1.用于检测dna的组合产品,包括核糖核酸酶hii以及探针;
所述探针为单链探针,探针的部分或全部序列能够与待检测的靶标dna分子互补,且所述探针互补区域内部嵌入一个或多个rna碱基,所述rna碱基将探针互补区域分隔为至少两个区段,每个区段中dna碱基和不妨碍核酸链杂交的碱基替代物的总个数独立地为0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13个。
2.根据权利要求1所述的组合产品,所述探针tm值所示温度≥核糖核酸酶hii切割反应的反应温度-10℃。
3.根据权利要求1所述的组合产品,至少两个区段中标记有不同的可检测的识别原件,所述识别原件为特定的核酸序列,或是标记在碱基和/或核酸骨架上的标记物;当所述探针从所述rna碱基处被核糖核酸酶hii切开时,所述标记物产生可检测的信号。
4.根据权利要求3所述的组合产品,所述标记物包括荧光基团和淬灭基团,且至少一个荧光基团和至少一个淬灭基团位于不同的区段。
5.根据权利要求3所述的组合产品,所述探针一端固定在固相载体表面,或反应完成后与固相载体结合,另一端偶联信号物质。
6.根据权利要求3所述的组合产品,其还包括试纸条;
其中,所述试纸条包括样品垫、反应膜和吸收垫,所述反应膜上沿液体流向设置有质检区和检测区:
所述标记物包括第一标记物和第二标记物;
所述样品垫包被有信号物质,所述信号物质标记有所述第一标记物的第一抗标记物;
所述质检区固定包被有针对所述第二标记物的第二抗标记物;
所述检测区固定包被有针对所述第一抗标记物的二抗;
所述第一标记物与所述第一抗标记物、所述第二标记物与所述第二抗标记物能够形成不同的标记物-抗标记物复合物;
或,所述试纸条包括样品垫、反应膜和吸收垫,所述反应膜上沿液体流向设置有检测区和质检区:
所述标记物包括第一标记物和第二标记物;
所述样品垫包被有信号物质,所述信号物质标记有所述第一标记物的第一抗标记物;
所述检测区固定包被有针对所述第二标记物的第二抗标记物;
所述质检区固定包被有针对所述第一抗标记物的二抗;
所述第一标记物与所述第一抗标记物、所述第二标记物与所述第二抗标记物能够形成不同的标记物-抗标记物复合物。
7.根据权利要求6所述的组合产品,所述信号物质选自荧光团、比色标记、量子点、胶体金、用于拉曼衍射成像的炔烃基团、用于click反应的环烯烃、用于聚合物标记的引发基团、多肽/蛋白分子、lna/pna、非天然氨基酸及其类似物、非天然核酸及其类似物和纳米结构;
所述纳米结构包括无机纳米颗粒、nv-center、聚集/组装诱导发光分子、稀土离子配体分子以及多金属氧簇。
8.根据权利要求6所述的组合产品,所述标记物-抗标记物复合物中标记物/抗标记物的组合选自生物素或其衍生物/链霉亲和素,生物素或其衍生物/亲和素,生物素或其衍生物/中性抗生物素蛋白,半抗原/抗体,抗原/抗体,受体/配体,地高辛/地高辛配基,碳水化合物/凝集素和多核苷酸/互补的多核苷酸;
其中生物素的衍生物为d-生物素、活化生物素、生物胞素、乙二胺生物素、尸胺生物素及脱硫生物素中的任一种。
9.根据权利要求1所述的组合产品,所述探针的3’末端包含不可延伸的封闭部分。
10.根据权利要求1~9任一项所述的组合产品,所述rna碱基为一个,所述探针互补区域长度小于25nt。
11.根据权利要求1~9任一项所述的组合产品,其还包括lamp引物、near引物或rpa引物。
12.试剂盒,其包含权利要求1~11任一项所述的组合产品。
13.权利要求10所述的组合产品在检测snp中的应用;其中所述探针中所述rna碱基为一个。
14.根据权利要求13所述的应用,在检测snp时,所述核糖核酸酶hii切割反应的反应温度≤tm值所示温度+10℃。
15.权利要求1~9任一项所述的组合产品在检测靶dna中的应用,所述靶dna由lamp、near或rpa引物扩增得到。
16.根据权利要求15所述的应用,每个区段中dna碱基或碱基替代物个数≤6个,所述扩增在35℃~45℃的温度下进行。