用于治疗特应性皮炎的方法和组合物与流程

特应性皮炎(ad)，也被称为特应性湿疹，是一种类型的皮肤炎症(皮炎)。它会导致瘙痒、发红、肿胀和皮肤开裂。ad患者常常具有除了可能的尿布区外遍布全身的干燥且甲错的皮肤，并且在臂或腿弯曲处、面部和颈部形成强烈瘙痒、发红、斑状、凸起的病变。这种状况通常始于儿童期，其严重程度随着年龄而变化。在一岁以下的儿童中，身体的很多部分可能会受到影响。随着年龄增长，膝盖背侧和肘前部是最常见的患病区域。在成人中，手和足是最常受到影响的区域。其病因未知，但据认为涉及遗传学、免疫系统功能障碍、环境暴露以及皮肤通透性困难。诊断通常基于体征和症状。诊断前必须排除的其他疾病包括接触性皮炎、银屑病和脂溢性皮炎。目前还没有已知的治愈ad的方法，尽管治疗方法可以降低红肿的严重程度和频率。治疗包括避开使状况恶化的因素，之后每天使用保湿霜进行沐浴，当发生红肿时涂抹类固醇乳膏，以及使用有助于处理瘙痒的药物。技术实现要素：在一个方面，本文提供了治疗或减轻受试者中特应性皮炎的症状的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的具有以下结构的环己烯酮化合物，或其药学上可接受的盐、代谢物、溶剂化物或前药：其中x和y中的每一个独立地为氧、nr5或硫；r为氢或c(＝o)c1-c8烷基；r1、r2和r3中的每一个独立地为氢、任选取代的甲基或(ch2)m-ch3；r4为nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、卤素、5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基、葡糖基，其中该5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基和葡糖基任选地被一个或多个取代基取代，该取代基选自nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、c3-c8环烷基和c1-c8卤代烷基；r5和r6中的每一个独立地为氢或c1-c8烷基；r7为c1-c8烷基、or5或nr5r6；m＝1-12；且n＝1-12。援引并入本说明书中所提到的所有出版物、专利和专利申请均通过引用并入本文，其程度等同于特别地且单独地指出每个单独的出版物、专利或专利申请通过引用而并入。附图说明本发明的新颖特征在所附权利要求书中具体阐述。通过参考以下对利用了本发明原理的说明性实施方案进行阐述的详细描述以及附图，将获得对本发明的特征和优点的更好的理解，在附图中：图1示出了在动物研究过程中饲喂各剂量化合物1的各组小鼠的体重记录。p值为通过studentt-检验与组n比较而得。(*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001)图2a-e示出了代表性小鼠背部上的说明性皮肤状况变化。图2a示出了组n小鼠的照片，图2b示出了致敏组(组o)小鼠的照片。图2c示出了组l小鼠的照片(向该小鼠饲喂低剂量的示例性化合物1)。图2d示出了组m小鼠的照片(向该小鼠饲喂中等剂量的示例性化合物1)。图2e示出了组h小鼠的照片(向该小鼠饲喂高剂量的示例性化合物1)。p值为通过studentt-检验与组n比较而得。(*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001)图3a-c示出了各组皮肤状况的说明性研究结果：相对经表皮失水(3a)、相对湿度(3b)、ph(3c)。p值为通过studentt-检验与组n比较而得。(*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001)图4a-g示出了来自各组的皮肤样本的h&e染色结果。图4a：组n，4b：组o，4c：组l，4d：组m，4e：组h。图4f提供了各组的表皮计数。图4g提供了各组的真皮计数。p值为通过studentt-检验与组n比较而得。(*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001)图5a-f示出了来自各组的皮肤样本的嗜酸性粒细胞染色结果。5a：组n，5b：组o，5c：组l，5d：组m，5e：组h。图5f提供了各组的嗜酸性粒细胞计数。p值为通过studentt-检验与组n比较而得。(*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001)图6a-f示出了来自各组的皮肤样本的tslp染色结果。6a：组n，6b：组o，6c：组l，6d：组m，6e：组h。图6f提供了各组的tslp计数。p值为通过studentt-检验与组n比较而得。(*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001)图7a-f示出了来自各组的皮肤样本的朗格汉斯细胞染色(langerinstain)结果。7a：组n，7b：组o，7c：组l，7d：组m，7e：组h。图7f提供了各组的朗格汉斯细胞计数。p值为通过studentt-检验与组n比较而得。(*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001)图8a/b示出了来自各组的血清免疫球蛋白和ova特异性免疫球蛋白计数的结果。8a：总ige与天数。8b：特异性ige与天数。p值为通过studentt-检验与组n比较而得。(*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001)图9a/b示出了来自各组的迟发型致敏反应的结果。图9a示出了耳厚度的测量值。图9b示出了足厚度。p值为通过studentt-检验与组n比较而得。(*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001)图10a-d示出了用pha、cona和ova刺激24小时的脾细胞的激素分泌结果。p值为通过studentt-检验与组n比较而得。(*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001)图11a-d示出了用pha、cona和ova刺激72小时的脾细胞的激素分泌结果。p值为通过studentt-检验与组n比较而得。(*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001)图12a-d示出了用pha、cona和ova刺激24小时的淋巴细胞的细胞因子分泌结果。p值为通过studentt-检验与组n比较而得。(*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001)图13a-d示出了用pha、cona和ova刺激72小时的淋巴细胞的细胞因子分泌结果。p值为通过studentt-检验与组n比较而得。(*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001)具体实施方式特应性皮炎(ad)的特征在于皮肤炎症，皮肤屏障功能受损，以及ige刺激的对环境变应原的致敏。特应性皮炎(ad)的免疫应答可分为急性和慢性期。在急性期，临床表现显示出剧烈瘙痒、红斑丘疹、擦伤及体液渗出。ad的发病机理是由外而内，然后回到外部的，并且主要是由于t辅助细胞1(th1)th1/th2细胞失调的调节异常。表皮中的树突细胞主要是朗格汉斯细胞(lc)，其为髓样树突细胞。朗格汉斯细胞的表面具有ige和受体fcεri。在急性期，它们可能暴露于呈递给t淋巴细胞的环境刺激物，从而触发th2途径，并且朗格汉斯细胞也可以诱导单核细胞进入表皮，转移到炎性树突状表皮细胞(idec)，使得ige和受体fcεri产生变应性免疫应答，分泌炎性细胞因子il-1、il-6和tnf-α(muddegc等人，1992；inagakin等人，1997)。在慢性期，炎性树突状表皮细胞(idec)将th2转移到th1和th0途径，引起细胞因子ifn-γ、il-12、il-5和gm-csf(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)的分泌。如leungdy等人所报道的，在ad患者外周血中循环的th2细胞导致血清ige和嗜酸性粒细胞升高。这些t细胞表达皮肤归巢受体cla，并通过未受影响的ad皮肤再循环，在该皮肤处它们可以参与促进th2细胞发育的变应原触发的ige+lc和肥大细胞(mc)。当皮肤受到擦伤、环境变应原或微生物毒素的损伤时，会激活角质形成细胞以释放促炎细胞因子和趋化因子，这些因子促进炎症细胞渗入皮肤内。胸腺基质淋巴细胞生成素(tslp)和il-10也增强th2细胞分化。ad炎症引起急性皮肤损伤中th2细胞的增加。然而，在慢性ad期，其导致炎性idec、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞的浸润，这些细胞产生il-12，导致切换到与ifn-γ表达增加相关的th1型细胞因子环境。(参见“newinsightsintoatopicdermatitis，”leung等人，j.clin.invest.，2004年3月1日；113(5)：651-657)。在一些实施方案中，本文提供了通过将本文所述的环己烯酮化合物施用于受试者(例如哺乳动物，如大鼠、狗、猫、人等)来治疗或减轻受试者中特应性皮炎的症状的方法。本发明发现，通过饲喂某些环己烯酮化合物(如化合物1，以低、中或高剂量)，具有ad的小鼠的状况显著改善。所述改善包括，例如，皮肤炎症减轻、皮肤生理功能和保湿效果恢复、发炎皮肤的表皮和真皮层厚度减小以及嗜酸性白细胞和朗格汉斯细胞浸润现象减少的表现。基于组织染色方法，通过向具有ad状况的小鼠饲喂化合物1，引起ad炎症的tslp和总ige的量以剂量依赖性方式降低。基于刺激脾细胞和淋巴结细胞的实验，示例性化合物还可以调节某些细胞因子，如提高ifn-γ和il-12的浓度，降低il-4和tnf-α的浓度。因此，本文所述的环己烯酮化合物对正在治疗ad的受试者提供治疗益处(参见实施例1-4)。一些实施方案中，所述环己烯酮化合物是从天然产物的提取物获得的或以合成或半合成方式制备的。在一些实施方案中，本发明提供了示例性环己烯酮化合物(例如，化合物1)在治疗或减轻特应性皮炎的症状中的治疗和预防潜力。在一些实施方案中，提供了治疗或减轻受试者中特应性皮炎的症状的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的具有以下结构的环己烯酮化合物，或其药学上可接受的盐、代谢物、溶剂化物或前药：其中x和y中的每一个独立地为氧、nr5或硫；r为氢或c(＝o)c1-c8烷基；r1、r2和r3中的每一个独立地为氢、任选取代的甲基或(ch2)m-ch3；r4为nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、卤素、5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基、葡糖基，其中该5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基和葡糖基任选地被一个或多个取代基取代，该取代基选自nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、c3-c8环烷基和c1-c8卤代烷基；r5和r6中的每一个独立地为氢或c1-c8烷基；r7为c1-c8烷基、or5或nr5r6；m＝1-12；且n＝1-12。在一些实施方案中，提供了药物组合物，其包含治疗有效量的具有以下结构的环己烯酮化合物，或其药学上可接受的盐、代谢物、溶剂化物或前药：其中x和y中的每一个独立地为氧、nr5或硫；r为氢或c(＝o)c1-c8烷基；r1、r2和r3中的每一个独立地为氢、任选取代的甲基或(ch2)m-ch3；r4为nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、卤素、5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基、葡糖基，其中该5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基和葡糖基任选地被一个或多个取代基取代，该取代基选自nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、c3-c8环烷基和c1-c8卤代烷基；r5和r6中的每一个独立地为氢或c1-c8烷基；r7为c1-c8烷基、or5或nr5r6；m＝1-12；且n＝1-12；该药物组合物用于治疗或减轻受试者中特应性皮炎的症状。在一些实施方案中，提供了治疗有效量的具有以下结构的环己烯酮化合物或其药学上可接受的盐、代谢物、溶剂化物或前药在制备用于治疗或减轻受试者中特应性皮炎的症状的药物中的用途，其中x和y中的每一个独立地为氧、nr5或硫；r为氢或c(＝o)c1-c8烷基；r1、r2和r3中的每一个独立地为氢、任选取代的甲基或(ch2)m-ch3；r4为nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、卤素、5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基、葡糖基，其中该5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基和葡糖基任选地被一个或多个取代基取代，该取代基选自nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、c3-c8环烷基和c1-c8卤代烷基；r5和r6中的每一个独立地为氢或c1-c8烷基；r7为c1-c8烷基、or5或nr5r6；m＝1-12；且n＝1-12。在一些实施方案中，所述减轻ad的症状是皮肤炎症减轻、皮肤生理功能恢复、皮肤保湿效果恢复、发炎皮肤的表皮和真皮层厚度减小、嗜酸性白细胞和朗格汉斯细胞浸润现象减少等表现。在一些实施方案中，所述减轻ad的症状是受试者中的tslp或总ige浓度降低、受试者中的ifn-γ或il-12浓度升高或il-4或tnf-α浓度降低。参见实施例2-3。在一些实施方案中，具有结构的环己烯酮化合物由任何合适的起始材料以合成或半合成方式制备。在其他实施方案中，该环己烯酮化合物通过发酵等制备。例如，化合物1和3-7从有机溶剂提取物中分离。以下示出了非限制性的示例化合物。在其他实施方案中，具有结构的环己烯酮化合物从牛樟芝(antrodiacamphorata)的有机溶剂提取物中分离得到。在一些实施方案中，该有机溶剂选自：醇类(例如，甲醇、乙醇、丙醇等)、酯类(例如，乙酸甲酯、乙酸乙酯等)、烷烃(例如，戊烷、己烷、庚烷等)、卤代烷烃(例如，氯甲烷、氯乙烷、氯仿、二氯甲烷等)，等等。例如，示例性化合物1-7从有机溶剂提取物中分离得到。在某些实施方案中，该有机溶剂是醇。在某些实施方案中，该醇是乙醇。在一些实施方案中，该环己烯酮化合物从牛樟芝的水性提取物中分离得到。在某些实施方案中，本文公开的环己烯酮化合物以合成或半合成方式制备。在一些实施方案中，x和y中的每一个独立地为氧或硫。本领域中已知，其中每个x和y独立地为硫的化合物可以与其中每个x和y独立地为氧的化合物类似地或通过相同的途径来制备，因为氧和硫在结构上共有类似的化学性质。在一些实施方案中，通过使用适当的保护基团，其中每个x和y独立地为nr5的化合物可以通过与其中每个x和y独立地为氧或硫的化合物类似的途径来制备。在一些实施方案中，r为氢、c(＝o)c3h8、c(＝o)c2h5或c(＝o)ch3。在一些实施方案中，r1为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在某些实施方案中，r1为氢或甲基。在一些实施方案中，r2为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在某些实施方案中，r2为氢或甲基。在一些实施方案中，r3为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在一些实施方案中，r4为卤素、nh2、nhch3、n(ch3)2、och3、oc2h5、c(＝o)ch3、c(＝o)c2h5、c(＝o)och3、c(＝o)oc2h5、c(＝o)nhch3、c(＝o)nhc2h5、c(＝o)nh2、oc(＝o)ch3、oc(＝o)c2h5、oc(＝o)och3、oc(＝o)oc2h5、oc(＝o)nhch3、oc(＝o)nhc2h5或oc(＝o)nh2。在一些实施方案中，r4为c2h5c(ch3)2oh、c2h5c(ch3)2och3、ch2cooh、c2h5cooh、ch2oh、c2h5oh、ch2ph、c2h5ph、ch2ch＝c(ch3)(cho)、ch2ch＝c(ch3)(c(＝o)ch3)、5或6元内酯、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基和葡糖基，其中5或6元内酯、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基和葡糖基任选地被一个或多个取代基取代，该取代基选自nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、c3-c8环烷基和c1-c8卤代烷基。在某些实施方案中，r4为5或6元内酯、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基和葡糖基，其任选地被一个或多个取代基取代该取代基选自nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、c3-c8环烷基和c1-c8卤代烷基。在某些实施方案中，r4为ch2ch＝c(ch3)2。在某些实施方案中，该化合物为某些药学和医学术语除非另有说明，否则本申请(包括说明书和权利要求书)中使用的以下术语具有以下给出的定义。必须指出，除非上下文另外明确指出，否则如在本说明书和所附的权利要求书中使用的，单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数的指示对象。除非另有说明，否则采用质谱法、nmr、hplc、蛋白质化学、生物化学、重组dna技术和药理学的常规方法。在本申请中，除非另有说明，否则“或”或“和”的使用意指“和/或”。此外，术语“包括”以及其他形式如“包含”、“含有”和“包括”的使用并非限制性的。本文所用的章节标题仅仅是为了组织编排目的，而不应理解为限制所描述的主题。“烷基”是指脂肪族烃基。烷基可以是饱和烷基(意味着其不含任何碳-碳双键或碳-碳三键)，或者烷基可以是不饱和烷基(意味着其含有至少一个碳-碳双键或碳-碳三键)。烷基部分不管是饱和的还是不饱和的，都可以为支链或直链。“烷基”可具有1-12个碳原子(数值范围如“1-12”在本文中无论何时出现，均指所给定的范围内的每个整数；例如，“1-12个碳原子”意指烷基可由1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等、直至且包括12个碳原子组成，但本定义也涵盖了未指明数值范围的术语“烷基”的存在)。本文所述化合物的烷基可以被指定为“c1-c8烷基”或相似的指定。仅举例来说，“c1-c8烷基”表示在烷基链中有1、2、3、4、5、6、7或8个碳原子。在一个方面，所述烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。典型的烷基包括但绝不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基、烯丙基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基等。在一个方面，烷基是c1-c8烷基。术语“亚烷基”是指二价的烷基基团。任何上述单价烷基都可以通过从烷基中抽离第二个氢原子而成为亚烷基。在一个方面，亚烷基是c1-c12亚烷基。在另一方面，亚烷基是c1-c8亚烷基。典型的亚烷基包括但不限于-ch2-、-ch(ch3)-、-c(ch3)2-、-ch2ch2-、-ch2ch(ch3)-、-ch2c(ch3)2-、-ch2ch2ch2-、-ch2ch2ch2ch2-等。如本文所用的，术语“芳基”是指其中形成环的每个原子都是碳原子的芳香环。芳基环由五、六、七、八、九个或超过九个碳原子构成。芳基任选地被取代。在一个方面，芳基是苯基或萘基。在一个方面，芳基为苯基。在一个方面，芳基为c6-c10芳基。根据结构，芳基可以是单价基团或双价基团(即亚芳基)。在一个方面，亚芳基为c6-c10亚芳基。示例性亚芳基包括但不限于苯基-1，2-亚基、苯基-1，3-亚基和苯基-1，4-亚基。术语“芳香族”是指具有包含4n+2个π电子的离域π电子体系的平面环，其中n为整数。芳环可以由五、六、七、八、九、十个或超过十个原子构成。芳香环任选地被取代。术语“芳香族”包括碳环芳基(“芳基”，例如，苯基)和杂环芳基(或“杂芳基”或“杂芳香族”)基团(例如，吡啶)。该术语包括单环或稠环多环(即，共用相邻碳原子对的环)基团。术语“卤代”或可替代的“卤素”或“卤”意指氟、氯、溴或碘。术语“内酯”是指可被视为同一分子中的羟基-oh和羧酸基团-cooh的缩合产物的环酯。其特征在于由两个或更多个碳原子与一个氧原子组成的、在邻近另一个氧的一个碳原子上具有酮基＝o的闭环。术语“杂环”或“杂环的”是指环中含有1-4个杂原子的芳香杂环(也被称为杂芳基)和杂环烷基环(也被称为杂脂环基团)，其中环中的每个杂原子选自o、s和n，其中每个杂环基团在其环系中具有4-10个原子，并且条件是任何环都不含两个相邻的o或s原子。非芳香族杂环基团(也被称为杂环烷基)包括在其环系中仅含有3个原子的基团，而芳香族杂环基团在其环系中必须含有至少5个原子。杂环基团包括苯并稠合的环系。3元杂环基团的一个实例是吖丙啶基。4元杂环基团的一个实例是氮杂环丁基。5元杂环基团的一个实例是噻唑基。6元杂环基团的一个实例是吡啶基，而10元杂环基团的一个实例是喹啉基。非芳香族杂环基团的实例有吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、噁唑烷酮基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、噻噁烷基、哌嗪基、吖丙啶基、氮杂环丁基、氧杂环丁基(oxetanyl)、硫杂环丁基(thietanyl)、高哌啶基、氧杂环庚基(oxepanyl)、硫杂环庚基(thiepanyl)、氧氮杂基、二氮杂基、硫氮杂基、1，2，3，6-四氢吡啶基、吡咯啉-2-基、吡咯啉-3-基、二氢吲哚基、2h-吡喃基、4h-吡喃基、二氧杂环己基(dioxanyl)、1，3-二氧杂环戊基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫杂环戊基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂双环[3.1.0]己烷基、3-氮杂双环[4.1.0]庚烷基、3h-吲哚基和喹嗪基(quinolizinyl)。芳香族杂环基团的实例有吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、吲嗪基、酞嗪基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃并吡啶基。只要可能的话，前述基团可以是c连接的或n-连接的。例如，由吡咯衍生的基团可以是吡咯-1-基(n-连接的)或吡咯-3-基(c-连接的)。此外，由咪唑衍生的基团可以是咪唑-1-基或咪唑-3-基(均为n-连接的)或咪唑-2-基、咪唑-4-基或咪唑-5-基(均为c-连接的)。杂环基团包括苯并稠合的环系。非芳香族杂环可以被一个或两个氧代(＝o)部分取代，例如吡咯烷-2-酮。如本文使用的术语“烯基”是指含有2-10个碳且含有至少一个通过脱去两个氢而形成的碳-碳双键的直链、支链或环状(在这种情况下，其也被称为“环烯基”)烃。在一些实施方案中，根据结构的不同，烯基是单价的或二价的(即亚烯基)。在一些实施方案中，烯基任选地被取代。烯基的说明性实例包括但不限于乙烯基、2-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、3-丁烯基、4-戊烯基、5-己烯基、2-庚烯基、2-甲基-1-庚烯基和3-癸烯基(3-cecenyl)。如本文使用的术语“炔基”是指含有2-10个碳且含有至少一个通过脱去四个氢而形成的碳-碳三键的直链、支链或环状(在这种情况下，其也被称为“环炔基”)烃。在一些实施方案中，根据结构的不同，炔基是单价的或二价的(即亚炔基)。在一些实施方案中，炔基任选地被取代。炔基的说明性实例包括但不限于乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、庚炔基等。如本文使用的术语“烷氧基”是指通过氧原子与母体分子部分连接的本文所定义的烷基。烷氧基的说明性实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、戊氧基和己氧基。如本文使用的术语“环烷基”是指单环或多环基团，其仅含有碳和氢，并且包括饱和的、部分不饱和的或完全不饱和的基团。环烷基基团包括具有3至10个环原子的基团。环的代表性实例包括但不限于以下部分：在一些实施方案中，根据结构，环烷基基基团是单价或双价的(即，亚环烷基基团)。如本文使用的术语“卤代烷基”、“卤代烯基”、“卤代炔基”和“卤代烷氧基”包括其中的至少一个氢被替换成卤素原子的烷基、烯基、炔基和烷氧基结构。在其中的两个或更多个氢原子被替换成卤素原子的某些实施方案中，卤素原子全是彼此相同的。在其中的两个或更多个氢原子被替换成卤素原子的其他实施方案中，卤素原子不全是彼此相同的。术语“氟代烷基”和“氟代烷氧基”分别包括其中卤代为氟的卤代烷基和卤代烷氧基基团。在某些实施方案中，卤代烷基是任选取代的。如本文使用的术语“葡糖基”包括d-或l-形式的葡糖基，其中该葡糖基经由葡萄糖环上的任何羟基连接。如本文使用的，关于制剂、组合物或成分的术语“可接受的”意指对所治疗的受试者的一般健康没有持续的不利影响。薄孔菌属(antrodia)是薄孔菌科(meripilaceae)真菌的一个属。薄孔菌属的种的子实体一般在生长的表面上平置或展开，其子实层暴露于外部；其边缘可能会卷起，从而形成小括号状(narrowbrackets)。大多数的种可见于温带和北方森林中，且导致褐腐病(brownrot)。牛樟芝，也被称为牛樟真菌ganodermacamphoratum，是台湾特有的薄孔菌属真菌的一个种，仅在本地树种牛樟树(cinnamomumkanehirae)上生长，引起心腐病。这种台湾独有的蘑菇已经被用作对抗不同疾病状况的传统药物。本领域中已知，从牛樟芝的不同部分中分离的活性成分因不同的培养基和方法而异。例如，本文公开的某些环己烯酮化合物可以从用来培育牛樟芝的独特固态发酵过程中分离，该过程不同于其他已知的方法。如本文使用的，术语“载体”是指促进化合物被引入细胞或组织中的相对无毒的化学化合物或试剂。如本文使用的，术语“共同施用”或类似用语意在包括对一名患者施用多种选定的治疗剂，并且旨在包括通过相同或不同的给药途径或者在相同或不同的时间施用多种药剂的治疗方案。术语“稀释剂”是指用于在递送前稀释目的化合物的化学化合物。稀释剂也可用于稳定化合物，因为它们可提供更稳定的环境。本领域中利用溶解于缓冲的溶液(其也可以提供ph控制或维持)中的盐作为稀释剂，包括但不限于磷酸盐缓冲盐水溶液。如本文使用的，术语“有效量”或“治疗有效量”是指足以在一定程度上缓解所治疗的疾病或状况的一种或多种症状的药剂或化合物的给药量。结果可以是疾病的指征、症状或病因的减轻和/或缓解，或者是生物系统的任何其他期望的变化。例如，用于治疗性应用的“有效量”是包含本文公开的化合物的组合物的量，该量是导致疾病症状的临床上显著的减轻所需要的。在任何单独情况下，适当的“有效”量可以使用诸如剂量递增研究等技术来确定。如本文使用的，术语“增强”意指所需效果在效力或持续时间上的提高或延长。因此，关于增强治疗剂的效果，术语“增强”是指在效力或持续时间上提高或延长其他治疗剂对系统的效果的能力。如本文使用的，“增强有效量”是指足以增强另一种治疗剂在所需系统中的效果的量。本文公开的化合物的“代谢物”是在化合物代谢时形成的该化合物的衍生物。术语“活性代谢物”是指在化合物代谢时形成的该化合物的生物活性衍生物。如本文使用的，术语“代谢”是指特定物质被生物体改变的过程(包括但不限于水解反应和酶催化的反应)的总和。因此，酶可以对化合物产生特定的结构改变。例如，细胞色素p450催化多种氧化和还原反应，而尿苷二磷酸葡糖醛酸基转移酶催化活化的葡糖醛酸分子向芳香醇、脂肪醇、羧酸、胺和游离巯基的转移。任选地通过对宿主施用化合物并分析来自该宿主的组织样品，或者通过使化合物与肝细胞一起在体外温育并分析所得到的化合物，来鉴别本文公开的化合物的代谢物。如本文使用的术语“药物组合”意指通过混合或组合超过一种活性成分而得到的产物，并且包括活性成分的固定和非固定组合。术语“固定组合”意指将活性成分例如化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)和联合药剂以单一实体或剂量的形式同时施用于患者。术语“非固定组合”意指将活性成分例如化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)和联合药剂作为单独的实体同时、并行地或顺序地施用于患者，而没有具体的间隔时间限制，其中这样的施用在患者体内提供这两种化合物的有效水平。后者也应用于鸡尾酒疗法，例如三种或更多种活性成分的施用。术语“药物组合物”是指化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)与诸如载体、稳定剂、稀释剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂和/或赋形剂等其他化学组分的混合物。药物组合物有利于将化合物施用于生物体。本领域中存在多种施用化合物的技术，包括但不限于：静脉内、口服、气雾剂、肠胃外、经眼、经肺和局部给药。术语“受试者”或“患者”包括哺乳动物。哺乳动物的例子包括但不限于哺乳纲的任何成员：人，非人灵长类动物，如黑猩猩以及其他猿和猴物种；农场动物，如牛、马、绵羊、山羊、猪；家畜，如兔、狗和猫；实验动物，包括啮齿动物，如大鼠、小鼠和豚鼠，等等。在一个实施方案中，该哺乳动物是人。如本文使用的，术语“治疗”或“处理”包括预防性地和/或治疗性地缓解、消除或改善疾病或状况的至少一种症状，预防另外的症状，抑制疾病或状况，例如阻止疾病或状况的发展、缓解疾病或状况、使疾病或状况消退、缓解由疾病或状况引起的病状，或者终止疾病或状况的症状。给药途径和剂量合适的给药途径包括但不限于口服、静脉内、直肠、气雾剂、肠胃外、经眼、经肺、经粘膜、透皮、经阴道、经耳、经鼻和局部给药。另外，仅举例来说，肠胃外递送包括肌肉内、皮下、静脉内、髓内注射以及鞘内、直接心室内、腹膜内、淋巴内和鼻内注射。在某些实施方案中，如本文所述的化合物通常在贮库型制剂(depotpreparation)或持续释放制剂中，以局部而不是全身方式给药，例如，通过将化合物直接注射到器官中来给药。在特定实施方案中，通过植入(例如皮下或肌肉内)或通过肌肉内注射来施用长效制剂。此外，在其他实施方案中，在靶向药物递送系统中，例如，在用器官特异性抗体包被的脂质体中递送药物。在这样的实施方案中，脂质体靶向至器官并且被器官选择性吸收。在另外的实施方案中，如本文所述的化合物以快速释放制剂形式、以延长释放制剂形式或以立即释放制剂形式提供。在另外的实施方案中，局部施用本文所述的化合物。在一些实施方案中，所述环己烯酮化合物或其药学上可接受的盐、代谢物、溶剂化物或前药经肠胃外或静脉内给药。在其他实施方案中，所述环己烯酮化合物或其药学上可接受的盐、代谢物、溶剂化物或前药通过注射给药。在一些实施方案中，所述环己烯酮化合物或其药学上可接受的盐、代谢物、溶剂化物或前药经口服给药。在患者的状况没有改善的情况下，根据医生的判断，化合物的施用可以长期进行，即持续一段延长的时间，包括在患者的整个生命期内，以便改善或以其他方式控制或限制患者疾病或状况的症状。在患者的状态确实改善的情况下，根据医生的判断，化合物的施用可以连续给予，或者暂时中止某段时间(即“休药期”)。前述范围仅是建议性的，因为关于个体治疗方案的变量数目很大，并且距离这些推荐值的相当大的偏离也并非不常见的。此类剂量可以根据许多变量而改变，这些变量不限于所使用的化合物的活性、所治疗的疾病或状况、给药方式、受试个体的需求、所治疗的疾病或状况的严重程度，以及从业医生的判断。此类治疗方案的毒性和治疗效果可以通过标准药学程序在细胞培养物或实验动物中确定，包括但不限于用于确定ld50(群体的50％致死剂量)和ed50(群体的50％治疗有效剂量)。毒性与治疗效果之间的剂量比是治疗指数，并且它可以表示成ld50与ed50之间的比值。显示出高治疗指数的化合物是优选的。从细胞培养试验和动物研究中获得的数据可以用于制定在人体中使用的剂量范围。此类化合物的剂量优选地处于包括ed50且具有最小毒性的循环浓度的范围内。剂量可以在该范围内变化，这取决于所使用的剂型和所使用的给药途径。药物制剂在一些实施方案中提供了药物组合物，其包含治疗有效量的具有以下结构的环己烯酮化合物，或其药学上可接受的盐、代谢物、溶剂化物或前药：其中x和y中的每一个独立地为氧、nr5或硫；r为氢或c(＝o)c1-c8烷基；r1、r2和r3中的每一个独立地为氢、任选取代的甲基或(ch2)m-ch3；r4为nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、卤素、5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基、葡糖基，其中该5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基和葡糖基任选地被一个或多个取代基取代，该取代基选自nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、c3-c8环烷基和c1-c8卤代烷基；r5和r6中的每一个独立地为氢或c1-c8烷基；r7为c1-c8烷基、or5或nr5r6；m＝1-12；且n＝1-12；以及药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，所述药物组合物的环己烯酮化合物具有以下结构：其中x和y中的每一个独立地为氧、nr5或硫；r为氢或c(＝o)c1-c8烷基；r1、r2和r3中的每一个独立地为氢、任选取代的甲基或(ch2)m-ch3；r4为nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、卤素、5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基、葡糖基，其中该5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基和葡糖基任选地被一个或多个取代基取代，该取代基选自nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、c3-c8环烷基和c1-c8卤代烷基；r5和r6中的每一个独立地为氢或c1-c8烷基；r7为c1-c8烷基、or5或nr5r6；m＝1-12；且n＝1-12；或其药学上可接受的盐、代谢物、溶剂化物或前药。在一些实施方案中，r为氢、c(＝o)c3h8、c(＝o)c2h5或c(＝o)ch3。在一些实施方案中，r1、r2和r3中的每一个独立地为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基或辛基。在某些实施方案中，r1为氢或甲基。在某些实施方案中，r2为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在某些实施方案中，r3为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在一些实施方案中，r4为卤素、nh2、nhch3、n(ch3)2、och3、oc2h5、c(＝o)ch3、c(＝o)c2h5、c(＝o)och3、c(＝o)oc2h5、c(＝o)nhch3、c(＝o)nhc2h5、c(＝o)nh2、oc(＝o)ch3、oc(＝o)c2h5、oc(＝o)och3、oc(＝o)oc2h5、oc(＝o)nhch3、oc(＝o)nhc2h5或oc(＝o)nh2。在某些实施方案中，r4为c2h5c(ch3)2oh、c2h5c(ch3)2och3、ch2cooh、c2h5cooh、ch2oh、c2h5oh、ch2ph、c2h5ph、ch2ch＝c(ch3)(cho)、ch2ch＝c(ch3)(c(＝o)ch3)、5或6元内酯、芳基或葡糖基，其中该5或6元内酯、芳基和葡糖基任选地被一个或多个取代基取代，该取代基选自nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、c3-c8环烷基和c1-c8卤代烷基。在某些实施方案中，r4为ch2cooh、c2h5cooh、ch2oh、c2h5oh、ch2ph、c2h5ph、ch2ch＝c(ch3)(cho)、ch2ch＝c(ch3)(c(＝o)ch3)、5或6元内酯、芳基或葡糖基，其中5或6元内酯、芳基和葡糖基任选地被一个或多个取代基取代，该取代基选自nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、c3-c8环烷基和c1-c8卤代烷基。在某些实施方案中，r4为5或6元内酯、芳基或葡糖基，其任选地被一个或多个取代基取代，该取代基选自nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、c3-c8环烷基和c1-c8卤代烷基。在某些实施方案中，所述化合物选自在某些实施方案中，所述化合物选自在一些实施方案中，将本文所述的化合物配制成药物组合物。在特定实施方案中，使用一种或多种生理学上可接受的载体以常规方式配制药物组合物，该生理学上可接受的载体包括赋形剂和辅剂，其有助于将活性化合物加工为可以药用的制剂。合适的制剂取决于选定的给药途径。任何药学上可接受的技术、载体和赋形剂均可适当地用于配制本文所述的药物组合物：remington：thescienceandpracticeofpharmacy，第十九版(easton，pa.：mackpublishingcompany，1995)；hoover，johne.，remington’spharmaceuticalsciences，mackpublishingco.，easton，pennsylvania1975；liberman，h.a.和lachman，l.编，pharmaceuticaldosageforms，marceldecker，newyork，n.y.，1980；以及pharmaceuticaldosageformsanddrugdeliverysystems，第七版(lippincottwilliams&wilkins1999)。本文提供了包含化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)和药学上可接受的稀释剂、赋形剂或载体的药物组合物。在某些实施方案中，如同在联合治疗中一样，所述化合物以药物组合物形式给药，在该药物组合物中化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)与其他活性成分相混合。本文包括在以下联合治疗章节中和整个公开内容中所阐述的活性成分的所有组合。在特定实施方案中，该药物组合物包含一种或多种化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)。如本文使用的，药物组合物是指化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)与其他化学组分如载体、稳定剂、稀释剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂和/或赋形剂的混合物。在某些实施方案中，药物组合物有助于将化合物施用于生物体。在一些实施方案中，为实施本文提供的治疗或使用方法，将治疗有效量的化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)以药物组合物的形式施用于患有待治疗的疾病或状况的哺乳动物。在特定实施方案中，该哺乳动物是人。在某些实施方案中，治疗有效量根据疾病的严重程度、受试者的年龄及相对健康状况、所使用的化合物的效力以及其他因素而变化。此外，本文所述的化合物单独使用，或与一种或多种作为混合物组分的治疗剂联合使用。在一个实施方案中，化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)被配制成水溶液。在特定实施方案中，仅举例来说，水溶液选自生理学上相容的缓冲液，如汉克氏溶液、林格氏溶液或生理盐水缓冲液。在其他实施方案中，化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)被配制为用于经粘膜给药。在特定实施方案中，经粘膜制剂包括适合于待渗透的屏障的渗透剂。在配制本文所述的化合物以供其他肠胃外注射的其他实施方案中，合适的制剂包括水溶液或非水溶液。在特定实施方案中，这类溶液包括生理学上相容的缓冲液和/或赋形剂。在另一个实施方案中，本文所述的化合物被配制为用于口服给药。包括化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)在内的本文所述的化合物通过将活性化合物与例如药学上可接受的载体或赋形剂混合而配制。在各种实施方案中，本文所述的化合物被配制成口服剂型，仅举例来说，其包括片剂、粉末、丸剂、糖锭剂、胶囊、液体、凝胶、糖浆、酏剂、浆剂、悬浮液等。在某些实施方案中，供口服使用的药物制剂通过以下步骤获得：将一种或多种固体赋形剂与一种或多种本文所述的化合物混合，任选地研磨获得的混合物，并且在加入合适的辅料(如果需要)后，加工颗粒的混合物，从而获得片剂或糖锭剂芯。特别地，合适的赋形剂是：填充剂，如糖类，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇；纤维素制剂，例如玉米淀粉、小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、微晶纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠；或其他物质，如聚乙烯吡咯烷酮(pvp或聚维酮)或磷酸钙。在特定实施方案中，任选地添加崩解剂。仅举例来说，崩解剂包括交联羧甲纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或藻酸或其盐如藻酸钠。在一个实施方案中，诸如糖锭剂芯和片剂等剂型具有一层或多层合适的包衣。在特定实施方案中，使用浓缩糖溶液来包覆该剂型。糖溶液任选地含有额外的成分，仅举例来说，例如阿拉伯胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆凝胶(carbopolgel)、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液以及合适的有机溶剂或溶剂混合物。染料和/或色素也任选地添加至包衣中以供辨识目的。另外，任选地使用染料和/或色素来标示活性化合物剂量的不同组合。在某些实施方案中，治疗有效量的至少一种本文所述的化合物被配制成其他口服剂型。口服剂型包括由明胶制成的推入配合式胶囊以及由明胶和塑化剂(如甘油或山梨糖醇)制成的密封软胶囊。在特定实施方案中，推入配合式胶囊含有与一种或多种填充剂混合的活性成分。仅举例来说，填充剂包括乳糖，诸如淀粉的粘合剂，和/或诸如滑石或硬脂酸镁的润滑剂，以及任选的稳定剂。在其他实施方案中，软胶囊含有一种或多种溶解或悬浮在合适的液体中的活性化合物。仅举例来说，合适的液体包括一种或多种脂肪油、液体石腊或液态聚乙二醇。此外，任选地添加稳定剂。在其他实施方案中，治疗有效量的至少一种本文所述的化合物被配制为用于颊部或舌下给药。仅举例来说，适合颊部或舌下给药的制剂包括片剂、锭剂或凝胶。在另外其他的实施方案中，本文所述的化合物被配制为用于肠胃外注射，包括适合浓注(bolusinjection)或连续输注的制剂。在特定的实施方案中，注射用制剂在单位剂型(例如，在安瓶中)或多剂量容器中提供。任选地向注射制剂中添加防腐剂。在另外其他的实施方案中，化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)的药物组合物以适合于肠胃外注射的形式被配制为在油性或水性媒介物中的无菌悬浮液、溶液或乳液。肠胃外注射制剂任选地含有配制用剂，如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。在特定实施方案中，用于肠胃外给药的药物制剂包括水溶性形式的活性化合物的水溶液。在另外的实施方案中，将活性化合物的悬浮液制备成合适的油性注射悬浮液。仅举例来说，用于本文所述的药物组合物中的合适的亲脂性溶剂或媒介物包括诸如芝麻油的脂肪油，或诸如油酸乙酯或甘油三酯的合成脂肪酸酯，或脂质体。在某些特定实施方案中，水性注射悬浮液含有可增加悬浮液粘度的物质，如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇或葡聚糖。任选地，该悬浮液含有合适的稳定剂或增加化合物的溶解度以便允许制备高度浓缩的溶液的试剂。或者，在其他实施方案中，活性成分为粉末形式，以供在使用前用合适的媒介物(例如无菌无热原水)重建。在一个方面，将化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)制备为如本文所述的或本领域已知的用于肠胃外注射的溶液，并且使用自动注射器来施用。自动注射器是已知的，例如在美国专利4,031,893、5,358,489、5,540,664、5,665,071、5,695,472和wo/2005/087297(其各自通过引用这些公开内容而并入本文)中所公开的自动注射器。通常，所有自动注射器都含有一定体积的包含化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)的待注射溶液。通常，自动注射器包括：用于容纳溶液的储器，该储器与针头流体连通以供递送药物；以及用于自动部署针头、将针头插入患者并将剂量递送至患者体内的机构。示例性的注射器提供约0.3ml、0.6ml、1.0ml或其他适当体积的溶液，其浓度约为每1ml溶液0.5mg至50mg的化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)。每个注射器能够仅递送一个剂量的化合物。在另外其他的实施方案中，局部施用所述化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)。本文所述的化合物被配制成多种可局部给药的组合物，如溶液、悬浮液、洗液、凝胶、糊剂、药棒、香膏、乳膏或软膏。此类药物组合物任选地含有增溶剂、稳定剂、张力增强剂、缓冲液和防腐剂。在另外其他的实施方案中，所述化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)被配制为用于透皮给药。在特定实施方案中，透皮制剂采用透皮递送装置和透皮递送贴剂，并且可以是溶解和/或分散于聚合物或粘合剂中的亲脂性乳液或水性缓冲溶液。在各种实施方案中，构建这样的贴剂，以供药物制剂的连续、脉冲式或按需递送。在另外的实施方案中，化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)的透皮递送通过离子电渗贴剂及类似方式来完成。在某些实施方案中，透皮贴剂提供化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)的受控递送。在特定实施方案中，通过使用速率控制膜或通过将化合物捕获在聚合物基质或凝胶中来减缓吸收速率。在备选的实施方案中，使用吸收促进剂来增强吸收。吸收促进剂或载体包括帮助穿过皮肤的可吸收的药学上可接受的溶剂。例如，在一个实施方案中，透皮装置为绷带的形式，其包含：背衬部件，含有化合物以及任选的载体的储器，任选的用于在延长的一段时间内以受控和预定的速率将化合物递送至宿主皮肤的速率控制屏障，以及将该装置固定于皮肤上的工具。本文所述的透皮制剂可使用多种本领域已经描述的装置进行给药。例如，此类装置包括但不限于美国专利3,598,122、3,598,123、3,710,795、3,731,683、3,742,951、3,814,097、3,921,636、3,972,995、3,993,072、3,993,073、3,996,934、4,031,894、4,060,084、4,069,307、4,077,407、4,201,211、4,230,105、4,292,299、4,292,303、5,336,168、5,665,378、5,837,280、5,869,090、6,923,983、6,929,801和6,946,144中描述的装置。本文所述的透皮剂型可掺有某些本领域中常规的、药学上可接受的赋形剂。在一个实施方案中，本文所述的透皮制剂包含至少三种成分：(1)化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)的制剂；(2)渗透促进剂；和(3)水性佐剂。此外，透皮制剂还可包含其他成分，例如但不限于胶凝剂、乳膏和软膏基质等。在一些实施方案中，透皮制剂进一步包含织造或非织造的背衬材料，用以增强吸收并防止透皮制剂从皮肤上脱落。在其他实施方案中，本文所述的透皮制剂维持饱和或过饱和状态，以便促进向皮肤内的扩散。在其他实施方案中，所述化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)被配制为用于通过吸入给药。各种适合通过吸入给药的形式包括但不限于气雾剂、薄雾剂(mist)或粉末。化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)的药物组合物方便地利用合适的推进剂(例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合适的气体)从加压包或雾化器以气雾喷雾形式递送。在特定实施方案中，加压的气雾剂的剂量单位通过设置用来递送计量的量的阀来确定。在特定实施方案中，仅举例来说，配制在吸入器或吹药器中使用的例如明胶的胶囊和药筒，其含有所述化合物和合适的粉末基质如乳糖或淀粉的粉末混合物。鼻内制剂是本领域已知的，并且在例如美国专利4,476,116、5,116,817和6,391,452(各自特别地通过引用并入本文)中描述。使用苯甲醇或本领域已知的其他合适的防腐剂、氟碳化合物和/或其他增溶剂或分散剂，将根据这些和其他本领域公知技术制备的、包含化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)的制剂在盐水中制备成溶液。例如，参见ansel，h.c等人，pharmaceuticaldosageformsanddrugdeliverysystem，第六版(1995)。优选地，这些组合物和制剂用合适的药学上可接受的无毒成分制备。这些成分可见于许多资料中，如本领域中的标准参考书remington：thescienceandpracticeofpharmacy，第21版，2005。合适的载体的选择高度取决于期望的经鼻剂型例如溶液、悬浮液、软膏或凝胶的确切性质。经鼻剂型除活性成分外通常含有大量的水。也可存在少量的其他成分，如ph调节剂、乳化剂或分散剂、防腐剂、表面活性剂、胶凝剂或缓冲剂及其他稳定剂和增溶剂。优选地，经鼻剂型应当与鼻分泌物等渗。对于吸入给药，本文所述的化合物可以是气雾剂、薄雾剂或粉末的形式。本文所述的药物组合物方便地利用合适的推进剂(例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合适的气体)从加压包或雾化器以气雾喷雾形式递送。在加压的气雾剂的情况下，可以通过设置用来递送计量的量的阀来确定剂量单位。仅举例来说，可以配制在吸入器或吹药器中使用的例如明胶的胶囊和药筒，其含有本文所述的化合物和合适的粉末基质如乳糖或淀粉的粉末混合物。在另外其他的实施方案中，所述化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)被配制为直肠组合物，如含有常规栓剂基质如可可脂或其他甘油酯以及合成聚合物如聚乙烯吡咯烷酮、peg等的灌肠剂、直肠凝胶剂、直肠泡沫剂、直肠气雾剂、栓剂、胶状栓剂或保留灌肠剂。在组合物的栓剂形式中，低熔点蜡，例如但不限于任选地与可可脂组合的脂肪酸甘油酯的混合物，首先熔化。在某些实施方案中，使用一种或多种包含有助于将活性化合物加工成可药用制剂的赋形剂和助剂的生理学上可接受的载体，以任何常规方式配制药物组合物。合适的制剂取决于选定的给药途径。适当地且如本领域所理解的，任选地使用任何药学上可接受的技术、载体和赋形剂。包含化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)的药物组合物可以以常规的方式生产，例如，仅举例来说，通过常规混合、溶解、制粒、制锭、磨细、乳化、胶囊化、捕获或压制工艺生产。药物组合物包含至少一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂以及作为活性成分的至少一种本文所述的化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)。活性成分为游离酸或游离碱的形式，或为药学上可接受的盐的形式。此外，本文所述的方法和药物组合物包括使用晶形(也被称为多晶型物)以及这些化合物的具有相同活性类型的活性代谢物。本文所述化合物的所有互变异构体也包括在本文提出的化合物的范围内。此外，本文所述的化合物包括非溶剂化的形式以及用药学上可接受的溶剂如水、乙醇等溶剂化的形式。本文提出的化合物的溶剂化形式也被认为在此公开。此外，药物组合物任选地包含其他医用或药用试剂、载体、佐剂，如防腐剂、稳定剂、润湿剂或乳化剂、溶液促进剂、用以调节渗透压的盐、缓冲液和/或其他具有治疗价值的物质。用于制备包含本文所述化合物的组合物的方法包括将该化合物与一种或多种惰性的、药学上可接受的赋形剂或载体一起配制，以形成固体、半固体或液体。固体组合物包括但不限于粉末、片剂、可分散颗粒、胶囊、扁囊剂和栓剂。液体组合物包括化合物溶解于其中的溶液、包含化合物的乳液，或包含含有如本文公开的化合物的脂质体、胶束或纳米颗粒的溶液。半固体组合物包括但不限于凝胶、悬浮液和乳膏。本文所述的药物组合物的形式包括液体溶液或悬浮液，适于使用前在液体中制成溶液或悬浮液的固体形式，或作为乳液。这些组合物任选地也含有少量的无毒的辅助物质，如润湿剂或乳化剂、ph缓冲剂等。在一些实施方案中，包含至少一种化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)的药物组合物说明性地采用液体形式，其中药剂存在于溶液中、悬浮液中或两者中。一般而言，当组合物作为溶液或悬浮液给药时，药剂的第一部分存在于溶液中，而药剂的第二部分则以颗粒形式悬浮存在于液态基质中。在一些实施方案中，液体组合物包括凝胶制剂。在其他实施方案中，液体组合物是水性的。在某些实施方案中，水性药物悬浮液包含一种或多种聚合物作为悬浮剂。聚合物包括诸如纤维质聚合物(例如，羟丙甲基纤维素)的水溶性聚合物以及诸如交联的含羧基聚合物的非水溶性聚合物。本文所述的某些药物组合物包含粘膜粘附聚合物，其选自例如：羧甲基纤维素、卡波姆(carbomer)(丙烯酸聚合物)、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚丙烯酰胺、聚卡波非、丙烯酸/丙烯酸丁酯共聚物、藻酸钠和葡聚糖。药物组合物还任选地包含增溶剂，以有助于化合物(即本文描述的环己烯酮化合物)的溶解度。术语“增溶剂”通常包括导致形成药剂的胶束溶液或真溶液的试剂。某些可接受的非离子型表面活性剂，例如聚山梨酯80，可用作增溶剂，也可使用眼部可接受的二醇、聚二醇(例如聚乙二醇400)和二醇醚。此外，药物组合物任选地包含一种或多种ph调节剂或缓冲剂，包括：酸，如乙酸、硼酸、柠檬酸、乳酸、磷酸和盐酸；碱，如氢氧化钠、磷酸钠、硼酸钠、柠檬酸钠、乙酸钠、乳酸钠和三羟甲基氨基甲烷；和缓冲液，如柠檬酸盐/右旋糖、碳酸氢钠和氯化铵。以维持组合物的ph处于可接受范围内所需的量包含这样的酸、碱和缓冲液。此外，药物组合物任选地以使组合物的摩尔渗透压浓度处于可接受范围内所需的量包含一种或多种盐。这样的盐包括含有钠、钾或铵阳离子以及氯离子、柠檬酸根、抗坏血酸根、硼酸根、磷酸根、碳酸氢根、硫酸根、硫代硫酸根或亚硫酸氢根阴离子的盐；合适的盐包括氯化钠、氯化钾、硫代硫酸钠、亚硫酸氢钠和硫酸铵。其他药物组合物任选地包含一种或多种防腐剂，用以抑制微生物的活性。合适的防腐剂包括：含汞物质，如硼酸苯汞(merfen)和硫柳汞(thiomersal)；稳定化的二氧化氯；以及季铵化合物，如苯扎氯铵、溴化十六烷基三甲胺和氯化十六烷基吡啶。另外的其他药物组合物包含一种或多种表面活性剂，用以增强物理稳定性或用于其他目的。合适的非离子型表面活性剂包括：聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和植物油，例如聚氧乙烯(60)氢化蓖麻油；以及聚氧乙烯烷基醚和烷基苯基醚，例如辛苯昔醇10(octoxynol10)、辛苯昔醇40。另外其他的药物组合物可包含一种或多种抗氧化剂，用以在需要时增强化学稳定性。仅举例来说，合适的抗氧化剂包括抗坏血酸和焦亚硫酸钠。在某些实施方案中，药物组合物水性悬浮液被包装于不可重新封闭的单剂量容器中。或者，使用可重新封闭的多剂量容器，在这种情况下，通常在组合物中包含防腐剂。在备选的实施方案中，使用其他用于疏水性药物化合物的递送系统。脂质体和乳液是本文的递送媒介物或载体的实例。在某些实施方案中，也使用有机溶剂如n-甲基吡咯烷酮。在另外的实施方案中，使用持续释放系统，如含有治疗剂的固态疏水性聚合物的半渗透性基质，来递送本文所述的化合物。各种持续释放材料在此处是有用的。在一些实施方案中，持续释放胶囊释放化合物数小时，最多经24小时。根据治疗剂的化学性质及生物稳定性，可使用另外的蛋白质稳定策略。在某些实施方案中，本文所述的制剂包含一种或多种抗氧化剂、金属螯合剂、含巯基化合物和/或其他普通稳定剂。这样的稳定剂的实例包括但不限于：(a)约0.5％至约2％w/v的甘油，(b)约0.1％至约1％w/v的甲硫氨酸，(c)约0.1％至约2％w/v的单硫代甘油，(d)约1mm至约10mm的edta，(e)约0.01％至约2％w/v的抗坏血酸，(f)0.003％至约0.02％w/v的聚山梨酯80，(g)0.001％至约0.05％w/v的聚山梨酯20，(h)精氨酸，(i)肝素，(j)硫酸葡聚糖，(k)环糊精，(l)多硫酸戊聚糖酯及其他类肝素，(m)二价阳离子如镁离子和锌离子；或(n)它们的组合。联合治疗通常，本文所述的组合物和(在基于本文所述的作用模式采用联合治疗的实施方案中)其他药剂无需在同一药物组合物中进行施用，并且在一些实施方案中，由于物理及化学特性不同，它们通过不同的途径给药。在一些实施方案中，根据确立的方案进行初始给药，而后由熟练的临床医生基于所观察到的效果改变剂量、给药方式及给药时间。在一些实施方案中，当药物在治疗组合中使用时，治疗有效剂量发生变化。联合治疗进一步包括在不同的时间开始和结束的定期治疗，以便帮助对患者的临床处理。对于本文所述的联合治疗，共同施用的化合物的剂量根据所使用的联合药物的类型，所使用的具体药物，所治疗的疾病、病症或状况等而变化。应当理解，在一些实施方案中，根据多种因素改变用于治疗、预防或改善寻求缓解的状况的剂量方案。这些因素包括受试者所罹患的病症，以及受试者的年龄、体重、性别、饮食及医疗状况。因此，在其他实施方案中，实际使用的剂量方案变化很大，因此偏离本文所述的剂量方案。旨在涵盖化合物(即本文所述的环己烯酮化合物)与其他ad治疗剂的组合。在一些实施方案中，所述环己烯酮化合物与本文所述的其他ad治疗剂的组合包括使用其他药剂的额外的疗法和治疗方案。在一些实施方案中，此类额外的疗法和治疗方案可包括另一种ad疗法。或者，在其他实施方案中，额外的疗法和治疗方案包括用来治疗与ad相关的附加状况或由联合治疗中的这种药剂所导致的副作用的其他药剂。在进一步的实施方案中，佐剂或增强剂与本文所述的联合治疗一起施用。在一些实施方案中提供了用于治疗或减轻ad的症状的组合物，其包含治疗有效量的具有以下结构的环己烯酮化合物，或其药学上可接受的盐、代谢物、溶剂化物或前药：其中x和y中的每一个独立地为氧、nr5或硫；r为氢或c(＝o)c1-c8烷基；r1、r2和r3中的每一个独立地为氢、任选取代的甲基或(ch2)m-ch3；r4为nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、卤素、5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基、葡糖基，其中该5或6元内酯、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、芳基和葡糖基任选地被一个或多个取代基取代，该取代基选自nr5r6、or5、oc(＝o)r7、c(＝o)or5、c(＝o)r5、c(＝o)nr5r6、c1-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、c3-c8环烷基和c1-c8卤代烷基；r5和r6中的每一个独立地为氢或c1-c8烷基；r7为c1-c8烷基、or5或nr5r6；m＝1-12；且n＝1-12；以及一种或多种ad治疗剂。实施例实施例1：示例性的环己烯酮化合物的制备将100克来自牛樟芝的菌丝体置于烧瓶中。将适量的水和醇(70％-100％醇溶液)加至该烧瓶中，并于20-25℃下搅拌至少1小时。通过滤器和0.45μm滤膜过滤该溶液，并收集滤液作为提取物。在一些实施方案中，例如，通过lee，t-h.等人，plantamed2007；73：1412-1415中公开的固态发酵菌丝体条件和组成制备提取物。对牛樟芝的滤液进行高效液相色谱(hplc)分析。在rp18柱上进行分离，流动相由甲醇(a)和0.3％乙酸(b)组成，梯度条件为：在95％-20％b中0-10min，在20％-10％b中10-20min，在10％-10％b中20-35min，在10％-95％b中35-40min，流速为1ml/min。用紫外线-可见光检测器监测柱的流出物。对在21.2至21.4min时收集的级分进行收集并浓缩，以得到化合物5，一种淡黄色液体产物。化合物5经分析为4-羟基-5-(11-羟基-3，7，11-三甲基十二碳-2，6-二烯基)-2，3-二甲氧基-6-甲基环己-2-烯酮，其分子量为408(分子式：c24h40o5)。1h-nmr(cdcl3)δ(ppm)＝1.21，1.36，1.67，1.71，1.75，1.94，2.03，2.07，2.22，2.25，3.68，4.05，5.71的5.56。13c-nmr(cdcl3)δ(ppm)：12.31，16.1，16.12，17.67，25.67，26.44，26.74，27.00，30.10，40.27，43.34，59.22，60.59，71.8，120.97，123.84，124.30，131.32，134.61，135.92，138.05，160.45和197.11。化合物5：4-羟基-5-(11-羟基-3，7，11-三甲基十二碳-2，6-二烯基)-2，3-二甲氧基-6-甲基环己-2-烯酮对在23.7至24.0min时收集的级分进行收集并浓缩，以得到化合物7，一种淡黄色液体产物。化合物7经分析为4-羟基-2，3-二甲氧基-5-(11-甲氧基-3，7，11-三甲基十二碳-2，6-二烯基)-6-甲基环己-2-烯酮，其分子量为422(c25h42o5)。1h-nmr(cdcl3)δ(ppm)＝1.21，1.36，1.71，1.75，1.94，2.03，2.07，2.22，2.25，3.24，3.68，4.05，5.12，5.50和5.61。13c-nmr(cdcl3)δ(ppm)：12.31，16.1，16.12，17.67，24.44，26.44，26.74，27.00，37.81，39.81，40.27，43.34，49.00，59.22，60.59，120.97，123.84，124.30，135.92，138.05，160.45和197.12。化合物7：4-羟基-2，3-二甲氧基-5-(11-甲氧基-3，7，11-三甲基十二碳-2，6-二烯基)-6-甲基环己-2-烯酮对在25至30min时收集的级分进行收集并浓缩，以得到4-羟基-2，3-二甲氧基-6-甲基-5-(3，7，11-三甲基十二碳-2，6，10-三烯基)环己-2-烯酮(化合物1)，一种浅黄棕色液体产物。对化合物1的分析显示分子式为c24h38o4，分子量为390，熔点为48至52℃。nmr谱显示：1h-nmr(cdcl3)δ(ppm)＝1.51，1.67，1.71，1.75，1.94，2.03，2.07，2.22，2.25，3.68，4.05，5.07和5.14；13c-nmr(cdcl3)δ(ppm)＝12.31，16.1，16.12，17.67，25.67，26.44，26.74，27.00，39.71，39.81，40.27，43.34，59.22，60.59，120.97，123.84，124.30，131.32，135.35，135.92，138.05，160.45和197.12。化合物1：4-羟基-2，3-二甲氧基-6-甲基-5-(3，7，11-三甲基十二碳-2，6，10-三烯基)环己-2-烯酮在动物研究中，从饲喂化合物1的大鼠的尿液样品中获得化合物27，即化合物1的代谢物。化合物27被确定为4-羟基-2，3-二甲氧基-6-甲基-5-(3-甲基-2-己烯酸)环己-2-烯酮，其分子量为312(c16h24o6)。化合物25从纯化过程获得，其被确定为2，3-二甲氧基-5-甲基-6-((2e，6e)-3，7，11-三甲基十二碳-2，6，10-三烯基)环己-2，5-二烯-1，4-二酮(分子量为386.52，c24h34o4)。化合物26，即4-羟基-2-甲氧基-6-甲基-5-((2e，6e)-3，7，11-三甲基十二碳-2，6，10-三烯基)环己-2-烯酮，也通过纯化过程制备，其分子量为350.53(c23h36o3)。还制备了化合物28。或者，示例性的化合物可以由4-羟基-2，3-二甲氧基-6-甲基环己-2，5-二烯酮等制备。例如，参见美国专利9365481和美国专利公开号2016-0237012的实施例。类似地，其他具有结构的环己烯酮化合物从牛樟芝中分离或由适合的起始材料以合成或半合成方式制备。本领域普通技术人员将会容易地利用合适的条件进行这样的合成。实施例2：由外而内的动物模型研究使用6-8周龄的balc/c雌性大鼠。每组有6-8只大鼠。致敏前从大鼠面颊获取血液样品。在第1天和第8天，向小鼠腹膜内注射50μg/小鼠的ova-氢氧化铝(1∶1v/v)。在第15天用ova贴剂使小鼠皮肤致敏。制备于pbs中的ova(100μg)包含在2×2cm的无菌纱布贴剂中，该贴剂放置在小鼠剃毛的背部上，并用3mtegader膜、随后用3mcoban胶带固定至皮肤，以固定纱布。3天后，移除纱布并再次应用。该过程重复三次。在第27天，处死研究中的所有小鼠并进行检查。时间表：空白组n：空白。致敏组o：在第1天和第8天注射ova(致敏)，在第15天应用ova纱布持续3天(激发)并休息一天。应用ova纱布的程序重复3次。从第14天开始，向该组中的小鼠喂水。组l：与组o程序相同，但向小鼠饲喂低剂量(5mg/kg体重)的示例性化合物1。组m：与组o程序相同，但向小鼠饲喂中等剂量(15mg/kg体重)的示例性化合物1。组h：与组o程序相同，但向小鼠饲喂高剂量(45mg/kg体重)的示例性化合物1。程序总结于下表中。组注释致敏(腹膜内)激发处理n原始---oovaova50μgova100μg水l低ova50μgova100μg5mg/kg体重m中ova50μgova100μg15mg/kg体重h高ova50μgova100μg45mg/kg体重实施例3：皮肤表面研究和组织切片对于组织学检查，在处死小鼠后从小鼠具有贴剂的背部皮肤获得皮肤样本(0.5x0.5cm)，并拍照(参见图2a-2e)。还从小鼠获取血液样品。分离皮肤样本的肌肉层和脂肪层。在6孔盘中用含10％福尔马林的中性缓冲溶液固定皮肤样本，并在干燥后包埋在石蜡中。血清免疫球蛋白分析。测量采用夹心elisa。在具有包被缓冲液(ph9.6)的96孔nunc-immuno板中制备适量的抗小鼠ige抗体。在4℃下过夜后，用pbst缓冲液洗涤该板以去除未缀合的抗体，然后用200μl/孔的封闭缓冲液(1％bsa/pbs)在室温下封闭30分钟。然后用pbst缓冲液洗涤该板，并添加100μl的50倍稀释的小鼠血清或具有已知浓度的igg、iga、ige标准参照物。使含有测试溶液或ige标准的孔在室温下反应1小时，并用pbst缓冲液洗涤，并添加100μl/孔的合适的浓缩hrp缀合的抗ige第二抗体。使板在室温下反应1小时，随后用pbst缓冲液洗涤，然后与tmb底物反应。5分钟后，用100μl2nh2so4终止反应，然后在450nm波长下测量以确定吸光度值。该值被用于确定血清中的抗体浓度。迟发型变态反应。将ova注入小鼠的腹腔内。6天后，通过皮下注射将ova应用于小鼠的右后肢，或应用于小鼠的耳朵内部和外部。在应用24小时后，测量后肢或耳朵与未加应用时(即对照组)相比的肿胀厚度作为迟发型变态反应的基础。皮肤生理学的测定。麻醉后，通过tewametertm210测量小鼠皮肤的经表皮失水和相对湿度。还测量皮肤的ph值。参见图3a-3c。小鼠脾细胞的收集。无菌移取小鼠脾脏，并将其放入rpmi培养基(10％fbs)中。使用20ml注射器的管来研磨脾脏。使所得脾悬浮液倾倒穿过无菌金属细胞过滤器(70μm)，并在4℃下以300xg离心5分钟。除去上清液，并将沉淀物溶于5mlrbc裂解缓冲液中。将溶液用冰冷却10分钟，然后添加相同体积的crpmi培养基以终止反应。所得悬浮液在4℃下以300xg离心5分钟。除去上清液，将沉淀物溶于10mlcrpmi培养基中，然后对细胞数进行计数。用crpmi培养基将所得溶液的浓度调节至1x106/ml。将所得细胞接种至12孔盘中，并向每孔添加50μg/mlova、5μg/mlcona和10μg/mlpha-l。每孔激发72小时，然后在4℃下以300xg离心5分钟。收集每孔的上清液并储存于-80℃。小鼠淋巴结的收集。无菌移取小鼠淋巴结，并将其放入rpmi培养基(10％fbs)中。使用20ml注射器的管来研磨淋巴结。使所得悬浮液倾倒穿过无菌金属细胞过滤器(70μm)，并在4℃下以300xg离心5分钟。除去上清液，并将沉淀物溶于5mlrbc裂解缓冲液中。将溶液用冰冷却10分钟，然后添加相同体积的crpmi培养基以终止反应。所得悬浮液在4℃下以300xg离心5分钟。除去上清液，将沉淀物溶于10mlcrpmi培养基中，然后对细胞数进行计数。用crpmi培养基将所得溶液的浓度调节至1x106/ml。将所得细胞接种至12孔盘中，并向每孔添加50μg/mlova、5μg/mlcona和10μg/mlpha-l。每孔激发72小时，然后在4℃下以300xg离心5分钟。收集每孔的上清液并储存于-80℃。细胞因子产生的定量对于定义若干病理过程的标准免疫学分析是有价值的辅助手段。细胞因子水平的测量已经产生了关于ad的病理过程的有用信息。细胞因子分泌测试。将分离的淋巴细胞的浓度调节为1x106/ml并置于24孔板中。向该板施加定量的pha、cona或ova以刺激脾细胞或淋巴细胞。将盘培养24小时或72小时，并收集每孔的上清液以测量细胞因子分泌的量。通过夹心elisa测量细胞因子。处理elisa板以应用抗体并在4℃下温育过夜。测试前用1％pbs-bsa洗涤该板。将样本添加至该板并在室温下保持2小时，然后添加生物素连接的抗细胞因子抗体。在室温下保持2小时后，向该板添加抗生物素蛋白连接的过氧化物酶。再过两小时，使用tmb进行酶/底物读出。使用自动化微量培养板elisa读取器在450nm处测量显色。上述程序中使用的每种试剂的浓度应在测试之前通过参考具有已知浓度的淋巴培养基来确定。皮肤角质形成细胞凋亡。从小鼠切下皮肤样本。弃去皮肤样本的肌肉层和脂肪层，然后将皮肤放入含有10％抗生素的pbs中5分钟。然后取出皮肤样本并放入37℃的0.25％胰蛋白酶溶液中30分钟。取出皮肤样本并放在10cm的盘上。用刀片刮出皮肤角质形成细胞，然后用胰蛋白酶洗涤，离心，将沉淀物重悬浮于pbs中至2x105/ml的浓度。在荧光激活细胞分选(facs)分析中使用异硫氰酸荧光素(fitc)和藻红蛋白(pe)缀合的抗体来确定(a)表皮角质形成细胞的凋亡状态。统计分析实施例的结果表示为平均值±sem，并通过非配对t检验进行分析。双尾p值小于0.05被认为是显著的。结果如图1中所示，所有施用口服剂量的化合物1的小鼠在整个研究期间均未发生任何体重减轻或任何观察到的临床体征，并且所有治疗组之间的体重变化没有显著差异。如图2a-2e中所示，组o中的小鼠比组n中的小鼠显示更严重的肿胀和炎症。低剂量组l和中剂量组m与组o相比没有显著差异。值得注意的是，与组o小鼠相比，组h(高剂量化合物1)中的小鼠皮肤状况较好，肿胀和炎症情况较少。皮肤也更光滑。因此，显然用高剂量的示例性化合物1饲喂的小鼠具有改善的ad状况。如经表皮失水率(tewl)所示，tewl值越小，来自皮肤表面的水分损失越少，这意味着表皮保护层的状况更好。tewl值越大，水分损失越大，表皮保护层的损伤越严重。如图3a中所示，在向小鼠的背部皮肤应用ova贴剂的第14天之前，各组的tewl值非常相似。在第27天，组o的tewl值显著高于组n的tewl值，这表明ova诱导的ad导致皮肤表面的水分损失。组l、组m和组h的tewl值与组o相比在统计上显著更低，表明在这些组中表皮损伤得到改善。数据还显示，这种改善是剂量依赖性的，更高的剂量提供更好的改善。如相对湿度(rh)所示，当rh值较小时，意味着皮肤具有更好的保水性，且皮肤结构更加健康。当rh值较大时，意味着皮肤更干燥，且皮肤结构更不完善。如图3b中所示，在向小鼠的背部皮肤应用ova贴剂的第14天之前，各组的rh值非常相似。在第27天，组o的rh值在统计学上显著高于组n的rh值，这表明ova诱导的ad导致皮肤干燥和皮肤结构损伤。组l、组m和组h的rh值与组o相比在统计上显著更低，表明在这些组中表皮损伤得到改善。数据还显示，这种改善是剂量依赖性的，更高的剂量提供更好的改善。如图3c中所示，在向小鼠的背部皮肤应用ova贴剂的第14天，以及在第27天，各组的ph值非常相似。因此，通过服用有效量的示例性化合物，可改善ad中的皮肤生理功能反应，如通过tewl和rh值的结果所证明的。苏木精/伊红染色或苏木素/伊红染色(h&e染色或he染色)是组织学中的主要染色之一。这种染色方法基于细胞组分对染料的亲和力。样品结构差异导致染色差异。苏木精将嗜碱性结构染为蓝紫色，而正铁血红素(hematin)将嗜酸性结构染为红色、粉色或橙色。如图4a-4e中所示，h&e染色结果表明，组o中皮肤样本的表皮和真皮层与组n相比均显著增厚。这些层也显示炎性细胞浸润数目增加。与组o的结果相比，组l、组m和组h的表皮和真皮层明显更薄，且具有降低的炎性细胞浸润。特别地，如图4f和图4g所示，组o的表皮和真皮层在统计学上显著厚于组n的表皮和真皮层，这表明ova诱导炎性细胞的大量浸润，产生较厚的层。与组o相比，组l、组m和组h的表皮和真皮层的厚度在统计上显著更小。数据还显示表皮和真皮厚度的减少呈剂量依赖性方式。因此，通过服用有效量的示例性化合物，可改善ad中的皮肤表皮状况，如通过h&e染色的皮肤样本的结果所证明的。嗜酸性粒细胞(嗜酸性白细胞)是在造血过程中在骨髓中发育随后迁移到血液中的粒细胞。它们主要在炎症和寄生虫感染期间生成。已显示它们可用于监测多种活动性炎性疾病，包括支气管哮喘、特应性皮炎、鼻炎、变应性眼炎、变应性耳炎、寄生虫和细菌感染、自身免疫病和慢性疲惫(burnout)。如图5a-5e中所示，将组o嗜酸性粒细胞染色结果与组n相比，组o中皮肤样本的真皮中的嗜酸性粒细胞显著增加。组l、组m和组h的真皮中的嗜酸性粒细胞与组o的结果相比显著减少。图5f示出了真皮中嗜酸性粒细胞的细胞数计数的结果。组o的真皮中嗜酸性粒细胞的数目与组n中的数目相比在统计学上显著增加，表明ova诱导的ad导致嗜酸性粒细胞数目的增加。组l、组m、组h的真皮中嗜酸性粒细胞的数目与组o相比减少。特别地，组m和组h中的数目减少是统计上显著的。因此，通过服用有效量的示例性化合物，可改善ad中的真皮状况，如通过嗜酸性粒细胞染色的细胞的结果所证明的。特应性皮炎引起瘙痒感，因为皮肤损伤会激活表皮产生胸腺基质淋巴细胞生成素(thymicstromallymphopoietin，tslp)。如图6a-6e中所示，将组o的tslp染色结果与组n相比，组o中皮肤样本的真皮中的tslp显著增加。组l、组m和组h的真皮中的tslp染色与组o的结果相比显著减少。图6f示出了小鼠表皮中tslp细胞染色的定量细胞计数结果。致敏组o中tslp染色细胞的数目在统计学上显著高于组n中的数目，表明ova诱导的ad导致tslp染色细胞数目的增加。组l、组m和组h中表皮中tslp染色细胞的数目低于组o中的数目。特别地，组m和组h中的数目减少是统计上显著的。因此，通过服用有效量的示例性化合物，可改善ad中的表皮状况，如通过tslp染色细胞的结果所证明的。朗格汉斯细胞可用于检测皮肤屏障状况。当皮肤受损时，朗格汉斯细胞将会大量分泌，以吞下并破坏(吞噬)外部病毒。朗格汉斯细胞也可刺激一些淋巴细胞的产生。如提供朗格汉斯细胞染色结果的图7a-7e中所示，致敏组o中的朗格汉斯细胞染色量显著高于组n中的染色量。组l、组m和组h中的朗格汉斯染色量与组o中的染色量相比明显减少。图6f示出了朗格汉斯细胞染色的定量细胞计数结果。致敏组o中朗格汉斯染色细胞的数目在统计学上显著高于组n中的数目，表明ova诱导的ad导致朗格汉斯染色细胞数目的增加。组l、组m和组h中朗格汉斯染色细胞计数的数目在统计上显著低于组o中的数目。因此，通过服用有效量的示例性化合物，可改善ad中的皮肤屏障状况，如通过朗格汉斯染色细胞的结果所证明的。当身体具有变态反应时，血清免疫球蛋白e(immunoglobuline，ige)将会增加。图8a示出了各组的总ige量。在第0天，各组之间没有差异。在第14天，在向小鼠背部皮肤上应用ova贴剂之前，除了组n小鼠之外，其他组中的小鼠均进行腹腔内ova注射。组o、组l、组m和组h中的总ige均在统计上高于组n中的总ige，表明ova注射导致体内的变态反应。在第27天，组o中的总ige在统计学上显著高于组n中的总ige，表明ova贴剂对组o的小鼠成功建立了ad模型。组l、组m和组h中的总ige的量在统计上显著低于组o中的量，并且该降低呈剂量依赖性。图8b示出了ova特异性ige量。在第0天，各组之间没有差异。在第14天，在向小鼠背部皮肤上应用ova贴剂之前，除了组n小鼠之外，其他组中的小鼠均进行腹腔内ova注射。组o、组l、组m和组h中的ova特异性ige量均在统计上高于组n中的ova特异性ige量，表明ova注射导致体内的变态反应。在第27天，组o中的ova特异性ige在统计学上显著高于组n中的ova特异性ige，表明ova贴剂对组o的小鼠成功建立了ad模型。组l、组m和组h中的ova特异性ige的量在统计上显著低于组o中的量。因此，通过服用有效量的示例性化合物，可减少ad中的总ige和ova特异性ige，如通过血清ige测量的结果所证明的。如图9a中所示，在第27天，致敏组o中的耳厚度与组n中的耳厚度相比未增厚。组l、组m和组h中的耳厚度与组o中的耳厚度没有差异。如图9b中所示，组o中的后肢厚度在统计学上显著厚于组n中的后肢厚度。组l、组m和组h中的后肢厚度明显小于组o中的后肢厚度，其中组l中的后肢厚度是统计学上显著的。因此，通过服用有效量的示例性化合物，可改善特应性皮炎中对耳和腿的迟发型变态反应。用pha、cona和ova刺激24小时的脾细胞的激素分泌结果。在第27天后处死各组中的小鼠并收集脾细胞。将含有脾细胞的溶液的浓度调节至1x106/ml，然后用pha、cona和ova进行24小时的刺激。测量脾细胞中生成的ifn-γ、il-4、il-12和tnf-α的量。如图10a中所示，在24小时的pha刺激后，组o和组n中的ifn-γ分泌量大致相同。组l、组m和组h中的ifn-γ分泌量略高于组o中的量，但不具有统计学意义。在24小时的cona刺激后的ifn-γ分泌量方面，组o中的ifn-γ分泌量在统计学上显著低于组n中的量。组l、组m和组h中的ifn-γ分泌量在统计学上显著高于组o中的量。在24小时的ova刺激后，各组中的ifn-γ分泌量大致相同，没有显示出差异。如图10b中所示，在24小时的pha刺激后，组o和组n中的il-4分泌量大致相同。在24小时的cona刺激后，组o中的il-4分泌量在统计上显著高于组n中的量。组l、组m和组h中的il-4分泌量低于组o中的量，特别地，在组l和组m中是统计上显著的。在24小时的ova刺激后，各组中的il-4分泌量大致相同，没有显示出任何差异。如图10c中所示，在24小时的pha刺激后，各组中的il-12分泌量大致相同。在24小时的cona刺激后，组o中的il-12分泌量略低于组n中的量，但不具有统计学意义。组l、组m和组h中的il-12分泌量高于组o中的量，特别地，在组l和组m中是统计上显著的。在24小时的ova刺激后，各组中的il-12分泌量大致相同，没有显示出差异。如图10d中所示，在24小时的pha刺激后，各组中的tnf-α分泌量大致相同。在24小时的cona刺激后，组o中的tnf-α分泌量在统计学上显著高于组n中的量。组l、组m和组h中的tnf-α分泌量在统计学上显著低于组o中的量。在24小时的ova刺激后，组o中的tnf-α分泌量略高于组n中的量，但不具有统计显著性。组l、组m和组h中的tnf-α分泌量略低于组o中的量，但不是统计学上显著的。因此，有效量的示例性化合物可影响某些生物标志物从ad中的脾细胞的分泌。用pha、cona和ova刺激72小时的脾细胞的激素分泌结果。在第27天后处死各组中的小鼠。将含有脾细胞的溶液的浓度调节至1x106/ml，然后用pha、cona和ova进行72小时的刺激。测量脾细胞中生成的ifn-γ、il-4、il-12和tnf-α的量。如图11a中所示，在72小时的pha刺激后，组o和组n在ifn-γ分泌量方面大致相同。组l和组m中的ifn-γ分泌量与组o中的分泌量大致相同。组h中的量略高于组o中的量，但不具有统计学意义。在72小时的cona刺激后的ifn-γ分泌量方面，组o中的ifn-γ分泌量与组n中的量大致相同。组l、组m和组h中的ifn-γ分泌量略高于组o中的量，特别地，组m中的量是统计学上显著的。在72小时的ova刺激后，组o和组n中的ifn-γ分泌量大致相同。组l和组m中的量与组o中的量大致相同。组h中的量略高于组o中的量，但未显示出统计学意义。如图11b中所示，在72小时的pha刺激后，组o和组n中的il-4分泌量大致相同。在72小时的cona刺激后，组o中的il-4分泌量在统计上显著高于组n中的量。组l、组m和组h中的il-4分泌量在统计上显著低于组o中的量。在72小时的ova刺激后，各组中的il-4分泌量大致相同，没有显示出任何差异。如图11c中所示，在72小时的pha、cona或ova刺激后，各组中的il-12分泌量大致相同。如图11d中所示，在72小时的pha刺激后，各组中的tnf-α分泌量大致相同。在72小时的cona刺激后，组o中的tnf-α分泌量在统计学上显著高于组n中的量。组l、组m和组h中的tnf-α分泌量在统计学上显著低于组o中的量。在72小时的ova刺激后，各组中的tnf-α分泌量大致相同，没有显示出差异。用pha、cona和ova刺激24小时的淋巴细胞的细胞因子分泌结果。在第27天后处死各组中的小鼠并收集淋巴细胞。将含有淋巴细胞的溶液的浓度调节至1x106/ml，然后用pha、cona和ova进行24小时的刺激。测量淋巴细胞中生成的ifn-γ、il-4、il-12和tnf-α的量。如图12a中所示，在24小时的pha刺激后，各组中的ifn-γ分泌量大致相同。在24小时的cona刺激后的ifn-γ分泌量方面，组o中的ifn-γ分泌量在统计学上显著高于组n中的量。组l、组m和组h中的ifn-γ分泌量在统计学上显著高于组o中的量。在24小时的ova刺激后，各组中的ifn-γ分泌量大致相同，没有显示出差异。如图12b中所示，在24小时的pha刺激后，各组中的il-4分泌量大致相同。在24小时的cona刺激后，组o中的il-4分泌量在统计上显著高于组n中的量。组l、组m和组h中的il-4分泌量在统计学上显著低于组o中的量。在24小时的ova刺激后，各组中的il-4分泌量大致相同，没有显示出任何差异。如图12c中所示，在24小时的pha、cona或ova刺激后，各组中的il-12分泌量大致相同。如图12d中所示，在24小时的pha刺激后，各组中的tnf-α分泌量大致相同。在24小时的cona刺激后，组o中的tnf-α分泌量在统计学上显著高于组n中的量。组l、组m和组h中的tnf-α分泌量在统计学上显著低于组o中的量。在24小时的ova刺激后，各组中的tnf-α分泌量大致相同，没有显示出任何差异。用pha、cona和ova刺激72小时的淋巴细胞的细胞因子分泌结果。在第27天后处死各组中的小鼠并收集淋巴细胞。将含有淋巴细胞的溶液的浓度调节至1x106/ml，然后用pha、cona和ova进行72小时的刺激。测量淋巴细胞中生成的ifn-γ、il-4、il-12和tnf-α的量。如图13a中所示，在72小时的pha刺激后，各组中的ifn-γ分泌量大致相同。在72小时的cona刺激后的ifn-γ分泌量方面，组o中的ifn-γ分泌量与组n中的量大致相同。组l、组m和组h中的ifn-γ分泌量略高于组o中的量，但未显示出统计学意义。在72小时的ova刺激后，各组中的ifn-γ分泌量大致相同，没有显示出差异。如图13b中所示，在72小时的pha刺激后，各组中的il-4分泌量大致相同。在72小时的cona刺激后，组o中的il-4分泌量在统计上显著高于组n中的量。组l、组m和组h中的il-4分泌量低于组o中的量，特别地，组m和组h中的量具有统计显著性。在24小时的ova刺激后，各组中的il-4分泌量大致相同，没有显示出任何差异。如图13c中所示，在72小时的pha、cona或ova刺激后，各组中的il-12分泌量大致相同。如图13d中所示，在72小时的pha刺激后，各组中的tnf-α分泌量大致相同。在72小时的cona刺激后，组o中的tnf-α分泌量在统计学上显著高于组n中的量。组l、组m和组h中的tnf-α分泌量在统计学上显著低于组o中的量。在24小时的ova刺激后，各组中的tnf-α分泌量大致相同，没有显示出任何差异。实施例4：化合物1用于治疗特应性皮炎患者的临床试验研究用来研究本文所述的环己烯酮化合物如化合物1在治疗特应性皮炎患者中的有效性的临床试验。研究设计：随机化、三组、双盲、剂量变化、带安慰剂对照的试验。主要目的：本研究将会比较化合物1(例如50mg、100mg和200mg)与安慰剂在中度特应性皮炎患者中的安全性和疗效。研究目标：主要目标：评价化合物1在中度至重度特应性皮炎患者中的活性。次要目标：评估安卓奎诺尔(antroquinonol)在特应性皮炎患者中的机制和细胞因子变化。探索性目标：探索安卓奎诺尔暴露与安全性和疗效终点之间的潜在关系。概述：招募共60名患者的样本量，每组20名患者。患者在第0天接受安卓奎诺尔50mg、100mg或安慰剂，每天一次(qd)，持续12周或直到有记录的证据显示不可接受的毒性、患者不依从或撤回同意，或者研究人员决定中断治疗，以先到者为准。研究药物施用时间应记录在患者日记中。在筛查时、第0天、第28天、第56天和第84天进行评分评估，包括easi评分、scorad、siga评分。主要终点是基线与第12周之间的湿疹面积和严重程度指数(easi)的改善百分比。入选标准研究的合格年龄：12岁至65岁之间且具有中度至重度特应性皮炎(使用hanifin和rajka诊断标准)。体重≥35kg且≤120kg的患者。为了有资格参与，要求患者具有a.在湿疹面积和严重程度指数(easi)上至少为10分的评分，该评分范围为0至72，分数越高表示疾病越严重；b.在视觉模拟量表上至少为30mm的瘙痒评分，该评分范围为0(无瘙痒)至100mm(能想象到的最痒的情况)；c.在静态研究者全局评估(siga)上至少为3分的评分，该评分范围为0(无疾病)至4(严重疾病)。d.受影响的bsa或psai≥5％排除标准1.伴有特应性皮炎的活动性皮肤疾病患者。2.具有研究人员认为应禁止参与该研究的严重医疗状况的患者。3.具有netherton综合征或引起表皮屏障缺陷的其他遗传性皮肤病的受试者。4.免疫功能低下或具有恶性病史的任何受试者。这些信息将从患者口头收集，同时从患者获得病史，而不会进行进一步测试如hiv测试。5.具有会干扰遵守该研究方案的能力的精神病史或者酒精或药物滥用史的受试者。6.任一手臂上皮肤的任何明显破裂或开裂，包括提示活动性感染或易感染性增加的皮肤严重脱落或者具有开放性或渗出性伤口的皮肤。7.正在参与另一项调查性试验。8.在治疗就诊或活动性感染之前使用研究人员认为会损害患者耐受治疗的能力的任何口服或局部用抗生素长达四周。9.在治疗就诊的四周内使用任何全身免疫抑制疗法(例如csa、mtx等)。10.参与者具有或处于研究人员认为可使患者具有重大风险或可显著干扰患者参与该研究的状况或情况。11.具有人工心脏瓣膜、起搏器、血管内导管或其他外来或假体装置的受试者。12.食品或药物相关的严重类过敏或过敏反应史。13.妊娠或哺乳。14.癫痫、严重神经疾病、脑血管病或局部缺血的病史或存在。15.需要药物治疗的心肌梗死或心律失常的病史或存在。16.无法完成纸质问卷的患者。17.临床上重要的实验室异常。18.经治疗或未经治疗的任何器官系统的恶性病史。主要研究终点：基线与第12周之间的湿疹面积和严重程度指数的改善百分比。次要研究终点：第12周和每个时间点(第4、8和12周)的次要终点包括以下方面与基线相比的改善1.easi评分；2.特应性皮炎评分(scorad)，范围为0至103，分数越高表示疾病越严重；3.siga评分，范围为0至4；4.受特应性皮炎影响的体表面积；5.瘙痒口头等级评定量表，其描述每日从0(无)至10(非常严重)的瘙痒强度；6.睡眠障碍视觉模拟量表，每日从0(无睡眠障碍)至10(完全无法入睡)；7.瘙痒视觉模拟评分、easi和scorad评分改善25％、50％和75％的患者比例；8.在siga和瘙痒口头等级评定量表上改善至少2分的患者比例。其他疗效终点：血清细胞因子(包括tarc/ccl17、ifn-γ、tnf-α、il-18、il-6、il-1β)在基线与第12周之间的变化百分比。实施例5：口服制剂为了制备用于口服递送的药物组合物，将等重量的示例性化合物1与等重量的玉米油(例如，25mg、50mg、100mg、200mg)混合。将该混合物引入到适合口服给药的胶囊中的口服剂量单位中。在一些情况下，将100mg本文所述的化合物与750mg淀粉混合。将该混合物引入到适合口服给药的口服剂量单位如硬明胶胶囊中。实施例6：舌下(硬锭剂)制剂为了制备用于颊部递送的药物组合物，如硬锭剂，将一份本文所述的化合物与4至5份糖粉混合，该糖粉与适量的低度玉米糖浆、蒸馏水和薄荷提取物混合。将该混合物轻轻掺混并倒入模具中以形成适合颊部给药的锭剂。实施例7：吸入组合物为了制备用于吸入递送的药物组合物，将20mg本文所述的化合物与50mg无水柠檬酸和100ml的0.9％氯化钠溶液混合。将该混合物引入到适合吸入给药的吸入递送单元如雾化器中。尽管本文中已经示出并描述了本发明的优选实施方案，但对于本领域技术人员显而易见的是，这些实施方案仅以示例的方式提供。本领域技术人员在不脱离本发明的情况下现将想到多种变化、改变和替代。应当理解，本文中所述的本发明实施方案的各种替代方案可用于实施本发明。目的在于以下述权利要求限定本发明的范围，并由此涵盖这些权利要求范围内的方法和结构及其等同物。当前第1页12