用于可规模化生产和递送生物制剂的组合物和方法与流程

文档序号:21046867发布日期:2020-06-09 20:58阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种农业制剂,其包含:

a.完整小细胞,所述完整小细胞在所述小细胞内包含至少一种生物活性化合物,其中所述生物活性化合物选自由以下组成的组:

i.核酸,其中所述核酸靶向靶标的细胞内编码多肽的转录物,

ii.生物防治化合物,其中所述生物防治化合物对害虫具有活性,以及

iii.生物刺激剂化合物,其中所述生物刺激剂化合物刺激植物的生长或健康,

其中所述靶标是植物或害虫。

2.如权利要求1所述的农业制剂,其中所述小细胞与至少一种农业上适合的添加剂或佐剂一起施加。

3.如权利要求1所述的农业制剂,其中所述小细胞来源于原核细胞、革兰氏阴性细菌细胞、革兰氏阳性细菌细胞或真核细胞。

4.如权利要求1所述的农业制剂,其中所述小细胞来源于内生菌或植物病原细菌。

5.如权利要求1所述的农业制剂,其中所述小细胞是蛋白酶缺乏的或是核糖核酸酶缺乏的。

6.如权利要求5所述的农业制剂,其中所述小细胞是蛋白酶缺乏的。

7.如权利要求5所述的农业制剂,其中所述小细胞是核糖核酸酶缺乏的。

8.如权利要求1所述的农业制剂,其中所述小细胞是蛋白酶缺乏的和是核糖核酸酶缺乏的。

9.如权利要求1、5、6和8中任一项所述的农业制剂,其中所述小细胞是蛋白酶缺乏的,并且其中所述生物活性化合物是蛋白质。

10.如权利要求1、5、7和8中任一项所述的农业制剂,其中所述小细胞是核糖核酸酶缺乏的,并且其中所述生物活性化合物是核酸。

11.如权利要求1或10所述的农业制剂,其中所述生物活性化合物是所述核酸,所述核酸选自由以下组成的组:反义核酸、双链rna(dsrna)、短发夹rna(shrna)、小干扰rna(sirna)、微rna(mirna)、核酶、适体及其组合。

12.如权利要求1所述的农业制剂,其中所述生物活性化合物对除所述靶标的细胞以外的细胞是惰性的。

13.如权利要求1所述的农业制剂,其中所述生物防治化合物是肽、多肽、发酵产物、代谢物、抗体、化学信息素或微量营养素。

14.如权利要求1所述的农业制剂,其中所述生物刺激剂化合物是肽、多肽、发酵产物、代谢物、抗体、化学信息素或微量营养素。

15.如权利要求1所述的农业制剂,其中所述靶标包括植物、昆虫、蠕虫、细菌、真菌、病毒和水生动物,其中所述水生动物包括鱼、贝类和甲壳动物。

16.如权利要求1所述的农业制剂,其还在所述小细胞内包含多肽,其中所述多肽在所述小细胞内表达,其中所述多肽与所述核酸结合。

17.如权利要求16所述的农业制剂,其中所述多肽是dsrna结合蛋白,并且其中所述dsrna结合蛋白增加负载并增强dsrna的稳定性。

18.如权利要求1所述的农业制剂,其中所述小细胞还包含至少一种融合蛋白,并且其中所述融合蛋白在所述小细胞的表面上表达。

19.如权利要求18所述的农业制剂,其中所述融合蛋白包含至少一个表面表达部分和至少一个靶细胞粘附部分,并且其中所述靶细胞粘附部分包含由纤维素结合结构域、木聚糖结合结构域、几丁质结合结构域和木质素结合结构域组成的碳水化合物结合模块。

20.如权利要求1所述的农业制剂,其中所述小细胞用溶剂、试剂、固定剂、防腐剂或交联剂处理以具有更好的溶解性、增加的稳定性或增强的完整性。

21.如权利要求1所述的农业制剂,其中所述小细胞表现出所述生物活性化合物的控制释放速率,其中所述释放可以是稳定释放或初始突释然后稳定释放。

22.一种递送至少一种生物活性化合物的方法,其包括:将如权利要求1所述的所述小细胞施加于靶细胞。

23.如权利要求22所述的方法,其中将所述小细胞施加于靶标并通过内吞作用递送到所述靶标的细胞中。

24.如权利要求22所述的方法,其还包括:将所述小细胞与试剂一起施加于所述靶细胞,其中所述试剂是用于改善所述小细胞向所述靶细胞中的穿透的佐剂。

25.如权利要求24所述的方法,其中所述试剂是表面活性剂、乳化剂、作物油浓缩液、穿透剂、盐或其组合。

26.一种递送至少一种生物活性化合物的方法,其包括:

将农业制剂施加于靶细胞,其中所述农业制剂包含:

a.来源于细菌亲代细胞的完整无核细胞,所述完整无核细胞在所述细胞中包含所述生物活性化合物,其中所述生物活性化合物选自由以下组成的组:

i.核酸,其中所述核酸靶向所述靶细胞内编码多肽的转录物,

ii.生物防治化合物,以及

iii.生物刺激剂化合物。

27.如权利要求26所述的方法,其中所述生物活性化合物是所述核酸,所述核酸选自由以下组成的组:反义核酸、双链rna(dsrna)、短发夹rna(shrna)、小干扰rna(sirna)、微rna(mirna)、核酶、适体及其组合。

28.如权利要求26所述的方法,其中所述生物防治化合物是肽、多肽、发酵产物、代谢物、抗体、化学信息素或微量营养素。

29.如权利要求26所述的方法,其中所述生物刺激剂化合物是肽、多肽、发酵产物、代谢物、抗体、化学信息素或微量营养素。

30.如权利要求26所述的方法,其中所述靶细胞包括植物细胞、昆虫细胞、蠕虫细胞、细菌细胞、真菌细胞、病毒和水生动物的细胞,其中所述水生动物包括鱼、贝类和甲壳动物。

31.如权利要求26所述的方法,其中所述无核细胞还包含至少一种融合蛋白,并且其中所述融合蛋白在所述细胞的表面上表达。

32.如权利要求31所述的方法,其中所述融合蛋白包含至少一个表面表达部分和至少一个靶细胞粘附部分,并且其中所述靶细胞粘附部分包含由纤维素结合结构域、木聚糖结合结构域、几丁质结合结构域和木质素结合结构域组成的碳水化合物结合模块。


技术总结
本公开总体上涉及用于包封和可规模化递送生物活性化合物的包含无核小细胞的农业制剂和基于无核细胞的平台。本文公开了用于将无染色体和/或无核细胞内的生物活性化合物稳定且靶向递送到靶细胞上和/或靶细胞中的组合物。本公开还提供了改善生物活性化合物在无染色体和/或无核细胞中的包封和保留以及将生物活性化合物递送到靶细胞中的方法。

技术研发人员:A·H·莎克尔;Z·G·戴维斯;J·T·弗兰克;S·佐莫洛迪;P·普塔赫里
受保护的技术使用者:农业球体公司
技术研发日:2018.09.25
技术公布日:2020.06.09
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