，然后用终浓度100nm的tmre染色15分钟。然后用pbs洗涤细胞一次，并在荧光显微镜下检查。用各种浓度的氯硝柳胺乙醇胺处理的细胞用作阳性对照。线粒体tmre染色的减少被估算为线粒体解偶联活性的量化。所示化合物的ec50定义为细胞中线粒体tmre染色的荧光强度降低至约50％时的浓度。下表(表ii)总结了各种化合物在培养的哺乳动物细胞中降低线粒体膜电位的活性。

表ii.对线粒体膜电位减少的相对活性

²，ec50：***，<10μm；**≥10但≤25μm；*>25μm.

实施例63

ampk(ampk-活化的激酶)活化测试和acc(乙酰基-coa羧化酶)抑制测试

线粒体解偶联导致细胞生物能量效率降低，通常导致atp轻微下降和amp增加。细胞内amp的升高激活ampk。在表达acc的细胞如肝细胞中，ampk可以反过来磷酸化(抑制)acc。acc是脂质代谢的主要调节剂。acc的抑制抑制了脂质从头合成并促进脂肪酸β-氧化。我们分别通过抗p-ampk和p-acc抗体的免疫印迹试验分别测定了成纤维细胞nih3t3细胞和肝hepg2细胞中的ampk活化(磷酸化ampk水平)和acc抑制(磷酸化acc水平)(磷酸化-ampkα(thr172)mab(#2535)、磷酸化-乙酰基-coa羧化酶(ser79)抗体(#3661)来自cellsignalingtechnology)。用不同浓度的化合物处理细胞3-6小时。然后获得细胞提取物并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-page)。将蛋白质转移到聚偏二氟乙烯(pvdf)膜(millipore，ipvh00010)中。用抗体进行免疫印迹测定。图2显示了在以对线粒体解偶联有效的浓度处理所示实施例化合物后磷酸化ampk(图2a，活化)和磷酸化acc(活性抑制，图2b)的增加。

实施例64

对2型糖尿病和脂肪肝的体内疗效：高脂饮食(hfd)诱导的糖尿病小鼠模型中降低血糖、降低血胰岛素、降低胰岛素耐受和降低脂肪肝的作用。

为了测试化合物在体内治疗2型糖尿病的功效，我们以化合物28为例，确定其在临床相关的小鼠模型，hfd-诱导的脂肪肝和糖尿病模型中降低血糖，降低血胰岛素浓度，改善胰岛素敏感性和减少脂肪肝的作用。从2个月龄开始，给c57b6/j雄性小鼠喂食hfd(60％卡路里源自脂肪)4个月，以诱导2型糖尿病和脂肪肝的高血糖、高血胰岛素和胰岛素耐量症状。然后小鼠继续使用hfd或含有600ppm化合物28的hfd。测量血糖、血液胰岛素水平并进行葡萄糖耐量测定以测量胰岛素敏感性。处死小鼠并通过比较肝脏重量评估化合物28对脂肪肝发育的影响。图3a-c显示用化合物28治疗显著降低血糖浓度、血液胰岛素浓度，并改善胰岛素敏感性。图3d显示化合物28降低了由高脂肪饮食引起的脂肪肝重量。测量血浆化合物28的浓度，并且水平处于使线粒体解偶联的有效浓度。

实施例65

对癌细胞生长抑制的作用

评估了实施例化合物对癌细胞生长的影响。使用国家癌症研究所(nci)标准化的方案进行细胞生长抑制测定以评估抗癌药物(https://dtp.cancer.gov/discovery_development/nci-60/methodology.htm)。人结肠癌hct116细胞系和人肺癌细胞系h1299用于测定。将人肿瘤细胞接种到96孔微量滴定板中。细胞接种后，将微量滴定板培养细胞生长24小时，然后加入化合物。24小时后，用tca原位固定每个细胞系的两个平板，以表示化合物添加时(tz)每个细胞系的细胞群的测量。将试验化合物溶解在二甲基亚砜中。在加入试验化合物时，进行五次10倍或1/2log连续稀释，以提供总共五种试验化合物浓度加对照。将100μl这些不同测试化合物稀释液的等分试样加入已经含有100μl培养基的适当微量滴定孔中，得到所需的最终测试化合物浓度。加入测试化合物后，将板再孵育48小时。通过加入冷tca终止测定。用50μl冷的50％(w/v)tca(终浓度，10％tca)原位固定细胞，用自来水洗涤五次并空气干燥。将在1％乙酸中的0.4％(w/v)的磺基罗丹明b(srb)溶液(100μl)加入到每个孔中，并将板在室温下温育10分钟。染色后，通过用1％乙酸洗涤五次除去未结合的染料，并将板空气干燥。随后用10mmtrizma碱溶解结合的染色，并在自动读板仪上在515nm的波长下读取吸光度。使用七种吸光度测量[时间零点(tz)，对照生长(c)，和在五种浓度水平的化合物存在下的测试生长(ti)]，在每种测试化合物浓度水平下计算百分比生长。从[(ti-tz)/(c-tz)]x100＝50计算50％生长抑制(gi50)，这是导致化合物培养期间对照细胞中净蛋白质增加(通过srb染色测量)减少50％的测试化合物浓度。用hct116细胞和h1299细胞获得了一致的结果。表iii显示了测试的实施例化合物的gi50。

表iii.实施例化合物的细胞生长抑制活性

³，gi50，50％生长抑制活性：***，<10μm；**≥10but≤25μm；*>25μm.

实施例66

对癌细胞周期进程和癌细胞集落生成的影响

分析了实施例化合物对细胞周期进展的影响。肿瘤细胞、小鼠胰腺癌细胞panc2细胞或人胰腺癌panc1细胞用各种化合物以对线粒体解偶联有效的浓度处理48小时，而对照组用载体dmso处理。然后将细胞用冰冷的70％乙醇在冰上固定30分钟。之后，将5μl碘化丙啶(pi)(sigma，p4170,1mg/ml)溶液和50μlrna酶a(sigma，r-4875)溶液加入固定细胞中，然后在室温下避光保存30分钟。通过流式细胞术分析细胞的细胞周期谱。如图4所示，实施例化合物28使癌细胞在g0/g1期停滞。下表iv总结了其他实施例化合物诱导g0/g1细胞周期停滞的活性。

分析了实施例化合物对集落生成的影响。将癌细胞以每孔200个细胞接种在6孔板中。用不同浓度的各化合物处理细胞。在改变培养基加化合物的情况下保持细胞10天。然后将群落在1:3乙酸-甲醇溶液中固定5分钟，用0.02％结晶紫染色20分钟并计数。表ⅴ表明，在化合物解偶联线粒体的浓度下，实施例化合物降低了癌细胞的集落生成。

表iv.实施例化合物的细胞周期阻滞(g0/g1停滞)活性

⁴，可以阻滞细胞周期在g0/g1期的有效浓度***，<10μm；**≥10但≤25μm；*>25μm。

表v.实施例化合物的集落生成抑制活性

⁵，ic95，减少集落生成达95％的浓度：***，<10μm；**≥10但≤25μm；*>25μm.

实施例67

对转移性癌症的功效：小鼠模型中对胰腺癌转移的作用

使用公认的胰腺癌肝转移小鼠模型检查实施例化合物-化合物28的体内抗癌功效。将小鼠胰腺癌细胞panc2细胞(0.25百万个细胞)注射到免疫受损的nod-scid小鼠的脾脏中。将小鼠随机分为两组(每组n＝6)，一组喂食正常食物，第二组喂食含有750ppm化合物28的食物。三周后，处死小鼠，观察胰腺癌的肝转移(图5)并在对照和化合物28处理的小鼠中定量(图6)。如图5a所示，未处理的小鼠具有大量肝肿瘤转移。相反，如图5b所示，化合物28处理的小鼠显示很少或没有肝肿瘤转移。在图6中定量了抗肿瘤功效，用化合物28处理显著降低了转移性肿瘤结节的数量以及转移性肿瘤体积，证明化合物28在体内具有优异的抗癌活性。重要的是，测量处理剂量方案下化合物28的血浆浓度，其在解偶联线粒体的有效浓度范围内。

实施例68

抗细菌活性

线粒体是与宿主细胞形成共生关系的古细菌。细菌质膜含有与线粒体相似的电子传递链和atp合酶。测试实施例化合物的抗生素活性。进行测试以确定最小抑制浓度(mic)。将测试化合物和参考化合物溶解在dmso中以制备储备溶液(6.4或3.2mg/ml)，在v形底96孔板中以100倍最终浓度制备连续2倍化合物稀释液，总共11种稀释度，范围为6.4或3.2mg/ml至0.0625mg/ml。将2μl100×工作溶液的等分试样转移至圆底96孔板的第1列至第11列，并将2μldmso转移至第12列(作为模拟对照)。制备的微量稀释板用于mic测试。

为了制备接种物，在测试前一天将菌株在相应的琼脂平板上划线。对于需氧细菌，通过从琼脂平板上将24小时的传代培养物中的一些菌落挑选到无菌盐水中来制备接种物。将盐水培养悬浮液调节至所需的浊度，然后在相应的培养基中稀释以获得最终的接种物，即对于需氧/厌氧细菌为～1×10⁶cfu/ml。将100μl最终接种物的等分试样转移至如上所述制备的微量稀释板，其预先填充98μl细菌生长培养基。mic测定：将所得平板在37℃下孵育20-24小时(孵育温度和时间可根据标准方法而不同)。通过目视检查将mic记录为完全或显著抑制细菌生长的最低浓度(图7)。

尽管本披露已参考其某些优先版本进行了相当详细地描述，但其他版本是可能的。因此，本申请的精神和范围不应限于本文所述的优先版本的描述。

尽管可以在本发明的实践或测试中使用类似于或等效于本文所述的组合物、材料和方法，但是本文描述了合适的制剂、方法和材料。本文提及的所有出版物通过引用以其全文结合在此。在发生冲突的情况下，以包括定义的本说明书为准。另外，以下所讨论的具体实施例只为说明而非意在限制。

在本说明书中所披露的所有特征(包括摘要和附图)以及在披露的任何方法或过程中的所有步骤可以按任何组合的形式组合，此类特征和/或步骤中的至少一些相互排斥的组合除外。除非另外明确说明，否则本说明书中所披露的每个特征(包括摘要和附图)可以被服务于相同、等效或类似目的的可替代特征所取代。因此，除非另外明确说明，否则所披露的每个特征仅是一系列等效或相似特征的一个实例。除了本文所述的那些之外，本申请的各种修改对于本领域普通技术人员而言从前述描述将是显而易见的。这样的修改也预期落入所附权利要求书的范围之内。