人血清白蛋白与白介素2的融合蛋白及其用途的制作方法

文档序号:24873370发布日期:2021-04-30 12:46阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种融合蛋白,其包含人血清白蛋白成熟肽和人白介素-2成熟肽,其中所述人血清白蛋白成熟肽和所述人白介素-2成熟肽直接连接或经由肽接头间接连接,

其中所述人白介素-2成熟肽以其c端与所述人血清白蛋白成熟肽的n端融合或所述人白介素-2成熟肽以其n端与所述人血清白蛋白成熟肽的c端融合,

其中所述人白介素-2成熟肽具有野生型人白介素-2成熟肽序列或相对于野生型人白介素-2成熟肽序列包含下述替代中的一项或多项的突变型人白介素-2成熟肽序列:t3a、r38a、f42a、y45a、e62a、l72g和c125a,其中所述野生型人白介素-2成熟肽序列任选如seqidno.10所示,

其中所述人血清白蛋白成熟肽具有野生型人血清白蛋白成熟肽序列,任选如seqidno.9所示,或所述人血清白蛋白成熟肽具有突变型人血清白蛋白成熟肽序列。

2.权利要求1的融合蛋白,其中

(a)所述突变型人白介素-2成熟肽序列相对于野生型人白介素-2成熟肽序列包含t3a、f42a、y45a、l72g和c125a替代并以其c端与人血清白蛋白成熟肽的n端直接连接;或

(b)所述突变型人白介素-2成熟肽序列相对于野生型人白介素-2成熟肽序列包含t3a、r38a、f42a、y45a、e62a、l72g和c125a替代并以其n端与人血清白蛋白成熟肽的c端直接连接。

3.权利要求1的融合蛋白,其具有seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5或seqidno.7的氨基酸序列。

4.权利要求1-3任一项的融合蛋白,其具有下述一项或多项特性:

(a)具有与野生型人白介素-2相比减弱的人il-2α受体(cd25)结合;

(b)不结合人il-2α受体(cd25);

(c)具有与野生型人白介素-2相比增强的il-2β受体(cd122)和il-2γ受体(cd132)结合;

(d)具有与野生型人白介素-2或其氨基酸序列变体相比延长至少1倍、至少2倍、至少5倍、至少10倍、至少15倍、至少20倍或更多的体内半衰期;

(e)具有与野生型人白介素-2相比降低的细胞毒性;

(f)具有与野生型人白介素-2相比升高的抑制肿瘤生长的活性;和/或

(g)将抗pd-1抗体或抗pd-l1抗体抑制肿瘤生长的活性提高至少1倍、至少2倍、至少5倍、至少10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或更多。

5.一种核酸,其编码权利要求1-4任一项的融合蛋白,任选具有seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6或seqidno.8的核苷酸序列。

6.一种宿主细胞,其包含权利要求5的核酸,任选为细菌细胞、真菌细胞、植物细胞或动物细胞,进一步任选为巴斯德毕赤酵母细胞或cho细胞。

7.一种生成权利要求1-4任一项的融合蛋白的方法,其包括培养权利要求6的宿主细胞,使得所述融合蛋白生成。

8.一种药物组合物,其包含权利要求1-4任一项的融合蛋白。

9.权利要求1-4任一项的融合蛋白制备用于治疗肿瘤、癌症或癌性腹水的药物的用途。

10.一种治疗肿瘤、癌症或癌性腹水的方法,其包括对具有肿瘤、癌症或癌性腹水的受试者施用权利要求1-4任一项的融合蛋白,任选还包括对所述受试者施用抗pd-1抗体或抗pd-l1抗体。


技术总结
本发明涉及人血清白蛋白(特别是野生型人血清白蛋白)与人白介素‑2(特别是突变型人白介素‑2)的融合蛋白。所述融合蛋白具有相对于重组白介素‑2显著延长的体内半衰期,从而能够单独用于治疗肿瘤。而且,所述融合蛋白能够显著提高抗PD‑1抗体或抗PD‑L1抗体的抗肿瘤功效。

技术研发人员:于在林;富岩;杨小楠;富俞淞;乔国强;侯琼;朱涛
受保护的技术使用者:天津林达生物科技有限公司;中美福源生物技术(北京)股份有限公司;天津溥瀛生物技术有限公司;北京美福源生物医药科技有限公司
技术研发日:2020.11.16
技术公布日:2021.04.30
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