FLT3-D835Y突变检测的CRISPR-Cas系统及其应用

文档序号:26587941发布日期:2021-09-10 19:55阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种flt3

d835y突变检测的crispr

cas系统,其特征在于,所述crispr

cas系统包括cas12a蛋白、crrna、ssdna和fq

probe。2.根据权利要求1所述的flt3

d835y突变检测的crispr

cas系统,其特征在于,所述crrna序列如seq id no.2所示。3.根据权利要求1所述的flt3

d835y突变检测的crispr

cas系统,其特征在于,所述ssdna扩增引物包括如seq id no.20所示的上游引物和如seq id no.23所示的下游引物。4.根据权利要求1所述的flt3

d835y突变检测的crispr

cas系统,其特征在于,所述fq

probe序列如seq id no.28所示,所述fq

probe的5,端修饰有荧光基团,3,端修饰有淬灭基团。5.根据权利要求2所述的flt3

d835y突变检测的crispr

cas系统,其特征在于,所述crrna的制备方法包括如下步骤:步骤1):设计并合成序列如seq id no.2所示的crrna;步骤2):用转录试剂盒对步骤1)获得的crrna进行转录,即得所述crrna。6.根据权利要求3所述的flt3

d835y突变检测的crispr

cas系统,其特征在于,所述ssdna的制备方法包括如下步骤:步骤1):提取待测样本dna;步骤2):利用如seq id no.20所示的上游引物和如seq id no.23所示的下游引物进行pcr扩增,pcr扩增产物回收,即得到所述ssdna。7.一种权利要求1~6任一项所述的flt3

d835y突变检测的crispr

cas系统在制备flt3

d835y突变检测试剂盒或诊断试剂中的应用。8.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1~6任一项所述的flt3

d835y突变检测的crispr

cas系统。9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒组分在检测体系的含量为cas12a蛋白200ng/μl、crrna1μm、ssdna0.25v/v%和fq

probe25 pmol/μl。

技术总结
本发明提供一种FLT3


技术研发人员:刘银 王鑫杰 黄行许 陈妍灵 灿灿 商豫凤 周芙玲
受保护的技术使用者:武汉大学
技术研发日:2021.06.01
技术公布日:2021/9/9
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