甘松马兜铃酮b及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种植物提取物及其制备方法与应用，尤其是甘松马兜铃酮B及其制 备方法与应用。
【背景技术】
[0002] 5-羟色胺转运体（SERT)是一种对5-HT有高度亲和力的跨膜转运蛋白，约含630 个氨基酸残基，其编码基因（SLC6A4)分别位于7号和11号染色体上，由跨度约为35kb的 14个外显子组成。SERT蛋白包含12-13个跨膜区，N端及C端位于胞质中，靠近N端处有 cAMP依赖性蛋白激酶结合位点，在第三与第四跨膜区之间有一位于细胞外的环状部分，是 N-连接的糖基化位点。
[0003] SERT属于Na+/Cl依赖型转运蛋白，在中枢神经系统主要位于5-HT能神经元， SERT从神经突触间隙中重新摄取5-HT进入突触前神经元，直接影响突触间隙5-HT浓度，改 变突触后受体介导信号的数量和作用持续时间。在消化系统SERT主要位于肠粘膜上皮细 胞，重新摄取肠道黏膜层的嗜铬细胞释放的5-HT来调节胃肠功能。此外，SERT在血小板、 胎盘组织、骨髓、肾、肺、心、肾上腺、肝、甲状旁腺、甲状腺、胰腺等亦有分布，提示SERT参与 多种生理功能。
[0004] SERT是转运5-HT的重要分子，在中枢神经系统与情绪、食欲、睡眠、记忆、学习等 许多生理心理功能相关，SERT及5-HT表达改变可引起焦虑、抑郁、强迫症、恐惧症，甚至精 神分裂症，并与药物成瘾性密切相关；在胃肠道功能性疾病中SERT扮演了重要角色，5-HT 信号系统异常可导致胃肠道动力及分泌功能异常、内脏高敏感性，与慢性便秘、肠易激综 合征、腹泻及功能性消化不良等胃肠道功能性疾病密切相关。
[0005] SERT是临床药物研发的重要靶点。基于SERT靶点的经典抗抑郁药多属于选择 性SERT抑制剂（SSRI)，如氟西汀（Fluoxetine)等；5-羟色胺再摄取促进剂（SSRE)则少 有报道，至今已报道SSRE有噻奈普汀（tianeptine)，别名达体朗（stablon)，其化学结构 属三环类抗抑郁药，临床主要用于抗抑郁和抗焦虑。实验研究发现噻奈普汀可促进5-HT 再摄取，在神经结构可塑性方面，噻奈普汀对应激/皮质酮诱导的海马神经元树突萎缩具 有预防作用，能够对抗应激诱发的海马前体细胞增殖、海马体积下降和N-乙酰天冬氨酸浓 度下降，并防止杏仁核树突过度增生。在神经兴奋性方面，噻奈普汀能够克服应激阻断海 马长时程增强作用，逆转应激对海马-前皮层突触的抑制作用等。在神经保护方面，噻奈 普汀能够降低海马和颞叶皮层的细胞凋亡。在记忆功能方面，噻奈普汀对应激诱导空间 记忆损害具有阻断作用，增加记忆保留，有助于注意力集中行为，拮抗酒精的有害作用等 (McEwenBS,OlieJP. 2005.Neurobiologyofmood,anxiety,andemotionsasrevealed bystudiesofauniqueantidepressant:tianeptine.MolecularPsychiatry10,525 -537)。此外，噻奈普汀能使中枢5-HT代谢物5-羟吲哚乙酸升高，推断可能由于突触前膜再摄 取-5-HT增加后，神经内5-HT分解代谢相应增高有关；噻奈普汀可作用于下丘脑-垂体-肾 上腺轴，使下丘脑皮质激素释放因子及垂体前叶肾上腺皮质激素浓度下降。
[0006] 噻奈普汀对重度抑郁症有效，对抑郁症长期疗效优于氟西汀，且安全性高，不良反 应少，适合于老年抑郁症，抗焦虑效果优于氟西汀（胡萌，李臻.2007.噻奈普汀药理研究和 临床应用进展.广东医学28(7) =1192-1193.)噻奈普汀对人体的作用特点包括：对心境紊 乱有一定作用，介于镇静性抗抑郁药和兴奋性抗抑郁药之间；对躯体不适，尤其是对于焦虑 和心境紊乱有关的胃肠不适有明显作用；对酒精中毒病人在戒酒期间出现的人格和行为紊 乱有一定作用；而且，噻奈普汀对下列方面无不良作用：睡眠和警觉；心血管系统；胆碱能 系统（无抗胆碱能症状）；药物成瘾。以上研究提示了 5-羟色胺再摄取促进剂（SSRE)在 临床应用中的特点和优势。
[0007] 甘松（NardostachyschinensisBatal.)是败酱科甘松属植物，具有理气止痛， 开郁醒脾；外用祛湿消肿的功效，甘松已经报道的生物活性包括：（1)作用于神经系统，如 抗抑郁、镇静和抗惊厥、抗帕金森和记忆恢复；（2)作用于心血管系统，如降血压、抗心律失 常、抗心肌缺血、抗心血管损伤；（3)作用于呼吸系统，如增强耐缺氧能力；(4)抑菌；（5)抗 肝损伤等。甘松的化学成分包括倍半萜、三萜、环烯醚萜、香豆素、酚酸、黄酮等，倍半萜是其 主要成分，其中甘松新酮、马兜铃烯等研究报道较多，其它活性成分特别是少量或微量成分 鲜有报道，生物活性及相关机制还有待进一步发现。
【发明内容】
[0008] 本发明所要解决的技术问题在于提供一种甘松马兜铃酮B。
[0009] 本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述甘松马兜铃酮B的制备方法。
[0010] 本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述甘松马兜铃酮B的应用。
[0011] 为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：
[0012] -种甘松马兜铃酮B(nardoaristolonesB)，具有如下结构通式（I)，
[0013]
[0014] 优选的，上述甘松马兜铃酮B，其物理化学和波谱性质：无色结晶（乙酸乙 酯），UV(MeOH)入nax:206、228、250、308、334nm;CD(c0.05，Me0H)A(Ae):335(-1.74)、 310(-1. 09)、278(-l. 99)、231 (+1. 35)nmJH-匪R(CDC13, 400MHz) :S" 6. 24(1H，s，H-1)、 2.30(lH，dd，J= 13.6，18.2Hz，H-3a)、2.43(lH，dd，J= 4.8，18.2Hz，H-30)、 2.47(lH，m，H-4)、1.84(lH，d，J= 5.6Hz，H-6)、2.01(lH，d，J= 5.6Hz，H-7)、 1. 16 (3H，s，n-CH3)、1. 20 (3H，s，12-CH3)、1. 24 (3H，s，13-CH3)、1. 13 (3H，d，J= 6. 4Hz，14-CH3) ;13C-匪R(CDC13, 100MHz) :Sc 123. 5(C-1)、199. 9(C-2)、42. 3(C-3)、 35. 5(C-4)、44. 3(C-5)、42. 3(C-6)、40. 2(C-7)、201. 5(C-8)、165. 1 (C-9)、32. 1 (C-10)、 17. 7(C-11)、28. 9(C-12)、20. 8(C-13)、15. 8(C-14)。
[0015] 优选的，上述甘松马兜铃酮B，其化学结构特点：属于降马兜铃烷型倍半萜，具有 3/5/6环系统，不同于马兜铃烷型3/6/6环系统，2、8位-酮羰基取代，1、9_位形成双键。
[0016] 上述甘松马兜铃酮B的制备方法，具体步骤如下：
[0017] (1)甘松根茎用70% (v/v)乙醇浸提3次，每次48小时，合并提取液，减压浓缩， 得粗提物浸膏；然后用70 %乙醇热提上述药渣3次，每次2小时，合并提取液，减压浓缩，再 次得粗提物浸膏；合并两次粗提物浸膏获得粗提物总浸膏；
[0018] (2)所得粗提物总浸膏经水分散后，分别用等体积的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依 次萃取，分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水层；
[0019] (3)将石油醚部位经硅胶柱色谱，石油醚：乙酸乙酯=100:0(100:0指100%石油 醚洗脱情况）-100:50溶剂系统梯度洗脱，得22个流份Fr. 1-22 ;
[0020] (4)其中，石油醚：乙酸乙酯=100:5-100:7溶剂洗脱流份一一流份Fr. 9经反复硅 胶柱层析，石油醚：乙酸乙酯=100:0 (100:0指100 %石油醚洗脱情况）-100:10梯度洗脱， 分离得到甘松马兜铃酮B。
[0021] 上述甘松马兜铃酮B在制备促进5-羟色胺转运体（SERT)活性药物方面的应用。
[0022] 上述甘松马兜铃酮B在制备治疗抑郁症、焦虑症、精神分裂症、强迫症、神经退行 性疾病、药物成瘾性或消化系统功能紊乱疾病的药物方面的应用。
[0023] 上述消化系统功能紊乱疾病包括慢传输性便秘、肠道易激综合征和/或功能性腹 胀