用于肝细胞癌的诊断、预后、监测和治疗的方法

用于肝细胞癌的诊断、预后、监测和治疗的方法【专利摘要】本发明首次公开了由肝线粒体代谢的辛酸的水平，如在使用同位素标记的辛酸的呼吸测试中所反映的，与活跃的HCC的存在相关，并可被用于检测和监测HCC。特别地，现在公开了同位素标记的辛酸呼吸测试（OBT），例如13C-辛酸呼吸测试的较低的值指示活跃的HCC。出人意料地发现与患有非活跃的HCC的受试者和未患有HCC的对照受试者相比，观察到患有活跃HCC的受试者的显著较低的13C-辛酸呼吸测试值。本文下面示例的患有非活跃HCC的受试者已经受TACE治疗并在紧邻该过程之后和直至该过程之后的3个月被评价。【专利说明】用于肝细胞癌的诊断、预后、监测和治疗的方法发明领域[0001]本发明涉及肝细胞癌(HCC)的诊断、预后、监测和治疗。具体地，本发明涉及在HCC的检测和监测中使用基于同位素标记的辛酸的呼吸测试。[0002]发明背景[0003]肝细胞癌(HCC，也称为恶性肝细胞瘤)是肝的原发恶性肿瘤。HCC最常出现在患有慢性病毒性肝炎(例如，乙型肝炎)和/或具有任何病因的肝硬化的患者中。非酒精性脂肪性肝炎(NASH)也被发现是形成HCC的危险因素。其他危险因素的实例包括高黄曲霉毒素暴露和铁过载病症诸如血色素沉着症。在某些情况下，隐源性HCC在无肝病历史或已知危险因素的患者中形成。[0004]世界范围内的HCC发病率不断增加。在世界的一些地方，诸如撒哈拉以南非洲、中国、香港和台湾，可能由于高的肝炎病毒像乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒的暴露及由于环境病原体的区域暴露，HCC是主要的健康问题。[0005]HCC的发病机理不是完全已知，然而，线粒体功能障碍被暗示参与其中。HCC细胞显示具有减弱的线粒体功能的遗传和代谢变化(Warburg0(1956)."Ontheoriginofcancercells".Sciencel23(3191):309-14)。[0006]HCC的治疗可针对治愈，或集中在症状的缓解和生命的延长。典型地根据肿瘤的大小和阶段选择治疗的类型。当肿瘤是小的(小于2-3cm)、限于肝的一叶、不具有肝血管系统的侵入的迹象并呈保存好的肝功能时，可执行手术切除。其他治疗选项包括肝移植、射频消蚀(RFA)和动脉化疗栓塞(TACE)(关于治疗方法(algorithm)，见，例如，巴塞罗那临床肝癌(BCLC)分期系统)。在RFA中，`通过在图像指导(诸如X-射线筛查、CT扫描或超声)下进入到肿瘤的针电极将射频能量传送至肿瘤。穿过针的射频波通过热凝固和蛋白变性导致肿瘤破坏。在TACE中，通过导管向肿瘤直接施用化学治疗，并切断至肿瘤的血液供给。除了以上描述的程序之外，还可施用口服药物。例如，甲苯磺酸索拉非尼(Nexavar?)，一种通过活化内在的线粒体通路阻断肿瘤生长的口服药物(Kurosu,“SorafenibinducesapoptosisspecificallyincellsexpressingBCR/ABLbyinhibitingitskinaseactivitytoactivatetheintrinsicmitochondrialpathway，，，CancerResearch2009Mayl;69(9):3927-36.)，被批准用于患有晚期HCC的患者。[0007]通常，如果早期诊断，小的或缓慢生长的肿瘤可被成功治愈。然而，早期诊断是困难的，部分因为形成HCC的大多数患者，除了与他们的长期存在的肝病相关的症状之外不具有症状。通常执行高风险组，诸如肝硬化患者的监控以便于HCC的早期检测(见，例如，AASLDGuidelines)。[0008]HCC的检测和诊断典型地基于成像测试、血清学测试和有时的活组织检查。成像测试包括，例如，腹部超声、螺旋计算机断层扫描(CT)扫描、三相CT扫描和磁共振成像(MRI)。血清学测试包括甲胎蛋白(AFP)的血液水平的测量，其中AFP的高水平与HCC相关。典型的策略是用AFP和超声每隔6个月监控。[0009]还执行HCC的评价作为治疗后监测的部分。通常使用对比增强的CT或MRI放射执行治疗疗效的评价和活跃的对非活跃的HCC的确定。示例性的对比介质(contrastmedia)是破油R(Iipiodolii)，一种选择性保持在肿瘤微血管内的碘化油剂。被治疗的病灶中血管增强的缺乏典型指示对治疗的积极响应。AFP作为随访工具不是足够准确，且治疗后AFP水平的监测无法代替成像。理想的成像间隔是不清楚的，但初始治疗后通常使用最初3-4个月的间隔以监测HCC病灶。[0010]用于HCC诊断和随访的标准技术具有几个缺点。例如,基于CT或MRI的成像方法被认为是昂贵的、必须由熟练的从业者在医院执行、并与强辐射和副作用相关，诸如在CT/MRI情况下对比介质引起的肾病。另外，诸如AFP测量的方法不是足够地灵敏或特异。[0011]基于监测13CO2水平的呼吸测试，其是由肝代谢的13C标记的物质的副产物，已被提出作为用于评价肝功能的工具。如果测试化合物的肝代谢导致二氧化碳的形成，且适当的碳被标记，那么标记的CO2(其在例如，质谱或无色散红外分析仪中是可测量的)的呼气则反映原始标记的化合物的肝清除并可被用于评价特定的肝功能。例如，由肝细胞细胞色素P450酶代谢的化合物可被用于评价肝微粒体功能。示例性的化合物是美沙西丁(methacetin)。作为另一个实例,在肝线粒体中经过代谢的化合物可被用于评价肝线粒体功能并可被用于检测某些肝病症(见例如，Grattagliano等人(2010)EurJClinInvest,40(9):843-850和Portincasa等人(2010)ClujulMedical,83:23-26)。[0012]一种示例性的分子是酮异己酸(KICA)，一种在肝线粒体中经过脱羧反应的化合物。已报道了在HCC患者的肝功能评价中使用KICA呼吸测试(Palmieri等人(2009)JournalofSurgicalResearchl57,199-207)。在本研究中，评价了两种不同的HCC治疗对肝功能的影响。除了其他的之外，使用KICA脱羧反应测试患有和未患有HCC的肝硬化患者。在基线状态，与健康的对照和未患有HCC的肝硬化患者相比，患有HCC的患者具有显著较低的13C-KICA呼吸测试值。在未患有HCC的肝硬化患者和健康的对照之间出现13C-KICA呼吸测试值中不重要但显著的变化(minorbutsignificantchanges)(与健康的对照相t匕，观察到未患有HCC的肝硬化患者的较低的值)。患者被TACE或RFA治疗之后，在第I天、第30天及第180天再次测试了13C-KICA水平。作者总结:“酮异己酸脱羧反应未受TACE影响但在RFA之后被减弱(_27%，P〈0.05)”，并得出结论:RFA而非TACE呈现解除(spare)剩余(微粒体)肝质量，但对线粒体功能引起如此短暂的击昏效应。[0013]由肝线粒体代谢的另一种示例性分子是辛酸。辛酸是进入线粒体并经过β_氧化产生乙酰辅酶A(乙酰-CoA)的中链脂肪酸。除非其被用于其他高能化合物的合成，乙酰-CoA进入Krebs循环并被氧化为CO2。[0014]本发明的申请人:的W02007/054940公开了用于肝功能和代谢能力的评价或评价肝健康和/或肝损伤的程度的呼吸测试装置和方法。例如，公开了评价肝病症的方法，该方法包括在向受试者施用同位素标记的辛酸、其盐或衍生物之后，在线监测受试者呼吸中辛酸、辛酸的盐或衍生物的代谢产物。作为另一个实例，公开了用于评价肝病症的装置，该装置包括适于在线监测受试者呼吸中标记的辛酸、或其盐或衍生物的代谢产物的同位素水平的一个或多个传感器，和在连续模式下适于一个或多个传感器的样品测量的控制器。该方法和装置可被用于区别受试者的非酒精性脂肪性肝病症和非酒精性脂肪性肝炎病症。[0015]本发明的申请人:的W02010/013235公开了可被用于肝功能和代谢能力的评价或评价肝健康和/或肝损伤的程度的呼吸测试装置和方法。例如，公开了检测与胰岛素耐受性或酒精性肝病或非酒精性脂肪性肝病或代谢综合征相关的异常β-氧化的方法，该方法包括在向受试者施用同位素标记的辛酸、其盐或衍生物之后，监测受试者呼吸中辛酸、辛酸的盐或衍生物的代谢产物。[0016]肝代谢的复杂性加强了对评价其功能的挑战，并因此呼吸测试结果的解读并非总是明确的。关于呼吸测试结果的解读的潜在局限性的实例包括混杂变量(例如，运动)的存在、胃排空动力学的类型学、被施用的物质的肝首过代谢、和化合物的消除和代谢的竞争性通路的存在。应被考虑的另外的因素包括，例如，在除了肝以外的器官中发生的线粒体代谢的存在(当肝代谢是目的代谢时，肝之外的代谢将负面影响测试相关性)、外源标记的化合物在未标记化合物的较大的池中的可能的稀释、和在受试者之间可基本上不同的未标记的CO2的内源产生。此外，存在导致高的患者内和患者间可变性的许多因素，且不同的疾病病因可影响肝的不同功能并可导致不同的呼吸测试结果。[0017]对用于监控、检测、预后和监测对肝细胞癌的治疗的响应的经济有效、准确并简单的方法和系统仍然存在需求。[0018]发明概述[0019]本发明提供了用于改进的HCC检测、评价并监测对治疗的响应的方法和系统，该方法和系统利用辛酸(octanoate)或其盐或衍生物。[0020]本发明首次公开了由肝线粒体代谢的辛酸的水平，如在使用同位素标记的辛酸的呼吸测试中所反映的，与活跃的HCC的存在相关，并可被用于检测和监测HCC。特别地，现在公开了同位素标记的辛酸呼吸测试(0ΒΤ)，例如13C-辛酸呼吸测试的较低的值指示活跃的HCC0出人意料地发现与患有非活跃的HCC的受试者和未患有HCC的对照受试者相比，观察到患有活跃HCC的受试者的显著较低的13C-辛酸呼吸测试值。本文下面示例的患有非活跃HCC的受试者已经受TACE治疗并在紧邻该过程之后并直至该过程之后的3个月被评价。所观察到的结果是出人意料的，除了其他的以外，鉴于较早的公开物说明:“TACE未引起线粒体功能的早期下降，如针对RFA所观察到的，表明该过程对线粒体功能没有特异性干扰。”(Palmieri等人(2009)JournalofSurgicalResearchl57,199-207)。[0021]本发明还公开了OBT值可被用于检测即使处于早期阶段的HCC。明显地，发现即使是在患有HCC〈2cm的患者中，其代表肝质量的非常小的部分，OBT测量是显著下降的。本发明还公开了OBT值可被用于患有HCC的患者的治疗后随访，以评价对治疗和/或疾病的复发的响应。[0022]本发明的方法和系统可适用于小的和较大的肿瘤的筛查/监控和早期检测。本发明的方法和系统还可适用于监测对几种类型的HCC治疗，例如，TACE和RFA治疗的响应。OBT还可使得肿瘤的切除之后或肝移植之后的复发的早期检测成为可能。[0023]根据一个方面，本发明提供了用于受试者中HCC检测、确定预后和/或随访的方法，该方法包括:[0024](i)在施用同位素标记的辛酸之后，监测受试者的呼出气中辛酸的同位素标记的代谢产物；[0025](ii)将受试者中的辛酸代谢和参考辛酸代谢比较，其中显著减弱的辛酸代谢指示活跃的HCC。[0026]在一些实施方案中，该方法还包括根据疾病病因标准化呼吸测试值，如以下详细描述的。在另外的或可选的实施方案中，该方法还包括根据治疗标准化呼吸测试值，如以下详细描述的。在一些实施方案中，该方法还包括基于比较区分活跃的和非活跃的HCC。[0027]根据本发明的实施方案的方法，用于活跃的HCC，例如，小于2cm的HCC的早期检测是有用的。在患有小的活跃的HCC(例如，<2cm)的患者中OBT的下降，其可被由绝大部分肝质量的代谢间和代谢内可变性掩饰，基于现有技术不能够被透彻解释。不希望被任何特定理论或作用机制限制，其可反映由肿瘤细胞分泌的、影响这些患者的肝中的整体线粒体功能的一种因子(afactor)或多种因子(factors)。阻碍该因子或这些因子的任何类型的治疗可对恶性过程的缓和具有影响。可选地或另外地，这可能由于将辛酸捕获在肿瘤中，例如进入肿瘤的过度血管供应区或在肿瘤细胞中或在细胞之间和在血管中。与肿瘤相关的血管中的变化可归因于肿瘤的直接质量之外的作用的增强。潜在的捕获作用可用作用于向肿瘤递送对比剂或治疗剂的方法。向HCC的递送机制可使得能够在肿瘤中实现高浓度的治疗剂而不具有全身性副作用。[0028]本发明解决了现有技术测试，例如，13C-KICA呼吸测试的一些局限性。与用于现有技术的KICA相反，辛酸代谢不受整体肝功能的影响并在肝硬化患者中保持正常。有利地，辛酸呼吸测试允许具有损伤的肝(由于纤维化阶段或肝硬化)而不具有HCC的患者和患有HCC的患者之间的较大的区分，前者将具有与正常受试者相似的辛酸代谢并且不像在KICA中那样由于减少的肝保留而被减弱。[0029]如本文所用的，术语“辛酸(octanoate)”包含辛酸(octanoate)和其盐或衍生物，诸如辛酸(octanoicacid)。13C-标记的“辛酸(octanoate)”通过辛酸的钠盐(sodiumsaltofcaprylicacid),辛酸钠(sodiumcaprylate)的通用名称而被了解。辛酸钠(sodiumcaprylate)的IUPAC名称为1-13C-辛酸钠(1-13C-OctanoateSodium)。另外的同义词包括:1-13C_辛酸钠；辛酸钠(SodiumOctanoate)、辛酸钠盐(OctanoicAcidSodiumSalt)、正辛酸钠(Sodiumn-Octanoate)、辛酸钠(SodiumOctoate)。[0030]如本文所用的，“监测辛酸的同位素标记的代谢产物”指检测并测量经预定时间段的受试者的呼出气中同位素比的变化。术语“同位素比”指被选择用于辛酸标记的同位素和天然丰度的同位素的比。在一些实施方案中，在标记的辛酸的单次施用之后，通过经预定时间段的连续测量执行监测。在其他实施方案中，在标记的辛酸的单次施用之后，在以定期间隔收集自受试者的呼吸样品中测量同位素比。根据这些实施方案，经预定时间段收集多个样品。[0031]在一些典型的实施方案中，代谢产物是C02。在一些实施方案中，同位素选自由以下组成的组--碳-13、碳-14和氧-18。在一些典型的实施方案中，同位素是13C。[0032]在一些实施方案中，将受试者中的辛酸代谢与参考辛酸代谢比较包括产生关于受试者的超基准δ值(deltaoverbaseline,DOB)曲线、回收剂量百分比(percentagedoserecovery,PDR)曲线和累积PDR(CPDR)曲线的至少一种，并将所述DOB、PDR或CPDR的至少一种参数与参考DOB、PDR,CPDR或其组合的至少一种参数比较。[0033]在一些实施方案中，将受试者中的辛酸代谢与参考辛酸代谢比较包括产生I3DR曲线并将所述TOR曲线的至少一种参数与参考TOR的至少一种参数比较。[0034]在一些实施方案中，至少一种参数选自由以下组成的组:PDR最大水平(峰高)、峰出现的时间(至峰时间)和代谢速率的斜率。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。[0035]在一些特定实施方案中，参数是峰高。根据这些实施方案，下降的峰高指示HCC。[0036]在另外特定的实施方案中，参数是至峰时间。根据这些实施方案，较长的至峰时间指示HCC。[0037]在又另外的特定实施方案中，至少一种参数是在选择的时间点的一个或多个I3DR值(％剂量/小时)。根据这些实施方案，在选择的时间点的下降的PDR值指示HCC。[0038]在一些特定的实施方案中，至少一种参数是在选择的时间点的一个或多个CPDR值。根据这些实施方案，在选择的时间点的下降的CPDR值指示HCC。[0039]在一些特定的实施方案中，至少一种参数是在选择的时间点的一个或多个DOB值。根据这些实施方案，在选择的时间点的下降的DOB值指示HCC。[0040]在一些典型的实施方案中，口服施用标记的辛酸。在其他实施方案中，静脉内或鼻腔内施用标记的辛酸。[0041]在一些典型的实施方案中，以预定的、单次剂量(例如，每一名患者IOOmg)施用标记的辛酸。在其他实施方案中，基于患者的体重施用标记的辛酸(例如，2mg每千克)。[0042]在一些实施方案中，该方法适于随访及检测对患者的HCC治疗的响应。[0043]在一些实施方案中，该方法包括在同位素标记的辛酸的首次施用之后，通过监测受试者的呼出气中辛酸的同位素标记的代谢产物执行肝功能的首次评价，和在同位素标记的辛酸的第二次施用之后，通过监测受试者的呼出气中辛酸的同位素标记的代谢产物在预定时间段之后执行肝功能的第二次评价。[0044]在一些实施方案中`，在预定时间段之后执行第二次评价的步骤被重复许多次。[0045]应被理解的是术语“肝功能的首次评价”和“肝功能的第二次评价”不限于初始评价单元(session)和其后的接连的单元，而可涉及任何两个单独的评价单元。[0046]如本文所用的，“下降”、“显著下降”或“显著差异”典型指统计显著的差异，如可由本领域已知的标准方法定义的。[0047]在一些实施方案中，参考辛酸代谢指对照辛酸代谢，如在未罹患HCC的对照受试者中确定的。在一些实施方案中，对照受试者患有至少一种慢性肝病而未患有HCC。在一些示例性实施方案中，对照受试者是未患有HCC的肝硬化患者。在其他实施方案中，对照受试者是未患有肝病的健康个体。[0048]在其他实施方案中，参考辛酸代谢指在肝功能的首次评价过程中确定的辛酸代谢，例如，测试的受试者中先前测量的辛酸代谢。例如，如果本发明的方法被用于监测对治疗的应答，那么在来自特定受试者的首次测量中获得的呼吸测试结果可被用作来自相同的受试者的第二次测量中获得的呼吸测试结果的参考。例如，可在开始治疗之前执行首次测量并可在治疗之后的预定时间段之后执行第二次测量。在这种情况下，与首次测量相比，第二次测量中增加的辛酸呼吸测试值指示对治疗的积极响应。[0049]在一些典型的实施方案中，测试的受试者是哺乳动物，优选人。[0050]在一些实施方案中，测试的受试者选自由以下组成的组:处于形成HCC的风险中的受试者、怀疑患有HCC的受试者和罹患HCC的受试者。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。[0051]在一些实施方案中，受试者罹患HCC并已经受或正经受治疗。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。[0052]在一些实施方案中，治疗选自由以下组成的组:TACE和RFA或用于HCC的任何其他药物，包括任何类型的酪氨酸激酶抑制剂、任何类型的化学治疗剂包括但不限于阿霉素、和用于HCC的任何类型的免疫治疗包括但不限于脉冲的树突状细胞(pulseddendriticcells)、及治疗的任何组合。这还包括针对经受手术切除或肝移植的患者中的任何辅助治疗的应答的随访。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。[0053]在一些实施方案中，测试的受试者患有至少一种慢性肝病。在一些实施方案中，慢性肝病选自由以下组成的组:非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、乙型肝炎、丙型肝炎或由于任何病因患有肝硬化的患者。通常，疾病可以是具有或不具有肝硬化的任何其他类型的慢性肝病，包括患有特发性肝硬化的患者、将患者暴露于原发性肝癌和/或转移。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。[0054]在一些实施方案中，慢性肝病选自由以下组成的组:NASH和NAFLD。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。根据这些实施方案，该方法还包括OBT值的标准化。已知NASH/NAFLD影响肝线粒体功能(见，例如，Grattagliano1.等人,13Obreathtestsforclinicalinvestigationoflivermitochondrialfunction;EurJClinInvest2010;40(9):843_850)。在一些实施方案中，算法被用于修正NASH/NAFLD患者的值。在一些实施方案中，确定用于患有NASH/NAFLD的受试者的不同的截止值(cut-offvalue)。[0055]在一些实施方案中，测试的受试者患有除了NASH之外的肝病。在一些实施方案中，测试的受试者患有除了NAFLD之外的肝病。在一些实施方案中，将患有选自由NASH和NAFLD组成的组的肝病的受试者从使用本发明方法的测试中排除。[0056]在一些实施方案中,用索拉非尼(sorafenib)(已知增强线粒体功能)治疗测试的受试者。根据这些实施方案，该方法还包括OBT值的标准化。在一些实施方案中，算法被用于修正索拉非尼治疗的患者的值。在一些实施方案中，确定用于用索拉非尼治疗的受试者的不同的截止值。[0057]这还可适用于任何其他类型的治疗，包括任何化学治疗放射治疗和辅助治疗、免疫治疗或细胞内机制的抑制剂或以上的组合。[0058]在其他实施方案中，未用索拉非尼或任何其他癌症药物治疗受试者。在一些实施方案中，用索拉非尼或任何其他癌症药物治疗的受试者从使用本发明方法的测试中排除。[0059]因此，在一些实施方案中，该方法还包括根据疾病病因将在步骤(i)中获得的值标准化。在另外的或可选的实施方案中，该方法还包括根据治疗将在步骤(i)中获得的值标准化。[0060]在一些实施方案中，该方法还包括例如通过二氧化碳描记术同时监测呼吸中的总CO2。这可使得能够最小化测试长度和将引入不相关的变量至肝测试评价的代谢速率和/或CO2产生的变化。[0061]本发明的这些和另外的方面和特征将从下面的附图、详述、实施例和权利要求而变得明显。[0062]附图简述[0063]图1.活跃的HCC对非活跃的HCC和对照中13C-辛酸呼吸测试值的箱线图和平均值菱形表示。[0064]图2.活跃的HCC对非活跃的HCC和对照中13C-辛酸呼吸测试值的ROC曲线。[0065]图3.除了索拉非尼治疗的患者之外，活跃的HCC对非活跃的HCC和对照中13C-辛酸呼吸测试值的ROC曲线。[0066]图4.除了患有HCC的NASH受试者和索拉非尼治疗的患者之外，活跃的HCC对非活跃的HCC和对照中13C-辛酸呼吸测试值的箱线图和平均值菱形的表示。[0067]图5.未患有HCC的61岁男性HCV患者的13C-辛酸呼吸测试的I3DR曲线。[0068]图6.患有活跃的HCC的74岁女性HCV患者的13C-辛酸呼吸测试的I3DR曲线。[0069]图7.在对HCC复发的治疗之前和之后，患有HCC的69岁女性NASH患者的三次连续的13C-辛酸呼吸测试的I3DR曲线。[0070]图8.在成功的HCC治疗之前和之后，患有隐源性肝硬化的61岁男性的三次连续的13C-辛酸呼吸测试的I3DR曲线。[0071]图9.在成功的HCC治疗之前和之后，患有HCV肝硬化的58岁男性的两次连续的13C-辛酸呼吸测试的roR曲线。[0072]发明详述[0073]本发明涉及使用同位素标记的辛酸或其盐或衍生物用于HCC的诊断、预后和随访。[0074]本发明的方法和系`统有效区分患有活跃的HCC的受试者与患有非活跃的HCC或未患有HCC的受试者。因此，本发明的方法和系统用于检测、诊断和监测受试者的HCC是有用的。本发明的方法和系统用于HCC筛查、肿瘤进展的检测、复发、预后和分期也可以是有用的。本发明的方法用于评价肿瘤大小和对任何类型的治疗的响应也可以是有用的。本发明的方法用于检测HCC复发也可以是有用的。[0075]本发明的方法基于呼吸测试参数的分析。将已知数量的同位素标记的外源物质，即，同位素标记的辛酸施用至受试者，并定量及定性地追踪标记的物质的代谢。将获得的呼吸测试参数与参考数据比较。获得的参数指示受试者中HCC状态。根据本发明实施方案的呼吸测试，基于检测受试者呼吸中同位素标记的代谢产物并测量标记的和未标记的代谢产物之间的比。例如，通过计算标记的代谢产物的呼出的速率并产生TOR曲线还可进一步处理数据。[0076]尽管呼吸测试中评价肝状况存在困难，但观察到辛酸代谢的水平与受试者的HCC的状态之间的相关性。[0077]根据一个方面，本发明提供了用于受试者中HCC的早期检测、预后和随访的方法，该方法包括:[0078](i)在施用同位素标记的辛酸之后，通过监测受试者的呼出气样品中辛酸的同位素标记的代谢产物，确定受试者中的辛酸代谢；和[0079](ii)将受试者中的辛酸代谢和参考辛酸代谢比较，其中显著减弱的辛酸代谢指示HCC。[0080]在一些实施方案中，本文提供了用于受试者中HCC的检测、确定预后和/或随访的方法，该方法包括将如通过以下确定的受试者中的辛酸代谢与参考辛酸代谢比较:在施用同位素标记的辛酸之后，监测受试者的呼出气中辛酸的同位素标记的代谢产物，其中显著下降的辛酸代谢指示活跃的HCC。[0081]在肝硬化患者中，整体的肝功能是损伤的。现有技术中使用的KICA的代谢，已知受整体肝功能的影响，且与未患有肝硬化的患者中正常值相比，肝硬化导致的损伤影响KICA呼吸测试值并降低它们。然而，已知一些HCC患者不是肝硬化患者。因此，预期未患有肝硬化但患有HCC的患者不能够被KICA有效地检测出。有利地，根据本发明实施方案的方法，利用其代谢不受整体肝功能影响的化合物。关于健康的受试者、患有肝硬化的对照或患有非活跃的HCC的受试者对患有HCC的受试者的OBT峰值是相似的(独立于他们的实际肝损伤)。因此，预期未患有肝硬化但患有HCC的患者可被辛酸呼吸测试检测出。[0082]典型地，向受试者施用同位素标记的辛酸，并收集呼吸样品。在一些实施方案中，通过经预定时间段的连续测量执行监测。在一些实施方案中，使用例如Breath丨Du系统(ExalenzBioscienceLtd.)执行连续测量。此测量使得PDR峰的准确评价成为可能,其是当前用于HCC的存在的优选的指示测量，并可被用于小的肿瘤的早期检测。[0083]在其他实施方案中，标记的辛酸的单次施用之后，通过经预定时间段以定期间隔或在确定的时间点收集来自受试者的多个呼吸样品执行监测，并测量所述样品中的同位素比。[0084]在一些实施方案中，通过连续在线取样收集样品。[0085]在一些实施方案中，预定时间段从约0.1-1小时、从约0.1-2小时、从约0.1-3小时、从约1-2小时、从约1-3小时、从约1-4小时、从约2-4小时的范围。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。[0086]在一些实施方案中，用于收集呼吸样品的定期间隔从约0.5_30min、从约10-30min、从约20_60min、从约30_60min的范围。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。[0087]在一些实施方案中，监测仅在标记的物质的施用之后开始。在其他实施方案中，监测在施用标记的物质之前开始。在一些实施方案中，产生基线读数或基线值。[0088]在一些实施方案中，在至少三个时间点处测量呼气的同位素标记的代谢产物，例如，以产生回收剂量百分比(PDR)曲线。可从PDR确定代谢活性。[0089]在一些实施方案中，该方法包括在向受试者施用同位素标记的辛酸之后，在线监测受试者的呼吸中辛酸的代谢产物。[0090]在一些典型的实施方案中，代谢产物是C02。在一些实施方案中，同位素选自由以下组成的组:碳-13、碳-14和氧-18。在一些典型的实施方案中，同位素是13C。例如，可通过测量呼出气中13C/12C的比评价13C-辛酸的肝代谢。碳-13是稳定的非放射性同位素，其可被掺入(incorporate)测试物质的分子内特定的位置以致其被肝代谢并产生13CO2之后，其将被释放。可口服施用13C-化合物，由肝快速吸收并代谢，且随后可在预定时间段内在呼出气中测量13CO2。[0091]在一些实施方案中，监测包括产生回收剂量百分比(PDR)曲线、累积的回收剂量百分比(CPDR)曲线和超基准δ值(DOB)曲线的至少一种，并计算所述H)R、CPDR和DOB曲线的至少一种参数。[0092]在一些实施方案中，比较包括将计算的至少一种参数与参考H)R、CPDR和DOB曲线的至少一种参数比较。[0093]在一些实施方案中，将受试者中的辛酸代谢与参考辛酸代谢比较包括产生关于受试者的回收剂量百分比(PDR)曲线并将所述TOR曲线的至少一种参数与参考PDR曲线的至少一种参数比较。PDR曲线是本领域已知的。此类曲线以％剂量/小时(施用剂量的回收百分数每小时)描绘标记的物质的代谢速率，如在呼吸中测量的。PDR曲线反映肝的动态响应。[0094]在一些实施方案中，至少一种参数选自由以下组成的组:峰高、峰出现的时间和代谢速率的斜率。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。在可选的或另外的实施方案中，参数是在选择的时间点的一个或多个I3DR值(％剂量/小时)。[0095]在一些实施方案中，将受试者中的辛酸代谢与参考辛酸代谢比较包括产生关于受试者的累积的回收剂量百分比(CPDR)曲线并将所述CPDR曲线的至少一种参数与参考CPDR曲线的至少一种参数比较。CPDR曲线是本领域已知的。此类曲线以％剂量描绘被代谢的标记的物质的量(施用剂量随时间推移的累积回收百分数)，如在呼吸中测量的。可将呼吸中标记的CO2的累积回收计算为I3DR的曲线下面积(AUC)。[0096]在一些实施方案中，参数是在选择的时间点的一个或多个CPDR值，例如，在30、40和/或45分钟时的CPDR值。[0097]在一些实施方案中，将受试者中的辛酸代谢与参考辛酸代谢比较包括产生超基准δ值(DOB)曲线并将所述DOB曲线的至少一种参数与参考DOB曲线的至少一种参数比较。DOB曲线是本领域已知的。此类曲线描绘了特定时间点收集的测试样品中同位素比(例如，13co2/12co2)和基线样品中相应的比之间的差异。[0098]在一些实施方案中，参数是在选择的时间点的一个或多个DOB值。[0099]PDR曲线展示基于身高和体重及施用的物质的量考虑受试者的CO2产率将DOB每受试者标准化。在一些实施方案中，基于受试者的体重向受试者施用辛酸的剂量(例如，Img或2mg或3mg每千克)。根据这些实施方案,DOB曲线更优选用于分析。在其他实施方案中，受试者被施用辛酸的固定的、预定的剂量(例如，lOOmg)。根据这些实施方案，PDR曲线更优选用于分析。[0100]典型地，根据本发明的实施方案选择用于分析的呼吸测试参数处理肝外代谢或克服肝外代谢的问题。通常，仅针对直至峰被检测到而获得的信息，例如-峰高和峰时间执行分析。[0101]在一些特定实施方案中，参数是峰高。根据这些实施方案，下降的峰高指示HCC。[0102]在一些典型的实施方案中，口服、静脉内或鼻腔内施用标记的辛酸。[0103]在一些实施方案中，该方法适于随访及监测对患者的HCC治疗的响应。在一些实施方案中，该方法包括在同位素标记的辛酸施用之后，通过监测受试者的呼出气中辛酸的同位素标记的代谢产物执行肝功能的首次评价，并在预定时间段之后，通过监测受试者的呼出气中辛酸的同位素标记的代谢产物执行肝功能的第二次评价。在一些实施方案中，在预定时间段之后执行第二次评价的步骤被重复许多次。[0104]术语“许多”可以指大于I的任何数目。在一些实施方案中，术语“许多”指大于2的任何数目。在其他实施方案中，术语“许多”指大于3的任何数目。[0105]如本文所用的，“下降”、“显著下降”或“显著差异”典型指统计显著的差异，如可由本领域已知的标准方法定义的。[0106]典型地，在未罹患HCC的受试者中确定对照辛酸代谢。在一些实施方案中，对照受试者患有至少一种慢性肝病而未患有HCC。在一些示例性实施方案中，对照受试者是未患有HCC的肝硬化患者。在其他实施方案中，对照受试者是未患有肝病的健康个体。[0107]根据本发明的原理，在至少一名受试者、优选多名受试者中确定对照辛酸代谢。可将在对照受试者中确定的一组对照参数储存为参考数据集。[0108]在一些典型的实施方案中，测试的受试者是哺乳动物，优选人。[0109]在一些实施方案中，测试的受试者选自由以下组成的组:处于形成HCC的风险中的受试者、怀疑患有HCC的受试者和罹患HCC的受试者。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。[0110]在一些实施方案中，受试者罹患HCC并已经受或正经受治疗。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。在一些实施方案中，治疗选自由以下组成的组:TACE和RFA或用于HCC的任何其他药物，包括任何类型的酪氨酸激酶抑制剂、任何类型的化学治疗剂包括但不限于阿霉素、和用于HCC的任何类型的免疫治疗包括但不限于脉冲的树突状细胞、及治疗的任何组合。这还包括针对经受手术切除或肝移植的患者中的任何辅助治疗的应答的随访。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。[0111]在一些实施方案中，该方法还包括根据疾病病因将步骤(i)中获得的值标准化。在一些实施方案中，疾病病因选自由以下组成的组=NASH和NAFLD。[0112]在可选的或另外的实施方案中，该方法还包括根据一种或多种血液测试结果将步骤(i)中获得的值标准化。在一些实施方案中，一种或多种血液测试选自由以下组成的组:空腹葡萄糖水平、胰岛素水平、ALT水平、AST水平、ALP水平、GGTP水平、胆红素水平、白蛋白水平和钠水平。[0113]在可选的或另外的实施方案中，该方法还包含根据受试者正在接受或已接受的HCC治疗将步骤(i)中获得的值标准化。在一些实施方案中，治疗是索拉非尼施用。[0114]在一些实施方案中，光谱法测量呼出的同位素标记的代谢产物，例如，通过红外光谱法或用质量分析仪。[0115]在一些实施方案中，监测受试者的呼出气中辛酸的同位素标记的代谢产物包括使用选自由以下组成的组的至少一种技术:气相色谱(GC)、GC-质谱联用(GC-MS)、质子转移反应质谱(PTR-MS)、电子鼻装置和石英晶体微量天平(QCM)。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。[0116]在一些实施方案中，测试的受试者患有至少一种慢性肝病。在一些实施方案中，慢性肝病选自由以下组成的组:非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、乙型肝炎和丙型肝炎或患有或未患有将患者暴露于原发性肝癌和/或转移的肝硬化的任何其他类型的慢性肝病，。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。[0117]在一些实施方案中，慢性肝病选自由以下组成的组:NASH和NAFLD。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。根据这些实施方案，该方法还包括OBT值的标准化。已知NASH/NAFLD影响肝线粒体功能(见，例如，Grattagliano1.等人13Obreathtestsforclinicalinvestigationoflivermitochondrialfunction;EurJClinInvest2010;40(9):843-850)。[0118]在一些实施方案中，算法和/或不同的截止值被用于修正NASH/NAFLD患者的值。适合的算法可包括代表那些患者的疾病严重程度的某些血液测试结果，包括，但不限于，空腹葡萄糖水平、胰岛素水平和/或肝功能(liverpanel)(例如，ALT、AST、ALP、GGTP、胆红素、白蛋白、钠水平)。[0119]在一些实施方案中，测试的受试者患有不同于NASH/NAFLD的肝病。[0120]在一些实施方案中，用索拉非尼(增强线粒体功能)治疗测试的受试者。根据这些实施方案，该方法还包括OBT值的标准化和/或不同的截止值的使用。在一些实施方案中，算法被用于修正索拉非尼治疗的患者的值。例如，可将呼吸测试结果标准化为索拉非尼剂量、频率和已完成治疗的时间的函数。[0121]这还可适用于任何其他类型的治疗，包括任何化学治疗放射治疗和辅助治疗、免疫治疗或细胞内机制的抑制剂或以上的组合。在其他实施方案中，受试者是除用索拉非尼治疗的受试者外的受试者。[0122]该方法还可包括监测呼吸中的总C02。可例如通过二氧化碳描记术监测C02。这可最小化测试长度和将引入不相关的变量至HCC评价的代谢速率和/或CO2产生的变化。[0123]该方法还可包括分析通过监测辛酸的代谢产物获得的至少一种呼吸相关的参数与通过监测呼吸中的总CO2获得的至少一种呼吸相关的参数的组合。该方法还可包括分析通过监测辛酸的代谢产物获得的至少一种呼吸相关的参数与至少一种生理和/或医学参数的组合。生理和/或医学参数可包括年龄、性别、体重、身高、血液相关的参数、身体质量指数(BMI)、腰围、药物治疗相关的参数、基础疾病或其任何组合。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。[0124]在一些实施方案中，将辛酸呼吸测试结果与受试者的人口统计学和临床数据结合以产生预测分数。[0125]在一些实施方案中，还考虑并评价了人口统计学参数。[0126]在一些实施方案中，该方法还包括至少基于一种呼吸测试相关的参数和人口统计学参数计算肝损伤分数(HIS)。[0127]人口统计学参数的非限制性实例包括身高、体重、年龄、性别、吸烟习惯、疾病病因、关于并发症的已知信息或其任何组合。人口统计学信息可被用于:[0128](i)补偿影响呼吸测试的患者之间因素；和/或[0129](ii)处理影响疾病的因素和与呼吸测试数据一起可允许提供疾病严重程度和/或状态的可靠预测的因素。该信息可涉及来自下面列表的任何一个或多个条目(和/或任何其他相关信息):身高和体重、年龄、性别、吸烟习惯、疾病病因、关于并发症的已知信息(包括但不限于，分流术、门静脉高压、脑病、静脉曲张、静脉曲张出血、异常血液测试诸如胆红素、水肿和/或腹水、失代偿期肝硬化、可影响辛酸的代谢途径的某些药物的消耗)和评价肝病严重程度的一般分数诸如肝功能分级(CTP)、终末期肝病模型(MELD)和/或钠MELD(Na-MELD)分数。[0130]关于计算HIS分数的信息可见于国际专利申请公布号W02010/013235。[0131]通常，如本文涉及的检测、监测、区别、评价、测量、区分、定量，等等，可通过本文描述的任何装置、呼吸收集系统、分析仪单元、校准装置、算法和方法实现，和/或作为非限制性实例，通过在美国专利号6，186，958,6,491，643和6，656，127;和美国专利申请公布号2003/0216660和2001/0021815中公开的任何装置、呼吸收集系统、分析仪单元、校准装置、算法和方法实现。[0132]适于本发明的方法的装置的另外的非限制性实例是在国际专利申请公布号W02007/054940和W02010/013235中描述的装置。[0133]典型地，适于本发明的方法的装置包括呼吸测试分析仪，包括能够测量具有不同的分子量的两种化学性质相同的气体的比的非常灵敏的气体分析仪。气体分析仪能够测量可存在于受试者的呼吸中的少量的同位素标记的气体。[0134]在一些实施方案中，存在分析呼吸样品的至少两种模式。分析仪可执行其关于个体呼出气的分析，或其可执行其关于连续采集自患者的患者呼吸的多个样品的在线分析。[0135]在一些实施方案中，呼吸测试分析仪包括呼吸分析室、用于传送来自患者的呼出气至呼吸分析室的呼吸进口导管；和操作以分析呼吸分析室中的气体并进行患者呼出气的首次分析的气体分析仪。[0136]在一些实施方案中，通过连续的测量执行监测辛酸的同位素标记的代谢产物。在一些实施方案中，实时执行在线监测，同时受试者连续提供呼吸用于后续分析。用于在线监测的适合的装置可包括，例如，适于监测标记的辛酸、或辛酸的盐或衍生物的代谢产物内同位素水平的一种或多种呼吸传感器，和适于在连续模式下一种或多种传感器的在线样品测量的控制器。[0137]该装置可适于连续模式下一种或多种传感器的样品测量，同时在采集呼吸样品期间患者通过例如鼻套管与该装置连接。该装置可适于自动收集并分析呼吸样品。[0138]该装置还可包括一个或多个呼吸传感器，诸如适于监测呼吸中CO2的二氧化碳描记术传感器。[0139]该装置还可包括适于分析通过监测标记的物质，诸如，辛酸的代谢产物中同位素水平获得的至少一种呼吸相关`的参数与通过监测呼吸中CO2获得的至少一种呼吸相关的参数的组合的处理器。处理器可修正整个呼吸测试过程中受试者的CO2呼出/产生中的变化。[0140]在一些实施方案中，基于便携式办公的系统(portableoffice-basedsystem)可连续感测并收集呼出气并实时在线分析通过受试者所戴的鼻套管的CO2，并可使能够实时评价HCC状态，从而提供临床肝病学中的随访方法。在一些实施方案中，设计此测试旨在提供13co2/12co2比小至1/1000的临床相关变化的准确检测所需的灵敏性和准确性。[0141]在一些实施方案中，在医疗点执行根据本发明的实施方案的呼吸测试。[0142]不希望被任何理论或作用机制限制，在一些实施方案中，患有活跃的HCC、即使小于2cm的活跃的HCC的患者中OBT的下降可反映由肿瘤细胞分泌的影响这些患者中整体线粒体功能的一种因子或多种因子。[0143]在一些实施方案中，阻碍该假定的因子或这些假定的因子的任何类型的治疗可对恶性过程的缓和具有影响。[0144]不希望被任何理论或作用机制限制，在一些实施方案中，由于肿瘤的过度血管供应，将辛酸捕获在肿瘤中或在肿瘤细胞内或在细胞之间。[0145]在一些实施方案中，两种机制，辛酸的捕获和由肿瘤细胞分泌一种因子或多种因子可同时起作用。[0146]在一些实施方案中，可将辛酸缀合至化学治疗剂作为将化学治疗递送至肿瘤内的方法，因此预防或减少不想要的药物的全身性副作用并使能够在肿瘤内使用高浓度的药物。[0147]在一些实施方案中，这些治疗剂还包括任何类型的化学治疗,放射治疗包括但不限于放射性物质诸如铱，免疫治疗，基因治疗或以上的任何组合。辛酸因此可用作用于递送治疗的剂或载体。[0148]在一些实施方案中，由于辛酸在肿瘤中被浓缩，其还可被用作用于成像的工具，作为目前已知的剂的有效的替代，例如在其中碘油被用于CT或MRI的情况下。[0149]本发明的方法基于通过肝线粒体代谢辛酸(C8H16O2)。脂肪酸(诸如辛酸)的代谢和13C-碳呈13CO2形式的释放需要多个步骤，包括β-氧化、13C标记的乙酰辅酶A(AcCoA)的产生和后续13C碳在三羧酸(TCA)循环(还称为柠檬酸循环或Krebs循环)中的释放。不适当的TCA功能可导致AcCoA的积累。已知存在关于AcCoA的可替代的通路，其导致在呼吸测试中将不会被检出的酮体产生或脂肪生成。继续在TCA循环中的标记的辛酸的百分数对转到酮体产生的标记的辛酸的百分数可取决于受试者的生理条件。例如，在饥饿/禁食条件下，可能需要导致不太有效的TCA过程的草酰乙酸(如其在葡萄糖合成/糖异生中被细胞使用)。“采取”TCA循环途径的标记的辛酸的量和“采取”可替代的途径的标记的辛酸的量之间的不同(且有时不可预测)的比可影响呼吸测试的准确性。在一些实施方案中，提供了以下步骤，彼此独立或呈任何组合，用于增加辛酸呼吸测试的诊断准确性:[0150]a.使用低剂量(诸如，约IOOmg的范围内)的辛酸或辛酸盐以避免TCA循环的饱和。通常，可根据体重选择待被施用的辛酸剂量，例如，约lmg/kg-3mg/kg,允许从约15mg(儿童，lmg/kg)至约450mg(肥胖患者,3mg/kg)的范围的剂量。[0151]b.可在>8小时禁食之后测试患者，以确保代谢条件几乎稳定并对由于进餐的变化较少敏感。[0152]c.测试餐可包括葡萄糖和13C辛酸。[0153]d.测试餐可包括阿斯巴甜(和13C辛酸盐)，其提供作为草酰乙酸的来源的天冬氨酸。[0154]e.c和/或d的替代是其中在测试之前施用葡萄糖/阿斯巴甜。[0155]f.使用阻断/减少酮产生通路的药物(例如，HMG-CoA还原酶抑制剂)。[0156]g.用生物化学测试(酮尿和/或血浆血清酮体浓度)与13C-辛酸呼吸测试配合测量酮体产生以改进测试的诊断准确性。[0157]h.寻找血液中13C-辛酸的踪迹。[0158]根据另一个方面，本发明提供了用于受试者中HCC的检测、预后和/或随访的装置，该装置包括被配置以检测受试者中的辛酸代谢和对照辛酸代谢之间差异的处理器，其中减少的辛酸代谢指示HCC。[0159]在一些实施方案中，处理器被配置以在施用同位素标记的辛酸之后，监测受试者的呼出气中辛酸的同位素标记的代谢产物，并将受试者中的辛酸代谢与参考辛酸代谢比较，其中显著降低的辛酸代谢指示活跃的HCC。[0160]在一些实施方案中，处理器适于根据疾病的病因、治疗或其组合标准化呼吸测试值。[0161]在一些实施方案中，处理器适于计算并产生DOB曲线、PDR曲线和CPDR曲线的至少一种，并将所述DOB、PDR或CPDR的至少一种参数与至少一种参考参数比较。[0162]在一些实施方案中，至少一种参数选自由以下组成的组:PDR最大水平(峰高)、峰出现的时间(至峰时间)和代谢速率的斜率。每一种可能性都代表本发明单独的实施方案。[0163]在一些实施方案中，处理器还适于基于辛酸代谢的差异计算与HCC相关的输出指示。[0164]在一些实施方案中，处理器还适于基于D0B、PDR和/或CPDR的至少一种参数的差异计算与HCC相关的输出指示。[0165]在一些实施方案中，处理器还适于并发地监测呼吸中的总C02。[0166]呈现下面的实施例是为了更全面地说明本发明的某些实施方案。然而，它们不应以任何方式被解释为限制本发明的宽范围。本领域技术人员可容易设计本文公开的原理的许多变化形式和修改形式而不偏离本发明的范围。实施例[0167]实施例1:活跃的HCC对非活跃的HCC和对照中13C-辛酸呼吸测试值[0168]招募患有活跃的或非活跃的HCC(成功治疗之后)的患者。基于注射对比介质(碘油?)根据CT和/或MRI确定活性的程度。另外，还招募了无任何HCC迹象的肝硬化患者(用作对照组)。关于研究人群的信息在下文的表1、2和3中提供。[0169]表1【权利要求】1.一种用于受试者中肝细胞癌(HCC)检测、确定预后和/或随访的方法，所述方法包括:(i)在同位素标记的辛酸的施用之后，监测所述受试者的呼出气中辛酸的同位素标记的代谢产物；和(ii)将所述受试者中的辛酸代谢和参考辛酸代谢比较，其中显著减弱的辛酸代谢指示活跃的肝细胞癌。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述参考辛酸代谢是在未罹患HCC的受试者中确定的对照辛酸代谢。3.根据权利要求1所述的方法，所述方法还包括基于所述比较区别活跃的和非活跃的肝细胞癌。4.根据权利要求1所述的方法，其中在标记的辛酸的单次施用之后，通过经预定时间段的连续测量执行监测。5.根据权利要求1所述的方法，其中在标记的辛酸的单次施用之后，经预定时间段以定期间隔收集来自所述受试者的多个呼吸样品。6.根据权利要求1所述的方法，其中所述代谢产物是C02。7.根据权利要求1所述的方法，其中所述同位素选自由以下组成的组--碳-13、碳-14和氧_18。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述同位素是13C。9.根据权利要求1所述的方法，其中将所述受试者中的辛酸代谢与参考辛酸代谢比较包括产生关于所述受试者的超基准δ值(DOB)曲线、回收剂量百分比(PDR)曲线和累积TOR(CPDR)曲线的至少一种，并将所述DOB、PDR或CPDR的至少一种参数与参考DOB、PDR、CPDR曲线或其组合的至少一种参数比较。10.根据权利要求9所述的方法，其中将所述受试者中的辛酸代谢与参考辛酸代谢比较包括产生I3DR曲线并将所述I3DR曲线的至少一种参数与参考I3DR的至少一种参数比较。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述至少一种参数选自由以下组成的组:峰高、峰出现的时间和代谢速率的斜率。12.根据权利要求11所述的方法，其中所述参数是峰高。13.根据权利要求12所述的方法，其中降低的峰高指示HCC。14.根据权利要求11所述的方法，其中所述参数是至峰时间。15.根据权利要求14所述的方法，其中较长的至峰时间指示HCC。16.根据权利要求9所述的方法，其中所述至少一种参数选自以下:在选择的时间点的一个或多个I3DR(%剂量/小时)值、在选择的时间点的一个或多个CPDR值和在选择的时间点的一个或多个DOB值。17.根据权利要求16所述的方法，其中在所述选择的时间点的降低的H)R、CPDR和/或DOB值指示HCC。18.根据权利要求1所述的方法，所述方法包括在同位素标记的辛酸的首次施用之后，通过监测所述受试者的呼出气中辛酸的同位素标记的代谢产物执行肝功能的首次评价，和在同位素标记的辛酸的第二次施用之后，通过监测所述受试者的呼出气中辛酸的同位素标记的代谢产物在预定时间段之后执行肝功能的第二次评价。19.根据权利要求18所述的方法，其中在预定时间段之后执行第二次评价的所述步骤被重复许多次。20.根据权利要求17所述的方法，其中所述参考辛酸代谢是在肝功能的首次评价过程中确定的辛酸代谢。21.根据权利要求1所述的方法，所述方法还包括根据疾病病因将步骤(i)中获得的值标准化。22.根据权利要求21所述的方法，其中所述疾病病因选自由以下组成的组:NASH和NAFLD。23.根据权利要求1所述的方法，所述方法还包括根据一种或多种血液测试的结果将步骤(i)中获得的值标准化。24.根据权利要求23所述的方法，其中所述一种或多种血液测试选自由以下组成的组:空腹葡萄糖水平、胰岛素水平、ALT水平、AST水平、ALP水平、GGTP水平、胆红素水平、白蛋白水平和钠水平。25.根据权利要求1所述的方法，所述方法还包括根据治疗将步骤(i)中获得的值标准化。26.根据权利要求25所述的方法，其中所述治疗是索拉非尼施用。27.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者选自由以下组成的组:处于形成肝细胞癌的风险中的受试者、怀疑患有肝细胞癌的受试者和罹患肝细胞癌的受试者。28.根据权利要求27所述的方法，其中所述受试者罹患肝细胞癌并已经受或正经受治疗。29.根据权利要求28所述的方法，其中所述治疗不同于索拉非尼施用。30.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者患有至少一种慢性肝病。31.根据权利要求30所述的方法，其中所述慢性肝病选自由以下组成的组:NASH、NAFLD、乙型肝炎、丙型肝炎和由于任何病因的肝硬化。32.根据权利要求30所述的方法，其中所述慢性肝病不同于NASH或NAFLD。33.根据权利要求1所述的方法，所述方法还包括监测所述受试者的呼出气中的总CO2。34.根据权利要求1所述的方法，其中口服、静脉内或鼻腔内施用所述同位素标记的辛酸。【文档编号】A61B5/083GK103764026SQ201280029124【公开日】2014年4月30日申请日期:2012年4月5日优先权日:2011年4月14日【发明者】吉尔·古根海姆,伊兰·本-奥伦,亚夫拉罕·赫什科维茨,亚龙·伊兰申请人:艾克萨伦茨生物科技有限公司