一种高敏感性和特异性强的日本血吸虫检测引物、探针、试剂盒及其应用

文档序号:26589509发布日期:2021-09-10 20:26阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种用于日本血吸虫检测的lfd

rpa诊断试剂盒,所述的试剂盒包括一对特异性引物和一个nfo探针,核苷酸序列如下:rpa

f: 5'

ccgaacacttcaaggaacagtttagctggc

3'(seq id no.1)rpa

r: 5'

cttcgtcgtttcaggttagatatagctttttg

3'(seq id no.2)rpa

p:5'

attacccagcttttccactcaagctaaatgaacattgaagtaggc

3'(seq id no.3)。2.根据权利要求1所述的用于日本血吸虫检测的lfd

rpa诊断试剂盒包括:rpa

f/r(10 μm):2.1 μltwistampnfo probe (10 μm):0.6 μlprimer free rehydration buffer:29.5μlbetaine(5m):5 μldna模板:1 μlddh2o:7.2 μlmgoac (280mm):2.5μl。3.根据权利要求1或2所述的用于日本血吸虫检测的lfd

rpa诊断试剂盒扩增反应条件如下:39℃反应15 min,反应产物稀释20倍后用lfd检测。4.如权利要求1

3任一项所述的试剂盒在非诊断目的的检测日本血吸虫中的应用。5.根据权利要求4所述的应用具体是:用试剂盒中的一对特异性引物和nfo探针,对待测样本中提取的dna进行rpa反应,通过lfd对扩增产物进行分析,当同时出现检测线和质控线时,认为扩增出了目的片段,该样本判为阳性。6.一种非诊断目的的日本血吸虫的lfd

rpa检测方法,检测方法包括如下步骤:从待测样本中提取dna,以dna为模版,将权利2中所有成分同时加入rpa反应体系,进行rpa反应;用lfd对rpa扩增产物进行分析,若扩增出目的片段,则待测样本为阳性。

技术总结
本发明提供了一种高敏感性和特异性强的日本血吸虫检测引物、探针、试剂盒及其应用,所述的试剂盒提供了一组敏感性高和特异性强的日本血吸虫检测用引物和探针。本发明构建了敏感性高和特异性强的日本血吸虫LFD


技术研发人员:洪炀 郭庆红 陈程 周可柔 尚政 岳永程 周雪 傅志强 陆珂 李浩 刘金明 林矫矫
受保护的技术使用者:中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
技术研发日:2021.07.09
技术公布日:2021/9/9
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