一种益生菌组合物及其应用和制备方法与流程

1.本发明属于口腔健康技术领域，具体地说是涉及一种益生菌组合物及其应用和制备方法。


背景技术：

2.随着生活条件的提高，儿童食用了越来越多的糖果、果冻和饼干等零食，这些零食极易造成儿童龋齿，影响儿童的生活和健康。龋齿是在以细菌为主的多因素影响下，牙体硬组织发生慢性进行性破坏的疾病。而牙菌斑是龋病发生过程中不可缺少的微生态环境，菌斑中细菌代谢碳水化合物产生的酸性代谢产物，可导致牙釉质脱矿、溶解，进而形成龋病。因此，只要能有效控制菌斑，就可以有效控制龋病的发生和发展。
3.卫生习惯是从小培养起来的，许多儿童还不具有自觉刷牙的习惯，使用和大人一样的牙膏、牙刷，每天坚持清洁牙齿，对他们来说，是一件难以坚持的事情。对于儿童而言，即使他们天天刷牙，由于动作的不规范性，依然会存在蛀牙龋齿的问题。
4.除了儿童，成年人也由于对于口腔护理知识的不足，以至于造成龋齿与牙周病的高发性，日后严重者可能需要换装假牙或者植牙应对，造成很多的困扰，因此，口腔日常保健护理的执行，变成一个刻不容缓的问题。
5.根据口腔病症内抽样实验得知，平均1克牙龈分泌物有10亿个厌氧链球菌，也就是造成蛀牙龋齿与牙周病的元凶，1克牙垢里有100亿个细菌，间接导致口臭的产生，1c.c的唾液里8000万个奈瑟氏菌，引起脑膜炎与淋病的致病菌，因此，如何抑制口腔内有害菌的滋生与补充益生菌来平衡口腔内微生态的环境，营造良好健康口腔状态，为近年来攻坚的研究重要课题。


技术实现要素：

6.本发明提供了一种益生菌组合物及其应用和制备方法，利用一种热灭活益生菌组合物的冻干粉活性组分搭配漱口水剂型使用，能够逐步减轻已发生蛀牙龋齿问题，消除口臭，清新口气，同时提供孩童与成人预防蛀牙的产生，在饮食过后，在刷牙与漱口领域提供新的应用机制。
7.为了实现上述技术效果，本发明采用的技术方案为：
8.一种益生菌组合物，所述益生菌组合物由热灭活唾液联合乳杆菌(ligilactobacillus salivarius)br202冻干粉、副干酪乳杆菌(lactobacillus paracasei)br176冻干粉复配得到；所述唾液联合乳杆菌br202保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通生物中心，编号cgmcc no.21564，保藏日期为2020年12月28日；副干酪乳杆菌br176保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通生物中心，编号cgmcc no.21563，保藏日期为2020年12月28日。
9.作为优选，所述唾液联合乳杆菌br202冻干粉的重量百分比为40～50％，副干酪乳杆菌br176冻干粉的重量百分比为50～60％。
10.本发明还提供了上述益生菌组合物的应用，所述益生菌组合物加上漱口水内料配制得到益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品。
11.作为优选，所述漱口水内料由丙二醇、山梨糖醇、聚山梨醇酯
‑
20、异胡薄荷醇、尿囊素、胶态银、去离子水按重量百分比配制而成；各原料的重量百分比是：丁二醇15.0～30.0％、山梨糖醇10.0～20.0％、聚山梨醇酯
‑
20 1.2～1.5％、异胡薄荷醇0.3～0.5％、尿囊素0.1～0.3％、胶态银0.1～0.2％、余量为去离子水。
12.作为优选，漱口水内料由下述重量百分比原料组成：丁二醇25％、山梨糖醇20％、聚山梨醇酯
‑
20 1.5％、异胡薄荷醇0.5％、尿囊素0.2％、胶态银0.2％、余量为去离子水。
13.作为优选，益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品中益生菌组合物用量为1.0～3.0％。
14.本发明还提供了上述益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品的制备方法，包括下述步骤：
15.(1)将热灭活唾液联合乳杆菌br202冻干粉、副干酪乳杆菌br176冻干粉按重量百分比配制而成益生菌组合物；
16.(2)将漱口水内料的油相组成分聚山梨醇酯
‑
20、异胡薄荷醇室温搅拌分散至完全透明澄清，当成a相备用；
17.(3)将漱口水内料的水相组成分丁二醇、山梨糖醇、尿囊素、去离子水加热至70～90℃完全溶解，当成b相备用；
18.(4)将b相真空吸入位于真空均质搅拌锅内，开启搅拌叶片，搅拌速度400～800rpm，开启抽真空至0.02～0.06mpa，搅拌10～20mins后，开启水冷阀降温，继续抽真空搅拌降温至35～55℃，泄真空压力后，依序将漱口水内料的a相、胶态银以及益生菌组合物加入，开启搅拌速度400～800rpm，均质速度2000～4000rpm，均质搅拌1～5mins后，继续抽真空搅拌降温至25～40℃，出料过滤装桶备用，即可得益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品。
19.作为优选，所述益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品的制备方法，包括下述步骤：
20.(1)将热灭活唾液联合乳杆菌br202冻干粉、副干酪乳杆菌br176冻干粉按重量百分比配制而成益生菌组合物；其中，唾液联合乳杆菌br202冻干粉的重量百分比为45％，副干酪乳杆菌br176冻干粉的重量百分比为55％；
21.(2)将漱口水内料的油相组成分聚山梨醇酯
‑
20、异胡薄荷醇室温搅拌分散至完全透明澄清，当成a相备用；
22.(3)将漱口水内料的水相组成分丁二醇、山梨糖醇、尿囊素、去离子水加热至80℃完全溶解，当成b相备用；
23.(4)将b相真空吸入位于固定式真空均质搅拌锅内，开启固定式抽真空均质搅拌叶片，搅拌速度600rpm，开启抽真空至0.04mpa，搅拌15mins后，开启水冷阀降温，继续抽真空搅拌降温至45℃，泄真空压力后，依序将漱口水内料的a相、胶态银以及益生菌组合物加入，开启搅拌速度600rpm，均质速度3000rpm，均质搅拌3mins后，继续抽真空搅拌降温至35℃，出料过滤装桶备用，即可得益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品。
24.作为优选，益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品由下述重量百分比的组分组成：益生菌组合物2.8％、丁二醇25％、山梨糖醇20％、聚山梨醇酯
‑
20 1.5％、异胡薄荷醇0.5％、尿囊素0.2％、胶态银0.2％、余量为去离子水。
25.本发明如无特殊说明，采用的原料均购于市场。
26.本发明的技术效果在于：
27.本发明除了传统清新口气、消除异味功能外，另外，添加了防蛀牙热灭活的益生菌组合物，利用热灭活益生菌组合物产生口腔保健的机转，每次于刷牙过后，配合清新漱口水与热灭活益生菌协同作用，使其在口腔里与漱口液滚动混匀发生释放作用，在口腔里漱口一分钟后吐出，并使得热灭活益生菌能停留在口腔牙龈细缝里，产生抑制厌氧链球菌等有害菌，并同时竞争有害菌的养分，逐步达到口腔有害菌弱化消灭的效果，使得蛀牙龋齿的现象减轻，逐渐恢复牙齿与牙龈的健康，另外，配方里添加的薄荷成分，使得漱口过后产生清新芳香口气，有效的去除口臭气味。本发明可以在漱口的同时，发挥抑制龋齿菌与牙菌斑的产生，舒缓发炎口腔粘膜组织，降低蛀牙与牙周病发生率，进而调节口腔中益生菌微生态平衡。
具体实施方式
28.下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明所要保护的范围并不限于此。
29.实施例1
30.益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品由下述重量百分比的组分组成：益生菌组合物2.8％、丁二醇25％、山梨糖醇20％、聚山梨醇酯
‑
20 1.5％、异胡薄荷醇0.5％、尿囊素0.2％、胶态银0.2％、余量为去离子水。
31.上述益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品通过下述步骤制备得到：
32.(1)将热灭活唾液联合乳杆菌br202冻干粉、副干酪乳杆菌br176冻干粉按重量百分比配制而成益生菌组合物；其中，唾液联合乳杆菌br202冻干粉的重量百分比为45％，副干酪乳杆菌br176冻干粉的重量百分比为55％；
33.(2)将漱口水内料的油相组成分聚山梨醇酯
‑
20、异胡薄荷醇室温搅拌分散至完全透明澄清，当成a相备用；
34.(3)将漱口水内料的水相组成分丁二醇、山梨糖醇、尿囊素、去离子水加热至80℃完全溶解，当成b相备用；
35.(4)将b相真空吸入位于固定式真空均质搅拌锅内，开启固定式抽真空均质搅拌叶片，搅拌速度600rpm，开启抽真空至0.04mpa，搅拌15mins后，开启水冷阀降温，继续抽真空搅拌降温至45℃，泄真空压力后，依序将漱口水内料的a相、胶态银以及益生菌组合物加入，开启搅拌速度600rpm，均质速度3000rpm，均质搅拌3mins后，继续抽真空搅拌降温至35℃，出料过滤装桶备用，即可得益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品。
36.为了解本发明的使用效果，以问卷调查的形式对本产品开展了广泛的试用调查，本调查共纳入全国各地男女试用者3010人，年龄层分布在12～50岁，其中男性1665人，女性1345人，年龄最大50岁，最小12岁，平均年龄层30岁左右，共收回有效问卷2520份。
37.通过观察产品使用前后受试者相关指标的变化来判断效果，评价标准：
38.牙龈出血性改善：无改善或变差，牙龈出血基本无变化或变大；轻度改善，牙龈出血虽降低，但依然较明显；中度改善，牙龈出血降低较明显；明显改善，牙龈出血明显降低，牙龈出血已不十分明显；
39.牙齿牙垢斑改善：中度改善，牙齿牙垢斑降低较明显；明显改善，牙齿牙垢斑明显
降低，牙齿牙垢斑已不十分明显；
40.口臭异味改善：中度改善，口臭异味消除较明显；明显改善，口臭异味明显消除，口臭异味已不十分明显；
41.冷热敏感性改善：中度改善，冷热敏感降低较明显；明显改善，冷热敏感明显降低，冷热敏感已不十分明显。
42.2520名试用者使用(每次于刷牙过后，在口腔里漱口一分钟后吐出)本发明制品28天后对蛀牙龋齿改善与口臭改善相关的各项指标程度自我评价的结果如下：
43.牙龈出血性降低：分别有85.6％和94.5％的试用者有中度改善和明显改善；
44.降低牙齿牙垢斑：分别有84.2％和90.7％的试用者有中度改善和明显改善；
45.消除口臭异味性：分别有87.6％和93.4％的试用者有中度改善和明显改善；
46.冷热敏感性降低：分别有89.6％和92.6％的试用者有中度改善和明显改善；
47.从试用者的自我评估的结果可以看出，该产品对牙龈出血性降低、降低牙齿牙垢斑、消除口臭异味性、牙龈冷热敏感性降低有不同程度的显著改善。
48.实施例2
49.益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品由下述重量百分比的组分组成：益生菌组合物2.3％、丁二醇30％、山梨糖醇15％、聚山梨醇酯
‑
20 1.4％、异胡薄荷醇0.4％、尿囊素0.2％、胶态银0.1％、余量为去离子水。
50.上述益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品通过下述步骤制备得到：
51.(1)将热灭活唾液联合乳杆菌br202冻干粉、副干酪乳杆菌br176冻干粉按重量百分比配制而成益生菌组合物；其中，唾液联合乳杆菌br202冻干粉的重量百分比为45％，副干酪乳杆菌br176冻干粉的重量百分比为55％；
52.(2)将漱口水内料的油相组成分聚山梨醇酯
‑
20、异胡薄荷醇室温搅拌分散至完全透明澄清，当成a相备用；
53.(3)将漱口水内料的水相组成分丁二醇、山梨糖醇、尿囊素、去离子水加热至80℃完全溶解，当成b相备用；
54.(4)将b相真空吸入位于固定式真空均质搅拌锅内，开启固定式抽真空均质搅拌叶片，搅拌速度600rpm，开启抽真空至0.04mpa，搅拌15mins后，开启水冷阀降温，继续抽真空搅拌降温至45℃，泄真空压力后，依序将漱口水内料的a相、胶态银以及益生菌组合物加入，开启搅拌速度600rpm，均质速度3000rpm，均质搅拌3mins后，继续抽真空搅拌降温至35℃，出料过滤装桶备用，即可得益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品。
55.为了解本发明的使用效果，以问卷调查的形式对本产品开展了广泛的试用调查，本调查共纳入全国各地男女试用者3000人，年龄层分布在12～52岁，其中男性1660人，女性1340人，年龄最大52岁，最小12岁，平均年龄层30岁左右，共收回有效问卷2510份。
56.2510名试用者使用(每次于刷牙过后，在口腔里漱口一分钟后吐出)本发明制品28天后对蛀牙龋齿改善与口臭改善相关的各项指标程度自我评价的结果如下：
57.牙龈出血性降低：分别有83.1％和91.2％的试用者有中度改善和明显改善；
58.降低牙齿牙垢斑：分别有80.7％和88.3％的试用者有中度改善和明显改善；
59.消除口臭异味性：分别有84.3％和90.1％的试用者有中度改善和明显改善；
60.冷热敏感性降低：分别有85.7％和89.6％的试用者有中度改善和明显改善；
61.从试用者的自我评估的结果可以看出，该产品对牙龈出血性降低、降低牙齿牙垢斑、消除口臭异味性、牙龈冷热敏感性降低有不同程度的显著改善。
62.实施例3
63.益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品由下述重量百分比的组分组成：益生菌组合物1.5％、丁二醇15％、山梨糖醇10％、聚山梨醇酯
‑
20 1.2％、异胡薄荷醇0.3％、尿囊素0.1％、胶态银0.1％、余量为去离子水。
64.上述益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品通过下述步骤制备得到：
65.(1)将热灭活唾液联合乳杆菌br202冻干粉、副干酪乳杆菌br176冻干粉按重量百分比配制而成益生菌组合物；其中，唾液联合乳杆菌br202冻干粉的重量百分比为45％，副干酪乳杆菌br176冻干粉的重量百分比为55％；
66.(2)将漱口水内料的油相组成分聚山梨醇酯
‑
20、异胡薄荷醇室温搅拌分散至完全透明澄清，当成a相备用；
67.(3)将漱口水内料的水相组成分丁二醇、山梨糖醇、尿囊素、去离子水加热至80℃完全溶解，当成b相备用；
68.(4)将b相真空吸入位于固定式真空均质搅拌锅内，开启固定式抽真空均质搅拌叶片，搅拌速度600rpm，开启抽真空至0.04mpa，搅拌15mins后，开启水冷阀降温，继续抽真空搅拌降温至45℃，泄真空压力后，依序将漱口水内料的a相、胶态银以及益生菌组合物加入，开启搅拌速度600rpm，均质速度3000rpm，均质搅拌3mins后，继续抽真空搅拌降温至35℃，出料过滤装桶备用，即可得益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品。
69.为了解本发明的使用效果，以问卷调查的形式对本产品开展了广泛的试用调查，本调查共纳入全国各地男女试用者3000人，年龄层分布在12～50岁，其中男性1670人，女性1330人，年龄最大50岁，最小12岁，平均年龄层30岁左右，共收回有效问卷2510份。
70.2510名试用者使用(每次于刷牙过后，在口腔里漱口一分钟后吐出)本发明制品28天后对蛀牙龋齿改善与口臭改善相关的各项指标程度自我评价的结果如下：
71.牙龈出血性降低：分别有80.6％和87.9％的试用者有中度改善和明显改善；
72.降低牙齿牙垢斑：分别有78.3％和85.2％的试用者有中度改善和明显改善；
73.消除口臭异味性：分别有80.1％和86.6％的试用者有中度改善和明显改善；
74.冷热敏感性降低：分别有81.4％和86.9％的试用者有中度改善和明显改善；
75.从试用者的自我评估的结果可以看出，该产品对牙龈出血性降低、降低牙齿牙垢斑、消除口臭异味性、牙龈冷热敏感性降低有不同程度的显著改善。
76.实施例4
77.益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品由下述重量百分比的组分组成：益生菌组合物2.8％、丁二醇25％、山梨糖醇20％、聚山梨醇酯
‑
20 1.5％、异胡薄荷醇0.5％、尿囊素0.2％、胶态银0.2％、余量为去离子水。
78.上述益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品通过下述步骤制备得到：
79.(1)将热灭活唾液联合乳杆菌br202冻干粉、副干酪乳杆菌br176冻干粉按重量百分比配制而成益生菌组合物；其中，唾液联合乳杆菌br202冻干粉的重量百分比为50％，副干酪乳杆菌br176冻干粉的重量百分比为50％；
80.(2)将漱口水内料的油相组成分聚山梨醇酯
‑
20、异胡薄荷醇室温搅拌分散至完全
透明澄清，当成a相备用；
81.(3)将漱口水内料的水相组成分丁二醇、山梨糖醇、尿囊素、去离子水加热至80℃完全溶解，当成b相备用；
82.(4)将b相真空吸入位于固定式真空均质搅拌锅内，开启固定式抽真空均质搅拌叶片，搅拌速度600rpm，开启抽真空至0.04mpa，搅拌15mins后，开启水冷阀降温，继续抽真空搅拌降温至45℃，泄真空压力后，依序将漱口水内料的a相、胶态银以及益生菌组合物加入，开启搅拌速度600rpm，均质速度3000rpm，均质搅拌3mins后，继续抽真空搅拌降温至35℃，出料过滤装桶备用，即可得益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品。
83.为了解本发明的使用效果，以问卷调查的形式对本产品开展了广泛的试用调查，本调查共纳入全国各地男女试用者3010人，年龄层分布在12～50岁，其中男性1665人，女性1345人，年龄最大50岁，最小12岁，平均年龄层30岁左右，共收回有效问卷2520份。
84.2520名试用者使用(每次于刷牙过后，在口腔里漱口一分钟后吐出)本发明制品28天后对蛀牙龋齿改善与口臭改善相关的各项指标程度自我评价的结果如下：
85.牙龈出血性降低：分别有83.9％和92.7％的试用者有中度改善和明显改善；
86.降低牙齿牙垢斑：分别有82.6％和89.3％的试用者有中度改善和明显改善；
87.消除口臭异味性：分别有85.9％和91.6％的试用者有中度改善和明显改善；
88.冷热敏感性降低：分别有88.5％和90.8％的试用者有中度改善和明显改善；
89.从试用者的自我评估的结果可以看出，该产品对牙龈出血性降低、降低牙齿牙垢斑、消除口臭异味性、牙龈冷热敏感性降低有不同程度的显著改善。
90.实施例5
91.益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品由下述重量百分比的组分组成：益生菌组合物2.8％、丁二醇25％、山梨糖醇20％、聚山梨醇酯
‑
20 1.5％、异胡薄荷醇0.5％、尿囊素0.2％、胶态银0.2％、余量为去离子水。
92.上述益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品通过下述步骤制备得到：
93.(1)将热灭活唾液联合乳杆菌br202冻干粉、副干酪乳杆菌br176冻干粉按重量百分比配制而成益生菌组合物；其中，唾液联合乳杆菌br202冻干粉的重量百分比为45％，副干酪乳杆菌br176冻干粉的重量百分比为55％；
94.(2)将漱口水内料的油相组成分聚山梨醇酯
‑
20、异胡薄荷醇室温搅拌分散至完全透明澄清，当成a相备用；
95.(3)将漱口水内料的水相组成分丁二醇、山梨糖醇、尿囊素、去离子水加热至80℃完全溶解，当成b相备用；
96.(4)将b相真空吸入位于固定式真空均质搅拌锅内，开启固定式抽真空均质搅拌叶片，搅拌速度500rpm，开启抽真空至0.03mpa，搅拌10mins后，开启水冷阀降温，继续抽真空搅拌降温至50℃，泄真空压力后，依序将漱口水内料的a相、胶态银以及益生菌组合物加入，开启搅拌速度500rpm，均质速度2000rpm，均质搅拌2mins后，继续抽真空搅拌降温至30℃，出料过滤装桶备用，即可得益生菌组合物防止蛀牙龋齿制品。
97.为了解本发明的使用效果，以问卷调查的形式对本产品开展了广泛的试用调查，本调查共纳入全国各地男女试用者3010人，年龄层分布在12～50岁，其中男性1675人，女性1335人，年龄最大50岁，最小12岁，平均年龄层30岁左右，共收回有效问卷2510份。
98.2510名试用者使用(每次于刷牙过后，在口腔里漱口一分钟后吐出)本发明制品28天后对蛀牙龋齿改善与口臭改善相关的各项指标程度自我评价的结果如下：
99.牙龈出血性降低：分别有83.6％和91.6％的试用者有中度改善和明显改善；
100.降低牙齿牙垢斑：分别有80.9％和88.7％的试用者有中度改善和明显改善；
101.消除口臭异味性：分别有84.6％和89.8％的试用者有中度改善和明显改善；
102.冷热敏感性降低：分别有86.7％和90.1％的试用者有中度改善和明显改善；
103.从试用者的自我评估的结果可以看出，该产品对牙龈出血性降低、降低牙齿牙垢斑、消除口臭异味性、牙龈冷热敏感性降低有不同程度的显著改善。
104.实施例6
105.添加益生菌组合物的防止蛀牙龋齿制品(漱口水)对于腔中龋齿病原菌的降低率
106.每日漱口一次，试验周期4周；
107.对照组：未添加益生菌组合物的漱口水；
108.实验组：实施例1～5；
109.实验天数：28天；
110.实验人数：1966名；
111.未添加益生菌组合物漱口水对病原菌降低率以及添加益生菌组合物的漱口水对病原菌降低率的实验结果如表1所示：
112.表1
[0113][0114][0115]
实验数据表明本发明能够有效地降低龋齿病原菌的数量比例，效果显著。
[0116]
应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本申请的保护范围。