1.一种检测布鲁氏菌减毒活疫苗株和野毒株的方法,其特征在于,所述方法包括:根据布鲁氏菌减毒活疫苗株的缺失基因设计引物,采用所述引物对待测样品dna进行扩增,若检测扩增产物中含有特异性dna片段,则所述待测样品含有布鲁氏菌野毒株。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述布鲁氏菌减毒活疫苗株包括a19、s2、m5、s19或rev.1中的一种或多种。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述引物包括如下(a)-(c)中的一种或多种:
(a)a19-f:5’-gggaggagggcagttgtt-3';
a19-r:5'-gccaccgcattccgataa-3';
(b)s2-f:5-’ggcggcacaagaggaact-3’;
s2-r:5'-gcgggtacgccttgattg-3';
(c)m5-f:5’-attcccatgactgaagaaca-3’;
m5-r:5’-taacgcttccctcgattt-3’。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,(a)引物扩增产物的大小为254bp;和/或,
(b)引物扩增产物的大小为300bp;和/或,
(c)引物扩增产物的大小为207bp。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述扩增包括普通pcr扩增、qpcr扩增、rpa扩增或lamp扩增。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,采用多重pcr的方式进行检测。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述待测样品来源于布鲁氏菌减毒活疫苗株的被接种体,所述被接种体的接种时间为4-90天。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述被接种体包括牛、羊、猪、犬或人。
9.根据权利要求1-8任一项所述的方法,其特征在于,所述待测样品为血液、奶样或组织。
10.如权利要求1-9任一项所述的方法在如下(i)-(iii)中的应用:
(i)鉴别布鲁氏菌减毒活疫苗株和布鲁氏菌野毒株;
(ii)检测待测样品是否感染布鲁氏菌;
(iii)鉴别待测样品所感染的布鲁氏菌的类型。