本发明涉及药物领域，具体地，本发明涉及一种抑制MNK1和MNK2的多环化合物。
背景技术：
：本发明涉及抑制MAP激酶相互作用的MNK的酶活性的化合物。MNK蛋白由两个基因MKNK1和MKNK2编码，这两个基因产生MNK1和MNK2。这两种蛋白都有由选择性剪接产生的两种亚型。较短的亚型被称为MNK1b/2b，其缺少导致低基础活性的MAP激酶结合结构域。MNK1a通过ERK和p38来激活，而MNK2a似乎只被ERK激活。MNK1和MNK2的催化结构域非常相似。而这些结构域与其他激酶则非常不同，因为这些结构域在ATP结合位点显示DFD基序而不是典型的DFG基序，这表明确认存在改变的活化环。MNK1/2普遍用磷酸化真核起始因子4E(eIF4E)、胞质磷脂酶A2(cPLA2)异源核RNA-结合蛋白A1(hnRNPA1)、多聚嘧啶串结合蛋白相关剪接因子(PSF)和Sprouty2(hSPRY2)来表达。MNK通过eIF4E的磷酸化而与癌症相关联。eIF4E是在癌症中扩增并且单独地由MNK磷酸化的致癌基因。当eIF4E过表达或过度活化时，它们的水平会增加。已发现许多类型的肿瘤和癌细胞系中存在升高水平的eIF4E，包括结肠癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、前列腺癌、胃肠道癌、头颈癌、霍奇金氏淋巴瘤和成神经细胞瘤。eIF4E的磷酸化导致细胞存活、血管生成和癌症转移中涉及的mRNA的优选翻译。eIF4E作为eIF4F复合物的一部分，是控制翻译速率的一项限制因素，因而eIF4E是mRNA翻译的重要调节物。值得注意的是，尽管MNK活性对于eIF4E介导的致癌性转化而言是必需的，其对于正常发育而言是非必要的。因此，从药理学上抑制MNK是极具吸引力的针对癌症的治疗策略。尽管对于MNK结构和功能的了解有所增加，但已经报道的MNK抑制剂相对较少：CGP052088、CGP57380、和尾孢素酰胺(Cercosporamide)，这些化合物主要用于MNK靶标验证，缺乏临床用途。因此，尽管在该领域中已经取得了一些进步，本领域中仍然极其需要能特异性抑制MNK激酶活性，尤其是能够用于调节癌症通路的MNK抑制剂化合物。技术实现要素：本发明的目的是提供一种能够用于调节癌症通路的MNK抑制剂化合物。本发明的第一方面，提供一种化合物，或其立体异构体、互变异构体，或其药学上可接受的盐，或其前药，或其水合物，或其溶剂合物，所述的化合物具有式IA和式IB结构：R1为氢、取代或未取代的C1-C8烷基、或取代或未取代的C3-C8环烷基；R2和R3各自独立地为取代或未取代的C1-C8烷基、取代或未取代的C3-C8环烷基，或R2和R3与共同相连的C原子形成取代或未取代的3-10元环烷环(优选为饱和环烷环)、或取代或未取代的3-10元杂环烷环(优选为饱和杂环烷环)；R4为氢、卤素、羟基、-SH、取代或未取代的C1-C8烷基、或取代或未取代的C3-C8环烷基；R5为氢、氘、卤素、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烷氧基、羟基、巯基、氨基、取代或未取代的C1-C6氘代烷氧基、或取代或未取代的C1-C6卤代烷氧基；R6为氢、取代或未取代的C1-C6烷基、或取代或未取代的C3-C6环烷基；R7为氨基、羟基、巯基、羧基、氨甲酰基、卤素、取代或未取代的3-10元杂环烷环、取代或未取代的-NH＝CH-N(R10)(R11)，取代或未取代的-NH＝CH-(取代或未取代的C1-C4烷基)-N(R10)(R11)、取代或未取代的(R12)-NH-、取代或未取代的(R12)-O-、取代或未取代的(R12)-S-、取代或未取代的(R12)-NHC(O)NH-、取代或未取代的(R12)-OC(O)NH-、取代或未取代的(R12)-NHC(O)-、取代或未取代的C1-C6亚烷基＝N-、-N＝C(R13)(R14)、取代或未取代的C1-C4烷基、或取代或未取代的(C1-C4烷基)-S(O)2-NH-(C1-C4烷基)-、取代或为取代的C6-C12芳基、取代或为取代的5-12元杂芳基、取代或未取代的C2-C8烯基、取代或未取代的C2-C8炔基；A1为-N＝或-CR8＝；A2为-N＝或-CR9＝；W1和W2独立地选自O、S或＝N-O-(取代或未取代的C1-C8烷基)；R8和R9是氢、取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、羟基-C1-C4烷基、取代或未取代的C3-C8环烷基、取代或未取代的5-12元杂环烷基、或-NH2或-OH；R10、R11各自独立地为氢、取代或未取代的C1-C8烷基，R12为氢、取代或未取代的(C1-C8烷基)-S(O)2-(CH2)i-、取代或未取代的C1-C8烷基、取代或未取代的C3-C8环烷基、取代或未取代的C3-C8杂环烷基、取代或未取代的C2-C8酰基、取代或未取代的C3-C8环烷基-C(O)-、取代或未取代的(C1-C4烷基)-S(O)2-、HO-S(O)2-O-、(HO)2P(O)-O-、取代或为取代的C6-C12芳基、取代或为取代的5-12元杂芳基、取代或未取代的C2-C8烯基、取代或未取代的C2-C8炔基，i为0、1、2、3、4或5；R13、R14各自独立地为氢、或取代或未取代的C1-C8烷基；a和c为双键，b为单键，或a和c为单键，b为双键；e和g为双键，f为单键，或e和g为单键，f为双键；当e和g为双键，f为单键时，X为取代或未取代的CR15，Y为N；当e和g为单键，f为双键时，X为取代或未取代的CR15R16，Y为NR17、O或S；；R15和R16各自独立为氢、氘、卤素、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烷氧基、取代或未取代的氘代C1-C6烷氧基、羟基、巯基、或氨基；R17为氢、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基；所述的任一“取代”是指基团上的1-4个(优选为1、2、3或4个)氢原子各自独立地被选自下组的取代基所取代：羟基、氨基、巯基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、(R18)(R19)N-、(R18)(R19)N-(C1-C6烷基)-、C2-C4酯基、C2-C4酰氨基、C2-C4酰基、-S(O)2(C1-C4烷基)、或C3-C6环烷基、氨甲酰基，其中，R18、R19各自独立地为C1-C4烷基；所述的杂环烷环、杂环烷基、杂芳基各自独立地具有1-3个(优选为1、2或3)选自N、O和S杂原子。在另一优选例中，R1为氢、C1-C4烷基、C3-C6环烷基。在另一优选例中，R1为氢。在另一优选例中，R2和R3各自独立地为取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基，或R2和R3与共同相连的C原子形成取代或未取代的C3-C8环烷环(优选为饱和环烷环)、取代或未取代的3-8元杂环烷环(优选为饱和杂环)。在另一优选例中，R2和R3各自独立地为甲基、乙基、丙基、丁基(如叔丁基)，或R2和R3与共同相连的C原子形成环己环、环戊环、环丁环、六氢吡啶、四氢吡喃、N原子上的氢被C1-C4烷基(优选为甲基)取代的六氢吡啶、羟基(优选为单羟基)取代的环己环、卤代取代(优选为二卤代，更优选为二氟代)的环己环、螺[2,3]辛烷、二环[2.2.2]辛烷环，或降冰片环。在另一优选例中，R4为氢、卤素、羟基、-SH、取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基。在另一优选例中，R4为甲基、氯。在另一优选例中，R5为氢、卤素、氘、取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、羟基、巯基、氨基、取代或未取代的C1-C4氘代(优选为全氘代)烷氧基、取代或未取代的C1-C4卤代烷氧基。在另一优选例中，R5为氢、氘、甲基、甲氧基、乙氧基、羟基、巯基、氨基、三氘代甲氧基、三氟甲氧基。在另一优选例中，R6为氢。在另一优选例中，W1和W2独立地选自O、S。在另一优选例中，R7为氨基、羟基、巯基、羧基、氨甲酰基、取代或未取代的4-8元杂环烷环、卤素、取代或未取代的-NH＝CH-N(R10)(R11)，取代或未取代的-NH＝CH-(取代或未取代的C1-C4烷基)-N(R10)(R11)、取代或未取代的(R12)-NH-、取代或未取代的(R12)-O-、取代或未取代的(R12)-S-、取代或未取代的(R12)-NHC(O)NH-、取代或未取代的(R12)-OC(O)NH-、取代或未取代的(R12)-NHC(O)-、取代或未取代的C1-C6亚烷基＝N-、-N＝C(R13)(R14)、取代或未取代的C1-C4烷基、或取代或未取代的(C1-C4烷基)-S(O)2-NH-(C1-C4烷基)-。在另一优选例中，R8为氢、卤素、取代或未取代的C1-C4烷基。在另一优选例中，R8为氢、氯、甲基。在另一优选例中，R9为氢、卤素、取代或未取代的C1-C8烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基。在另一优选例中，R9为氢、卤素、取代或未取代的C1-C4烷基。在另一优选例中，R9为氢、氟。在另一优选例中，R10、R11各自独立地为氢、或取代或未取代的C1-C4烷基。在另一优选例中，R10、R11各自独立地为氢、或甲基。在另一优选例中，R12为氢、取代或未取代的(C1-C4烷基)-S(O)2-(CH2)i-、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C3-C6杂环烷基、取代或未取代的C2-C6酰基、取代或未取代的C3-C8环烷基-C(O)-、取代或未取代的(C1-C4烷基)-S(O)2-、HO-S(O)2-O-、(HO)2P(O)-O-，i为0、1、2或3。在另一优选例中，i为0、1、2或3。在另一优选例中，R13、R14各自独立地为氢、或取代或未取代的C1-C4烷基。在另一优选例中，R13、R14各自独立地为氢、或甲基。在另一优选例中，R7为CH3-S(O)2-NH-、氨基、-N＝CH-N(CH3)(CH3)、-N＝CH-CH2-N(CH3)(CH3)、CH3-CH＝N-、羧基、氨甲酰基、2-羟基-2-甲基-乙基-、甲氨基、羟基-乙氨基-、羟基-乙酰氨基-、氨基-乙酰氨基-、氨基-丙酰氨基-、氨基-丁酰氨基-、氨基-戊酰氨基-、甲氧基-乙氨基-、甲氧基-酰基氨基-、乙氧基-酰基氨基-、甲氨基-酰基氨基-、乙氨基-酰基氨基-、氨基-乙氨基-、甲酰氨基、乙酰氨基、丁酰氨基、戊酰氨基、-NH＝CHCH3、羟基-丙氨基-、CH3-S(O)2-(CH2)2NH-、CH3-S(O)2-(CH2)-NH-、二甲氨基-乙氨基-、甲氧酰基-乙氨基-、乙酯基-乙氨基-、氨甲酰基-乙氨基-、环丙基-甲酰氨基-、HO-S(O)2-O-NH-、(HO)2P(O)-O-NH-、羟甲基、羟丙基、氨基-甲基-、二甲氨基-甲基-、乙酰氨基-甲基-、CH3-S(O)2-NH-、CH3-S(O)2-NH-CH2-、被选自下组的取代基取代的环原子上具有2个N原子六元杂环烷环：甲基、二甲氨基乙基。在另一优选例中，R15和R16各自独立为氢、氘、卤素、取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、取代或未取代的氘代C1-C4烷氧基、羟基、巯基、氨基。在另一优选例中，R15和R16各自独立为氢、氘、氟、甲氧基、三氘代甲氧基、羟基。在另一优选例中，R17为氢。在另一优选例中，所述的化合物具有式IA-1、IA-2、IB-1和/或IB-2所述结构式：在另一优选例中，所述的化合物具有选自下组的一种或多种特征：R1为氢、取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基；R2和R3各自独立地为取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基，或R2和R3与共同相连的C原子形成取代或未取代的C3-C8环烷环(优选为饱和环烷环)、取代或未取代的3-8元杂环烷环(优选为饱和杂环)；R4为氢、卤素、羟基、-SH、取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基；R5为氢、卤素、氘、取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、羟基、巯基、氨基、取代或未取代的C1-C4氘代(优选为全氘代)烷氧基、取代或未取代的C1-C4卤代烷氧基；R7为氨基、羟基、巯基、羧基、氨甲酰基、取代或未取代的4-8元杂环烷环、卤素、取代或未取代的-NH＝CH-N(R10)(R11)，取代或未取代的-NH＝CH-(取代或未取代的C1-C4烷基)-N(R10)(R11)、取代或未取代的(R12)-NH-、取代或未取代的(R12)-O-、取代或未取代的(R12)-S-、取代或未取代的(R12)-NHC(O)NH-、取代或未取代的(R12)-OC(O)NH-、取代或未取代的(R12)-NHC(O)-、取代或未取代的C1-C6亚烷基＝N-、-N＝C(R13)(R14)、取代或未取代的C1-C4烷基、或取代或未取代的(C1-C4烷基)-S(O)2-NH-(C1-C4烷基)-；R8为氢、卤素、取代或未取代的C1-C4烷基；R9为氢、卤素、取代或未取代的C1-C8烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基；R10、R11各自独立地为氢、或取代或未取代的C1-C4烷基；R12为氢、取代或未取代的(C1-C4烷基)-S(O)2-(CH2)i-、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C3-C6杂环烷基、取代或未取代的C2-C6酰基、取代或未取代的C3-C8环烷基-C(O)-、取代或未取代的(C1-C4烷基)-S(O)2-、HO-S(O)2-O-、(HO)2P(O)-O-，i为0、1、2或3；R13、R14各自独立地为氢、或取代或未取代的C1-C4烷基；R15和R16各自独立为氢、氘、卤素、取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、取代或未取代的氘代C1-C4烷氧基、羟基、巯基、氨基。在另一优选例中，所述的化合物具有选自下组的一种或多种特征：R1为氢；R2和R3各自独立地为甲基、乙基、丙基、丁基(如叔丁基)，或R2和R3与共同相连的C原子形成环己环、环戊环、环丁环、六氢吡啶、四氢吡喃、N原子上的氢被C1-C4烷基(优选为甲基)取代的六氢吡啶、羟基(优选为单羟基)取代的环己环、卤代取代(优选为二卤代，更优选为二氟代)的环己环、螺[2,3]辛烷、二环[2.2.2]辛烷环，或降冰片环；R4为甲基、氯；R5为氢、氘、甲基、甲氧基、乙氧基、羟基、巯基、氨基、三氘代甲氧基、三氟甲氧基；R6为氢；R7为CH3-S(O)2-NH-、氨基、-N＝CH-N(CH3)(CH3)、-N＝CH-CH2-N(CH3)(CH3)、CH3-CH＝N-、羧基、氨甲酰基、2-羟基-2-甲基-乙基-、甲氨基、羟基-乙氨基-、羟基-乙酰氨基-、氨基-乙酰氨基-、氨基-丙酰氨基-、氨基-丁酰氨基-、氨基-戊酰氨基-、甲氧基-乙氨基-、甲氧基-酰基氨基-、乙氧基-酰基氨基-、甲氨基-酰基氨基-、乙氨基-酰基氨基-、氨基-乙氨基-、甲酰氨基、乙酰氨基、丁酰氨基、戊酰氨基、-NH＝CHCH3、羟基-丙氨基-、CH3-S(O)2-(CH2)2NH-、CH3-S(O)2-(CH2)-NH-、二甲氨基-乙氨基-、甲氧酰基-乙氨基-、乙酯基-乙氨基-、氨甲酰基-乙氨基-、环丙基-甲酰氨基-、HO-S(O)2-O-NH-、(HO)2P(O)-O-NH-、羟甲基、羟丙基、氨基-甲基-、二甲氨基-甲基-、乙酰氨基-甲基-、CH3-S(O)2-NH-、CH3-S(O)2-NH-CH2-、被选自下组的取代基取代的环原子上具有2个N原子六元杂环烷环：甲基、二甲氨基乙基；R8为氢、氯、甲基；R9为氢、氟；R15和R16各自独立为氢、氘、氟、甲氧基、三氘代甲氧基、羟基；R17为氢。在另一优选例中，所述化合物选自下组：本发明第二方面，提供一种药物组合物，所述的药物组合物包含：(i)治疗有效量的如本发明第一方面所述的化合物，或其立体异构体、互变异构体，或其药学上可接受的盐，或其前药，或其水合物，或其溶剂合物；和任选的(ii)药学上可接受的载体或赋形剂。在另一优选例中，所述的药物组合物还含有第二治疗剂。本发明第三方面，提供一种如本发明第一方面所述的化合物，或其立体异构体、互变异构体，或其药学上可接受的盐，或其前药，或其水合物，或其溶剂合物和/或如本发明第二方面方面所述的药物组合物的用途，用于制备(a)MNK抑制剂；和/或(b)用于治疗和/或预防与MNK活性或表达量相关的疾病或病症的药物。在另一优选例中，所述的MNK选自下组：MNK1、MNK2，或其组合。在另一优选例中，所述的与MNK活性或表达量相关的疾病或病症选自下组：结直肠癌，胃癌，肝癌，食管癌，甲状腺癌，肺癌，白血病，B细胞淋巴瘤，T细胞淋巴瘤，套细胞淋巴瘤，弥漫大B细胞淋巴瘤，霍奇金淋巴瘤，非霍奇金淋巴瘤，伯基特淋巴瘤，胰腺癌，黑色素瘤，多发性骨髓瘤，脑癌，CNS癌，肾癌，前列腺癌，卵巢癌、乳腺癌、不受控制的细胞生长、增殖和/或存活、不适宜的细胞免疫应答、不适宜的细胞炎症应答、白血病和骨髓增生异常综合征、恶性淋巴瘤、头颈部肿瘤、肺肿瘤和肺转移瘤、胸部肿瘤、非小细胞肺肿瘤和小细胞肺肿瘤、胃肠肿瘤、内分泌肿瘤、乳房和其他妇科肿瘤、泌尿系肿瘤、肾、膀胱和前列腺肿瘤、皮肤肿瘤、肉瘤、肿瘤转移、神经变性病症，或其组合。在另一优选例中，所述的神经变性病症为tau蛋白病，更优选阿尔茨海默病。本发明第四方面，提供一种体外非治疗性和非诊断性的抑制MNK的方法，所述的方法包括步骤：在体外培养体系中，将MNK或表达所述MNK的细胞与本发明第一方面所述的化合物，或其立体异构体、互变异构体，或其药学上可接受的盐，或其前药，或其水合物，或其溶剂合物进行接触，从而抑制MNK的活性。在另一优选例中，所述的细胞为过度表达MNK细胞。在另一优选例中，所述的细胞选自下组：结肠癌细胞，胃癌细胞，食管癌细胞，肝癌细胞，甲状腺癌细胞，肺癌细胞，白血病细胞，B细胞淋巴瘤，弥漫大B淋巴瘤细胞，T细胞淋巴瘤，套细胞淋巴瘤，霍奇金淋巴瘤细胞，非霍奇金淋巴瘤细胞，伯基特淋巴瘤细胞，胰腺癌细胞，黑素瘤细胞，多发性骨髓瘤细胞，脑癌细胞，CNS癌细胞，肾癌细胞，前列腺癌细胞，卵巢癌细胞、乳腺癌细胞，或其组合。本发明第五方面，提供一种在有需要的哺乳动物中治疗MNK依赖性病症的方法，包括给予所述对象或患者(i)治疗有效量的至少一种如本发明第一方面所述的化合物，或其立体异构体、互变异构体，或其药学上可接受的盐，或其前药，或其水合物，或其溶剂合物或如本发明第二方面所述的药物组合物。在另一优选例中，"患者"或"对象"包括动物，例如人、奶牛、马、绵羊、羔羊、猪、鸡、火鸡、鹌鹑、猫、狗、小鼠、大鼠、兔或豚鼠。该动物可以是哺乳动物，例如非灵长类和灵长类(例如，猴子和人类)。在一个实施方式中，患者是人，例如，人类婴儿、孩童、青少年或成人。在另一优选例中，所述药物用于治疗不受控制的细胞生长、增殖和/或存活、不适宜的细胞免疫应答或不适宜的细胞炎性应答，或用于治疗或预防神经变性病症，优选tau蛋白病，甚至更优选阿尔茨海默病。本发明第六方面，提供一种治疗在哺乳动物中的疾病的方法，所述疾病为不受控制的细胞生长、增殖和/或存活、不适宜的细胞免疫应答或不适宜的细胞炎性应答，或为神经变性病症，优选tau蛋白病，甚至更优选阿尔茨海默病，所述方法包括对哺乳动物施用治疗有效量的如本发明第一方面所述的化合物，或其立体异构体、互变异构体，或其药学上可接受的盐，或其前药，或其水合物，或其溶剂合物或如本发明第二方面所述的药物组合物。在另一优选例中，所述的化合物用于治疗炎症性疾病或自身免疫性疾病，包括但不限于类风湿性关节炎，幼年型关节炎，强直性脊椎炎，克罗恩病，牛皮癣，溃疡性结肠炎，银屑病关节炎，化脓性汗腺炎等。本发明第七方面，提供一种治疗处于病态的哺乳动物的方法，所述病态通过抑制MNK而减轻，所述方法包括对哺乳动物施用治疗有效量的如本发明第一方面所述的化合物，或其立体异构体、互变异构体，或其药学上可接受的盐，或其前药，或其水合物，或其溶剂合物或如本发明第二方面所述的药物组合物。本发明第八方面，提供了一种如本发明第一方面所述的化合物，或其立体异构体、互变异构体，或其药学上可接受的盐，或其前药，或其水合物，或其溶剂合物在检测鉴定MNK抑制剂的候选化合物的用途。应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。具体实施方式本发明人通过广泛而深入的研究，首次意外地开发了一种化合物，或其立体异构体、互变异构体，或其药学上可接受的盐，或其前药，或其水合物，或其溶剂合物，所述化合物具有式IA和式IB结构。实验表明，本发明化合物对MNK具有显著的抑制效果。本发明的化合物可有效治疗与MNK相关的疾病，例如癌症、炎症性疾病和神经变性疾病，如阿尔茨海默病。在此基础上，完成了本发明。术语除非另外定义，否则在本文中使用的所在技术和科学术语具有与本文所属领域的技术人员通常理解的相同的含义。如本文所用，术语“包含”、“包括”、“含有”可互换使用，不仅包括封闭式定义，还包括半封闭、和开放式的定义。换言之，所述术语包括了“由……构成”、“基本上由……构成”。如本文所用，术语“MNK”指的是有丝分裂原激活的蛋白激酶作用激酶(MAPkinaseintegratingkinases)。如本文所用，术语“MNK1”指的是有丝分裂原激活的蛋白激酶作用激酶1(MAPkinaseintegratingkinases1)。如本文所用，术语“MNK2”指的是有丝分裂原激活的蛋白激酶作用激酶2(MAPkinaseintegratingkinases2)。应当理解，本领域的普通技术人员可以选择本发明的化合物上的取代基和取代型式以产生化学上稳定的化合物，所述化合物可以通过本领域己知的技术以及下文所阐述的方法合成。如果被超过一个取代基团取代，应当理解，这多个基团可以是在同一个碳上或在不同碳上，只要产生稳定的结构即可。如本文所用，术语“取代”或“取代的”是基团上的氢原子被非氢原子基团，但需要满足其化合价要求并且由取代生成化学稳定的化合物，即不会自发进行诸如环化、消除等转变的化合物。除特别说明之处，本发明的所有化合物之中，各手性碳原子(手性中心)可以任选地为R构型或S构型，或R构型和S构型的混合物。如本文所用，“R1”、“R1”和“R1”的含义相同，可相互替换。对于R2等其它其他符号，类似定义的含义相同。如本文所用，虚实线代表单键或双键，即a、b、c、e、f和g的键为单键或双键。如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“烷基”指只含碳原子的直链(即，无支链)或支链饱和烃基，或直链和支链组合的基团。当烷基前具有碳原子数限定(如C1-C8烷基)指所述的烷基含有1-8个碳原子，例如，C1-C6烷基指含有1-6个碳原子的烷基，代表性实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、或类似基团。如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“环烷基”指具有饱和的或部分饱和的单元环，二环或多环(稠环、桥环或螺环)环系基团。当某个环烷基前具有碳原子数限定(如C3-C8)时，指所述的环烷基具有3-8个碳原子。在一些优选实施例中，术语“C3-C6环烷基”指具有3-6个碳原子的饱和或部分饱和的单环或二环烷基，包括环丙基、环丁基、环戊基、环庚基、或类似基团。“螺环烷基”指单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的二环或多环基团，这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。“稠环烷基”指系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳二环或多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。“桥环烷基”指任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。如下是环烷基的代表性实例，包括但不限于：如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，如本文所用，术语“卤素”指F、Cl、Br和I。如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，如本文所用，术语“卤代”是指基团中的一个或多个氢(优选1、2、3或4个)被卤素取代。术语“酰基”是指R-CO-基团，其中R为烷基，烷基为如上本文所定义，例如“C2-C8酰基”指具有C1-C7烷基-CO-结构的基团，酰基的代表性示例包括(但不限于)：CH3-CO-、C2H5-CO-、C3H8-CO-，或类似基团。如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“酯基”指具R-CO-O-基团或-CO-O-R基团，其中R为烷基，烷基为如上本文所定义，例如“C2-C8酯基”是指C1-C7烷基-CO-O-结构的基团或者-CO-O-C1-C7烷基结构的基团，酯基的代表性示例包括(但不限于)：CH3COO-、C2H5COO-、C3H8COO-、(CH3)2CHCOO-、-COOCH3、-COOC2H5、-COOC3H8，或类似基团。如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“酰氨基”指具R-CO-NH-，其中R为烷基，烷基为如上本文所定义，例如“C2-C4酰氨基”是指C1-C3烷基-CO-NH-，代表性示例包括(但不限于)：CH3CO-NH-、C2H5-CO-NH-、C3H8-CO-NH-、(CH3)2-CO-NH-、-CO-NH-CH3、-CO-NH-C2H5、-CO-NH-C3H8，或类似基团。如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“烷氧基”指R-O-基团，其中R为烷基，烷基为如上本文所定义，当烷氧基前具有碳原子数限定，如C1-C6烷氧基基指所述的烷氧基中的烷基具有1-6个碳原子。烷氧基的代表性示例包括(但不限于)：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基，或类似基团。如本文所用，术语“环烷环”为任何稳定的单环、二环或多环的碳环(即环原子为C原子)，碳环可以是饱和的、部分不饱和的、不饱和的环，但不能为芳族的环。当环烷环前面有“元”数限定时，“元”数表示环烷环的环原子(C)个数，例如，“3-10环烷环”中，3-10元表示环烷环的环原子(C)个数为3-10，例如6元环烷环表示环烷环的环原子(C)个数为6。所述环烷环的实例包括但不限于环丙环、环丁环、环丁烯环、环戊环、环戊烯环、环己环、环己烯环、环庚环、环庚烯环、螺[2,3]辛烷，或类似基团。如本文所用，术语“杂环烷环”为任何稳定的单环、二环或多环，杂环上含有一个或多个(优选为1、2或3个)选自N、O和S的杂原子，杂环上环原子由杂原子和碳原子组成，杂环可以是饱和的、部分不饱和的、不饱和的环，但不能为芳族的环。当杂环前面有“元”数限定时，“元”数表示杂环的环原子个数，例如，“5-7杂环”中，5-7元表示杂环的环原子个数为5-7个。应当理解的是，当含有多个杂原子时，杂原子可以相同、可以部分相同，也可以完全不同。杂环的代表性实施例包括(但不限于)：哌啶、四氢吡咯、四氢呋喃、哌啶，或类似基团。如本文所用，术语“杂环烷基”是指杂环烷去掉一个氢原子形成的基团，杂环烷如上所定义。如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，当芳基前面具有碳原子数限定，如C6-C12芳基，则指所述的芳基具有6-12个环碳原子，例如苯基和萘基。所述芳基环可以稠合于其它环状基团(包括饱和或不饱和环)，但不能含有杂原子如氮、氧、或硫，同时连接母体的点必须在具有共轭的π电子体系的环上的碳原子上。如下是芳基代表性实例，包括但不限于：如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“杂芳基”指具有一个到多个(优选为1、2、3个)杂原子的芳族杂环系，其可以是单环(单环的)或者稠合在一起或共价地连接的多环(二环的、三环的或多环的)，这里所指的杂原子包括氧、硫和氮。应当理解的是，当含有多个杂原子时，杂原子可以相同、可以部分相同，也可以完全不同。当杂芳基前被“元”数限定时，例如5元杂芳基指的是环原子个数为5个，5元杂芳基的实例包括(但不限于)：吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、恶唑、噻唑，6元杂芳基的实例包括(但不限于)吡啶、吡嗪、哒嗪、嘧啶。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环烷基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环。杂芳基代表性实例，包括但不限于：吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、恶唑、噻唑、吡啶、吡嗪、哒嗪、嘧啶。如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“烯基”是指直链或支链，具有至少一个碳-碳双键的碳链基团。当烯基前具有碳原子数限定(如C2-C10)时，指所述的烯基含有2-10个碳原子。例如，C2-C6烯基指含有2-6个碳原子烯基，包括乙烯基、丙烯基、1,2-丁烯基、2,3-丁烯基、丁二烯基、或类似基团。如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“炔基”是指具有至少一个碳-碳三键的脂肪族碳氢基团。所述的炔基可以是直链或支链的，或其组合。当炔基前具有碳原子数限定(如C2-C8炔基)时，指所述的炔基含有2-8个碳原子。例如，术语“C2-C6炔基”指具有2-6个碳原子的直链或支链炔基，包括乙炔基、丙炔基、异丙炔基、丁炔基、异丁炔基、仲丁炔基、叔丁炔基、或类似基团。如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语"氨基"表示-NH2。如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语"羟基"表示-OH。如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语"巯基"表示-SH。术语"前药"指：药物的前体，其为一种化合物，该化合物在给予患者后通过代谢过程经历化学转化，随后成为活性药理学物质。式IA和式IB化合物的示例性前药是酯、乙酰胺，和酰胺。术语“互变异构体”指：从分子的一个原子到同一分子的另一个原子的质子迁移。例如，当W1和W2是氧代基且R1是H时，本发明提供式I化合物的互变异构体，如下所示：在本说明书中，应解释为所有取代基为未取代的，除非在本文中明确描述为“取代的”。术语“取代”是指特定的基团上的一个或多个氢原子被特定的取代基所取代。特定的取代基为在前文中相应描述的取代基，或各实施例中所出现的取代基。除非特别说明，某个任意取代的基团可以在该基团的任何可取代的位点上具有一个选自特定组的取代基，所述的取代基在各个位置上可以是相同或不同的。在另一优选例中，所述的任一“取代”是指基团上的1-4个(优选为1、2、3或4个)氢原子各自独立地被选自下组的取代基所取代：羟基、氨基、巯基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、(R18)(R19)N-、(R18)(R19)N-(C1-C6烷基)-、C2-C4酯基、C2-C4酰氨基、C2-C4酰基、-S(O)2(C1-C4烷基)、或C3-C6环烷基、氨甲酰基，其中，R18、R19各自独立地为C1-C4烷基。活性成分如本文所用，“本发明化合物”和“本发明的式IA和式IB化合物”可互换使用，指具有式式IA和式IB的化合物，或其立体异构体、互变异构体，或其药学上可接受的盐，或其前药，或其水合物，或其溶剂合物。应理解，该术语还包括上述组分的混合物。除非特别说明，本发明中，所有出现的化合物均意在包括所有可能的光学异构体，如单一手性的化合物，或各种不同手性化合物的混合物(即外消旋体)。本发明的所有化合物之中，各手性碳原子可以任选地为R构型或S构型，或R构型和S构型的混合物。本发明化合物不仅对MNK具有抑制作用，对TRP家族中其它成员也有一定的抑制作用。术语“药学上可接受的盐”指本发明化合物与酸或碱所形成的适合用作药物的盐。药学上可接受的盐包括无机盐和有机盐。一类优选的盐是本发明化合物与酸形成的盐，适合形成盐的酸包括(但并不限于)：盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸、苯甲磺酸，苯磺酸等有机酸；以及天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸。一类优选的盐是本发明化合物与碱形成的金属盐，适合形成盐的碱包括(但并不限于)：氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸钠等无机碱、氨水、三乙胺、二乙胺等有机碱。本发明化合物可通过常规方法转化为其药学上可接受的盐，例如，可将相应的酸的溶液加入到上述化合物的溶液中，成盐完全后除去溶剂即得本发明所述化合物的相应的盐。化合物的通用合成方法本发明还提供了本发明化合物的制备方法。一种代表性的制备本发明化合物方法包括：本发明化合物采用传统合成方法合成，更具体地，采用如下所述的通用方法合成。对于本发明化合物的具体合成方案描述于如下实施例中。一般合成方法:方法1：化合物C由化合物A和化合物B经Suzuki偶联反应获得，化合物C的酯基在碱性条件下，例如在氢氧化钠，氢氧化钾，或氢氧化锂水溶液，或者水、醇、四氢呋喃混合溶液中，水解为化合物D。化合物D在酸作用下，例如在多聚磷酸、甲磺酸、或多聚磷酸-甲磺酸混酸溶液中，加热可得到关环化合物E。化合物E在氟试剂作用下，例如在二乙基氨基三氟化硫、或双(甲氧乙基)氨基三氟化硫作用下与醇反应可得化合物F。当式XII中,Y为NR17时，使化合物XI(Q是式IB中X的前体基团，如酯、亚烷基酯、-O-P、-S-P等，P为任选保护基)和化合物Xb(T是离去基团，例如卤素、-OTf、-OTs或-OMs)在布赫瓦尔德-哈特维希(Buchwald-Hartwig)条件下(例如钯催化剂，配体，碱，溶剂和热)反应，得到化合物XII。可选地，通过以下过程形成XII(Y是–NR17,-O-)：使化合物XI和化合物Xb(T是离去基团，例如卤素、-OTf、-OTs或-OMs)在铜介导的乌尔曼型条件下(例如碘化铜(I)，碱，溶剂和热)反应。通过以下过程形成IB(Q为酯基)：化合物XII在碱条件下形成酸中间体，酸中间体在包括以下任选条件下：多聚磷酸、三氟甲磺酸-多聚磷酸、POCl3、AlCl3，加热处理，如需要可经过进一步反应(如还原或脱保护等)获得化合物I。用途本发明还提供了利用本发明化合物来抑制MNK活性和/或治疗和/或预防与MNK活性或表达量相关的疾病或病症。优选地，所述的MNK包括(但不限于)：MNK1、MNK2，或其组合。在本发明中，术语“预防”表示预防疾病和/或它的附随症状的发作或者保护对象免于获得疾病的方法。本文中使用的"预防"还包括延迟疾病和/或它的附随症状的发作和降低对象的得病的风险。例如，所述预防是指在所述哺乳动物倾向于患上病症但尚未诊断患有该病症时，保护对象免于获得疾病。在本发明中，术语“治疗”指：减轻或根除疾病或与疾病相关的症状。在某些实施方式中，此类术语指：通过给予一种或多种预防或治疗剂至患有疾病的患者，使该疾病的扩散或恶化最小化。本发明的内容中，术语"治疗"也指：(ii)抑制该疾病或病症，即阻止其发展；(iii)减轻该疾病或病症，即，使该疾病或病症消退；或(iv)减轻由该疾病或病症所致的症状，即，减轻痛苦但不解决潜在的疾病或病症。本文中所用术语“疾病”和“病症”可互换使用，或可不同，其中具体的疾病或病症可不具有已知的致病物(从而病因尚不知晓)，因此其尚未被视作疾病而仅仅是作为不希望的病症或综合征，其中由临床医师或多或少地鉴定出了具体的一组症状。典型地，所述的与MNK活性或表达量相关的疾病或病症选自下组：结直肠癌，胃癌，肝癌，食管癌，甲状腺癌，肺癌，白血病，B细胞淋巴瘤，T细胞淋巴瘤，套细胞淋巴瘤，弥漫大B细胞淋巴瘤，霍奇金淋巴瘤，非霍奇金淋巴瘤，伯基特淋巴瘤，胰腺癌，黑色素瘤，多发性骨髓瘤，脑癌，CNS癌，肾癌，前列腺癌，卵巢癌、乳腺癌、不受控制的细胞生长、增殖和/或存活、不适宜的细胞免疫应答、不适宜的细胞炎症应答、白血病和骨髓增生异常综合征、恶性淋巴瘤、头颈部肿瘤、肺肿瘤和肺转移瘤、胸部肿瘤、非小细胞肺肿瘤和小细胞肺肿瘤、胃肠肿瘤、内分泌肿瘤、乳房和其他妇科肿瘤、泌尿系肿瘤、肾、膀胱和前列腺肿瘤、皮肤肿瘤、肉瘤、肿瘤转移、神经变性病症，或其组合。在另一优选例中，所述的神经变性病症为tau蛋白病，更优选阿尔茨海默病。组合物和施用方法本发明提供了一种用于抑制MNK活性和/或治疗和/或预防与MNK活性或表达量相关的疾病或病症组合物。所述的组合物包括(但并不限于)：药物组合物、食品组合物、膳食补充剂、饮料组合物等。典型地，所述的组合物为药物组合物，所述的药物组合物包括治疗有效量的如本发明所述的化合物，或其立体异构体、互变异构体，或其药学上可接受的盐，或其前药，或其水合物，或其溶剂合物；和任选的(ii)药学上可接受的载体或赋形剂。在本发明所述的组合物中，式I化合物的量为治疗有效量，其中“治疗有效量”是指对人和/或动物产生功能或活性的且可被人和/或动物所接受的量。本领域的普通技术人员应该理解，所述治疗有效量根据各种因素而变化，包括所用特定化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和作用时长、患者的年龄、体重、总体健康状况、性别、饮食、给予方式和时间、排泄速率、联合用药、具体疾病或病症的严重程度和接受治疗的对象。在本发明中，药物组合物的剂型包括(但不限于)口服制剂、注射剂、外用制剂。代表性的包括(但不限于)：片剂、注射剂、输液剂、膏剂、凝胶剂、溶液剂、微球、膜剂。术语“药学上可接受的载体或赋形剂”指的是：一种或多种相容性固体、半固体、液体或凝胶填料，它们适合于人体或动物使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”是指药物组合物中的各组分和药物的活性成分以及它们之间相互掺和，而不明显降低药效。应理解，在本发明中，所述的载体没有特别的限制，可选用本领域常用材料，或用常规方法制得，或从市场购买得到。药学可接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠等)、明胶、滑石粉、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油、等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如吐温)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、缓冲剂、螯合剂、增稠剂、pH调节剂、透皮促进剂、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、抑菌剂、无热原水等。代表性的，液体剂型除了活性药物成分外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例如，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂等药物制剂应与给药方式相匹配。本发明药剂还可与其他协同治疗剂一起使用(包括之前、之中或之后使用)。使用药物组合物或制剂时，是将安全有效量的药物施用于所需对象(如人或非人哺乳动物)，所述安全有效量通常至少约10微克/千克体重，而且在大多数情况下不超过约8毫克/千克体重，较佳地该剂量是约10微克/千克体重-约1毫克/千克体重。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。本发明的化合物，或其药学上可接受的盐，也可在一种或多种其它治疗剂的给予之前、同时或之后给予。此类联合治疗包括给予单一药物剂量制剂，其包含本发明化合物和一种或多种其它活性物质，以及在分开的药物剂量制剂中给予本发明化合物和各活性物质。例如，本发明化合物和其它活性物质可在单一口服剂量组合物(例如片剂或胶囊)中一起给予患者，或各物质在分开的口服剂量制剂中给予。使用单独的剂量制剂时，本发明的化合物和一种或多种其他活性剂可在基本相同时间(即同时)给予，或在单独的交错时间(即依次)给予；应理解组合疗法包括所有这些方案。在某些实施方式中，本文公开的化合物有用于抑制MNK活性和/或可用于在模型系统中分析MNK信号转导活性，和/或用于预防、治疗或减轻与涉及MNK的疾病、紊乱或病理性状况相关联的症状，优选是使人类痛苦的症状。能够抑制Mnk活性的化合物将有用于预防、治疗、减轻或减少如下事件中的症状或疾病进程：失控的细胞生长、增殖和/或存活、不当的细胞免疫反应，或不当的细胞炎性反应，或与失控的细胞生长、增殖和/或存活、不当的细胞免疫反应，或不当的细胞炎性反应相伴的疾病，尤其是其中该失控的细胞生长、增殖和/或存活、不当的细胞免疫反应，或不当的细胞炎性反应由MNK介导的情况，例如，血液肿瘤、实体瘤和/或其转移，包括白血病和骨髓增生异常综合征，瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症和恶性淋巴瘤，例如B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤和伯基特(Burkitts)淋巴瘤，头颈部肿瘤，包括脑肿瘤和脑转移，胸部肿瘤，包括非小细胞和小细胞肺肿瘤，胃肠肿瘤，内分泌肿瘤，乳腺和其它妇科肿瘤，泌尿系统肿瘤，包括肾、膀胱和前列腺肿瘤，皮肤肿瘤，和肉瘤，和/或其转移。此外，本发明化合物及其药物组合物是用于预防和/或治疗细胞因子相关疾病，例如炎性疾病、过敏，或与促炎性细胞因子相关联的其它病症的候选治疗剂。示例性的炎性疾病包括但不限于，慢性或急性炎症、关节炎症，例如慢性炎性关节炎、类风湿性关节炎、银屑病关节炎、骨关节炎、幼年型类风湿性关节炎、莱特尔综合征、类风湿性关节炎、风疹性关节炎、急性滑膜炎和痛风性关节炎；炎性皮肤疾病如晒伤、牛皮癣、红皮病性牛皮癣、脓疱性牛皮癣、湿疹、皮炎、急性或慢性移植物形成、特应性皮炎、接触性皮炎、荨麻疹和硬皮病；胃肠道炎症如炎性肠病、克罗恩病和相关病症、溃疡性结肠炎、结肠炎和憩室炎；肾炎、尿道炎、输卵管炎、卵巢炎、子宫内膜炎、脊柱炎、系统性红斑狼疮和相关疾病、多发性硬化、哮喘、脑膜炎、脊髓炎、脑脊髓炎、脑炎、静脉炎、血栓性静脉炎、呼吸系统疾病如哮喘、支气管炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、炎性肺病和成人呼吸窘迫综合征、和过敏性鼻炎；心内膜炎、骨髓炎、风湿热、风湿性心包炎、风湿性心内膜炎、风湿性心肌炎、风湿性二尖瓣病、风湿性主动脉瓣疾病、前列腺炎(prostatitis)、前列腺炎(prostatocystitis)、脊柱关节病、强直性脊柱炎、滑膜炎、腱鞘炎、肌炎、咽炎、风湿性多肌痛、肩腱炎或滑囊炎、痛风、假性痛风、血管炎、选自肉芽肿性甲状腺炎、淋巴细胞性甲状腺炎、浸润性纤维性甲状腺炎、急性甲状腺炎的甲状腺炎症性病症；桥本氏甲状腺炎、川崎病、雷诺现象、干燥综合征、神经炎症性疾病、脓毒症、结膜炎、角膜炎、虹膜睫状体炎、视神经炎、耳炎、淋巴腺炎、鼻咽炎、鼻窦炎、咽炎、扁桃体炎、喉炎、会厌炎、支气管炎、肺炎、口腔炎、龈炎。食管炎、胃炎、腹膜炎、肝炎、胆石病、胆囊、肾小球肾炎、良性肺炎、新月体性肾小球肾炎、胰腺炎、子宫内膜炎、子宫肌炎、子宫炎、子宫颈炎、子宫颈内膜炎、外宫颈炎、子宫旁炎、结核、阴道炎、外阴炎、硅肺病、肉状瘤病肺尘症、脓疮、炎性多关节病、银屑病关节病、肠纤维化、支气管扩张和肠病性关节病。尽管炎症是这些疾病的统一致病性病程，目前的疗法仅治疗所述疾病的症状而不治疗炎症的潜在病因。本发明的组合物有用于治疗和/或预防炎性疾病和相关并发症及紊乱。因此，某些实施方式涉及用于治疗有需要的哺乳动物中的MNK依赖性病症的方法，所述方法包括：给予有效量的上文所述的药物组合物(即，包含任何一种或多种式I化合物的药物组合物)至哺乳动物。如上所述，蛋白质合成的失调是人类癌症的常见事件。翻译控制的关键调节物是eIF4E，其活性是致瘤性的关键决定因素。因为eIF4E的活化涉及由MAP激酶相互作用性激酶(MNK)特异性作用的关键丝氨酸(Ser209)的磷酸化，MNK抑制剂是用于治疗细胞增生性疾病(例如，癌症)的合适的候选治疗剂。本文所述的组合物与方法可用于治疗包括实体肿瘤、淋巴瘤和白血病在内的多种癌症。可被治疗的癌症类型包括但不限于，乳腺、前列腺和结肠腺癌；所有形式的肺支气管癌；骨髓；黑素瘤；肝癌；神经母细胞瘤；乳头状瘤；胺前体摄取脱羧细胞瘤；迷芽瘤；分支瘤；恶性类癌综合征；类癌心脏病；和癌(例如Walker、基底细胞、基底鳞状细胞、Brown-Pearce、导管、Ehrlich瘤、Krebs2、默克细胞、粘液、非小细胞肺、燕麦细胞、乳头状细胞、硬癌、支气管、支气管源性、鳞状细胞和过渡细胞)。可被治疗的其它癌症类型包括：组织细胞疾病；急性和慢性白血病，骨髓和淋巴样/成淋巴细胞的，包括毛细胞白血病；恶性组织细胞增多症；霍奇金病；免疫增殖小瘤；霍奇金淋巴瘤；B细胞和T细胞非霍奇金淋巴瘤，包括弥漫性大B细胞和伯基特淋巴瘤；浆细胞瘤；网状内皮组织增殖；黑色素瘤；多发性骨髓瘤；软骨母细胞瘤；软骨瘤；软骨肉瘤；纤维瘤；纤维肉瘤；骨髓纤维化；巨细胞瘤；组织细胞瘤；脂肪瘤；脂肪肉瘤；间皮瘤；粘液瘤；粘液肉瘤；骨瘤；骨肉瘤；脊索瘤；颅咽管瘤；无性细胞瘤；错构瘤；间充质瘤；中肾瘤；肌肉瘤；成釉细胞瘤；牙骨质瘤；牙瘤；畸胎瘤；胸腺瘤；滋养细胞肿瘤。可采用本发明化合物治疗的其它癌症包括但不限于：腺瘤；胆管瘤；胆脂瘤；圆柱瘤；囊腺癌；囊腺瘤；粒层细胞肿瘤；两性母细胞瘤；肝细胞瘤；汗腺腺癌；胰岛细胞癌；睾丸间质(Leydig)细胞瘤；乳头状瘤；睾丸支持(Sertoli)细胞瘤；膜细胞瘤；平滑肌瘤；平滑肌肉瘤；成肌细胞瘤；肌瘤；肌肉瘤；横纹肌瘤；横纹肌肉瘤；室管膜瘤；神经节瘤；胶质瘤；成神经管细胞瘤；脑脊膜瘤；神经鞘瘤；神经母细胞瘤；神经上皮瘤；神经纤维瘤；神经瘤；副神经节瘤；非嗜铬性副神经节瘤。在一个实施方式中，本发明化合物是用于治疗如下癌症的候选治疗剂，例如，血管瘤；伴随嗜酸粒细胞增多的血管淋巴细胞增生；硬化性血管瘤；血管瘤病；血管球瘤；血管内皮瘤；血管瘤；血管外皮细胞瘤；血管肉瘤；淋巴管瘤；淋巴管肌瘤；淋巴管肉瘤；松果体瘤；癌肉瘤；软骨肉瘤；叶状囊肉瘤；纤维肉瘤；血管肉瘤；平滑肌肉瘤；白细胞肉瘤；脂肪肉瘤；淋巴管肉瘤；肌肉瘤；粘液肉瘤；卵巢癌；横纹肌肉瘤；肉瘤；赘生物；神经纤维瘤病；和宫颈非典型增生。在具体实施方式中，本发明提供了治疗如下病症的方法：结肠癌，结直肠癌，胃癌，甲状腺癌，肺癌，白血病，胰腺癌，黑素瘤，多发性骨髓瘤，脑癌，原发性和继发性CNS癌症，包括恶性神经胶质瘤和成胶质细胞瘤，肾癌，前列腺癌，包括去势抵抗性前列腺癌，卵巢癌或乳腺癌，包括三阴性，HER2阳性和激素受体阳性乳腺癌。根据所述方法，可给予已诊断患有细胞增生性疾病(例如癌症)的对象治疗有效量的至少一种式I化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。或者，可向已诊断患有癌症的对象给予包含至少一种式I化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐的药物组合物。在某些实施方式中，向患癌对象联合给予本发明的化合物和其它传统癌治疗物，例如，放疗或手术。放疗是本领域熟知的并且包括X射线治疗，例如伽马放射，和放射药物治疗。在某些实施方式中，本发明MNK抑制剂化合物与至少一种抗癌剂联用。抗癌剂包括化疗药物。化疗剂包括但不限于，染色质功能抑制剂、拓朴异构酶抑制剂、微管抑制性药物、DNA破坏剂、抗代谢剂(例如叶酸拮抗剂、嘧啶类似物、嘌呤类似物和糖修饰类似物)、DNA合成抑制剂、DNA相互作用剂(例如嵌入剂)，和DNA修复抑制剂。示例性的化疗剂包括但不限于下组：免疫检查点抑制剂，例如纳武利尤单抗、帕博利珠单抗、阿特珠单抗、度伐单抗、Avelumab、信迪利单抗、特瑞普利单抗依匹单抗；抗代谢物/抗癌剂，例如嘧啶类似物(5-氟尿嘧啶、氟尿苷、卡培他滨、吉西他滨和阿糖胞苷)和嘌呤类似物、叶酸拮抗剂和相关抑制剂(巯嘌呤、硫鸟嘌呤、喷司他丁和2-氯脱氧腺苷(克拉屈滨))；抗增殖剂/抗有丝分裂剂、包括天然产物如长春花生物碱(长春花碱、长春新碱和长春瑞滨)、微管干扰剂如紫杉烷(紫杉醇、多西他赛)、长春新碱、长春花碱、诺考达唑、埃坡霉素和长春瑞滨、表鬼臼毒素(依托泊苷、替尼泊苷)、DNA损伤剂(放线菌素、安吖啶、氨茴环霉素、博来霉素、白消安、喜树碱、卡铂、苯丁酸氮芥、顺铂、环磷酰胺、癌得星、更生霉素、柔红霉素、多柔比星、表柔比星、六甲蜜胺肟酸、异磷酰胺、美法仑、美洛欣、丝裂霉素、米托蒽醌、亚硝基脲、普卡霉素、丙卡巴肼、紫杉醇、泰索帝、替莫唑胺、替尼泊苷、三乙烯硫代磷酰胺和依托泊苷(VP16))；抗生素、例如、更生霉素(放线菌素D)、柔红霉素、多柔比星(阿霉素)、伊达比星、蒽环霉素、米托蒽醌、博莱霉素、光神霉素(米利霉素)和丝裂霉素；酶(L-天冬酰胺酶、其全身代谢L-天冬酰胺并剥夺不具有合成其自身天冬酰胺的能力的细胞)；抗血小板剂；抗增殖/抗有丝分裂烷基化剂、例如氮芥(甲氮芥、环磷酰胺和类似物、美法仑、苯丁酸氮芥)、乙烯亚胺和甲基三聚氰胺(六甲蜜胺和噻替派)、烷基磺酸盐-白消安、亚硝基脲(卡莫司汀(BCNU)和类似物、链脲霉素)、曲马沙明(DTIC)；抗增殖性/抗有丝分裂的抗代谢物、例如、叶酸类似物(甲氨蝶呤)；铂配位络合物(顺铂、卡铂)、丙卡巴肼、羟基脲、米托坦、氨鲁米特；激素，激素类似物(雌激素、他莫昔芬、戈舍瑞林、比卡鲁胺、尼鲁米特)和芳香酶抑制剂(来曲唑、阿那曲唑)；抗凝血剂(肝素、合成的肝素盐和其他凝血酶抑制剂)；纤维蛋白溶解剂(例如组织纤溶酶原激活剂、链激酶和尿激酶)、阿司匹林、双嘧达莫、噻氯匹定、氯吡格雷、阿昔单抗；抗霉剂；抗分泌剂(breveldin)；免疫抑制剂(环孢菌素、他克莫司(FK-506)、西罗莫司(雷帕霉素)、硫唑嘌呤、霉酚酸吗乙酯)；抗血管生成化合物(TNP470、染料木素)和生长因子抑制剂(血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂、成纤维细胞生长因子(FGF)抑制剂)；血管紧张素受体阻断剂；一氧化氮供体；反义寡核苷酸；抗体(曲妥珠单抗、利妥昔单抗)；嵌合抗原受体；细胞周期抑制剂和分化诱导剂(维甲酸)；mTOR抑制剂、拓扑异构酶抑制剂(多柔比星(阿霉素)、安吖啶、喜树碱、柔红霉素、更生霉素、依诺比星、表柔比星、依托泊苷、伊达比星、伊立替康(CPT-11)和泼尼松龙、拓扑替康、伊立替康)；皮质类固醇(可的松、地塞米松、氢化可的松、甲泼尼龙、泼尼松和泼尼松龙)；生长因子信号转导激酶抑制剂；线粒体功能障碍诱导剂、毒素例如霍乱毒素、蓖麻毒素、假单胞菌外毒素、百日咳博德特氏菌腺苷酸环化酶毒素或白喉毒素，和胱天蛋白酶激活剂；和，染色质破坏剂。在某些实施方式中，本发明的MNK抑制剂在相同或分开的制剂中与作为联合治疗方案的部分的其它试剂同时使用，或与所述其它试剂依次使用。式I的MNK抑制剂，包括其对应的盐和式I化合物的药物组合物作为治疗剂也能有效治疗或预防细胞因子介导的病症，例如，患者(优选人类)中的炎症。在一个实施方式中，本发明的化合物或组合物特别有利于治疗或预防选自下组的疾病：慢性或急性炎症、慢性炎性关节炎、类风湿性关节炎、牛皮癣、COPD、炎性肠病、败血性休克、克罗恩病、溃疡性结肠炎、多发性硬化和哮喘。本发明的化合物及其对应的盐和药学上可接受的组合物是用于治疗脑相关病症(包括但不限于孤独症，脆性X综合症，帕金森病和阿尔茨海默病)的候选治疗剂。治疗可通过给予需要治疗的对象式I的化合物，其药学上可接受的盐形式，或式I的化合物或其盐的药学上可接受的组合物来实现。在本发明的另一个方面中，提供本发明化合物或本发明化合物的药学上可接受的制剂作为MNK活性抑制剂。所述抑制通过将表达MNK的细胞与化合物或药学上可接受的制剂接触来实现，以降低或抑制MNK活性，以提供针对有需要的哺乳动物中MNK依赖性病症的治疗功效。式I化合物或式I化合物的组合物的治疗有效剂量的一般范围将是：约1-2000mg/天、约10-约1000mg/天、约10-约500mg/天、约10-约250mg/天、约10-约100mg/天，或约10-约50mg/天。治疗有效剂量将以一个或多个剂量给予。然而，应理解，对于任何特定患者的本发明化合物的特定剂量将取决于多种因素，例如，待治疗的患者的年龄、性别、体重、一般健康状况、饮食、个体响应，给予时间、待治疗的疾病的严重性、施用的具体化合物的活性、剂型、应用模式和伴用药物。给定情况的治疗有效量能用常规实验测定，并在临床医生或医师能力和判断范围内。在任何情况中，所述化合物或组合物将基于患者的个体情况以多个剂量给予并以允许递送治疗有效量的方式给予。下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。实施例实施例1：化合物1的合成中间体A的合成步骤A:4-氨基-6-氯烟酸乙酯室温在4,6-二氯烟酸乙酯(60克，0.27毫摩尔)的二甲基亚砜(500毫升)溶液中加入2,4-二甲氧基苯甲胺(47.8克，0.287毫摩尔)和三乙胺(55克，0.545毫摩尔)，将反应混合物在室温下搅拌过夜。向反应中加入水(2升)，用乙酸乙酯(2.5升x2)萃取，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到6-氯-4-(2,4-二甲氧基苄基氨基)烟酸乙酯。将产物溶解于三氟乙酸(300毫升)中，将反应混合物在50℃加热搅拌过夜。将混合物冷却至室温浓缩至干。用乙酸乙酯(2.5升x2)萃取混合物，用盐水(500毫升)洗涤，随后用饱和碳酸氢钠水溶液(500毫升)洗涤有机相，有机相干燥后真空浓缩。得到的产物通过硅胶柱层析法(石油/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到4-氨基-6-氯烟酸乙酯(34克，收率62.3％)为白色固体。。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.69(s,1H),6.57(s,1H),4.36(q,J＝7.1Hz,2H),1.40(t,J＝7.1Hz,3H).步骤B:4-氨基-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸乙酯室温下将4-氨基-6-氯烟酸乙酯(2克，0.01毫摩尔)溶于N-甲基吡咯烷酮(7.5毫升)溶液中，依次加入2,4-二甲氧基苯甲胺(2.5克，0.015毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(3.87克，0.03毫摩尔)。在室温氮气保护下，将反应混合物在150℃微波中加热8h。将混合物冷却至室温，加入水(50毫升)，用乙酸乙酯(200毫升)萃取。用盐水洗涤有机相，经无水硫酸钠干燥后真空浓缩。得到的产物通过硅胶柱层析法(石油/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到所需化合物(1.5克，收率45.4％)作为黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO)δ8.34(s,1H),7.04(d,J＝8.3Hz,1H),6.91(t,J＝6.1Hz,1H),6.77(s,2H),6.54(d,J＝2.3Hz,1H),6.45(dd,J＝8.3,2.4Hz,1H),5.56(s,1H),4.26(d,J＝5.9Hz,2H),4.18(q,J＝7.1Hz,2H),3.80(s,3H),3.73(s,3H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H).中间体B的合成步骤A:5-溴-2-羧酸甲酯-3-甲基吡啶-1-氧化物将5-溴-3-甲基吡啶羧酸甲酯(4.0克,17.4毫摩尔)溶于100毫升二氯甲烷。反应液冷却到0℃，加入过氧化尿(4.91克,52.2毫摩尔)，然后0℃滴加三氟乙酸酐(10.96克,52.2毫摩尔)。反应液室温搅拌过夜，反应液倒入冰水中，用磷酸氢二钾饱和溶液调PH值到7。混合液用二氯甲烷(100毫升)萃取两次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到产品(4.0克,收率93.4％)。LC-MS(ESI+):m/z246.24248.24(M+H)+.步骤B:5-溴-3-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-2-羧酸甲酯在5-溴-2-羧酸甲酯-3-甲基吡啶-1-氧化物(3.6克，14.6毫摩尔)的二甲基甲酰胺(100毫升)搅拌溶液中，在0℃滴加三氟乙酸酐(30.7克，146毫摩尔)。反应混合物的温度升高到50℃，继续搅拌3小时。氧化完成后，反应液降到室温，用饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，并用二氯甲烷(100毫升×2)萃取。将有机层分离、组合，用硫酸镁干燥，并浓缩为所需化合物(1.21克，33.3％收率)为白色固体。LC-MS(ESI+):m/z246.24(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.87(s,1H),8.01(s,1H),3.83(s,3H),2.29(s,3H).步骤C:5-溴-3-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-2-甲酰胺在5-溴-3-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-2-羧酸甲酯(2.7克,10.98毫摩尔)的甲醇(10毫升)搅拌溶液中，加入氨水(100毫升)于250毫升的密封管中。将反应瓶密闭，反应混合物搅拌并在63℃加热5小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝2/1，硅胶板)显示原料完全消耗。反应混合物在真空中浓缩。残余物用硅胶柱层析纯化，用石油醚/乙酸乙酯＝1/1洗脱，得到所需化合物(2.1克，83.2％收率)为白色固体。LC-MS(ESI+):m/z231.3,233.23(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.87(s,1H),7.88(s,2H),7.77(s,1H),2.15(s,3H).步骤D:6’-溴-8'-甲基-2'H-螺环[环己烷-1,3'-咪唑并[1,5-a]吡啶]-1’，5’-二酮(中间体B)室温在5-溴-3-甲基-6-氧-1,6-二氢吡啶-2-甲酰胺(2.1克,9.13毫摩尔)的1,4-二氧六环(50毫升)溶液中加入环己酮(8.95克,91.3毫摩尔)和浓硫酸(89.5毫克,0.913毫摩尔),反应混合物在100℃下加热8h。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)硅胶板显示原料完全消耗。反应混合物在减压下浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化，用石油醚/乙酸乙酯＝1/1洗脱，得到所需化合物中间体B(1.7克，60.1％收率)为白色固体。LC-MS(ESI+):m/z311.3313.3(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.38(s,1H),8.02(s,1H),2.91(td,J＝13.4,4.3Hz,2H),2.38(s,3H),1.65(dt,J＝27.4,13.1Hz,5H),1.43(d,J＝12.0Hz,2H),1.28–1.15(m,1H).化合物1的合成步骤A:6-((3,4-二甲基苄基)氨基)-4-((8'-甲基-1',5'-二氧杂-1',5'-二氢-2'H-螺[环己烷-1,3'-咪唑[1,5-a]吡啶]-6'-基)氨基)烟酸乙酯)室温下氮气保护下，在6'-溴-8'-甲基-2'H-螺[环己烷-1,3'-咪唑[1,5-a]吡啶]-1',5'-二酮(1.32克,4.26毫摩尔)的1,4-二氧六环(70毫升)溶液中加入4-氨基-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸乙酯(1.69克,5.11毫摩尔),Pd2(dba)3(585.3毫克,0.639毫摩尔),x-phos(305毫克,0.639毫摩尔),碳酸铯(4.19克,12.8毫摩尔)。反应液在氮气保护下，在105℃加热12小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝2/1，硅胶板)表明原料完全消耗。混合物冷却到室温，用乙酸乙酯(150毫升×2)萃取混合物。混合有机层用盐水(50毫升×3)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。产物用色谱柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到所需化合物(850.0毫克，收率35.6％)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z562.3(M+H)+.步骤B:6-((3,4-二甲基苄基)氨基)-4-((8'-甲基-1',5'-二氧杂-1',5'-二氢-2'H-螺[环己烷-1,3'-咪唑[1,5-a]吡啶]-6'-基)氨基)烟酸)6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)-4-((8'-甲基-1',5'-二氧杂-1',5'-二氢-2'H-螺[环己烷-1,3'-咪唑[1,5-a]吡啶]-6'-基)氨基)烟酸乙酯)(850毫克,1.52毫摩尔)溶于四氢呋喃(200毫升)和甲醇(100毫升)的混合溶液中，加入氢氧化锂(191毫克，4.55毫摩尔)，去离子水(2毫升)。反应在40℃下加热12小时。TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1，硅胶板)表明原料完全消耗。混合物冷却到室温，余物用乙醚(50毫升)洗涤。用1M盐酸水溶液将水层酸化至pH＝6。用乙酸乙酯(100毫升×2)萃取混合物。合并的有机层用盐水(50毫升×3)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(780毫克，粗)为灰色固体。LC-MS(ESI+):m/z534.3(M+H)+.步骤C:8'-氨基-12'-甲基-2'H-螺[环己烷-1,3'-咪唑[1',5':1,6]吡啶并[3,4-b][1,6]萘啶]-1',5',11'(6'H)-三酮(化合物C)将6-((3，4-二甲基苄基)氨基)-4-((8'-甲基-1'，5'-二氧杂-1'，5'-二氢-2'H-螺[环己烷-1，3'-咪唑[1，5-a]吡啶]-6'-基)氨基)烟酸(700毫克，1.313毫摩尔，粗品)和多聚磷酸(10克)的混合物在130℃下加热12小时。TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1，硅胶板)表明原料完全消耗。混合物冷却到室温然后将混合物倒入冰水中。水层先用乙醚(50毫升)洗涤，在用1M氢氧化钠水碱化至pH＝7.5，用乙酸乙酯(150毫升×2)萃取，用盐水(50毫升x3)洗涤组合有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到标题化合物(291毫克，61.7％，粗品)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z366.2(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.42(s,1H),10.08(s,1H),8.73(s,1H),6.64(s,2H),6.55(s,1H),2.90(s,3H),1.93(dd,J＝24.7,12.4Hz,1H),1.80–1.53(m,6H),1.44(d,J＝12.4Hz,3H).步骤D:8-氨基11’-甲氧基-甲基-1，12氢螺[环1,3-咪唑并[1，5’：1.6]吡啶并[3,4-b][16]萘啶]1′，5′-二酮(2氢)三氟乙酸盐(化合物1)室温下在封管中，向8’-氨基-12’-甲基-1’氢-螺环[环己烷-1,3’-咪唑[1’，5’：1,6]吡啶[3,4-b][1,6]萘啶]-1’，5’，11’(2’氢，6’氢)-三酮(40毫克,0.11毫摩尔)的二氯甲烷(1毫升)溶液里加入二乙基氨基三氟化硫(121毫克,0.55毫摩尔)。反应在50摄氏度下加热搅拌16小时。反应液降到室温，加入甲醇(5毫升)，搅拌5分钟。将该混合液旋干后用反向中压制备纯化(甲醇/水/0.1％TFA)得到产品(5毫克，12％收率)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z380.2(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.12(s,1H),10.30(s,1H),9.06(s,1H),8.31(s,2H),7.18(s,1H),3.91(s,3H),3.01–2.89(m,5H),1.82–1.61(m,5H),1.52(d,J＝11.4Hz,2H),1.26–1.22(m,1H).实施例2：化合物2的合成合成路线:步骤A:8’-氨基-12'-甲基-6'，11’-二氢-2'H-螺环[环己烷-1,3'-咪唑[1’，5’：1,6]吡啶并[3，4-B][1,6]萘啶]-1’，5’-二酮盐酸盐(化合物D)在250毫升密封管中，室温往8'-氨基-12'-甲基-2'H-螺[环己烷-1,3'-咪唑[1',5':1,6]吡啶并[3,4-b][1,6]萘啶]-1',5',11'(6'H)-三酮(250毫克,0.685毫摩尔)和NH4OH(50毫升)中的混合溶液中添加锌粉(448.1毫克，6.85毫摩尔)。将反应物在105℃搅拌12小时。TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1，硅胶板)表明原料完全消耗。将反应混合物冷却至室温。真空浓缩至干。将混合物溶解于1N盐酸水溶液(30ml)，然后用二氯甲烷和异丙醇的混合溶剂萃取(二氯甲烷和异丙醇＝3/1，100毫升x5)，用盐水洗涤有机相，干燥过滤并真空浓缩。得到的浓缩物通过反相柱层析法(乙腈/水)纯化，得到化合物D(108.3毫克，45.04％产率)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z352.0(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.33(s,1H),10.14(s,1H),9.97(s,1H),7.63(s,1H),7.37(s,2H),6.46(s,1H),3.88(s,2H),3.03–2.92(m,2H),2.39(s,3H),1.79–1.59(m,5H),1.43(d,J＝12.0Hz,2H),1.27–1.14(m,1H).步骤B:N-(12'-甲基-1'，5'-二氧代-1'，5'-二氢-2'H-螺[环己烷-1,3'-二氢咪唑并[1'，5'：1,6]吡啶并并[3,4-b][1,6]萘啶]-8'-基)甲磺酰胺(化合物2)常温下，向封管中加入8'-氨基12'-甲基-6'，11'-二氢-2'H-螺[环己烷-1,3'-二氢咪唑并[1'，5'：1,6]吡啶并[3,4-B][1,6]萘啶]-1'，5'-二酮(10毫克,0.028毫摩尔)和甲磺酸酐(500毫克)，然后在100℃下加热16小时。LC-MS表明原料已完全消耗。将反应混合物冷却至室温，饱和碳酸钠调节pH＝8.0，然后用混合溶液二氯甲烷/异丙醇萃取(3/1,20毫升×4)。萃取液合并,干燥并真空浓缩.将粗品溶于甲醇,加入1滴甲醇盐酸溶液,形成红褐色固体。将固体过滤并干燥，得到所需化合物(1.7毫克，14.4％收率)为红褐色固体。LC-MS(ESI+):m/z428.0(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.13(s,1H),10.36(s,1H),9.60(s,1H),9.29(s,1H),7.64(s,1H),3.42(s,3H),3.02-2.95(m,2H),2.81(s,3H),1.80-1.66(m,5H),1.54(d,2H),1.33-1.22(m,1H),实施例3：化合物3的合成合成路线:步骤A:4-溴-2-(溴甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯室温下向4-溴-2,6-二甲基苯甲酸甲酯(7.0克,28.9豪摩尔)的四氯化碳溶液中加入N-溴代琥珀酰胺(5.14克,28.9豪摩尔)和过氧苯甲酰(140豪克,0.579豪摩尔)。将反应液回流16小时。TLC监测反应完成后，将混合物冷却至室温，过滤并用四氯化碳洗涤。将滤液减压浓缩至干，得到浅黄色固体形式的产物(9.2克,98％收率)。LC-MS(ESI+):m/z323.0(M+H)+。步骤B:5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮在0℃向4-溴-2-(溴甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯(18克,55.7豪摩尔)的二甲基甲酰胺(80mL)溶液中加入二异丙基乙胺(21.6克,167豪摩尔)和4-甲氧基苄基胺(11.4克,83.6豪摩尔)。将反应液在室温下搅拌16小时。TLC监测反应完成后，加入水(150mL)并将混合物用乙酸乙酯(200mL×2)萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用石油醚中/乙酸乙酯洗脱。将所需馏分浓缩，真空干燥后得到白色固体形式的产物(5.5克,51.3％收率)。LC-MS(ESI+):m/z346.0(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ7.33(d,J＝12.8Hz,2H),7.22(d,J＝8.7Hz,2H),6.89–6.83(m,2H),4.68(s,2H),4.16(s,2H),3.79(s,3H),2.73(s,3H).步骤C:6'-溴-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮在0℃向5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(2.4克,3.96豪摩尔)的二甲基甲酰胺(15mL)溶液中加入氢化钠(695豪克,17.4豪摩尔)。将反应液在室温下搅拌10分钟。然后加入1,5-二溴戊烷(2.06克,9.04豪摩尔)并将反应液在室温下搅拌4小时。TLC监测反应完成后，加水淬灭反应，将混合物用乙酸乙酯(100mLx2)萃取。将有机层合并，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用石油醚/乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空下浓缩至干，得到白色固体形式的产物(900豪克,31.3％收率)。LC-MS(ESI+):m/z414.0(M+H)+。步骤D:6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)-4-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧杂螺环[环己烷-1,1'-异吲哚]-6'-基)氨基)烟酸在氮气保护下将原料6’-溴-2’-(4-甲氧基苄基)-4’-甲基螺环[环己烷-1,1’-异吲哚]-3’-酮(900毫克，2.17毫摩尔)，原料4-氨基-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸乙酯(648毫克,1.96毫摩尔),Pd2(dba)3(100毫克,0.11毫摩尔),XantPhos(128毫克,0.22毫摩尔)和碳酸铯(1.42克,4.34毫摩尔)混合于无水1，4-二氧六环(10毫升)中。反应混合物真空置换氮气3次，在氮气保护下，微波加热2.5小时。LC-MS检测反应，显示原料反应完全，生成产物。将反应液冷却到室温，然后倒入水(30毫升)中，用乙酸乙酯萃取(30毫升x3)。萃取液合并后用无水硫酸钠干燥，旋干。粗产品经过硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝1:1)，得到产物(320毫克,23％收率)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z637.2(M+H)+.步骤E:7’-氨基-11’-甲基螺环[环己烷-1,3’-异吲哚[5,6-b][1,6]萘啶]-1’，10’(2’氢，5’氢)-二酮将原料6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)-4-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧杂螺环[环己烷-1,1'-异吲哚]-6'-基)氨基)烟酸(320毫克,0.55毫摩尔)混合在多聚磷酸/三氟甲磺酸(1/5,3毫升)中。反应加热到130摄氏度并搅拌18小时。LC-MS检测反应，显示转化完全。反应液冷却到室温，并加入冰水(10毫升)中，然后将混合液用饱和碳酸钠溶液(20毫升)碱化到pH＝8.0。用二氯甲烷/异丙醇萃取(3/1,20毫升×4)。萃取液合并，用无水硫酸钠干燥后旋干，得到产物(200豪克,粗品)为棕色固体。LC-MS(ESI+):m/z349.2(M+H)+.步骤F:7’-氨基-10’-羟基-11’-甲基-5’，10’-二氢螺环[环己烷-1,3’-异吲哚[5,6-b][1,6]萘啶]-1’(2’氢)-酮(化合物3)室温在7’-氨基-11’-甲基螺环[环己烷-1,3’-异吲哚[5,6-b][1,6]萘啶]-1’，10’(2’氢，5’氢)-二酮(50毫克，0.144毫摩尔)的醋酸溶液中(50毫升)加入锌粉(94.96毫克，1.44毫摩尔)，反应混合物在100℃下加热16小时。LC-MS显示原料完全消耗。将反应混合物冷却至室温，过滤并将滤液真空浓缩。粗产品先通过反相柱层析法纯化，然后再经过TLC板纯化，得到呈黄色固体的所需产物(1.8豪克，3.6％产率)。LC-MS(ESI+):m/z351.0(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.01(s,1H),9.99(s,1H),9.13(m,3H),8.74(s,1H),7.39(s,1H),4.26(s,1H),3.95(d,J＝3.2Hz,2H),3.24(s,3H),1.84–1.71(m,5H),1.42(dd,J＝16.7,6.1Hz,3H).实施例4：化合物4的合成合成路线:步骤A:7’-氨基-11’-甲基-5’，10’-二氢螺环[环己烷-1,3’-异吲哚[5,6-b][1,6]萘啶]-1’(2’氢)-酮盐酸盐(化合物4)氮气保护下将原料7’-氨基-11’-甲基螺环[环己烷-1,3’-异吲哚[5,6-b][1,6]萘啶]-1’，10’(2’氢，5’氢)-二酮(60毫克，粗品)溶于四氢呋喃(1毫升)，室温氮气保护下加入硼烷-四氢呋喃溶液(1摩尔/升,5毫升)。反应在室温搅拌1小时。LCMS检测反应，显示原料消失。反应液用稀盐酸(1摩尔/升，3毫升)淬灭。旋干后先用反相中压制备纯化(甲醇/水溶液)，然后用制备版(二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得到产物(4.0毫克,7％收率)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z335.2(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.47(s,1H),8.71(s,1H),7.61(s,1H),6.66(s,1H),6.04(s,2H),5.88(s,1H),3.82(s,2H),2.53(s,3H),2.07–1.94(m,1H),1.73–1.68(m,3H),1.41–1.22(m,6H).实施例5：化合物5的合成合成路线:步骤A:(E)N，N-二甲基-N’-(2-甲基-1，5-二氧代-1，5-二氢-2’-螺环环己烷[-3-咪唑并[1，5－6〕吡啶并[3,4-b][1.68)]的萘啶基)甲亚胺盐酸盐(化合物5)室温将原料8’-氨基-12’-甲基-6’，11’-二氢-1’H-螺环[环己烷-1,3’-咪唑[1’，5’：1,6]吡啶[3,4-b][1,6]环烷]-1’，5’(2’氢)-二酮(500毫克,1.42毫摩尔)加入N-N二甲基甲酰胺(2毫升)和1,1-二甲氧基-N，N-二甲基甲酰胺(3毫升)中。反应加热到90摄氏度并搅拌16小时。LCMS检测反应完成。将反应冷却到室温，往反应液中加入氯化氢的甲醇溶液(4摩尔/升，5毫升)，将混合物浓缩干。然后将得到的粗品反向中压纯化(甲醇/水溶液)得化合物5(200毫克,34％收率)为棕色固体。LC-MS(ESI+):m/z405.2(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.40(s,1H),9.69(s,1H),9.36(d,J＝5.8Hz,2H),7.98(s,1H),3.52(s,3H),3.39(s,3H),3.00(dd,J＝13.5,4.3Hz,2H),2.81(s,3H),1.80–1.67(m,5H),1.56(d,J＝12.0Hz,2H),1.28(d,J＝13.9Hz,1H).实施例6：化合物6的合成合成路线:步骤A:6'-溴-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环戊烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮在0℃向5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异-1-酮(3.0克,8.7豪摩尔)的N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液中加入氢化钠(1.043克,43.5豪摩尔)。将反应液在室温下搅拌10分钟。然后加入1,5-二碘戊烷(3.493克,11.3豪摩尔)，并将反应液在室温下搅拌4小时。TLC监测反应完成后，加饱和氯化铵溶液淬灭反应，将混合物用乙酸乙酯(100mLx2)萃取。将有机层合并，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)，得到油状形式的产物(1.97豪克,收率56.8％)。LC-MS(ESI+):m/z400.1(M+H)+.步骤B:6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)-4-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环戊烷-1,1'-异吲哚]-6'-基)氨基)烟酸在氮气保护下将原料6'-溴-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环戊烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(1.85毫克，4.635毫摩尔)，原料4-氨基-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸乙酯(1.693毫克,5.099毫摩尔),Pd2(dba)3(637毫克,0.695毫摩尔),XantPhos(804.6毫克,1.39毫摩尔)，叔丁醇钠(1.782克,18.55毫摩尔)和三叔丁基苯酚(1.338克,5.10毫摩尔)混合于无水1，4-二氧六环(30毫升)中。反应混合物真空置换氮气3次，在氮气保护下，加热到100摄氏度，反应16小时。LC-MS检测反应，显示原料反应完全，生成产物。将反应液冷却到室温，加入甲醇(100毫升)，搅拌5分钟。过滤混合物，滤饼用甲醇(50毫升)洗涤，将滤液真空浓缩得到粗产品。粗产品通过反相柱色谱(甲醇/水)纯化，得到产物(1.5克，收率51.91％)，为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z623.4(M+H)+.步骤C:7'-氨基11'-甲基螺[环戊烷-1,3'-异吲哚并[5,6-B][1,6]萘啶]-1'，10'(2'氢，5'氢)-二酮将原料6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)-4-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环戊烷-1,1'-异吲哚]-6'-基)氨基)烟酸(900毫克,1.45毫摩尔)混合在多聚磷酸/三氟甲磺酸(1/5,10毫升)中。反应加热到130摄氏度并搅拌18小时。LC-MS检测反应，显示转化完全。反应液冷却到室温，并加入冰水(10毫升)中，然后将混合液用饱和碳酸钠溶液碱化到pH＝8.0。用二氯甲烷/异丙醇萃取(3/1,50毫升×4)。萃取液合并，用无水硫酸钠干燥后旋干，得到产物(880豪克,粗品)为棕色固体。LC-MS(ESI+):m/z335.0(M+H)+.步骤D:7'-氨基11'-甲基-5'，10'-二氢螺[环戊烷-1,3'-异吲哚并[5,6-B][1,6]萘啶]-1'(2'氢)-酮盐酸(NSP-1028,V1070-148)氮气保护下将原料7'-氨基-11'-甲基螺[环戊烷-1,3'-异吲哚并[5,6-b][1,6]萘啶]-1'，10'(2'H，5'H)-二酮(360毫克，粗品)溶于四氢呋喃(1毫升)，室温氮气保护下加入硼烷-四氢呋喃溶液(1摩尔/升,10毫升)。反应在室温搅拌1小时。LCMS检测反应，显示原料消失。反应液用稀盐酸(1摩尔/升，3毫升)在0℃下淬灭。旋干后先用反相柱色谱(甲醇/水)纯化，然后用制备版(乙腈/水)纯化得到产物(2.6毫克,收率0.8％)为淡红色的固体。LC-MS(ESI+):m/z321.0(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.34(s,1H),10.29(s,1H),8.59(s,1H),7.66(s,1H),7.29(s,2H),6.74(s,1H),6.05(s,1H),3.88(s,2H),2.53(s,3H),1.94–1.82(m,6H),1.75(s,2H).实施例7：化合物7的合成合成路线:步骤A:6－溴－3，3－二乙基－8－甲基－2，二氢咪唑[1,5-a]吡啶]1.5-二酮室温在封管中，在5-溴-3-甲基-6-氧-1,6-二氢吡啶-2-甲酰胺(2.0克,8.69毫摩尔)的1,4-二氧六环(5毫升)溶液中加入3-戊酮(3.7克,43.4毫摩尔)和浓硫酸(127毫克,1.3毫摩尔),将反应瓶密封，反应混合物在100℃下加热16小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)硅胶板显示原料完全消耗。反应混合物在减压下浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化，用石油醚/乙酸乙酯＝1/1洗脱，得到所需化合物(2.3克，88.8％收率)为白色固体。LC-MS(ESI+):m/z299.0(M+H)+.步骤B:4-((3,3-二乙基-8-甲基-1,5-二氧代-1,2,3,5-四氢咪唑[1,5-a]吡啶-6-基)氨基)-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸乙酯将4-氨基-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸乙酯(2.7克,8.12毫摩尔),6-溴-3,3-二乙基-8-甲基-2,3-二氢咪唑[1,5-a]吡啶-1,5-二酮(2.2克,7.383毫摩尔)，Pd2(dba)3(1.014克,1.107毫摩尔),XantPhos(574.1豪克,1.107毫摩尔)和碳酸铯(7.265克,22.149毫摩尔)混合于1,4-二氧六环(100毫升)中。反应混合物用氮气置换4次。反应液在氮气保护下，加热回流16小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1，硅胶板)表明原料完全消耗。反应液冷却到室温，将混合物倒入水中，然后用乙酸乙酯(150毫升x2)萃取，用盐水(50mlx3)洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。粗产品通过反相柱层析法(乙腈/水)纯化，得到所需化合物(1.9g，46.9％产率)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z550.4(M+H)+.步骤C:4-((3,3-二乙基-8-甲基-1,5-二氧代-1,2,3,5-四氢咪唑[1,5-a]吡啶-6-基)氨基)-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸室温下将4-((3,3-二乙基-8-甲基-1,5-二氧代-1,2,3,5-四氢咪唑[1,5-a]吡啶-6-基)氨基)-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸乙酯(1.9克,3.461毫摩尔)混合于四氢呋喃(50毫升)中，加入一水合氢氧化锂(872豪克，20.77毫摩尔)，水(50毫升)。反应在66℃下加热搅拌16小时。TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1，硅胶板)表明原料完全消耗。反应液冷却到室温，用乙醚洗涤水相，然后用1N稀盐酸调节水相pH到4.0。有黄色固体析出，过滤，将固体收集并用真空干燥，得到目标化合物(1.6克，收率88.73％)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z522.2(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),9.34(s,1H),8.49(s,1H),7.41(s,1H),7.28–7.10(m,3H),6.60(d,J＝2.3Hz,1H),6.51(dd,J＝8.3,2.3Hz,1H),4.44(d,J＝4.2Hz,2H),3.79(s,3H),3.75(s,3H),2.60–2.53(m,2H),2.42(s,3H),1.95–1.80(m,2H),0.58(t,J＝7.3Hz,6H).步骤D:8-氨基-3,3-二乙基-12-甲基-2,3-二氢咪唑[1'，5'：1,6]吡啶[3,4-b][1,6]萘并吡啶-1,5,11(6氢)-三酮在30度，将4-((3,3-二乙基-8-甲基-1,5-二氧代-1,2,3,5-四氢咪唑[1,5-a]吡啶-6-基)氨基)-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸(1.6克，3.071毫摩尔)溶解于环丁砜(20毫升)中，然后往混合溶液中加入多聚磷酸(13.2克)。反应混合物在135℃下加热搅拌16小时。TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1，硅胶板)表明原料完全消耗。混合物冷却到室温，然后将混合物倒入冰水中，用饱和碳酸钠溶液调节到pH＝8.0，然后用二氯甲烷和异丙醇的混合溶剂萃取(二氯甲烷/异丙醇＝3/1，100mLx4)，合并萃取液，用无水硫酸钠干燥，过滤，用旋转蒸发仪浓缩至干,得到目标化合物(751豪克，收率69.3％)为黄绿色固体LC-MS(ESI+):m/z354.2(M+H)+.步骤E:8-氨基-3，3-二乙基，12-甲基-2,3,6,11-四氢咪唑并[1，5－6〕吡啶并[3,4-b]吡啶[16]1,5-二酮盐酸盐(化合物7)室温下将8-氨基-3,3-二乙基-12-甲基-2,3-二氢咪唑[1'，5'：1,6]吡啶[3,4-b][1,6]萘并吡啶-1,5,11(6氢)-三酮(100豪克,0.283毫摩尔)和硼烷(1N的四氢呋喃溶液，5毫升)的混合溶液，加热到55℃，并搅拌0.5小时。LC-MS检测反应，大约有50％原料没有反应。将反应混合液冷却到室温。加入稀盐酸水溶液(3N,3毫升)淬灭反应，并搅拌10分钟。将混合物浓缩至干，将粗产品用制备色谱(乙腈/水)纯化，得到化合物7(9.1毫克，9.5％产率)为粉色固体。LC-MS(ESI+):m/z340.0(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.38(s,1H),9.24(s,1H),7.62(s,1H),6.55(s,2H),6.28(s,1H),3.86(s,2H),2.60(dt,J＝14.2,7.2Hz,2H),2.38(s,3H),1.86(dq,J＝14.3,7.1Hz,2H),0.59(t,J＝7.2Hz,6H).实施例8：化合物8的合成合成路线:步骤A:6-溴-3-(叔丁基)-3,8-二甲基-2,3-二氢咪唑并[1,5-a]吡啶-1,5-二酮向5-溴-3-甲基-6-氧-1,6-二氢吡啶-2-甲酰胺(2.0克,8.7毫摩尔)的1,4-二氧六环(30毫升)溶液中加入3,3-二甲基丁-2-酮(13克,130毫摩尔)和浓硫酸(127毫克,1.3毫摩尔),反应混合物在100℃下加热16小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)硅胶板显示原料完全消耗。反应混合物在减压下浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化，用石油醚/乙酸乙酯＝1/1洗脱，得到所需化合物(1.8克，66.1％收率)为白色固体。LC-MS(ESI+):m/z313.0(M+H)+.步骤B:4-((3-(叔丁基)-3,8-二甲基-1,5-二氧代-1,2,3,5-四氢咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氨基)-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸甲酯将6-溴-3-(叔丁基)-3,8-二甲基-2,3-二氢咪唑并[1,5-a]吡啶-1,5-二酮(1.8克,5.54毫摩尔),4-氨基-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸乙酯(1.654克,4.98毫摩尔)，Pd2(dba)3(507毫克,0.554毫摩尔),XantPhos(641豪克,1.1毫摩尔)和碳酸铯(3.633克,11毫摩尔)混合于1,4-二氧六环(90毫升)中。反应混合物用氮气置换3次。反应液在氮气保护下，加热回流16小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1，硅胶板)表明原料完全消耗。反应液冷却到室温，并在真空中浓缩。残留物用水(30毫升)和乙酸乙脂(30毫升)洗涤，过滤并在真空中浓缩，得到所需化合物(2.5g，粗品)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z564.4(M+H)+.步骤C:4-((3-(叔丁基)-3,8-二甲基-1,5-二氧代-1,2,3,5-四氢咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氨基)-6--((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸室温下将4-((3-(叔丁基)-3,8-二甲基-1,5-二氧代-1,2,3,5-四氢咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氨基)-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸甲酯(2.5克,4.44毫摩尔)混合于四氢呋喃(50毫升)中，加入一水合氢氧化锂(1.483毫克，31毫摩尔)，水(50毫升)。反应在66℃下加热搅拌16小时。LCMS表明原料完全消耗。反应液冷却到室温，在真空中浓缩，用1M盐酸溶液调节pH＝4～5，有黄色固体析出。过滤，将固体收集并用真空干燥，得到目标化合物(1.9克，收率80.2％)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z536.2(M+H)+.步骤D:8-氨基-3-(叔丁基)-3,12-二甲基-2,3-二氢咪唑并[1'，5'：1,6]吡啶并[3,4-b][1,6]萘啶1,5,11(6氢)-三酮将4-((3-(叔丁基)-3,8-二甲基-1,5-二氧代-1,2,3,5-四氢咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氨基)-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸(1.0克，1.868毫摩尔)混合在多聚磷酸/三氟甲磺酸(1/5,10毫升)中。反应加热到130摄氏度并搅拌16小时。LC-MS检测反应，显示转化完全。反应液冷却到室温，并加入冰水(10毫升)中，然后将混合液用饱和碳酸钠溶液碱化到pH＝8.0。过滤，滤饼用反相柱色谱(甲醇/水)纯化，得到目标化合物(235豪克，收率34.2％)为黄绿色固体LC-MS(ESI+):m/z368.2(M+H)+.步骤E：8-氨基-3-(叔丁基)-11-甲氧基-3,12-二甲基-2,3-二氢咪唑并[1'，5'：1,6]吡啶并[3,4-B][1,6]萘啶-1,5-二酮盐酸盐(化合物8)在常温下向8-氨基-3-(叔丁基)-3,12-二甲基-2,3-二氢咪唑并[1'，5'：1,6]吡啶并[3,4-B][1,6]萘啶-1-，5,11(6氢)-三酮(50毫克,014豪摩尔)的甲醇(5mL)溶液中缓慢加入DAST(1毫升)。将反应液在室温下搅拌5分钟。LC-MS监测反应完成后，旋干，先用反相柱色谱(甲醇/水)纯化，然后用制备柱层析(乙腈/水)纯化得到产物8(5.2毫克,收率10％)为淡绿色的固体。LC-MS(ESI+):m/z382.2(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.10(s,1H),9.03(s,1H),8.36(s,2H),7.17(s,1H),3.91(s,3H),2.60(s,3H),1.38(s,6H),1.23(s,6H).实施例9：化合物9的合成合成路线:步骤A:7'-氨基10'-甲氧基11'-甲基螺[环戊烷-1,3'-异吲哚并[5,6-B][1,6]萘啶]-1'(2'氢)-酮盐酸盐(化合物9)在常温下向7'-氨基11'-甲基螺[环戊烷-1,3'-异吲哚并[5,6-B][1,6]萘啶]-1'，10'(2'氢，5'氢)-二酮(50毫克,015豪摩尔)的甲醇(5毫升)溶液中缓慢加入DAST(1毫升)。将反应液在室温下搅拌5分钟。LC-MS监测反应完成后，旋干，先用反相柱色谱(甲醇/水)纯化，然后用制备色谱(乙腈/水)纯化得到产物10的盐酸盐(3.8毫克,收率7.3％)为淡绿色的固体。LC-MS(ESI+):m/z349.2(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.05(s,1H),8.99(s,1H),8.92(s,1H),8.19(s,2H),7.26(s,1H),6.62(s,1H),3.89(s,3H),3.19(s,3H),2.00–1.82(m,8H).实施例10：化合物10的合成合成路线:步骤A:6-溴-8-甲基-2H-螺环[环戊烷-1,3-咪唑[1,5-a]吡啶]-1，5-二酮室温在5-溴-3-甲基-6-氧-1,6-二氢吡啶-2-甲酰胺(1.5克,6.522毫摩尔)的1,4-二氧六环(50毫升)溶液中加入环戊酮(8.229克,97.83毫摩尔)和浓硫酸(95.87毫克,0.978毫摩尔),反应混合物在100℃下加热16小时。液相色谱-质谱分析表明，原料完全消耗。将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，盐水洗涤有机相，干燥，并真空浓缩。通过柱层析法纯化产物，得到所需化合物。反应混合物在减压下浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化，用石油醚/乙酸乙酯＝1/1洗脱，得到所需化合物(1.4克，72.0％收率)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z297.1(M+H)+.步骤B:6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)-4-((8-甲基-1，5-二氧基-1，5-二氢-2H-螺环[环戊烷-1,3-咪唑[1,5-a]吡啶]-6-基)氨基)烟酸乙酯室温氮气保护下，在6-溴-8-甲基-2H-螺环[环戊烷-1,3-咪唑[1,5-a]吡啶]-1，5-二酮(1.0克,3.78毫摩尔)的1,4-二氧六环(100毫升)溶液中加入4-氨基-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸乙酯(1.118克,3.378毫摩尔),Pd2(dba)3(464.1毫克,0.507毫摩尔),xantphos(293.2毫克,0.507毫摩尔),碳酸铯(2.77克,8.45毫摩尔)。反应液在氮气保护下，在105℃加热12小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝2/1，硅胶板)表明原料完全消耗。混合物冷却到室温，用乙酸乙酯(150毫升×2)萃取混合物。混合有机层用盐水(50毫升×3)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。产物用色谱柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到所需化合物(611.0毫克，收率33.1％)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z548.2(M+H)+.步骤C:6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)-4-((8-甲基-1，5-二氧基-1，5-二氢-2H-螺环[环戊烷-1,3-咪唑[1,5-a]吡啶]-6-基)氨基)烟酸6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)-4-((8-甲基-1，5-二氧基-1，5-二氢-2H-螺环[环戊烷-1,3-咪唑[1,5-a]吡啶]-6-基)氨基)烟酸乙酯(611毫克,1.117毫摩尔)溶于四氢呋喃(115毫升)和甲醇(15毫升)的混合溶液中，加入氢氧化锂(141毫克，3.35毫摩尔)，去离子水(12毫升)。反应在60℃下加热12小时。TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1，硅胶板)表明原料完全消耗。混合物冷却到室温，余物用乙醚(50毫升)洗涤。用1M盐酸水溶液将水层酸化至pH＝6。将混合物浓缩至干。往混合物中加入去离子水(10毫升)，搅拌5分钟，过滤，用水和甲醇洗涤，得到的固体用真空干燥得到标题化合物(551毫克，95％粗)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z520.2(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.03(s,1H),9.83(s,1H),8.55(s,1H),7.23(s,2H),7.15(d,J＝8.3Hz,1H),6.58(d,J＝2.0Hz,2H),6.49(dd,J＝8.3,2.1Hz,1H),4.39(d,J＝4.4Hz,2H),3.80(s,3H),3.74(s,3H),2.88–2.72(m,2H),2.38(s,3H),2.04–1.91(m,2H),1.88–1.73(m,2H),1.70–1.58(m,2H).步骤D:8-氨基-12-甲基-2H-螺环[环戊烷-1,3-咪唑[1，5：1,6]吡啶[3,4-b][1,6]萘啶]-1，5，11(6H)-三酮将6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)-4-((8-甲基-1，5-二氧基-1，5-二氢-2H-螺环[环戊烷-1,3-咪唑[1,5-a]吡啶]-6-基)氨基)烟酸(551毫克，1.062毫摩尔)和多聚磷酸(20克)的混合物在130℃下加热12小时。TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1，硅胶板)表明原料完全消耗。混合物冷却到室温然后将混合物倒入冰水中。水层先用乙醚(50毫升)洗涤，在用1M氢氧化钠水碱化至PH＝7.5，然后用二氯甲烷和异丙醇的混合溶剂萃取(二氯甲烷和异丙醇＝3/1，100毫升x8)，用盐水(50毫升)洗涤组合有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。将产物用1N盐酸水溶液调到PH＝6.0,溶解在甲醇(10ml)里，混合物扮样，通过反相柱层析法(乙腈/水)纯化，得到化合物(166.1毫克，44.6％，)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z352.0(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),9.96(s,1H),8.79(s,1H),6.98(s,2H),6.70(s,1H),2.94(s,3H),2.86–2.74(m,2H),2.02(qt,J＝9.9,5.1Hz,2H),1.84(dd,J＝15.4,10.9Hz,2H),1.73(dd,J＝12.3,5.8Hz,2H).步骤E:8’-氨基-11’-甲氧基-12’-甲基-2’氢-螺环[环戊烷-1,3’-咪唑[1’，5’：1,6]吡啶[3,4-b][1,6]萘啶]-1’，5’-二酮盐酸盐(化合物10)室温下在8’-氨基-12’-甲基-2’氢-螺环[环戊烷-1,3’-咪唑[1’，5’：1,6]吡啶[3,4-b][1,6]萘啶]-1’，5’，11’(6’氢)-三酮(100毫克,0.285毫摩尔)的甲醇(5毫升)溶液中滴加DAST(500毫克)。反应混合物在室温搅拌10分钟，然后往反应混合液里面再滴加DAST(500毫克)并且反应液继续搅拌10分钟。将反应混合溶液减压蒸干，粗产品经过制备HPLC纯化得到产品10的盐酸盐(4.3毫克,4.1％收率)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z366.0(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.18(s,1H),10.10(s,1H),9.05(s,1H),8.39(s,2H),7.18(s,1H),3.92(s,3H),2.91(s,3H),2.86–2.71(m,2H),2.02(dd,J＝11.5,10.5Hz,2H),1.87(dd,J＝15.3,10.9Hz,2H),1.80–1.67(m,2H).实施例11和12：化合物11和12的合成合成路线:步骤A:5-溴-3,3-二乙基-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异-1-酮在0℃向5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异-1-酮(2.5克,7.246豪摩尔)的N,N-二甲基甲酰胺(30毫升)溶液中加入氢化钠(869毫克,36.23豪摩尔)。将反应液在室温下搅拌10分钟。然后加入碘乙烷(3.39克,21.74豪摩尔)，并将反应液在室温下搅拌4小时。TLC监测反应完成后，加饱和氯化铵溶液淬灭反应，将混合物用乙酸乙酯(100mLx2)萃取。将有机层合并，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)，得到油状形式的产物(2.4克,收率82.7％)。LC-MS(ESI+):m/z402.1(M+H)+.步骤B:4-((3,3-二乙基-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸在氮气保护下将原料5-溴-3,3-二乙基-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚-1-酮(2.4克，5.99毫摩尔)，原料4-氨基-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸乙酯(2.17克,6.58毫摩尔),Pd2(dba)3(822毫克,0.9毫摩尔),XantPhos(1.039克,1.80毫摩尔)，叔丁醇钠(2.3克,23.94毫摩尔)和三叔丁基苯酚(1.727克,6.58毫摩尔)混合于无水1，4-二氧六环(60毫升)中。反应混合物真空置换氮气3次，在氮气保护下，加热到100摄氏度，反应16小时。LC-MS检测反应，显示原料反应完全，生成产物。将反应液冷却到室温，加入甲醇(100毫升)，搅拌5分钟。过滤混合物，滤饼用甲醇(50毫升)洗涤，将滤液真空浓缩得到粗产品。粗产品通过反相柱色谱(甲醇/水)纯化，得到产物(2.0克，收率53.5％)，为黑色固体。LC-MS(ESI+):m/z625.4(M+H)+.步骤C:7-氨基-3,3-二乙基-11-甲基-2,3-二氢-1氢-异吲哚并[5,6-B][1,6]萘啶-1,10-(5氢)-二酮将原料4-((3,3-二乙基-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸(1.3克,2.08毫摩尔)混合在多聚磷酸/三氟甲磺酸(1/5,13毫升)中。反应加热到130摄氏度并搅拌16小时。LC-MS检测反应，显示转化完全。反应液冷却到室温，并加入冰水(10毫升)中，然后将混合液用饱和碳酸钠溶液碱化到pH＝8.0。用二氯甲烷/异丙醇萃取(3/1,50毫升×4)。萃取液合并，用无水硫酸钠干燥后旋干，得到产物(820豪克,粗品)为绿色固体。LC-MS(ESI+):m/z337.0(M+H)+.步骤D:7-氨基-3,3-二乙基-11-甲基2,3,5,10四氢-1氢-异吲哚并[5,6-B][1,6]萘啶-1-酮盐酸盐(化合物11)氮气保护下将原料7-氨基-3,3-二乙基-11-甲基-2,3-二氢-1H-异吲哚并[5,6-B][1,6]萘啶-1,10-(5H)-二酮(270毫克，粗品)溶于四氢呋喃(1毫升)，室温氮气保护下加入硼烷-四氢呋喃溶液(1摩尔/升,10毫升)。反应在室温搅拌1小时。LCMS检测反应，显示原料消失。反应液用稀盐酸(1摩尔/升，3毫升)在0℃下淬灭。旋干后先用反相柱色谱(甲醇/水)纯化，然后用制备色谱(乙腈/水)纯化得到产物11的盐酸盐(2.7毫克,收率1.0％)为淡红色固体。LC-MS(ESI+):m/z323.0(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO)δ12.56(s,1H),10.55(s,1H),8.10(s,1H),7.66(s,1H),7.36(s,2H),6.70(s,1H),6.13(s,1H),3.89(s,2H),2.54(s,3H),1.81–1.62(m,4H),0.56(t,J＝7.3Hz,6H).步骤E:7-氨基-3,3-二乙基-10-甲氧基-11-甲基-2,3-二氢-1氢-异吲哚并[5,6-b][1,6]萘啶-1-酮盐酸盐(化合物12)在常温下向7-氨基-3,3-二乙基-11-甲基-2,3-二氢-1氢-异吲哚并[5,6-B][1,6]萘啶-1,10-(5H)-二酮(50毫克,015豪摩尔)的甲醇(5毫升)溶液中缓慢加入DAST(1毫升)。将反应液在室温下搅拌5分钟。LC-MS监测反应完成后，旋干，先用反相柱色谱(甲醇/水)纯化，然后用制备色谱(乙腈/水)纯化得到产物12盐酸盐(7.6毫克,收率14.6％)为淡绿色的固体。LC-MS(ESI+):m/z351.2(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO)δ12.52(s,1H),8.98(s,1H),8.44(s,1H),8.27(s,2H),7.28(s,1H),6.78(s,1H),3.89(s,3H),3.20(s,3H),1.80(td,J＝14.3,6.9Hz,4H),0.60(t,J＝7.3Hz,6H).实施例13：化合物13的合成合成路线:步骤A:8-氨基-3,3-二乙基-11-甲氧基-12-甲基-2,3-二氢咪唑[1'，5'：1,6]吡啶[3,4-b][1,6]萘啶-1,5-二酮盐酸盐(化合物13)室温下在8-氨基-3,3-二乙基-12-甲基-2,3-二氢咪唑[1'，5'：1,6]吡啶[3,4-b][1,6]萘并吡啶-1,5,11(6氢)-三酮(50毫克,0.142毫摩尔)的甲醇(5毫升)溶液中滴加DAST(200毫克)。反应混合物在室温搅拌10分钟，然后往反应混合液里面再滴加DAST(200毫克)并且反应液继续搅拌10分钟。将反应混合溶液减压蒸干，粗产品经过制备HPLC纯化得到产品13的盐酸盐(3.8毫克,7.3％收率)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z368.0(M+H)+.实施例14：化合物14的合成合成路线:步骤A:5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基-3,3-二丙基吲哚-1-酮在0℃向5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异-1-酮(2.0克,5.7毫摩尔)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中加入氢化钠(0.684克,28.5毫摩尔)。将反应液在室温下搅拌10分钟，然后加入碘丙烷(2.4克,14.49毫摩尔)，并将反应液在室温下搅拌4小时。TLC监测反应完成后，加饱和氯化铵溶液淬灭反应，将混合物用乙酸乙酯(100mLx2)萃取。将有机层合并，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化(石油醚/乙酸乙酯＝20/1)，得到油状形式的产物(2.1克,收率84.6％)。LC-MS(ESI+):m/z430.1(M+H)+.步骤B:5-溴-7-甲基-3,3-二丙基吲哚-1-酮室温下将原料5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基-3,3-二丙基吲哚-1-酮(300毫克，0.699毫摩尔)溶于二氯乙烷(7.5毫升)中，再加入散入三氟乙酸(7.5毫升)。反应混合物微波加热到100摄氏度。反应3小时。LC-MS检测反应，原料几乎反应完全，生成产物。将反应液冷却到室温，真空浓缩。加入氨水调pH＝8～9，再真空浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化(石油醚/乙酸乙酯＝15/1)，得到白色固体式的产物(180豪克,收率83.3％)。LC-MS(ESI+):m/z310.0(M+H)+.步骤C:6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)-4-((7-甲基-1-氧代-3,3-二丙基吲哚-5-基)氨基)烟酸在氮气保护下将原料5-溴-7-甲基-3,3-二丙基吲哚-1-酮(110毫克，0.42毫摩尔)，原料4-氨基-6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)烟酸乙酯(120毫克,0.42毫摩尔),Pd2(dba)3(76毫克,0.084毫摩尔),XantPhos(72毫克,0.126毫摩尔)，叔丁醇钠(161毫克,1.68毫摩尔)和三叔丁基苯酚(220毫克,0.84毫摩尔)混合于无水1，4-二氧六环(12毫升)中。反应混合物真空置换氮气3次，在氮气保护下，加热到100摄氏度，反应16小时。LC-MS检测反应，显示原料反应完全，生成产物。将反应液冷却到室温，加入甲醇(100毫升)，搅拌5分钟。过滤混合物，滤饼用甲醇(50毫升)洗涤，将滤液真空浓缩得到粗产品。粗产品通过快速柱色谱进行纯化(二氯甲烷/甲醇＝20:1)纯化，得到产物(123毫克，收率65％)，为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z533.4(M+H)+.步骤D:7-氨基-11-甲基-3,3-二丙基-2,3-二氢-1氢-异吲哚[5,6-b][1,6]萘啶-1,10(5氢)-二酮将原料6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)-4-((7-甲基-1-氧代-3,3-二丙基吲哚-5-基)氨基)烟酸(180毫克,0.338毫摩尔)混合在多聚磷酸/三氟甲磺酸(1/5,2毫升)中。反应加热到130摄氏度并搅拌18小时。LC-MS检测反应，显示转化完全。反应液冷却到室温，并加入冰水(10毫升)中，然后将混合液用饱和碳酸钠溶液碱化到pH＝8.0。用二氯甲烷/异丙醇萃取(3/1,50毫升×4)。萃取液合并，用无水硫酸钠干燥后旋干，得到产物(100豪克,粗品)为棕色固体。LC-MS(ESI+):m/z365.1(M+H)+.步骤E:7-氨基-10-甲氧基-11-甲基-3,3-二丙基-2,3-二氢-1H-异吲哚[5,6-b][1,6]萘啶-1-酮盐酸盐(化合物14)室温下在7-氨基-11-甲基-3,3-二丙基-2,3-二氢-1H-异吲哚[5,6-b][1,6]萘啶-1,10(5氢)-二酮(50毫克,0.137毫摩尔)的甲醇(3毫升)溶液中滴加DAST(0.5毫升)。反应混合物在室温搅拌10分钟，然后往反应混合液里面再滴加DAST(0.5毫升)并且反应液继续搅拌10分钟。将反应混合溶液减压蒸干，粗产品经过制备HPLC纯化得到产品14的盐酸盐(7毫克,13.7％收率)为黄色固体。LC-MS(ESI+):m/z379.0(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.52(s,1H),8.97(s,1H),8.49(s,1H),8.27(s,2H),7.30(s,1H),6.78(s,1H),3.89(s,3H),3.19(s,3H),1.83–1.68(m,4H),1.17(dd,J＝15.1,7.8Hz,4H),0.79(d,J＝3.5Hz,6H)。实施例15：化合物15的合成合成路线:步骤A:7'-氨基11'-甲基-5'，10'-二氢螺[环戊烷-1,3'-异吲哚并[5,6-B][1,6]萘啶]-1'(2'氢)-酮盐酸(化合物15)氮气保护下将原料7-氨基-11-甲基-3,3-二丙基-2,3-二氢-1H-异吲哚[5,6-b][1,6]萘啶-1,10(5h)-二酮(50毫克，粗品)溶于四氢呋喃(1毫升)，室温氮气保护下加入硼烷-四氢呋喃溶液(1摩尔/升,3毫升)。反应在室温搅拌1小时。LCMS检测反应，显示原料消失。反应液用稀盐酸(1摩尔/升，3毫升)在0℃下淬灭。旋干后用制备版(二氯甲烷/甲醇)纯化得到产物15的盐酸盐(7毫克,收率14％)为淡红色的固体。LC-MS(ESI+):m/z351.0(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.29(s,1H),10.23(s,1H),8.15(s,1H),7.66(s,1H),7.24(s,2H),6.65(s,1H),6.04(s,1H),3.88(s,2H),1.85–1.48(m,4H),1.12(dd,J＝13.8,8.5Hz,2H),0.77(d,J＝4.1Hz,8H).实施例16：化合物16的合成合成路线:步骤A:7'-氨基-10'-甲氧基-11'-甲基螺[环己烷-1,3'-异吲哚并[5,6-b][1,6]萘啶]-1'(2'氢)-酮盐酸盐(化合物16)在常温下向7'-氨基11'-甲基螺[环己烷-1,3'-异吲哚并[5,6-B][1,6]萘啶]-1'，10'(2'H，5'H)-二酮(100毫克,0.287毫摩尔)的甲醇(5毫升)溶液中缓慢加入DAST(1毫升)。将反应液在室温下搅拌5分钟。将反应液真空浓缩至干，先用反相柱色谱(甲醇/水)纯化，然后用制备色谱(乙腈/水)纯化得到产物(4.9毫克,收率4.72％)为淡绿色的固体。LC-MS(ESI+):m/z362.2(M+H)+.1HNMR(400MHz,DMSO)δ12.44(s,1H),9.17(s,1H),8.97(s,1H),8.25(s,2H),7.37(s,1H),6.75(s,1H),3.89(s,3H),3.20(s,3H),1.81–1.69(m,6H),1.44(d,J＝12.0Hz,2H),1.17(t,J＝7.3Hz,2H).实施例17实施例17考察本发明实施例1-16制备的部分化合物对MNK的抑制作用MNK生物学酶测定利用HTRF激酶测定试剂盒(Cisbio，目录号62ST1PEB)筛选MNK抑制化合物。所有激酶反应均在反应缓冲液(试剂盒提供)中进行。最终MNK1反应包含3ng/ul重组MNK1(赛默飞世尔(ThermoFisher)，PV6023)、1μMMNK底物肽STK1(试剂盒提供)、100μMATP，和不同浓度的感兴趣的抑制性化合物。最终MNK2反应包含1ng/ul重组MNK2(赛默飞世尔(ThermoFisher)，PV5607)、1μMMNK底物肽STK1(试剂盒提供)、100μMATP，和不同浓度的感兴趣抑制性化合物。各反应中的最终DMSO浓度是1％。激酶反应在384孔白平底聚苯乙烯板中以终体积10μl进行。MNK1/2酶与化合物和底物肽预孵育5分钟，然后添加ATP。添加ATP之后，激酶反应在25℃孵育120分钟或60分钟。反应后续通过添加5μl的底物抗体EU3+检测试剂和5μl的XL665检测试剂来终止，并且另孵育60分钟。发光信号用EnVision酶标仪计数器(PerkinElmer)检测，并且利用来自10-点化合物稀释系列的信号来计算实现50％酶活抑制的所需的化合物浓度(IC50)。这些测定的结果列于下表1。表1MNK生物学酶测定(IC50)注：小于0.01μM的IC50值标记为“+++”，从0.01到0.1μM标记为“++”，并且大于0.1至10.0μM标记为“+”,NA表示“未测得”。从表1中可以看出，本发明化合物对人MNK(尤其是MNK1和MNK2)活性具有明显的抑制作用。peIF4E信号转导细胞测定磷酸化elF4E采用CisBiopelF4E测定试剂盒(CisBio，目录号64EF4PEG)来测定。细胞以90μL体积铺板于96孔细胞培养板中，每孔细胞量是5*104个。化合物(10X)采用三倍连续稀释后，以10μL体积添加至细胞板中，最终DMSO浓度是1％，并在37℃孵育两小时。细胞板以300g速度离心5分钟，小心移出细胞上清液。立即添加50μL的细胞裂解缓冲液(1X)，并在25℃条件下振荡孵育至少30分钟。通过吹打均质化之后，将16μL的细胞裂解物从96孔细胞培养板转移至384孔小体积微孔板中。按照试剂盒说明书，用检测缓冲液制备抗体混合溶液，并以4μL体积添加在有细胞裂解液的384孔小体积微孔板。用封板器覆盖并25℃孵育过夜。在EnVision酶标仪计数器上读取两个不同波长的荧光发射(665nm和615nm)。发射比率导入GraphPadPrism软件，拟合出elF4E磷酸化50％抑制时所需的化合物浓度(IC50)。这些测定的结果列于下表2。表2peIF4E信号转导细胞测定(IC50)化合物编号IC50化合物编号IC501+3++4++4+++5+++6+++7+++8+9+10+11+++12+13+14+15++16+注：小于0.05μM的IC50值标为“+++”，0.05～1.0μM标为“++”，大于1.0至100μM标为“+”，并且NA指“未测得”。由于MNK催化其底物elF4E的磷酸化过程，因此MNK酶活被抑制时，其催化elF4E磷酸化的能力降低，因此化合物IC50值越低，说明化合物抑制MNK激酶的活性越高，抑制elF4E磷酸化的能力也越强。在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。当前第1页1 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