1.一种rna文库的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
采用第一引物逆转录rna,得到第一链cdna,所述第一引物包括第一接头序列和随机序列;
纯化所述第一链cdna;
采用第二引物扩增所述第一链cdna,生成二链dna,所述第二引物包括第二接头序列和随机序列;
采用第三引物扩增所述二链dna得到rna文库。
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述第二引物扩增所述第一链cdna时采用的dna聚合酶为具有链置换功能的dna聚合酶。
3.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述第一接头序列为acgctcttccgatct。
4.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述第二接头序列为cgtatgccgtcttctgcttg。
5.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述第三引物包括上游引物和下游引物,所述上游引物从5’端至3’端依次包括:上游测序平台序列、第一文库标签序列以及上游测序引物序列,所述下游引物从5’端至3’端依次包括:下游测序平台序列、第二文库标签序列以及下游测序引物序列,其中,所述下游测序引物序列与所述第一引物的5’端的至少部分序列相同,所述上游测序引物序列与所述第二引物的5’端的至少部分序列相同。
6.根据权利要求5所述的构建方法,其特征在于,所述第三引物序列为:
上游引物:
gatcggaagagcacacgtctgaactccagtcacxxxxxxxxatctcgtatgccgtcttctgcttg;
下游引物:
aatgatacggcgaccaccgagatctacacxxxxxxxxacactctttccctacacgacgctcttccgatc,
其中xxxxxxxx为index序列。
7.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述纯化为磁珠纯化。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的构建方法,其特征在于,所述rna为总rna、mrna、lncrna或去除核糖体的rna。
9.一种试剂盒,其特征在于,包括根据权利要求1-8中任一项所述的第一引物、第二引物和第三引物。
10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括逆转录酶和dna聚合酶。