专利名称：一种从乌饭树叶中提取天然黑色素的方法
技术领域：
本发明涉及一种天然色素的提取方法，特别是一种从乌饭树叶中提取天然黑色素的方法。
背景技术：
植物中的黑色素具有促进视红素再合成、Vp样机能、改善血液微循环、抗溃疡、抗炎症、抗衰老等多种药理活性。它包括花青素，黄酮类色素等多种色素成分，黑色素提取主要是溶剂提取法。
《食品与发酵工业》2004年第30卷第9期上发表王立、姚源惠的文章“乌饭树叶中黄酮类色素的提取与分离纯化”，确立黄酮类色素的最佳提取条件提取次数2次，乙醇体积分数60％，温度60℃，固液比1g∶35ml。
《中国野生植物资源》1997年第22卷第4期上发表胡志杰、姜萍等的文章“乌饭树叶色素提取工艺及色素性质再研究”，确定以55％的乙醇作溶剂，55℃提取，总提取时间不超过6.5小时为最适宜条件。
发明专利“用黑芝麻提取黑色素的方法”(申请号91104469.8)，介绍了用碱溶液浸提黑芝麻中的黑色素的方法。
《中国粮油学报》1998年第13卷第2期上发表张名位、孙玲等的文章“黑米、黑大豆、黑芝麻中天然色素性质的比较研究”，介绍了盐酸乙醇溶剂结合柱层析提取黑色素的方法。
上述黑色素的提取方法均未采用酶制剂，影响黑色素的提取率。
发明内容
本发明的目的，是利用酶制剂结合溶剂提取乌饭树叶中黑色素，提高黑色素的提取率。
本发明的一种从乌饭树叶中提取天然黑色素的方法，原料为乌饭树叶，试剂有果胶酶(30000IU)，纤维素酶(15000IU)，95％乙醇(食品级)，柠檬酸(食品级)，磷酸氢二钠(食品级)。
本发明的一种从乌饭树叶中提取天然黑色素的方法，由以下步骤组成
(1)备料将新鲜的乌饭树叶干燥、粉碎，40目过筛，得到乌饭树叶干粉备用。
(2)配制缓冲溶液将0.1mol/L柠檬酸溶液与0.2mol/L磷酸氢二钠溶液按1∶1.5～2的体积比混合，再加水稀释2倍，配制成缓冲溶液。
(3)配制酶液混合缓冲溶液、果胶酶和纤维素酶，并充分搅拌使其完全溶解，从而形成均匀的酶液；缓冲溶液的用量按乌饭树叶干粉重量(kg)∶缓冲溶液体积(L)＝1∶15～30的比例计算；果胶酶和纤维素酶的用量为每L的缓冲溶液加入0.1～0.3g果胶酶与0.1～0.3g纤维素酶。
(4)投料按乌饭树叶干粉重量(kg)∶缓冲溶液体积(L)＝1∶15～30的比例，将乌饭树叶干粉加入酶液中。
(5)酶解将乌饭树叶干粉与酶液搅拌均匀后，在50～55℃的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3～4h，生成酶解液和残渣的混合物。
(6)提取按每kg乌饭树叶干粉加入15～30L的75-97％乙醇的方法，将75-97％乙醇加入上述酶解液和残渣混合物中，在60～65℃条件下提取2～3h，经过滤，得到黑色提取液。
(7)成品置黑色提取液于60～70℃的烘箱中烘至恒重，得到天然黑色素。
本发明的一种从乌饭树叶中提取天然黑色素的方法，以天然植物乌饭树叶为主要原料，采用酶制剂结合溶剂提取天然黑色素，其优点是天然黑色素产品安全性好、质量佳(见表1)，黑色素提取率较醇提取法高30～40％，酶制剂的用量少，而且工艺简单，操作方便，效率高，适合工业化生产。使用果胶酶和纤维素酶可以破坏植物原料中以纤维素为主的细胞壁结构及其细胞间相连的果胶物质，使提取传质阻力减小，使内容物黑色素成分易于溶出。乙醇溶液作为醇溶性黑色素的提取溶剂。柠檬酸-磷酸缓冲溶液起到调节溶液pH值的作用。按本发明的方法配制的缓冲溶液，经检测其pH＝6，可以保证酶制剂作用的最佳效果。
取本发明的黑色素提取液与醇提法得到的黑色素提取液，均稀释100倍，用紫外分光光度仪，在色素的最大吸收波长243nm下，测定其吸光值(见表1)。采用本发明的酶法结合溶剂提取的黑色素，其吸光值为0.538，明显高于醇提法提取黑色素的吸光值0.417；经计算提取率较醇提取法高30％。
表1 酶法结合溶剂提取与醇提法提取的吸光值对比
具体实施例为了充分公开本发明的一种从乌饭树叶中提取天然黑色素的方法，下面结合实施例加以说明。
实施例一种从乌饭树叶中提取天然黑色素的方法取采收期为5-6月的天然乌饭树叶为原料，提取方法包括以下步骤(1)置新鲜的乌饭树叶于65℃烘箱中烘干，用高速组织捣碎机粉碎，40目过筛，得到乌饭树叶干粉备用。
(2)取0.1mol/L柠檬酸溶液180ml，0.2mol/L磷酸氢二钠溶液320ml，混合并稀释定容至1000ml，配制成缓冲溶液。
(3)取250ml的缓冲溶液，加入0.05g果胶酶与0.075g纤维素酶，搅拌使其完全溶解，形成均匀的酶液。
(4)在上述的酶液中加入10g的乌饭树叶干粉。
(5)搅拌均匀后于50℃的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3h，生成酶解液和残渣的混合物。
(6)在酶解液和残渣的混合物中加入250ml95％乙醇，于60℃条件下提取2h，经过滤得黑色提取液。
(7)置黑色提取液于65℃的烘箱中烘至恒重，得到天然黑色素。
权利要求
1.一种从乌饭树叶中提取天然黑色素的方法，其特征在于由以下步骤组成(1)备料将新鲜的乌饭树叶干燥、粉碎，40目过筛，得到乌饭树叶干粉备用；(2)配制缓冲溶液将0.1mol/L柠檬酸溶液与0.2mol/L磷酸氢二钠溶液按1∶1.5～2的体积比混合，再加水稀释2倍，配制成缓冲溶液；(3)配制酶液混合缓冲溶液、果胶酶和纤维素酶，并充分搅拌使其完全溶解，从而形成均匀的酶液；缓冲溶液的用量按乌饭树叶干粉重量(kg)∶缓冲溶液体积(L)＝1∶15～30的比例计算；果胶酶和纤维素酶的用量为每L的缓冲溶液加入0.1～0.3g果胶酶与0.1～0.3g纤维素酶；(4)投料按乌饭树叶干粉重量(kg)∶缓冲溶液体积(L)＝1∶15～30的比例，将乌饭树叶干粉加入酶液中；(5)酶解将乌饭树叶干粉与酶液搅拌均匀后，在50～55℃的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3～4h，生成酶解液和残渣的混合物；(6)提取按每kg乌饭树叶干粉加入15～30L的75-97％乙醇的方法，将75-97％乙醇加入上述酶解液和残渣混合物中，在60～65℃条件下提取2～3h，经过滤，得到黑色提取液；(7)成品置黑色提取液于60～70℃的烘箱中烘至恒重。
2.根据权利要求1所述的一种从乌饭树叶中提取天然黑色素的方法，其特征在于由以下步骤组成(1)置新鲜的乌饭树叶于65℃烘箱中烘干，用高速组织捣碎机粉碎，40目过筛，得到乌饭树叶干粉备用；(2)取0.1mol/L柠檬酸溶液180ml，0.2mol/L磷酸氢二钠溶液320ml，混合并稀释定容至1000ml，配制成缓冲溶液；(3)取250ml的缓冲溶液，加入0.05g果胶酶与0.075g纤维素酶，搅拌使其完全溶解，形成均匀的酶液；(4)在上述的酶液中加入10g的乌饭树叶干粉；(5)搅拌均匀后于50℃的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3h，生成酶解液和残渣的混合物；(6)在酶解液和残渣的混合物中加入250ml95％乙醇，于60℃条件下提取2h，经过滤得黑色提取液；(7)置黑色提取液于65℃的烘箱中烘至恒重。
3.按照权利要求1或2的方法制备的天然黑色素。
全文摘要
一种从乌饭树叶中提取天然黑色素的方法，以天然植物乌饭树叶为主要原料，采用酶制剂结合溶剂提取天然黑色素。制备方法包括以下步骤备料、配制缓冲溶液、配制酶液、投料、酶解、提取和成品。利用本发明的方法制备的天然黑色素，产品安全性好、质量佳，酶制剂的用量少，黑色素提取率较醇提取法高30～40％，而且工艺简单，操作方便，效率高，适合工业化生产。
文档编号C09B61/00GK1939979SQ200510104210
公开日2007年4月4日 申请日期2005年9月30日 优先权日2005年9月30日
发明者陈绍军, 余清 申请人:福建农林大学