Vegf拮抗剂治疗早产儿视网膜病变的用图
【技术领域】
[0001] 本发明在治疗婴儿中视网膜疾病的领域内。
【背景技术】
[0002] 视网膜新生血管生成与视网膜剥离是早产儿视网膜病变（ROP)的标志。出生时体 重小于1250g的早产婴儿中有50至65%患有此种视网膜病变形式。ROP为全球儿科期失 明的首要原因。
[0003] 根据ROP的严重度，治疗标准的范围是从观察等待到手术干预。主要治疗目的是 恢复视网膜功能及保持视力。通常不推荐对患有轻度或中度异常血管生长的婴儿进行治 疗，这是因为在大多数这些婴儿中，该疾病不会进一步进展且随时间会自我解决。
[0004] 较晚期ROP与重度异常视网膜新生血管生成相关联，通常继发视网膜部分或完全 剥离，就需要治疗性干预，通常是通过冷冻治疗或激光光凝治疗（LPT)。这两种治疗形式会 导致破坏周边视网膜的至少一部分。
[0005] 在最近报导的BEAT-ROP研究中，在患有3+期ROP的婴儿中比较玻璃体内贝 伐单抗（bevacizumab)单一疗法与传统型 LPT(Mintz_Hittner 等人（2011)N Engl J Med. 364(7) :603-15)。对接受玻璃体内贝伐单抗治疗的婴儿而言，观察到针对I区病变而 非II区病变的显著效果。周边视网膜血管在通过玻璃体内贝伐单抗治疗后持续发育，而传 统型激光光凝治疗会导致周边视网膜的永久性破坏。BEAT-ROP研究（及大多数其他后续研 究）在早产婴儿中的玻璃体内注射使用贝伐单抗成人剂量的一半。
[0006] 尽管贝伐单抗是为系统性治疗结肠癌而开发的，但未经当局许可的贝伐单抗广泛 地用于治疗成人中的老年性黄斑病变及其他脉络膜视网膜病变。通常难以预测可成功用 于成人的药物在儿科群体特别是低龄儿童（〇至12岁）中如何表现。由于贝伐单抗通常 是玻璃体内施用以治疗眼科疾病，所以已经有一些顾虑：少量的抗体VEGF拮抗剂可进入 脑，可能会干扰儿童正常脑发育（Sivaprasad等人（2008) Br J Ophthalmol. 92:451-54)。 对治疗儿童时抗体VEGF拮抗剂的全身暴露的潜在顾虑也有提及（Lyall等人（2010)Eye 24:1730-31)。
[0007] 因此，本发明的一个目标是针对在婴儿中视网膜疾病提供进一步且改善的治疗， 解决至少一些以上所提及的现有顾虑。
【发明内容】
[0008] 本发明是关于一种VEGF拮抗剂在治疗婴儿中视网膜新生血管性疾病的用途。具 体地，本发明提供一种治疗患有早产儿视网膜病变（ROP)的早产婴儿的方法，其中该方法 包括向婴儿眼睛施用一种要么不会进入体循环要么自体循环快速清除的VEGF拮抗剂。 VEGF拮抗剂可玻璃体内施用例如经由注射、或局部施用例如以滴眼剂形式施用。
[0009] 患者
[0010] 本发明是关于患有视网膜新生血管性疾病的婴儿的治疗。术语"婴儿"是用于指 自出生起至12个月大的幼儿。
[0011] 在本发明的一个特定方面中，本发明是关于早产（premature或pre-term)婴儿中 ROP的治疗。这些术语"早产婴儿"通常是指以小于37周孕龄出生的婴儿。
[0012] 在一些情形中，治疗标准以接受ROP治疗的婴儿的矫正胎龄为依据。矫正胎龄为 末次月经期的第一天与出生之间的实耗时间（孕龄）加上出生后实耗时间（时龄）。矫正 胎龄通常以周数描述。例如，在33周孕龄出生、目前为10周大（时龄）的早产婴儿具有43 周的矫正胎龄。
[0013] VEGF 拮抗剂
[0014] VEGF为刺激血管生成的已充分表征的信号蛋白。两种抗体VEGF拮抗剂已被批准 用于人类应用，即雷珠单抗（ranibizumab) (Lucentis?)和贝伐单抗(Avastin?)。
[0015] 虽然雷珠单抗和贝伐单抗自眼睛进入血液中的清除速率相似，但雷珠单抗是快速 自体循环排出，而贝伐单抗留存并会抑制全身VEGF浓度达数周。更具体地，雷珠单抗具有 约2小时的极短全身半衰期，而贝伐单抗具有约20天的全身半衰期。在发育态生物体例如 婴儿中，该长时间全身性VEGF抑制可能对正常发育具有不需要的副反应。
[0016] 因此，在一个方面中，本发明是关于VEGF拮抗剂在治疗婴儿中视网膜新生血管性 疾病的用途，其中该VEGF拮抗剂要么不会进入婴儿的体循环要么自婴儿的体循环快速清 除。根据本发明，当VEGF拮抗剂的全身半衰期在7天和约1小时之间时，VEGF拮抗剂的清 除会是足够快速的。优选地，本发明VEGF拮抗剂的全身半衰期小于7天，更优选小于1天， 最优选小于3小时。一种优选抗体VEGF诘抗剂为雷珠单抗。
[0017] 作为替代，VEGF拮抗剂为非抗体VEGF拮抗剂。非抗体拮抗剂包括（例如）免 疫粘附素。一种具有VEGF拮抗剂活性的此类免疫粘附素为最近已被批准用于人类应用 且也称为 VEGF-trap 的阿柏西普（afliberc印t) (Eylea?> (Holash 等人（2002)PNAS USA 99:11393-98 ;Riely&Miller(2007)Clin Cancer Res 13:4623-7s)。阿柏西普具有约 5 至 6天的全身半衰期，且是用于本发明的优选非抗体VEGF拮抗剂。阿柏西普是由人VEGF受 体1及2胞外域的部分融合至人IgGl的Fc部分所组成的重组人类可溶性VEGF受体融合 蛋白质。它是具有97千道耳顿（kDa)蛋白质分子量的二聚糖蛋白，包含的糖基化构成总分 子质量的额外15%，获得115kDa的总分子量。其可通过在重组CHO Kl细胞中表达为糖蛋 白而方便地制得。各单体可具有以下氨基酸序列（SEQ ID NO: 1):
[0018] SDTGRPFVEMYSEIPEIIHMTEGRELVIPCRVTSPNITVTLKKFPLDTLIPDGKRIIffDSRKGFIISNA TYKEIGLLTCEATVNGHLYKTNYLTHRQTNTIIDVVLSPSHGIELSVGEKLVLNCTARTELNVGIDFNWEYPSSKHQ HKKLVNRDLKTQSGSEMKKFLSTLTIDGVTRSDQGLYTCAASSGLMTKKNSTFVRVHEKDKTHTCPPCPAPELLGGP SVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLN GKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK TTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
[0019] 及二硫桥可在各单体中残基30-79、124-185、246-306及352-410之间、及这些单 体间残基211-211及214-214之间形成。
[0020] 目前在临床前开发中的另一种非抗体VEGF拮抗剂免疫粘附素是与VEGF-trap类 似的重组人类可溶性VEGF受体融合蛋白质，包含分别衍生自VEGFR2/KDR的胞外配体结合 域3和4、及衍生自VEGFRl/Flt-Ι的域2 ;这些域是融合至人IgG Fc蛋白质片段（Li等 人（2011)Molecular Vision 17:797-803)。该拮抗剂会结合至同型 VEGF-A、VEGF-B 和 VEGF-C。该分子采用两种不同制造工艺来制备，在最终蛋白质上获得不同糖基化形式。这 两种糖型称为KH902(康柏西普（conbercept))及KH906。该融合蛋白可具有以下氨基酸序 列（SEQ ID N0:2):
[0021] MVSYWDTGVLLCALLSCLLLTGSSSGGRPFVEMYSEIPEIIHMTEGRELVIPCRVTSPNITVTLKKFPL DTLIPDGKRIIffDSRKGFIISNATYKEIGLLTCEATVNGHLYKTNYLTHRQTNTIIDVVLSPSHGIELSVGEKLVLN CTARTELNVGIDFNWEYPSSKHQHKKLVNRDLKTQSGSEMKKFLSTLTIDGVTRSDQGLYTCAASSGLMTKKNSTFV RVHEKPFVAFGSGMESLVEATVGERVRLPAKYLGYPPPEIKffYKNGIPLESNHTIKAGHVLTIMEVSERDTGNYTVI LTNPISKEKQSHVVSLVVYVPPGP⑶KTHTCPLCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPE VKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVY TLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKATPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCS VMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
[0022] 及与VEGF-trap类似，可呈二聚物形式存在。该融合蛋白及相关分子的进一步表 征请参见EP1767546。
[0023] 其他非抗体VEGF拮抗剂包括具有VEGF拮抗剂活性的抗体模拟物（例如 Aiiibody?分子、affilin、affitin、抗运载蛋白、高亲合性多聚体（avimer)、Kunitz结构 域肽、及单抗体（monobody))。由于其小尺寸，抗体模拟物通常从循环内快速（在几分钟至 几小时以内）清除。聚乙二醇化是一种用于延长局部及全身半衰期的方法。
[0024] 因此，术语"非抗体VEGF拮抗剂"包括含有能结合VEGF-A且防止其与VEGFR-2结 合的锚蛋白重复域的重组结合蛋白。这种分子的一个实例为DARPin? MP0112。锚蛋白结 合域可具有以下氨基酸序列（SEQ ID N0:3):
[0025] GSDLGKKLLEAARAGQDDEVRILMANGADVNTADSTGffTPLHLAVPffGHLEIVEVLLKYGADVNAKDFQ GWTPLHLAAAIGHQEIVEVLLKNGADVNAQDKFGKTAFDISIDNGNEDLAEILQKAA
[0026] 包含结合VEGF-A且防止其与VEGFR-2结合的锚蛋白重复域的重组结合蛋白更详 细地描述在W02010/060748及W02011/135067中。聚