技术特征：
1.一种用于肺来源外泌体组成物质抽提的复合试剂，其特征在于，包括富集试剂组、抽提试剂组；所述富集试剂组包括富集试剂1、富集试剂2和富集试剂3，所述富集试剂1按重量份计，包括10-20份浓度为25％的peg20000、5-15份浓度为20％的peg10000、1-4份浓度为0.05％的吐温20、1-4份磷酸二氢钾溶液、1-4份磷酸氢二钠溶液、1-4份氯化钠溶液和1-4份氯化钾溶液，所述富集试剂2按重量份计，包括5-15份浓度为20％的peg20000、5-15份浓度为20％的peg8000、5-15份葡萄糖溶液和2-8份乙酸钠溶液，所述富集试剂3包括0.1-5份包被sftpc抗体的protein a/g磁珠；所述抽提试剂组包括蛋白抽提试剂组和rna抽提试剂组；所述蛋白抽提试剂组包括ripa强裂解液；所述rna抽提试剂组包括rna抽提试剂1、rna抽提试剂2和rna抽提试剂3，所述rna抽提试剂1包括trizol裂解液，所述rna抽提试剂2包括浓度为100％的三氯甲烷，所述rna抽提试剂3包括浓度为100％的乙醇。2.根据权利要求1所述的复合试剂，其特征在于，所述富集试剂1按重量份计，包括13-18份浓度为25％的peg20000、8-12份浓度为20％的peg10000、1.5-3份浓度为0.05％的吐温20、1.5-3份磷酸二氢钾溶液、1.5-3份磷酸氢二钠溶液、1.5-3份氯化钠溶液和1.5-3份氯化钾溶液，所述富集试剂2按重量份计，包括8-12份浓度为20％的peg20000、8-12份浓度为20％的peg8000、8-12份葡萄糖溶液和3-7份乙酸钠溶液，所述富集试剂3包括0.5-4份包被sftpc抗体的protein a/g磁珠。3.根据权利要求1所述的复合试剂，其特征在于，所述富集试剂1按重量份计，包括15份浓度为25％的peg20000、10份浓度为20％的peg10000、2份浓度为0.05％的吐温20、2份磷酸二氢钾溶液、2份磷酸氢二钠溶液、2份氯化钠溶液和2份氯化钾溶液，所述富集试剂2按重量份计，包括10份浓度为20％的peg20000、10份浓度为20％的peg8000、10份葡萄糖溶液和5份乙酸钠溶液，所述富集试剂3包括1份包被sftpc抗体的protein a/g磁珠。4.权利要求1-3任一项所述的复合试剂的使用方法，其特征在于，包括如下步骤：将血清样品离心得到上清液；加入所述富集试剂组得到复合物；加入所述抽提试剂组得到相应的组成物质，所述组成物质包括蛋白和rna，所述蛋白包括nse和cea，所述rna包括mir-21-5p、mir-141和mir-23a。5.根据权利要求4所述的使用方法，其特征在于，加入所述富集试剂组的操作顺序包括如下步骤：加入富集试剂1，3-5℃放置，离心后去清液得重悬液1；加入富集试剂2，3-5℃放置，离心后去清液得重悬液2；加入富集试剂3，3-5℃过夜孵育去清液得重悬液3。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述富集试剂1与所述上清液的体积比为1：(3-5)，所述富集试剂2与所述重悬液1的体积比为1：(4-6)，所述富集试剂3与所述重悬液2的体积比为1：(4-6)。7.根据权利要求4所述的使用方法，其特征在于，当组成物质为蛋白时，选择蛋白抽提试剂，所述蛋白抽提试剂的使用方法包括如下步骤：在重悬液3中加入蛋白抽提试剂后放置
于冰箱，涡旋，重复三次，离心后取上清液即为蛋白。8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述蛋白抽提试剂与重悬液3的体积比为1：(0.5-2)。9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，当组成物质为rna时，选择rna抽提试剂组，所述rna抽提试剂组的使用方法包括如下步骤：在重悬液3中加入rna抽提试剂1，涡旋震荡后室温放置；加入rna抽提试剂2，室温放置后离心得到无色上清液；加入rna抽提试剂3进行吸附得到rna。10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述rna抽提试剂1与所述重悬液3的体积比为(4-6)：1，所述rna抽提试剂1与所述rna抽提试剂2的体积比为(3-5)：1；所述rna抽提试剂3与所述无色上清液的体积比为(1-2)：1。
技术总结
本发明提供了一种用于肺来源外泌体组成物质抽提的复合试剂，该方法包括如下步骤：将血清样品离心得到的上清液；加入富集试剂组得到复合物；加入抽提试剂组得到相应的组成物质，所述组成物质包括蛋白和RNA，所述蛋白包括NSE和CEA，所述RNA包括miR-21-5p、miR-141和miR-23a。本发明通过抽提肺来源蛋白和RNA，可提早检测出肺癌，有助于尽早治疗。有助于尽早治疗。有助于尽早治疗。
技术研发人员：张庆华 宋凯 匡鑫
受保护的技术使用者：上海华盈生物医药科技有限公司
技术研发日：2022.03.16
技术公布日：2022/6/4