或固体菌剂加入有机肥中，混合均匀，使有机肥中的枯草芽孢杆菌活菌数为2 X 17CFU/克?2 X 18CFU/克，按照每亩I?3吨的用量作为基肥施入土壤中。
【具体实施方式】
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[0017]由本发明提供的枯草芽孢杆菌能够促进作物对养分的吸收和利用，并且能有效防治多种植物病害，本发明提供的技术方案生产的微生物菌剂应用于农业生产可以减少化肥和农药的使用量，从而改善农田环境质量；而且生产成本很低，使高浓度废水得到资源化利用，减少污染物排放。【具体实施方式】如下:
[0018]实施例1:甘薯淀粉废水生产枯草芽孢杆菌微生物菌剂
[0019](I)甘薯淀粉废水预处理:在高浓度甘薯淀粉废水中按照重量比加入0.5%的草木灰(来自于生物质热电厂的固态废弃物，其主要成分为碳酸钾)，重复混合均匀，再用石灰水调节废水的PH到8.0，于100°C微波加热5分钟。
[0020](2)液体种子制备:向装有预处理好的甘薯淀粉废水的三角瓶中接种斜面保藏的枯草芽孢杆菌，于50°C，150转/分振荡培养28小时，得到液体种子。
[0021]3、液态发酵:向装有预处理好的甘薯淀粉废水发酵罐中接种体积比为5%的液体种子，于45°C，通无菌空气培养16小时；培养好的发酵液经平板细菌计数，活菌数达到2X 19CFU/毫升以上，所得发酵液可以作为液体菌剂直接使用。
[0022]4、固体菌剂制备:以过30目筛的生物碳(生物质热解后剩余的固体物质，主要成分是碳)为载体，按照发酵液:生物碳为1: 2的重量比，将发酵液添加到生物碳中，充分混合均匀，得到固态菌剂，在55?60 °C下，通风干燥至菌剂含水量按重量比为15 %?25 %，包装，存放在阴凉干燥处，备用。
[0023]实施例2:枯草芽孢杆菌微生物菌剂应用于有机茶生产
[0024]在有机茶园选择茶树长势均匀的试验地2亩左右，实验茶树与基地其他茶树管理保持一直，只是施肥有所不同。试验地划分为5块，分别对应5个处理，每个处理之间都有设有2米左右的隔离行，将菌剂用自来水稀释或直接将发酵液稀释使用，5个处理分别为清水对照(CK)、淀粉废水对照(FCK)、高浓度(2 X 17CFU/毫升)喷施⑶、中浓度(IXlO7CFU/毫升)喷施(M)、低浓度(5X 16CFU/毫升)喷施(L)，按照每平方米2升的菌剂稀释液的量使用。各处理以相同的方式在冬季施用3次菌剂，春季采收茶叶，结果表明:施用废水稀释液的对照春茶产量与清水对照无显著差异，而使用菌剂的春茶产量显著增加，其中，施用中浓度和高浓度菌剂的春茶产量相当，都比清水对照增产35%以上，施用低浓度菌剂的春茶产量也比清水对照增产20%左右。而且施用菌剂的茶叶中茶多酚和氨基酸含量显著高于清水对照。
[0025]实施例3:富含枯草芽孢杆菌的有机肥应用于茶叶生产
[0026]在茶园选择一块茶树长势均匀的试验地，均匀划分为6个小区，每个小区约200平方米，分别设置为不施肥对照、施用有机肥和施用富含枯草芽孢杆菌^XlO7CFU/克)的有机肥3种处理，每种处理2个平行，各处理之间都设有2米左右的隔离行，有机肥和富含枯草芽孢杆菌的有机肥按照每亩I吨的用量，在入冬前沟施I次，春季采收茶叶，结果表明:施用有机肥的春茶产量比对照增产15%左右，而施用生物有机肥的春茶产量比对照增产35%以上，而且施用生物有机肥的茶叶中水浸出物、茶多酚和氨基酸的含量显著高于对照。
[0027]实施例4:枯草芽孢杆菌微生物菌剂应用于油菜生产
[0028]采用蔬菜大棚小区实验，设置8个条件完全相同的实验小区，每个小区100m2，2个小区为I组平行试验，共分成4组，种植油菜，在油菜幼苗期，第I组2个小区不施肥作对照；第2组2个小区按照100公斤/亩的用量在油菜完全发芽后和3周后各喷施一次菌剂稀释液(2 X 17CFU/毫升)；第3组2个小区按照15公斤/亩的施肥量在油菜完全发芽后和3周后各施用尿素一次；第4组2个按照15公斤/亩的施肥量在油菜完全发芽后和3周后各施用尿素一次，并在每次施用尿素后I天按照100公斤/亩喷施一次菌剂稀释液(2 X 17CFU/毫升)，各小区相同的灌溉和管理方式。油菜生长5周后调查产量和品质。单独施用菌剂和单独施用尿素的油菜产量基本一致，都比不施肥的对照小区增产50%左右；两种肥料都施用的小区比对照小区增产85%以上，而且油菜中硝酸盐和亚硝酸盐的含量显著低于单独施用尿素的小区。
【主权项】
1.一株具有促进植物生长、拮抗植物病原菌功能的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis) SZXll菌株，其特征在于:该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号=CGMCC N0.8188。2.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌农用微生物菌剂的生产方法，包括如下步骤: (1)甘薯淀粉废水预处理:在高浓度甘薯淀粉废水中按照重量比加入0.1%?1%的草木灰(来自于生物质热电厂的固态废弃物，其主要成分为碳酸钾)，重复混合均匀，再用石灰水调节废水的PH到7.0?8.5，于95?110°C微波加热3?15分钟； (2)液体种子制备:向装有预处理好的甘薯淀粉废水的三角瓶中接种斜面保藏的枯草芽孢杆菌，于45?55°C，120?200转/分振荡培养24?36小时，得到液体种子； (3)液态发酵:向装有预处理好的甘薯淀粉废水发酵罐中接种体积比为2%?15%的液体种子，于35?50°C，通无菌空气培养12?30小时；培养好的发酵液经平板细菌计数，活菌数达到2X 19CFU/毫升以上，所得发酵液可以作为液体菌剂直接使用； (4)固体菌剂制备:以过30目筛的生物碳(生物质热解后剩余的固体物质，主要成分是碳)为载体，按照发酵液:生物碳为1:1?1: 3的重量比，将发酵液添加到生物碳中，充分混合均匀，得到固态菌剂，在55?60°C下，通风干燥至菌剂含水量按重量比为15%?25%,包装，存放在阴凉干燥处，备用。3.权利要求2所述的农用微生物菌剂的使用方法，其特征在于:将发酵液或固体菌剂用灌溉用水稀释到活菌数为3X 16CFU/毫升?3X 17CFU/毫升，混合均匀，按照每亩0.3?3立方米稀释液的用量对作物整株均匀喷施或沟施入作物根部附近的土壤中。4.权利要求2所述的农用微生物菌剂的使用方法，其特征在于:将发酵液或固体菌剂加入有机肥中，混合均匀，使有机肥中的枯草芽孢杆菌活菌数为2X 17CFU/克?2X 18CFU/克，按照每亩I?3吨的用量作为基肥施入土壤中。
【专利摘要】本发明涉及一株高效植物促生菌——枯草芽孢杆菌，及其菌剂的低成本生产方法和使用方法，属于微生物肥料和节能减排技术领域。本发明采用的菌株是从松树叶片分离筛选出来的一株具有促进植物生长功能的枯草芽孢杆菌(Bacillus？subtilis)SZX11菌株，该菌株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC？No.8188。本发明利用甘薯淀粉废水作为液态发酵培养基，大规模培养枯草芽孢杆菌，并制备农用微生物菌剂，该工艺能耗低、生产成本低廉，操作简单，还可以使甘薯淀粉废水得到资源化利用，减少污染排放。本发明生产的菌剂用于茶叶和蔬菜的生产，不仅可以显著提高产量，而且可以明显改善农产品的品质，显示出广阔的应用前景。CGMCC No. 818820130916
【IPC分类】A01P1/00, A01P3/00, C05F11/08, A01P21/00, C12N1/20, C12R1/125
【公开号】CN105624056
【申请号】CN201410636383
【发明人】白志辉, 梁胜贤, 张倩, 张乙铭, 庞晓丹, 庄国强
【申请人】中国科学院生态环境研究中心
【公开日】2016年6月1日
【申请日】2014年11月6日