一种用于烈性噬菌体的低温保藏方法

文档序号:26013521发布日期:2021-07-23 21:34阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于烈性噬菌体的低温保藏方法,其特征在于,包括如下步骤:

将烈性噬菌体的悬液与保藏液混合均匀后,在-196℃~4℃下进行保藏,

其中,所述保藏液包括培养基以及低温保护剂,

所述培养基为液体lb培养基或液体sm培养基,

所述低温保护剂为甘油或二甲基亚砜。

2.根据权利要求1所述的用于烈性噬菌体的低温保藏方法,其特征在于:

其中,所述培养基与所述低温保护剂的体积比为1:(0.5-2)。

3.根据权利要求1所述的用于烈性噬菌体的低温保藏方法,其特征在于:

其中,所述保藏液中所述甘油的体积百分比为10%~30%。

4.根据权利要求1所述的用于烈性噬菌体的低温保藏方法,其特征在于:

其中,所述保藏液中所述二甲基亚砜的体积百分比为5%~10%。

5.根据权利要求1所述的用于烈性噬菌体的低温保藏方法,其特征在于:

其中,所述保藏液的制备方法如下:

步骤1,配制所述培养基;

步骤2,将所述低温保护剂与所述培养基混合后,定容、灭菌,得混合液;以及

步骤3,将所述混合液用所述培养基稀释后,即得所述保藏液。

6.根据权利要求5所述的用于烈性噬菌体的低温保藏方法,其特征在于:

其中,所述保藏液为甘油-lb保藏液,

所述甘油-lb保藏液由所述甘油及所述液体lb培养基组成,所述甘油与所述液体lb培养基的体积比为(0.1-0.3):(0.7-0.9)。

7.根据权利要求5所述的用于烈性噬菌体的低温保藏方法,其特征在于:

其中,所述保藏液为甘油-sm保藏液,

所述甘油-sm保藏液由所述甘油及所述液体sm培养基组成,所述甘油与所述液体sm培养基的体积比为(0.1-0.3):(0.7-0.9)。

8.根据权利要求5所述的用于烈性噬菌体的低温保藏方法,其特征在于:

其中,所述保藏液为二甲基亚砜-lb保藏液,

所述二甲基亚砜-lb保藏液由所述二甲基亚砜及所述液体lb培养基组成,所述二甲基亚砜与所述液体lb培养基的体积比为(0.05-0.1):(0.9-0.95)。

9.根据权利要求5所述的用于烈性噬菌体的低温保藏方法,其特征在于:

其中,所述保藏液为二甲基亚砜-sm保藏液时,

所述二甲基亚砜-sm保藏液由所述二甲基亚砜及所述液体sm培养基组成,所述二甲基亚砜与所述液体sm培养基的体积比为(0.05-0.1):(0.9-0.95)。

10.根据权利要求1所述的用于烈性噬菌体的低温保藏方法,其特征在于:

其中,所述烈性噬菌体为霍乱噬菌体。


技术总结
本发明涉及一种用于烈性噬菌体的低温保藏方法,属于病原菌种保藏技术领域。包括如下步骤:将烈性噬菌体的悬液与保藏液混合均匀后,在‑196℃~4℃下进行保藏,其中,保藏液包括培养基以及低温保护剂,培养基为液体LB培养基或液体SM培养基,低温保护剂为甘油或二甲基亚砜。因为在液体LB培养基或液体SM培养基上添加甘油或二甲基亚砜,从而形成复配后的保存液,并在不同温度下进行保藏,所以延长了噬菌体的保藏时间,提高了噬菌体的存活率和活性。

技术研发人员:黄频;胥义;魏强;王多春;郭宁
受保护的技术使用者:上海理工大学;中国疾病预防控制中心;中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
技术研发日:2021.04.15
技术公布日:2021.07.23
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