N-[2-{4-[6-氨基-5-(2,4-二氟苯甲酰)-2-氧代吡啶-1(2h)-基]-3,5-二氟苯基}乙基]-l ...的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及氨基酸醋化合物W及包含该氨基酸醋化合物的组合物。本发明还设及 该化合物或组合物在抑制p38MAP激酶中的应用。此外，本发明设及由本发明化合物的醋 基水解产生的酸。
【背景技术】
[0002] 导致诸如TNF-a、IL1-0和IL-8等细胞因子水平升高的包括单核细胞、巨 瞻细胞和中性粒细胞在内的白细胞的不当活化是一些炎性疾病的致病特征，该些炎性 疾病包括类风湿性关节炎、溃瘍性结肠炎、克罗恩病、慢性阻塞性肺病（C0PD)、哮喘和 牛皮癖、W及设及炎性组分的细胞增殖性疾病。炎症细胞响应各种外界刺激产生细胞 因子，导致许多细胞内信号传导机制的活化。其中较为显著的是由调节细胞生长、分化 和应激反应的高度保守的信号传导激酶构成的细胞分裂素活化蛋白激酶（MPK)超家 族。哺乳动物细胞包含至少S个MAPK家族；P42/44细胞外信号调节激酶巧服)MAPK， C-化nN肥-末端激酶（JNK)和p38MAPK(也称为p38a/Mpk2/服/SAPK2a/CSBPl/2)。 p38MAPK在其鉴定为激酶后首先被克隆，用脂多糖（LP巧刺激单核细胞之后酪氨酸磯 酸化出an等，Sciencel994,265,80引。已经描述了哺乳动物p38的其他同系物，包括 p38P[Jiang等，J.Biol.Qiem, 1996, 271, 17920],p38 丫[Li等，Biochem.Biophys.Res. Commun.，1996, 228, 334]和p38 5[Jiang等，J.Biol.Chem. 1997, 272, 30122]。p38a和 p38 0表达广泛，p38 丫主要限于骨骼肌，并且p38 5主要在肺和肾脏中表达。
[0003] 宿主防御细胞释放细胞因子W及白细胞对细胞因子和其他促炎应激的响应受到 p38MAPK各种程度的调节[Cuenda等，阳BSLett，1995,364,229-233]。在其他细胞类型 中，p38MAPK控制应激响应，例如TNF-a刺激支气管上皮细胞产生IL-8和上调LPS-刺激 的上皮细胞中的细胞粘附分子ICAM-1。一旦活化，经双特异性激酶MKK3和MKK6的TGY基 序的双重磯酸化，p38MAPK通过转录因子和其他激酶的磯酸化作用而产生效果。MAP激酶 活化的蛋白激酶-2 (MAPKAP-K2)已鉴定为p38磯酸化的目标。显示缺少MAPKAP-K2的小 鼠[Kotlyarov等，化t.CellBiol. 1999, 1，94-97]响应LPS/半乳糖胺介导的内毒素性休 克而释放降低水平的TNF-a，IL-1 0，IL-6,比-10和IFN-丫。在mRNA水平调节该些细胞 因子W及C0X-2的水平。TNF-a的水平通过TNF-amRNA的3' -UTR中的富AU元件经翻 译控制进行调节，而MAPKAP-K2信号传导增加TNF-amRNA翻译。MAPKAP-K2信号传导导致 C0X-2、IL-6和巨瞻细胞炎症蛋白的mRNA稳定性增加。MAPKAP-K2决定P38MAPKW及转导 p38MAPK信号传导的细胞位置，具有位于其駿基末端的核定位信号W及作为自动抑制结构 域的核输出信号圧ngel等，EMB0J. 1998, 17, 3363-3371]。在应激细胞中，MAPKAP-K2和 p38MAPK由细胞核迁移进入细胞质，该种迁移仅仅在p38MAPK催化活化时发生。据信该事 件是由于p38MAPK的磯酸化导致的MAPKAP-K2核输出信号的暴露而驱动的[Meng等，J. Biol.Chem. 2002, 277, 37401-37405]。此外，p38MAPK直接或间接地导致一些据信介导炎 症的转录因子的磯酸化，包括ATF1/2 (活化转录因子1/2)，CH0P-10/GADD-153 (生长停滞 和DNA损伤诱导基因153)，SAP-1 (血清应答因子辅助蛋白-1)和ME巧C(肌细胞增强子因 子-2)foster等，DrugNewsPerspect. 2000, 13, 488-497]。
[0004] 在一些实例中已显示，小分子抑制p38MAPK活性可用于治疗一些由不当细胞因 子产生介导的疾病状态，包括类风湿性关节炎、C0PD、哮喘和脑缺血。该种模式已成为一 些综述的主题[Sali1:u;ro等，Qi;rrentMedicinalQiemistry, 1999, 6, 807-823 和Kumar 等，化1:脚6ReviewsDrugDiscovery2003, 2, 717-726]。
[0005] 已显示p38MAPK的抑制剂在类风湿性关节炎的动物模型中是有效的，例如大 鼠中胶原诱导的关节炎[Revesz等，Biorg.Med.Chem.Lett.，2000, 10, 1261-1364]和大 鼠中佐剂诱发关节炎[Wadswo;rth等，J.化armacol.Exp.Hier. , 1999, 291, 1685-1691]。 在膜腺炎诱发的肺损伤的鼠模型中，用p38MAPK抑制剂预处理可降低气道和 肺水肿中TNF-a的释放[Denham等，Grit.CareMed. ,2000, 29, 628 和Yang 等，Surge巧，1999, 126, 216]。在OVA-致敏小鼠中在卵清蛋白刺激之前抑制p38 MAPK降低了炎症过敏气道模型中气道的细胞因子和炎症细胞蓄积扣nderwood等，J. 化armacol.Exp.Ilier.，2000, 293, 281]。已观察到在患有炎性肠病的患者中p38MAP 激酶活性增加[Waetzig等，J.Immunol, 2002, 168, 5432-5351]。在屯、脏肥大巧ehr 等，Circulation, 2001, 104, 1292-129引和脑局部缺血[Barone等，J.化armacol.Exp. Ther.，2001，296, 312-321]的大鼠模型中显示p38MAPK抑制剂是有效的。
[0006]W0 2007/129040和W0 2009/060160都揭示a氨基酸醋是p38MAP激酶的抑制 剂。在揭示的化合物中，醋基团是可W被一种或多种细胞内醋酶水解成駿酸基团的醋基团； 并且a氨基酸醋的碳上的取代基形成侧链，其是天然或非天然a氨基酸的侧链。
[0007] 据称揭示的化合物是p38MAPK(p38a，P，丫和5 )及其亚型和剪接变体，特别是 p38a，p38 0和P38 0 2的强效的选择性抑制剂。因此，化合物可用于医疗用途，例如治疗和 预防本文所述的免疫和炎性疾病。该化合物的特征在于，氨基酸基序或氨基酸醋基序分子 中存在-NH-CHR1R2,其可W被细胞内駿酸醋酶水解。具有亲脂性氨基酸醋基序的化合物穿 过细胞膜，并且由细胞内駿酸醋酶水解成酸。由于其不易于穿过所述细胞膜，所述极性水解 产物在细胞中积聚。因此，化合物的p38MAP激酶活性在细胞内得到延长和增强。本发明 化合物设及国际专利申请W003076405所涵盖的p38MAP激酶抑制剂，但区别在于它们具有 上述氨基酸醋基序。
[0008]W0 2007/129040还揭示了包括在巨瞻细胞中选择性蓄积的化合物。已知巨瞻 细胞通过释放细胞因子，特别是TNFa和IL-1在炎性疾病中发挥关键作用（vanRoon 等，ArthritisandMieumatism, 2003, 1229-1238)。在类风湿性关节炎中，其是维持关节 炎症和关节破坏的主要作用物。巨瞻细胞也参与肿瘤生长和发育（化Idini和Carraro， CurrDrugTargetsInflammAllergy, 2005, 3-8)。因此选择性祀向巨瞻细胞增殖的试剂 可具有治疗癌症和自体免疫疾病的价值。预期祀向特定细胞类型会引起副作用降低。醋 酶基序连接至p38激酶抑制剂的方式确定其是否水解，因而确定是否在不同细胞类型中积 聚。具体说，巨瞻细胞包含人駿酸醋酶hCE-1而其他细胞类型没有。在W02007/129040的 通式（I)中，当醋酶基序RICH巧2)NH-的氮不与幾基（-" = 0)-)直接相连时，即Y不是- C( = 0)，-C( = 0)0-或-c( = 0)NR3-基团，醋将只能由hCE-1水解，因而抑制剂仅在巨瞻 细胞中积聚。本文中，除非指定一种或多种"单核细胞"，所述术语一种或多种巨瞻细胞用于 指示巨瞻细胞（包含肿瘤相关巨瞻细胞）和/或单核细胞。
[0009] W0 2009/060160揭示了一组落在W0 2007/129040-般描述范围内的具体化合 物，但并未具体鉴定或示例。该些化合物显示如上所述的巨瞻细胞选择性。
【发明内容】
[0010] 本发明的发明人发现，化合物N-巧-{4- [6-氨基-5- (2, 4-二氣苯甲酯）-2-氧代 化晚-1 (2H)-基]-3, 5-二氣苯基}己基]丙氨酸叔了醋在抑制p38 MAP激酶活性方面 意外地好。测试显示，在人血中醋TNF-a抑制的IC50值明显低于相关化合物观察到的人 血中醋TNF-a抑制的IC50值。而且，本发明人进行的测试显示，本发明化合物的生物利用 度要比结构类似的已知化合物预计的结果要高得多。
[0011] 因此，本发明提供了W下化合物；N-巧-{4-[6-氨基-5-(2,4-二氣苯甲酯）-2-氧 代化晚-1 (2H)-基]-3, 5-二氣苯基}己基]丙氨酸叔了醋或其药学上可接受的盐、水 合物或溶剂合物。
[0012] 本发明还提供了包含该化合物W及一种或多种药学上可接受的运载体和/或赋 形剂的药物组合物。
[00