一种核酸检测芯片及核酸检测方法与流程

文档序号:29420077发布日期:2022-03-26 14:04阅读:410来源:国知局
一种核酸检测芯片及核酸检测方法与流程

1.本发明涉及生物检测技术领域,特别是涉及一种核酸检测芯片及核酸检测方法。


背景技术:

2.pcr(polymerase chain reaction,聚合酶链式反应)技术是一种在生物体外放大扩增特定dna(deoxyribonucleic acid,脱氧核糖核酸)序列的分子生物学技术。由于pcr技术具有特异性强、灵敏度高、纯度要求低以及简便、快速的特点,因而被广泛应用于核酸检测及分析。
3.在对样本进行检测时主要包括核酸提取、检测前处理及pcr检测。为了实现核酸即时检测(poct)和提高检测准确性,需要将各种试剂预置至试剂盒内,且试剂盒内各种试剂与样本的混匀和转移利用离心运动实现,以实现核酸提取和检测前处理等步骤。然而,现有技术中,试剂盒内的试剂的流向控制困难,增加了操作员的操作难度,并且需要在试剂盒上集成若干单向阀来控制各个试剂的流向,从而增大了制造难度和制造成本,体积较大不便于携带。例如申请号为202010737913.7的专利申请中,在过滤膜与加样区a之间设置允许液体从加样区a流向取样区b的单向阀,利用单向阀来控制试剂的流动方向。


技术实现要素:

4.基于此,有必要针对现有技术中试剂盒内的试剂的流向控制困难,增加了操作员的操作难度,并且需要在试剂盒上集成若干单向阀来控制各个试剂的流向,从而增大了制造难度和制造成本,体积较大不便于携带的问题,提供一种改善上述缺陷的核酸检测芯片及核酸检测方法。
5.一种核酸检测芯片,包括芯片本体,所述芯片本体具有多个试剂腔、检测腔、控制腔及第一流道;所述多个试剂仓依次彼此连通,且其中一个所述试剂腔通过所述第一流道与所述检测腔连通,所述控制腔与所述第一流道连通;
6.其中,所述控制腔内预置有能够在触发条件下于流态与固态之间切换的第一封堵件,所述控制腔内的所述第一封堵件转化为流态后能够在离心作用下流动至所述第一流道,并在所述第一流道内转化为固态,以封堵所述第一流道。
7.在其中一个实施例中,所述第一封堵件的温度大于第一预设温度或温度范围时,由固态切换为流态;所述第一封堵件的温度小于所述第一预设温度或温度范围时,由流态切换为固态。
8.在其中一个实施例中,所述第一封堵件包括石蜡件。
9.在其中一个实施例中,所述多个试剂腔和所述检测腔沿一预设方向依次间隔布设。
10.在其中一个实施例中,所述芯片本体还具有多个连通通道,每相邻两个所述试剂腔之间通过所述连通通道连通,每一所述连通通道预置有用于封闭所述连通通道的第二封堵件,所述第二封堵件能够在触发条件下由固态转化成流态。
11.在其中一个实施例中,所述第二封堵件的温度大于第二预设温度或温度范围时,由固态切换为流态。
12.在其中一个实施例中,所述第二封堵件包括石蜡件。
13.在其中一个实施例中,所述芯片本体包括第一表面和与所述第一表面相背离的第二表面;
14.所述第一表面开设有与所述多个试剂腔一一对应连通的多个第一添加孔;所述核酸检测芯片还包括盖设于所述第一表面上的第一盖片。
15.在其中一个实施例中,所述第一表面开设有与所述控制腔连通的第二添加孔、以及与所述多个连通通道一一对应连通的第三添加孔。
16.在其中一个实施例中,每一所述试剂腔、所述控制腔、所述第一流道及每一所述连通通道均由所述第二表面向内凹陷形成;
17.所述核酸检测芯片还包括盖设于所述第二表面上的第二盖片,所述第二盖片呈透明状。
18.在其中一个实施例中,所述检测腔贯通所述芯片本体的所述第一表面和所述第二表面;
19.所述第一盖片至少对应于所述检测腔的区域呈透明状。
20.一种应用如上任一实施例中所述的核酸检测芯片的核酸检测方法,包括以下步骤:
21.各个所述试剂腔分别预装核酸提取试剂和核酸反应试剂;将样品加入至预装有所述核酸提取试剂的所述试剂腔内;
22.利用离心机带动所述芯片本体作离心运动,以使样品依次流入各个预装有所述核酸反应试剂的所述试剂腔内进行混匀,并通过所述第一流道进入所述检测腔;
23.在触发条件下所述控制腔内呈固态的所述第一封堵件转化成流态;
24.利用离心机带动所述芯片本体作离心运动,以使呈流态的所述第一封堵件流动至所述第一流道内;
25.所述第一流道内的所述第一封堵件在触发条件下转化呈固态,以封堵所述第一流道;
26.利用核酸检测模块对所述检测腔内的液体进行核酸检测。
27.上述核酸检测芯片及核酸检测方法,在实际使用时,将各个试剂分别预置在各个试剂腔内,将呈固态的第一封堵件预置在控制腔内,将待检测的样品置于对应的试剂腔内。然后,将芯片本体置于离心机上作离心运动,从而在离心力的作用下样品依次与各个试剂腔内的试剂混匀,并发生反应,从而完成核酸提取和检测前处理,得到核酸检测液。再然后,在离心力的作用下该核酸检测液继续通过第一流道流动至检测腔内。再然后,在触发条件下控制腔内的第一封堵件由固态转化为流态,并在离心力的作用下流动至第一流道。再在触发条件下将第一流道内呈流态的第一封堵件转化成固态,以封堵第一流道,从而阻止检测腔内的核酸检测液通过第一流道反流至试剂腔内。最后,将核酸检测芯片转移至检测设备上,以对检测腔内的核酸检测液进行核酸检测(例如pcr荧光检测)。
28.如此,通过在芯片本体的控制腔内预置第一封堵件,利用该第一封堵件转化成流态时在离心力的作用下流动至第一流道,到达第一流道的第一封堵件在触发条件下转化成
固态,实现封堵第一流道,起到限制检测腔内的核酸检测液反流的目的,避免了如现有技术中需要集成设置单向阀,从而有利于降低制造难度和制造成本,且体积较小便于携带。并且,在核酸检测芯片的密闭空间内进行核酸提取、检测前处理和核酸检测,避免了人为和环境的污染,有利于确保检测精度,减少了对专业人员的要求与标准实验室的依赖。
附图说明
29.图1为本发明一实施例中核酸检测芯片的分解示意图;
30.图2为图1所示的核酸检测芯片的芯片本体的俯视图;
31.图3为图1所示的核酸检测芯片的芯片本体的仰视图;
32.图4为本发明一实施例中核酸检测方法的步骤流程图;
33.图5为图4所示的核酸检测方法的步骤s20的具体步骤流程图。
具体实施方式
34.为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施,本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进,因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
35.在本发明的描述中,需要理解的是,术语“中心”、“纵向”、“横向”、“长度”、“宽度”、“厚度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”、“顺时针”、“逆时针”、“轴向”、“径向”、“周向”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。
36.此外,术语“第一”、“第二”仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。在本发明的描述中,“多个”的含义是至少两个,例如两个,三个等,除非另有明确具体的限定。
37.在本发明中,除非另有明确的规定和限定,术语“安装”、“相连”、“连接”、“固定”等术语应做广义理解,例如,可以是固定连接,也可以是可拆卸连接,或成一体;可以是机械连接,也可以是电连接;可以是直接相连,也可以通过中间媒介间接相连,可以是两个元件内部的连通或两个元件的相互作用关系,除非另有明确的限定。对于本领域的普通技术人员而言,可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
38.在本发明中,除非另有明确的规定和限定,第一特征在第二特征“上”或“下”可以是第一和第二特征直接接触,或第一和第二特征通过中间媒介间接接触。而且,第一特征在第二特征“之上”、“上方”和“上面”可是第一特征在第二特征正上方或斜上方,或仅仅表示第一特征水平高度高于第二特征。第一特征在第二特征“之下”、“下方”和“下面”可以是第一特征在第二特征正下方或斜下方,或仅仅表示第一特征水平高度小于第二特征。
39.需要说明的是,当元件被称为“固定于”或“设置于”另一个元件,它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件,它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。本文所使用的术语“垂直的”、“水平
的”、“上”、“下”、“左”、“右”以及类似的表述只是为了说明的目的,并不表示是唯一的实施方式。
40.请参阅图1至图3所示,本发明一实施例提供了一种核酸检测芯片,包括芯片本体10,该芯片本体10具有多个试剂腔11、检测腔12、控制腔14及第一流道13。多个试剂腔11依次彼此连通,并其中一个试剂腔11通过第一流道13与检测腔12连通,且控制腔14与第一流道13连通。
41.其中,控制腔14内预置有能够在触发条件下于流态与固态之间切换的第一封堵件。该控制腔14内的第一封堵件转化为流态后能够在离心作用下流动至第一流道13,并在第一流道13内转化为固态,以封堵该第一流道13。
42.上述核酸检测芯片,在实际使用时,将各个试剂分别预置在各个试剂腔11内,将呈固态的第一封堵件预置在控制腔14内,将待检测的样品置于对应的试剂腔11内。然后,将芯片本体10置于离心机上作离心运动,从而在离心力的作用下样品依次与各个试剂腔11内的试剂混匀,并发生反应,从而完成核酸提取和检测前处理,得到核酸检测液。再然后,在离心力的作用下该核酸检测液继续通过第一流道13流动至检测腔12内。再然后,在触发条件下控制腔14内的第一封堵件由固态转化为流态,并在离心力的作用下流动至第一流道13。再在触发条件下将第一流道13内呈流态的第一封堵件转化成固态,以封堵第一流道13,从而阻止检测腔12内的核酸检测液通过第一流道13反流至试剂腔11内。最后,将核酸检测芯片转移至检测设备上,以对检测腔12内的核酸检测液进行核酸检测(例如pcr荧光检测)。
43.如此,通过在芯片本体10的控制腔14内预置第一封堵件,利用该第一封堵件转化成流态时在离心力的作用下流动至第一流道13,到达第一流道13的第一封堵件在触发条件下转化成固态,实现封堵第一流道13,起到限制检测腔12内的核酸检测液反流的目的,避免了如现有技术中需要集成设置单向阀,从而有利于降低制造难度和制造成本,且体积较小便于携带。并且,在核酸检测芯片的密闭空间内进行核酸提取、检测前处理和核酸检测,避免了人为和环境的污染,有利于确保检测精度,减少了对专业人员的要求与标准实验室的依赖。
44.需要说明的是,可在制造核酸检测芯片时就将第一封堵件和各种试剂分别预置在控制腔14和试剂腔11内。当然,第一封堵件和各种试剂也可在用户使用时自行添加,在此不作限定。试剂可以是胶囊颗粒或冻干状态,也可以是液体,在此不作限定。
45.具体到实施例中,第一封堵件的温度大于第一预设温度或温度范围时,由固态切换为流态。第一封堵件的温度小于第一预设温度或温度范围时,由流态切换为固态。如此,当核酸检测液进入检测腔12后,对控制腔14内的第一封堵件进行加热,使得第一封堵件的温度大于第一预设温度或温度范围,进而使得第一封堵件由固态转化成流态。当在离心力的作用下呈流态的第一封堵件进入第一流道13后,第一流道13内的第一封堵件逐渐降温(可以采用降温措施也可自然降温,在此不作限定),直至第一封堵件的温度小于第一预设温度或温度范围,使得第一封堵件转化成固态,从而达到封堵第一流道13的目的。可以理解的是,该第一预设温度或温度范围根据第一封堵件的相变温度进行设定,在此不作限定。
46.需要说明的是,触发条件并不仅限于温度,在另一些实施例中,第一封堵件也可采用例如感光材料,在光照条件下能够实现在固态和流态之间切换,在此不作限定。
47.还需要说明的是,该第一封堵件需要采用惰性材料,确保与样本、各个试剂等均不
发生反应,从而避免对核酸提取、检测前处理及核酸检测造成不良影响。可选地,第一封堵件可以采用石蜡件。
48.具体到实施例中,上述多个试剂腔11和检测腔12沿一预设方向依次间隔布设。如此,将芯片本体10装载在离心机上作离心运动时,旋转中心靠近芯片本体10在该预设方向上的一端,从而可通过控制转速来使得样品沿该预设方向依次到达各个试剂腔11,最终到达检测腔12。可选地,该预设方向可以是芯片本体10的纵长方向。
49.具体到附图所示的实施例中,试剂腔11的数量为三个,为便于描述分别命名为第一试剂腔11a、第二试剂腔11b及第三试剂腔11c。第一试剂腔11a用于容置核酸提取试剂和样品,第二试剂腔11b和第三试剂腔11c用于容置核酸反应试剂。第一试剂腔11a、第二试剂腔11b、第三试剂腔11c和检测腔12沿上述预设方向依次间隔布设。并且,第一试剂腔11a与第二试剂腔11b连通,第二试剂腔11b与第三试剂腔11c连通,第三试剂腔11c与检测腔12通过第一流道13连通,控制腔14与第一流道13通过第三试剂腔11c连通。可以理解的是,核酸提取试剂可以是裂解试剂等,核酸反应试剂可以是mix试剂或taq(thermus aquaticus,水生栖热菌)酶。其中,mix试剂可以包括pcr缓冲液和/或生物酶等,在此不作限定。
50.如此,在实际使用时,通过离心机产生振动,使得样品和核酸提取试剂在第一试剂腔11a内混匀,并充分反应。然后在离心运动的作用下第一试剂腔11a内的混合液进入第二试剂腔11b,并与第二试剂腔11b内的核酸反应液混匀,且充分反应。然后再在离心运动的作用下第二试剂腔11b内的混合液进入第三试剂腔11c,并与第三试剂腔11c内的核酸反应液混匀。然后再在离心运动的作用下第三试剂腔11c内的混合液通过第一流道13进入检测腔12内。然后,对控制腔14内的第一封堵件进行加热,使得第一封堵件的温度大于第一预设温度或温度范围,进而转换成流态。然后再在离心运动的作用下,使得控制腔14内的呈流态的第一封堵件通过第三试剂腔11c进入第一流道13。进入第一流道13内的第一封堵件温度降低至小于第一预设温度或温度范围,使得第一流道13内的第一封堵件转换成固态,从而封堵该第一流道13,避免在后续转运或检测的过程中检测腔12内的核酸检测液通过第一流道13回流至第三试剂腔11c。最后,将芯片本体10转移至核酸检测模块进行核酸检测。
51.本发明的实施例中,芯片本体10还具有多个连通通道15,每相邻两个试剂腔11之间通过连通通道15连通,即通过连通通道15实现相邻两个试剂腔11连通。每一连通通道15预置有用于封闭连通通道15的第二封堵件,该第二封堵件能够在触发条件下由固态转化成流态。如此,当混合液在当前试剂腔11内混匀并反应时,由于当前试剂腔11与其相邻的下一个试剂腔11之间的连通通道15被呈固态的第二封堵件封堵,使得当前试剂腔11内的混合液不会流动至下一个试剂腔11内。当需要将当前试剂腔11内的混合液转移至与其相邻的下一个试剂腔11内时,该两个试剂腔11之间的连通通道15内的第二封堵件在触发条件下由固态转化成流态,使得在离心运动的作用下混合液能够由当前试剂腔11通过流通通道进入到下一个试剂腔11内,从而实现混合液的转移。
52.具体到实施例中,第二封堵件的温度大于第二预设温度或温度范围时,由固态切换为流态。第二封堵件的温度小于第二预设温度或温度范围时,由流态切换为固态。如此,当不需要混合液在相邻两个试剂腔11之间转移时,该两个试剂腔11之间的连通通道15内的第二封堵件呈固态,从而起到封堵该连通通道15的作用,进而避免混合液在相邻两个试剂腔11之间转移。当需要混合液由当前试剂腔11转移至下一个试剂腔11内时,对该两个试剂
腔11之间的连通通道15内的第二封堵件进行加热,使得该第二封堵件的温度大于第二预设温度或温度范围,从而转换成流态,进而在离心运动的作用下当前试剂腔11内的混合液能够通过连通通道15进入下一个试剂腔11内。可以理解的是,该第二预设温度或温度范围根据第二封堵件的相变温度进行设定,在此不作限定。
53.需要说明的是,触发条件并不仅限于温度,在另一些实施例中,第二封堵件也可采用例如感光材料,在光照条件下能够实现在固态和流态之间切换,在此不作限定。
54.还需要说明的是,该第二封堵件需要采用惰性材料,确保与样本、各个试剂等均不发生反应,从而避免对核酸提取、检测前处理及核酸检测造成不良影响。可选地,第二封堵件可以采用石蜡件。
55.具体到附图所示的实施例中,第一试剂腔11a与第二试剂腔11b之间通过一个连通通道15连通,第二试剂腔11b与第三试剂腔11c之间通过一个连通通道15连通,且两个连通通道15内均预置有呈固态的第二封堵件,以封堵连通通道15。也就是说,在初始时利用第二封堵件的封堵,使得第一试剂腔11a与第二试剂腔11b之间不能进行试剂的转移,第二试剂腔11b与第三试剂腔11c之间也不能进行试剂的转移,避免在使用之前各个试剂腔11内的试剂错误的混合导致使用效果不佳或无法使用。
56.如此,在试剂使用时,通过离心机产生振动,使得样品和核酸提取试剂在第一试剂腔11a内混匀,并充分反应。然后对第一试剂腔11a与第二试剂腔11b之间的连通通道15内的第二封堵件进行加热,使其转换成流态。再在离心运动的作用下第一试剂腔11a内的混合液顺利地进入第二试剂腔11b,并与第二试剂腔11b内的核酸反应试剂混匀,进行充分反应。然后再对第二试剂腔11b与第三试剂腔11c之间的连通通道15内的第二封堵件进行加热,使其转换成流态。再在离心运动的作用下第二试剂腔11b内的混合液顺利地进入第三试剂腔11c,并与第三试剂腔11c内的核酸反应试剂混匀。之后再在离心运动的作用下第三试剂腔11c内的混合液通过第一流道13进入检测腔12内。再然后,对控制腔14内的第一封堵件进行加热,使得第一封堵件的温度大于第一预设温度或温度范围,进而转换成流态。之后再在离心运动的作用下,使得控制腔14内的呈流态的第一封堵件通过第三试剂腔11c进入第一流道13。进入第一流道13内的第一封堵件温度降低至小于第一预设温度或温度范围,使得第一流道13内的第一封堵件转换成固态,从而封堵该第一流道13,避免在后续转移或核酸检测的过程中检测腔12内的核酸检测液通过第一流道13回流至第三试剂腔11c。最后,将芯片本体10转移至核酸检测模块进行核酸检测。
57.本发明的实施例中,芯片本体10包括第一表面a1和与该第一表面a1相背离的第二表面a2。第一表面a1开设有与多个试剂腔11一一对应连通的多个第一添加孔111。核酸检测芯片还包括盖设于第一表面a1上的第一盖片20,从而利用该第一盖片20封闭各个第一添加孔111。如此,可通过各个第一添加孔111将各种试剂分别添加至各个试剂腔11内。然后再将第一盖片20盖设在第一表面a1上,以封闭各个第一添加孔111。可选地,第一盖片20可以采用膜材,例如封口膜。第一盖片20可以采用热熔胶封装、黏贴封装等方式连接在第一表面a1上,从而实现对各个第一添加孔111的封闭。
58.进一步地,核酸检测芯片还包括柱塞,该柱塞穿过第一盖片20,并封堵于与预装有核酸提取试剂的试剂腔11对应连通的一个第一添加孔111。如此,当需要使用时,可拔出柱塞,并通过该第一添加孔111将样品加入至预装有核酸反应试剂的试剂腔11内,然后再将柱
塞封堵在该第一添加孔111内。具体到附图所示的实施例中,柱塞穿过第一盖片20并封堵在与第一试剂腔11a连通的第一添加孔111(即图2中最右端的第一添加孔111)。
59.具体到实施例中,第一表面a1还可开设与控制腔14连通的第二添加孔142、以及与多个连通通道15一一对应连通的第三添加孔151。如此,可利用第二添加孔142将第一封堵件添加至控制腔14内,可利用各个第三添加孔151将第二封堵件添加至各个连通通道15内,以封堵各个连通通道15。第一封堵件和第二封堵件添加完毕后,再将第一盖片20盖设在第一表面a1上。
60.具体到实施例中,每一试剂腔11、控制腔14、第一流道13及每一连通通道15均由第二表面a2向内凹陷形成。也就是说,每一试剂腔11、控制腔14、第一流道13及每一连通通道15在第二表面a2上均具有敞口。核酸检测芯片还包括盖设于第二表面a2上的第二盖片30,且该第二盖片30呈透明状。如此,利用第二盖片30封闭每一试剂腔11、控制腔14、第一流道13及每一连通通道15在第二表面a2敞口。并且,可透过第二盖片30对各个试剂腔11、控制腔14、第一流道13及各个连通通道15内的液体的流向进行观察,以便于及时调整离心运动的转速和/或旋转方向。可选地,第二盖片30可以采用膜材,例如封口膜。第二盖片30可以采用热熔胶封装、黏贴封装等方式连接在第二表面a2上。
61.进一步地,芯片本体10还具有第二流道141,该第二流道141的一端与控制腔连通,第二流道141的另一端连通于第一流道13,或者连通于与该第一流道13连通的试剂腔11。可选地,第二流道141由第二表面a2向内凹陷形成,从而可透过第二盖片30观察第一封堵件的流动。
62.进一步地,检测腔12贯通芯片本体10的第一表面a1和第二表面a2。第一盖片20至少对应于检测腔12的区域呈透明状。如此,核酸检测模块可透过第一盖片20的对应于检测腔12的区域和第二盖片30对检测腔12内的核酸检测液进行pcr荧光检测。
63.进一步地,第一表面a1分为第一区域和第二区域。上述各个试剂腔11、控制腔14、各个连通通道15、第二流道141均位于第一区域,上述检测腔12位于第二区域,第一流道13由第一区域延伸至第二区域。第一盖片20包括分体设置的第一子盖片21和第二子盖片22。第一子盖片21用于覆盖第一区域,第二子盖片22用于覆盖第二区域。可以理解的是,第一子盖片21上具有用于供柱塞穿设的贯穿孔。
64.基于上述核酸检测芯片,本发明还提供一种核酸检测方法,该核酸检测方法包括以下步骤:
65.s10、各个试剂腔11内分别预装核酸提取试剂和核酸反应试剂;将样品加入至预装有核酸提取试剂的试剂腔11内。具体地,将与第一试剂腔11a连通的第一添加孔111内的柱塞拔出,然后从该第一添加孔111将样品加入至装有核酸提取试剂的第一试剂腔11a内。然后再重新将柱塞封堵在该第一添加孔111。
66.s20、利用离心机带动芯片本体10作离心运动,以使样品依次流入各个预装有核酸反应试剂的试剂腔11内进行混匀,从而发生反应,并通过第一流道13进入检测腔12,即实现核酸提取和检测前处理。具体地,通过控制离心运动的转速和/或转动方向,使得样品依次与各个试剂混合,以完成核酸提取和检测前处理。
67.s30、控制腔14内呈固态的第一封堵件在触发条件下转化成流态。具体地,对控制腔14进行加热,使得控制腔14内的第一封堵件的温度高于第一预设温度或温度范围,进而
第一封堵件由固态转化成流态。
68.s40、利用离心机带动芯片本体10作离心运动,以使呈流态的第一封堵件流动至第一流道13内。
69.s50、第一流道13内的第一封堵件在触发条件下转化呈固态,以封堵第一流道13,从而阻止检测腔12内的核酸检测液反流至试剂腔11。可选地,第一流道13内的第一封堵件可以在冷却措施或自然冷却的作用下降温至低于第一预设温度或温度范围,使得第一流道13内的第一封堵件转化成固态,从而封堵第一流道13。
70.s60、利用核酸检测模块对检测腔12内的液体进行核酸检测(例如pcr荧光检测)。
71.具体到实施例中,步骤s20具体包括:
72.s21、利用离心运动使得样品与当前试剂腔11内的试剂混匀,并充分反应;
73.s22、在触发条件下,使得当前试剂腔11与其相邻的下一个试剂腔11之间的连通通道15内的第二封堵件由固态转化成流态。
74.s23、利用离心机带动芯片本体10作离心运动,以使当前试剂腔11内的混合液转移至下一试剂腔11内;
75.s24、重复执行步骤s21至步骤s23,直至混合液到达与第一流道13连通的试剂腔11内,并与该试剂腔11内的试剂混匀而充分反应,从而得到核酸检测液;
76.s25、利用离心机带动芯片本体10作离心运动,以使核酸检测液通过第一流道13进入检测腔12内。
77.具体到实施例中,步骤s10还包括:
78.通过各个第一添加孔111将各种核酸提取试剂和核酸反应试剂分别添加至各个试剂腔11,通过第二添加孔142将第一封堵件添加至控制腔14内,通过各个第三添加孔151将第二封堵件分别添加至各个连通通道15内;
79.将第一子盖片21覆盖在第一表面a1的第一区域,以封闭各个第一添加孔111、第二添加孔142和各个第三添加孔151,并将柱塞封堵在与预置有核酸提取试剂的试剂腔11连通的一个第一添加孔111内;
80.在使用时,拔出柱塞,由第一添加孔111向预置有核酸提取试剂的试剂腔11内添加样品;
81.重新将柱塞封堵在与预置有核酸提取试剂的试剂腔11连通的第一添加孔111内。
82.需要说明的是,可根据实际需要对离心运动的转速和转动方向进行调整,以实现对当前试剂腔11内的液体进行混匀或转移、亦或是实现对控制腔14内的第一封堵件进行转移等,具体的转速值可根据实际情况进行设定,在此不作限定。
83.以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合,为使描述简洁,未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述,然而,只要这些技术特征的组合不存在矛盾,都应当认为是本说明书记载的范围。
84.以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
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