一种筛选miR-29靶基因的方法与流程

文档序号:14983816发布日期:2018-07-20 20:42阅读:来源:国知局

技术特征:

技术总结
本发明公开了一种筛选miR‑29靶基因的方法,该方法以山羊卵巢cDNA序列为模板,在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下,利用PTX3引物在PCR条件下进行扩增PTX3基因3'UTR区;构建双荧光素酶报告系统,检测荧光素酶活性,结果显示,miR‑29降低了荧光素酶的活性,初步确定PTX3为miR‑29的靶基因;采用RT‑qPCR和Western blot方法验证miR‑29对PTX3基因在mRNA和蛋白水平表达的影响。结果显示:miR‑29可以抑制PTX3基因在mRNA和蛋白水平上的表达,进一步确定miR‑29可与PTX33'UTR结合,PTX3是miR‑29的靶基因,为研究miR‑29对奶山羊卵巢发育和产羔性状的调控作用奠定了基础。

技术研发人员:白跃宇;谭旭信;魏金销;金喜新;韩明鹏;陈美凯;郭利亚;曹斌云;王沛捷
受保护的技术使用者:河南省种牛遗传性能测定中心;西北农林科技大学
技术研发日:2018.03.09
技术公布日:2018.07.20
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