本申请要求2015年10月5日提交的美国临时专利申请号62/237,297的优先权，将该临时申请的全部内容通过此引用而结合。本发明总体上涉及天然着色剂。本披露进一步针对制造天然着色剂的方法。本披露另外针对优化天然着色剂的方法。
背景技术：
：目前越来越少数量的人愿意消费合成着色的食物产品或者使用合成着色的化妆产品，这已导致天然着色剂市场的稳定增长。如wu等人的美国专利号8,557,319(其内容以其全文通过引用并入本文)中所述，商业上可行的一些第一天然蓝色是衍生自栀子果实(gardeniajasminoides)的那些。然而，栀子蓝目前在美国和欧洲市场上是不可获得的，并且只在一些亚洲市场作为用于食品和药物应用的安全颜色产品可获得。桅子果实含有大量的环烯醚萜类，如京尼平苷、桅子苷、京尼平-1-b-龙胆二糖甙、京尼平苷酸和京尼平。(endo,t.和taguchi，h.chem.pharm.bull.[化学与药学通报]1973)。当京尼平与特定化学品反应时，京尼平是促成栀子蓝的关键化合物。(美国专利号4,878,921)。栀子蓝可以通过使从栀子汁液提取的京尼平苷、纯化的京尼平或京尼平衍生物与某些分离的化学品反应来制成。在美洲格尼帕树(也称为格尼帕树，或huito，拉丁美洲的一种野生植物)的果实中发现了京尼平和其他环烯醚萜化合物，如京尼平酸、京尼平龙胆二糖甙、京尼平苷和京尼平苷酸。美洲格尼帕树的成熟果实已被用于冷饮、果冻、果子露、冰淇淋、甜蜜饯、糖浆、软饮料genipapada、葡萄酒、烈性利口酒和丹宁提取物。绿色或未成熟的果实已被用作颜色来源来涂色于脸部和身体进行装饰、用于驱除昆虫以及将衣服、陶器、吊床、器具和篮筐材料染成带蓝色的紫色。果实和汁液还具有药用特性，例如用作感冒和止咳药的糖浆。美洲格尼帕树的花和树皮也具有药用特性。除了在其果实中发现的碳水化合物、糖、蛋白质、灰分和苹果酸以外，美洲格尼帕树也是铁、核黄素和抗菌物质的天然来源。美洲格尼帕树的主要生物化学化合物包括：钙、磷、维生素c、咖啡因、caterine、京尼平酸、京尼平、龙胆二糖甙、京尼平尼酸、京尼平苷、京尼平苷酸、桅子苷、genamesidesa-d、桅子二醇、去乙酰基车叶草苷酸甲酯、山桅子苷、甘油酯、乙内酰脲、甘露醇、甲酯、单宁酸和酒石酸、以及单宁。从美洲格尼帕树制备富含京尼平的红色着色剂的方法是本领域已知的。(美国专利号8,945,640)。从含有京尼平或京尼平的衍生物的茜草科的果实或植物的汁液以及来自合适的食品级来源的其他汁液制备稳定的天然色的方法也是本领域已知的。(美国专利号8,557,319)。美国专利申请号2014/0350127披露了制备着色剂组合物的方法，该方法包括将美洲格尼帕树汁液和特定化学品混合，从该混合物中除去糖并且分离着色剂组合物。美国专利号7,927,637披露了一种制造着色剂ph稳定蓝的方法，该方法包括从其表皮上剥离美洲格尼帕树果实，从美洲格尼帕树果肉获得原液汁，将该原液汁与甘氨酸混合，并将与甘氨酸混合的该原液汁加热。另外，虽然螺旋藻提取物已被fda批准为糖果和口香糖中的蓝色的来源，但当提到天然蓝色和绿色的广泛应用时美国制造商具有有限的选择。(watson,e.，foodnavigator-usa，8月14日，2013，http://www.foodnavigator-usa.com/regulation/the-wait-is-over-for-a-natural-blue！-fda-approves-spirulina-as-food-color-in-us-as-mars-petition-gets-green-light)。螺旋藻在食物产品中具有有限用途，因为它倾向于在酸性饮料中沉淀并且不太热稳定。(watson,e.，foodnavigator-usa，8月26日，2013，http://www.foodnavigator-usa.com/suppliers2/wild-flavors-our-fruit-juice-based-natural-blue-color-was-around-in-the-us-long-before-spirulina-got-the-green-light)。仍然需要天然着色剂，这些天然着色剂在宽ph范围内是ph稳定的并且是热和光稳定的，以用于各种食品和饮料中。技术实现要素：在一个实施例中，披露了一种天然着色剂，该天然着色剂包含选自由京尼平、纯化的京尼平、前京尼平(pre-genipin)化合物、环烯醚萜化合物、京尼平衍生物、含京尼平的物质及其任何组合组成的组的材料，该材料与含伯胺的化合物反应。在另一个实施例中，披露了一种制造天然着色剂的方法，该方法包括将含伯胺的化合物与选自由京尼平、纯化的京尼平、前京尼平化合物、环烯醚萜化合物、京尼平衍生物、含京尼平的物质及其任何组合组成的组的材料混合，从而形成共混物，并加热该共混物，从而生产该天然着色剂。在另一个实施例中，本发明的方法进一步包括过滤该共混物，产生渗透物。在又另外的实施例中，本发明的方法包括将含伯胺的化合物与选自由京尼平、纯化的京尼平、前京尼平化合物、环烯醚萜化合物、京尼平衍生物、含京尼平的物质及其任何组合组成的组的材料混合，从而形成共混物，并加热该共混物，从而生产该天然着色剂，进一步包括将渗透物与以下各项混合：该含有伯胺的化合物；选自京尼平、纯化的京尼平、前京尼平化合物、环烯醚萜化合物、京尼平衍生物、含京尼平的物质及其任何组合的材料；该共混物；或其任何组合。在附加的实施例中，披露了一种产生天然着色剂的所希望的颜色的方法，该方法包括将第一氨基酸和第二氨基酸与选自由京尼平、纯化的京尼平、前京尼平化合物、环烯醚萜化合物、京尼平衍生物、含京尼平的物质及其任何组合组成的组的材料混合。附图说明图1示出了根据本发明的一种方法生产的溶液中的蓝色着色剂的一个实施例的样品。图2示出了根据本发明的方法生产的天然着色剂的实施例的样品在稀释之前和之后的比较。图3示出了根据本发明的方法生产的天然着色剂的实施例的样品，其按照最强烈的蓝色到最不强烈的蓝色的顺序排列。这些样品是未经稀释的。图4示出了根据本发明的方法生产天然着色剂的实施例的工艺流程图。图5示出了根据本发明的方法在没有(左图)和具有(右图)再循环的渗透物的情况下制造的天然着色剂的样品的比较。图6示出了通过本发明的方法获得的蓝色着色剂，其从左边最鲜艳的蓝色到右边微弱的蓝色排列，按从左到右的顺序：含有异亮氨酸、蛋氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸、天冬酰胺、精氨酸、丝氨酸和脯氨酸的着色剂。图7示出了对照着色剂和根据本发明的方法制造的纯化的着色剂的比较。具体实施方式在一个实施例中，本发明针对天然着色剂，该天然着色剂包含选自由京尼平、前京尼平化合物、环烯醚萜化合物、京尼平衍生物、含京尼平的物质及其任何组合组成的组的材料，该材料与含伯胺的化合物反应。在另外的实施例中，该含伯胺的化合物是氨基酸。在另一个实施例中，本发明针对制造天然着色剂的方法，这些方法包括将含伯胺的化合物加入到选自由京尼平、前京尼平化合物、环烯醚萜化合物、京尼平衍生物、含京尼平的物质及其任何组合组成的组的材料中，从而形成共混物，并加热该共混物，从而生产该天然着色剂。在另外的实施例中，该含伯胺的化合物是氨基酸。在又另一个实施例中，本发明针对产生天然着色剂的所希望的颜色的方法，这些方法包括将含伯胺的化合物与选自由京尼平、前京尼平化合物、环烯醚萜化合物、京尼平衍生物、含京尼平的物质及其任何组合组成的组的材料混合。在另外的实施例中，该含伯胺的化合物是氨基酸。在还另外的实施例中，该氨基酸可以是两种或更多种氨基酸的组合。本发明设想了许多含伯胺的化合物，包括但不限于氨基酸、氨基酸的衍生物、甲胺、γ-氨基丁酸、多肽、蛋白质及其任何组合。本发明设想的氨基酸包括但不限于赖氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸、甘氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、缬氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、组氨酸、脯氨酸、色氨酸及其任何组合。氨基酸可以进一步是分离的或纯化的氨基酸。本发明涵盖的氨基酸的衍生物包括但不限于肉毒碱、牛磺酸及其任何组合。本发明设想了含伯胺的化合物或氨基酸的许多来源，包括但不限于水果、蔬菜、谷物、豆类、坚果、种子、植物材料、包括但不限于奶和蛋的动物材料、微生物和藻类材料、其任何副产品及其任何组合。在另一个实施例中，该氨基酸选自由赖氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、其任何衍生物及其任何组合组成的组，从而形成蓝色着色剂。在又另一个实施例中，第一氨基酸和第二氨基酸各自独立地选自由赖氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸及其任何组合组成的组，从而产生蓝色。在另一个实施例中，将选自由赖氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸、甘氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、缬氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、组氨酸、脯氨酸、色氨酸、其任何衍生物及其任何组合组成的组的附加的氨基酸与该第一氨基酸和第二氨基酸混合。在另一个实施例中，该氨基酸选自由天冬氨酸、谷氨酸、半胱氨酸及其任何组合组成的组，从而形成黄色/绿色着色剂。在另一个实施例中，该氨基酸选自由脯氨酸、丙氨酸、精氨酸、缬氨酸、其任何衍生物及其任何组合组成的组，从而形成蓝-红/紫色着色剂。在另一个实施例中，该着色剂具有带蓝色的红色。在另一个实施例中，该材料或该含京尼平的物质选自由来自美洲格尼帕树的果实、来自美洲格尼帕树的近亲的果实及其任何组合组成的组。美洲格尼帕树，也被称为huito或huito果实，是格尼帕属中的一种物种，属于植物的茜草科。在不限制可使用的果实的范围的情况下，美洲格尼帕树应包括相关植物(包括栀子属(gardenia)和kailarsenia)以及其他含京尼平的植物(进一步包括栀子(gardeniajasminoidesellis)及其变种)的可食用果实或汁液或提取物或可食用部分。在优选的实施例中，该材料是huito果实。在另一个实施例中，该材料是呈选自由整果、果汁、果泥、果汁浓缩物、来自果实的干粉、来自汁液的干粉、果实的不溶于水的部分(包括但不限于种子和囊)、其任何衍生物及其任何组合组成的组的形式。在另一个实施例中，该含伯胺的化合物或氨基酸相对于该材料的重量以按重量计至少0.25％的量存在，其中该材料选自由美洲格尼帕树、来自美洲格尼帕树的近亲的果实及其任何组合组成的组。在又另一个实施例中，该含伯胺的化合物或氨基酸相对于该材料的重量以按重量计约0.25％-10％的量存在，其中该材料选自由美洲格尼帕树、来自美洲格尼帕树的近亲的果实及其任何组合组成的组。在另一个实施例中，该含伯胺的化合物或氨基酸相对于该材料的重量以按重量计约0.5％-4.0％的量存在，其中该材料选自由美洲格尼帕树、来自美洲格尼帕树的近亲的果实及其任何组合组成的组。在优选的实施例中，该含伯胺的化合物或氨基酸相对于该材料的重量以按重量计约0.75％-1.50％的量存在，其中该材料选自由美洲格尼帕树、来自美洲格尼帕树的近亲的果实及其任何组合组成的组。在另外的实施例中，美洲格尼帕树或来自美洲格尼帕树的近亲的果实可包括果实的任何部分，包括但不限于汁液、提取物、可食用部分及其任何组合。在另一个实施例中，该含伯胺的化合物或氨基酸以从0.1:1至10:1的量存在(摩尔比，含伯胺的化合物或氨基酸:材料，其中该材料为京尼平或纯化的京尼平)。在另一个实施例中，该含伯胺的化合物或氨基酸以从0.25:1至4:1的量存在(摩尔比，含伯胺的化合物或氨基酸:材料，其中该材料为京尼平或纯化的京尼平)。在优选的实施例中，该含伯胺的化合物或氨基酸以从0.5:1至1:1的量存在(摩尔比，含伯胺的化合物或氨基酸:材料，其中该材料为京尼平或纯化的京尼平)。在更优选的实施例中，该含伯胺的化合物或氨基酸以约1:1的量存在(摩尔比，含伯胺的化合物或氨基酸:材料，其中该材料为京尼平或纯化的京尼平)。在另一个实施例中，该氨基酸选自由天然来源的氨基酸、来源于发酵的氨基酸、合成氨基酸及其任何组合组成的组。在又另一个实施例中，该氨基酸可以是l-对映异构体。在还另一个实施例中，该氨基酸可以是呈粉末或液体形式。在又另一个实施例中，该氨基酸可以是呈盐形式，包括盐酸盐或单盐酸盐形式。在还另一个实施例中，该氨基酸可以是呈碱形式。在另一个实施例中，该氨基酸选自由异亮氨酸、l-异亮氨酸、l-赖氨酸单盐酸盐、l-精氨酸碱、l-谷氨酸盐酸盐(hcl)、l-苯丙氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸、甘氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、缬氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、组氨酸、脯氨酸、色氨酸及其任何组合组成的组。在另一个实施例中，该氨基酸选自、或者该第一氨基酸和该第二氨基酸各自独立地选自由l-异亮氨酸和l-赖氨酸单盐酸盐的组合以及异亮氨酸和赖氨酸的组合组成的组。在还另一个实施例中，该第一氨基酸是异亮氨酸并且该第二氨基酸是赖氨酸。在又另一个实施例中，增加异亮氨酸的量产生具有绿色色调的蓝色。在又另一个实施例中，增加赖氨酸的量产生具有紫色色调的蓝色。在还另一个实施例中，该氨基酸是异亮氨酸和赖氨酸的共混物，其范围为从60％至80％的异亮氨酸和从20％至40％的赖氨酸。在又另一个实施例中，该第一氨基酸与该第二氨基酸的比率为从约60:40至约80:20。在还另一个实施例中，该氨基酸是异亮氨酸和赖氨酸的约70:30(异亮氨酸:赖氨酸)共混物。在又另一个实施例中，该氨基酸选自异亮氨酸、丙氨酸及其任何组合。在另外的实施例中，氨基酸的组合包含70％-90％的异亮氨酸。在又另一个实施例中，该氨基酸是异亮氨酸和丙氨酸的共混物，其范围为从70％至90％的异亮氨酸和从10％至30％的丙氨酸。在另外的实施例中，异亮氨酸与丙氨酸的比率为从约70:30至约90:20。在优选的实施例中，该氨基酸是异亮氨酸和丙氨酸的约80:20(异亮氨酸:丙氨酸)共混物。在另一个实施例中，该天然着色剂具有范围为从约20至约55的l值，范围为从约-2.0至约6.5的a值，以及范围为从约1至约-20的b值。在另一个实施例中，该天然着色剂具有从约0.04至约55的cv。在又另一个实施例中，该天然着色剂的浓度导致cv大于55的天然着色剂。本发明列出了就cv、白利度、和l、a值和b值而言的天然着色剂的测量值。cv或色值单位是浓度的量度的商业名称。白利度或白利糖度是液体的糖(和其他固体)浓度的测量单位，其可以通过密度和折射率二者来测量。对于使用hunter(亨特)色度计的测量报告l、a值和b值。在另一个实施例中，该天然着色剂可用于选自下组的应用中，该组由以下各项组成：食品应用，饮料应用，动物食品应用，包括但不限于牙膏和漱口水的口腔护理应用，包括但不限于肥皂、香波和香料的个人护理应用，清洁用品，及其任何组合。在另一个实施例中，该天然着色剂可以用于食品应用中。在又另一个实施例中，该天然着色剂可以用于饮料应用中。在另一个实施例中，加热共混物在从约5℃至约65℃下进行。在另一个实施例中，加热共混物在约20℃至约60℃下进行。在又另一个实施例中，加热共混物在从约35℃至约45℃下进行。在另一个实施例中，在加入氨基酸之前处理材料。在又另一个实施例中，该处理包括选自由切碎、共混、与水共混、与溶剂共混、与渗透物共混、打浆、提取汁液、碾磨、过滤、压制、加热、干燥及其任何组合组成的组的动作。在另一个实施例中，将酶加入到共混物中。在又另一个实施例中，该酶是β-葡糖苷酶。在另一个实施例中，过滤共混物或天然着色剂。本发明设想了各种类型的过滤，包括但不限于纳滤和超滤。纳滤通常是指使用截留分子量为小于5,000道尔顿的膜的过滤。纳滤还可以指使用截留分子量为200-2,000道尔顿的膜的过滤。在本发明的一些实施例中，该膜具有约5,000道尔顿或更小的截留分子量。在本发明的另外的实施例中，该膜具有约3,000道尔顿或更小的截留分子量。在本发明的其他实施例中，该膜具有约1,000道尔顿或更小的截留分子量。发现使用截留分子量为约1,000道尔顿或更小的膜提供了更好的色体保留。在另外的实施例中，过滤共混物，产生渗透物。在还另外的实施例中，渗透物在根据本发明的方法中再循环。在又另外的实施例中，制造天然着色剂的方法包括将含伯胺的化合物混合到选自由京尼平、纯化的京尼平、前京尼平化合物、环烯醚萜化合物、京尼平衍生物、含京尼平的物质及其任何组合组成的组的材料中，从而形成共混物，并加热该共混物，从而生产该天然着色剂，进一步包括将该渗透物与以下各项混合：该含有伯胺的化合物；选自由京尼平、纯化的京尼平、前京尼平化合物、环烯醚萜化合物、京尼平衍生物、含京尼平物质及其任何组合组成的组的材料；该共混物；或其任何组合。在另一个实施例中，该渗透物是本发明方法的含伯胺的化合物或氨基酸的全部或部分的来源。在又另一个实施例中，加热该天然着色剂。在还另一个实施例中，加热该天然着色剂在从约10℃至约100℃的温度下进行。在优选的实施例中，加热该天然着色剂在约80℃的温度下进行。在另一个实施例中，该天然着色剂是浓缩的。在又另一个实施例中，将水加入到由氨基酸、该材料、该天然着色剂及其任何组合组成的组中。在还另一个实施例中，调节该天然着色剂的ph。在又另一个实施例中，通过将碱加入到该天然着色剂中来调节天然着色剂的ph。在优选的实施例中，该碱是氢氧化钠。在还另一个实施例中，通过将酸加入到该天然着色剂中来调节天然着色剂的ph。在另外的实施例中，该酸选自由氯化氢、柠檬酸及其任何组合组成的组中。在优选的实施例中，该酸是柠檬酸。在还另外的实施例中，该天然着色剂的ph可以在将氨基酸加入到选自由京尼平、前京尼平化合物、环烯醚萜化合物、京尼平衍生物及其任何组合组成的组的材料(包括但不限于huito果实)中之后，但在初始加热之前进行调节。在另外的实施例中，该天然着色剂的ph可以在初始加热之后且在第二次加热之前进行调节。在又另外的实施例中，将该天然着色剂的ph调节至约4-9。在优选的实施例中，将该天然着色剂的ph调节至约7.0。在还另外的实施例中，可以贯穿本发明的方法连续地调节该天然着色剂或共混物的ph。在又另外的实施例中，可以调节该天然着色剂或共混物的ph以优化该天然着色剂的色值。在另一个实施例中，调节第一氨基酸与第二氨基酸的比率以获得所希望的颜色。在又另一个实施例中，将多于2种氨基酸组合。在又另一个实施例中，本发明的方法可以好氧地进行。在优选的实施例中，用于生产蓝色天然着色剂的本发明方法好氧地进行。通过以下实例进一步说明本发明。实例1：天然蓝色着色剂的制备。将huito果实去皮、切碎并与水共混(比率为1:2.5，huito:水)。将所得混合物在40℃下加热10分钟，同时加入按重量计4％(相对于huito果实重量)的氨基酸溶液(异亮氨酸:赖氨酸，70:30)。通过真空过滤将所得共混物过滤，并将滤液在80℃下加热3小时并浓缩。发现调节异亮氨酸:赖氨酸的比率产生颜色变化。增加异亮氨酸的量产生更绿的颜色，而增加赖氨酸的量产生更多的紫色色调。70:30异亮氨酸:赖氨酸比率产生鲜艳的蓝色。然而，鉴于果实固有的自然差异，可能需要调节特定比率以获得天然着色剂的所希望的色调。在浓缩之前测量色值(cv)以及l、a和b值。这些值是在2个独立的设施中测量的，给出了下面的结果，总结在以下表1和2中。图1示出了根据本发明的方法制备的四种天然着色剂。最左边的着色剂是蓝色色调，几乎没有绿色或紫色色调。左起第二种着色剂具有比最左边的着色剂稍微更多的紫色色调。左起第三种着色剂具有比左起第二种着色剂更多的紫色色调。右边的着色剂是比最左边的着色剂更深/更暗的蓝色色调。表1：在位置1处测量的天然蓝色着色剂的色值试验cv白利度lab13.518.135.751.96-7.2125.5812.936.111.51-7.1233.097.841.552.51-8.9943.357.641.111.69-7.5554.8711.241.180.73-7.8064.4612.140.961.79-9.0274.3511.939.872.18-8.22表2：在位置2处测量的天然蓝色着色剂的色值试验cv白利度lab43.33---42.121.42-8.4864.46---43.241.36-9.7174.30---41.841.86-9.27表1与表2之间的值的小的差异可以通过用于测试的设备的差异来解释。浓度可能会将cv值从3增加到55或更高。与需要高使用率的具有低得多的cv值的天然蓝色着色剂相比，具有更高的cv(例如cv为55)的天然蓝色着色剂通过允许更低的包含率和改善的使用成本(ciu)而将是有益的。天然蓝色着色剂具有低的正a值和高的负b值。发现生产的天然蓝色着色剂是光稳定的、热稳定的和酸稳定的。实例2：天然着色剂的制备。从生果实(未成熟的)中除去huito果实(美洲格尼帕树)的果肉/种子/囊，干燥并粉碎成粉末。向huito粉末(10.0g)中加入去离子水(90.0g)。将huito粉末与水混合并浸泡30分钟。向huito粉末和水中加入β-葡糖苷酶(0.15g)。30分钟后，过滤混合物以除去不溶物。通过加入10％氢氧化钠(naoh)溶液将滤液的ph调节至6.80。将所得溶液分成5.00g样品。向每个样品中加入不同的氨基酸，每个样品中总共加入0.05g氨基酸。样品静置15小时。15小时后，观察到颜色变化(图2)。图2示出了左侧在稀释之前和右侧在稀释之后的含有样品的试管。颜色和强度的变化的描述在下面的段落中，并总结在下面的表3中。含有赖氨酸的样品产生最暗的蓝色。从最强到最弱(由添加的氨基酸鉴别)列出的样品的蓝色的强度是：赖氨酸>丙氨酸>苯丙氨酸>丝氨酸>苏氨酸。含有苏氨酸的样品产生与对照样品大致相同的蓝色强度。含有半胱氨酸和谷氨酸的样品产生黄色/绿色。含有天冬氨酸的样品产生比含有半胱氨酸和谷氨酸的样品更绿的颜色。含有脯氨酸的样品产生蓝色/红色。所有样品用去离子水稀释(10倍)(图2)。未稀释的样品再静置一天。通过强度/色谱排列并通过添加的氨基酸鉴别的样品的颜色为：赖氨酸(藏青色)>丙氨酸(藏青色)>苯丙氨酸(浅蓝色)>丝氨酸(淡灰色)>对照物(红紫色，具有更多蓝色)>苏氨酸(带绿色)>脯氨酸(红紫色)>天冬氨酸(略带绿色的灰色)>谷氨酸≈半胱氨酸(黄色/绿色)。结果总结在下表3中并示于图3中。图3示出了按照最强烈的蓝色(1)到最不强烈的蓝色(10)排列的天然着色剂的样品。表3：天然着色剂的制备实例3：制备天然着色剂的方法。图4示出了制造天然着色剂的工艺流程图。对huito果实进行选择、洗涤并消毒、去皮、切碎，并与处理过的水和至少一种氨基酸共混。例如，可以使用1.0％的异亮氨酸(按huito果实的重量计)或0.75％的丙氨酸(按huito果实的重量计)。用氢氧化钠溶液将ph调节至7.0，产生经ph调节的混合物。将经ph调节的混合物在40℃下加热10-20分钟，粗过滤，在80℃下加热2-4小时，并使用具有3,000道尔顿或更低的截留分子量的膜过滤，产生渗透物和着色剂。渗透物可以被丢弃或再循环并用于代替处理过的水和/或该至少一种氨基酸。将着色剂真空浓缩并将ph调节至4.2。着色剂可以经受质量控制。着色剂可以被包装。实例4：再循环渗透物对制备天然着色剂的方法的影响。制造天然着色剂(对照物)，并将制造对照物的渗透物用于制造另一种天然着色剂(测试物)。测量对照物和测试物二者的色值以确定使用再循环的渗透物在制造天然着色剂中的影响。通过将huito果实去皮并切成小块来制备对照物。将2份去离子水与1份huito果实的比率与高透明薄织物(sheer)共混。加入异亮氨酸(huito果实的按重量计0.75％)。用氢氧化钠溶液将ph调节至8.0，产生经ph调节的混合物。将经ph调节的混合物在40℃下加热20分钟，粗过滤，在80℃下加热4小时，并且膜过滤(产生渗透物)，并任选地浓缩，从而产生对照物。用柠檬酸溶液将ph调节至4.2用于微生物学稳定性。测量对照物的颜色。通过将huito果实去皮并切成小块来制备测试物。将2份渗透物(来自制造对照物的渗透物)与1份huito果实的比率与高透明薄织物共混，产生混合物。通过使用具有3,000道尔顿或更小的截留分子量的膜(hydracore7410)进行膜过滤获得渗透物。使用螺旋缠绕式膜组件(包括由间隔物分开的膜层)。当为螺旋缠绕式膜组件选择适当的间隔物厚度时，过滤是最有效的。间隔物厚度可以在从约35密耳(1密耳＝1/1000英寸)至约120密耳的范围内。将使用45密耳间隔物的渗透与使用65密耳间隔物的渗透进行比较，其中45密耳间隔物提供比65密耳间隔物更好的渗透率。加入异亮氨酸(huito果实的按重量计总计0.75％；0.576％来自异亮氨酸粉末和0.174％来自渗透物)。渗透物含有0.087％的异亮氨酸。用氢氧化钠溶液将混合物的ph调节至8.0，产生经ph调节的混合物。将经ph调节的混合物在40℃下加热20分钟，粗过滤，并在80℃下加热4小时，产生测试物。用柠檬酸溶液将ph调节至4.2用于微生物学稳定性。测量测试物的颜色。下面的表4示出了用于制造测试物和对照物的条件表4：对照物和测试物的条件色值(cv)(颜色强度的量度)在对照物与测试物之间是相同的。如由亨特l、a和b值测量的色调在对照物与测试物之间是非常相似的并且没有实质性不同。δe小于5，表明消费者将发现难以察觉到任何颜色差异。δe量化颜色变化，其中δe值大于5表示消费者可以容易地观察到的颜色变化。δe由以下等式计算：δe＝{(l0-l)2+(a0-a)2+(b0-b)2}的平方根。图5示出了左侧的对照物和右侧的测试物，证实了两种着色剂在视觉上是相同的。下面的表5示出了对照物和测试物的ph和颜色测试的详细结果。表5：对照物和测试物的ph和颜色测试的结果如表5可以看出，cv和亨特l、a和b值对于对照物和测试物二者都是非常相似的。再循环渗透物提供了几乎相同的颜色，同时降低了制备天然着色剂的方法的新鲜水要求，并降低了制备天然着色剂的方法的纯化氨基酸要求。实例5：天然着色剂的ph调节的影响。制备天然着色剂(着色剂a和着色剂b)。对于着色剂a和着色剂b二者，使用1:3.6的huito果实与水的比率。将异亮氨酸以huito果实的按重量计1.5％的比率加入到两种着色剂中。用氢氧化钠溶液将两种着色剂的ph调节至ph8。将两种着色剂在40℃下在热水浴中加热10分钟，并且过滤两种着色剂。将着色剂b重新调节至ph8，而着色剂a没有进一步的ph调节。将两种着色剂在80℃下在热水浴中加热3小时。用柠檬酸将两种着色剂调节至ph4.2。下表6和表7中总结了着色剂a和着色剂b的ph和颜色测试的结果。表6：着色剂aph和颜色测试结果表7：着色剂bph和颜色测试结果如通过比较表6和表7中的数据可以看出，着色剂a(其仅具有ph调节至8.0一次(在添加氨基酸后))在80℃下加热3小时后具有0.63的色值(cv)。然而，着色剂b(其具有ph调节至8.0两次(在添加氨基酸后和在40℃下初始加热后过滤后))具有0.91的cv，比着色剂a高几乎45％，给予着色剂b更强的颜色。cv的这种改进转化为大量的成本节省。这样的成本节省是可实现的，因为较高的色值意味着在应用(例如食品或饮料应用)中将需要较少的具有较高色值的着色剂以实现所希望的颜色。本质上，较高的色值等同于着色剂的提高的产率。通过在天然着色剂的整个制备过程中连续调节ph可以实现进一步的节省。实例6：改进的天然蓝色着色剂的制备。比较了通过使huito果实与各种氨基酸反应制备的天然着色剂。遵循一般程序。一般程序涉及以1:3.6(huito果实:水)比率将huito果实与水组合，以各种速率添加各种氨基酸，用氢氧化钠溶液将ph调节至7，在恒定搅拌下在40℃下加热20分钟，过滤，在恒定搅拌下在80℃下加热4小时，并且同时约每30分钟添加水以解决蒸发，并将ph调节至4.2。对于测试物a，所使用的氨基酸是处于huito果实重量的按重量计0.75％的比率的异亮氨酸。对于测试物b，所使用的氨基酸是处于huito果实重量的按重量计0.75％的比率的丙氨酸。对于测试物c，所使用的氨基酸是异亮氨酸和丙氨酸的组合，其中异亮氨酸处于huito果实重量的按重量计0.6％的比率，并且其中丙氨酸处于huito果实重量的按重量计0.15％的比率。测试物a、测试物b和测试物c的结果以及测试物a着色剂和测试物b着色剂(80％测试物a，20％测试物b)的组合的分析总结如下。表8：测试物a分析表9：测试物b分析表10：测试物c分析表11：测试物a和测试物b的组合的分析总体而言，异亮氨酸和丙氨酸的组合与huito果实反应导致改进的天然着色剂，与由单独的huito果实和异亮氨酸的混合物产生的着色剂相比，该天然着色剂具有更好的颜色(具有更少的绿色和更多的红色)(更高的a值)，并且没有观察到沉淀物。通过分别使氨基酸与huito果实反应并且然后共混所得着色剂(与将2种或更多种氨基酸与huito果实混合相比)，观察到类似的结果。通过使用丙氨酸产生的天然着色剂具有蓝色-红色/紫色。实例7：来自各种氨基酸的天然着色剂。基本上根据前述方法实例的方法被用于使用各种氨基酸制造天然着色剂(将huito果实与水以约1:3.6的huito果实:水，重量:重量的比率混合；将各种氨基酸以huito果实重量的按重量计约1.5％的比率混合，用氢氧化钠调节ph，在40℃下加热20分钟，粗过滤，在80℃下加热2小时，并用柠檬酸调节ph)。对于使用huito果实从好氧过程获得的着色剂(未浓缩的)，结果总结在下表12中。图6示出了如下表12中总结的蓝色着色剂的不同颜色。图6示出了通过本发明的方法获得的着色剂，其从左边最鲜艳的蓝色到右边微弱的蓝色排列，按从左到右的顺序：含有异亮氨酸、蛋氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸、天冬酰胺、精氨酸、丝氨酸和脯氨酸的着色剂。对于使用京尼平提取物从好氧过程获得的着色剂，结果总结在下表17中。对于使用京尼平提取物从好氧过程获得的附加着色剂，结果总结在下表18中。获得京尼平提取物的过程包括清洗、剥皮和切削huito果实；将比率为1.5:1(水:huito果实，重量:重量)的水和huito果实共混，并过滤以产生huito果汁。使用乙酸丁酯(1:2乙酸丁酯:huito果汁，重量:重量)从huito果汁中提取京尼平。重复使用乙酸丁酯的提取。将乙酸丁酯蒸发，产生可以干燥成粉末的京尼平提取物。为了获得如表13和表14中总结的着色剂，将干燥的京尼平提取物粉末溶解在水和乙醇的混合物中并与氨基酸混合，并加热2小时。表12：来自huito果实与各种氨基酸的好氧反应的天然着色剂表13：来自huito果实与各种氨基酸的好氧反应的天然浓缩着色剂氨基酸lab牛磺酸43.171.06-11.19赖氨酸43.651.35-10.91丙氨酸43.850.29-10.77精氨酸44.61-1.06-10.19表14：来自京尼平提取物与各种氨基酸的好氧反应的天然着色剂氨基酸颜色lab异亮氨酸绿色87.47-3.42-0.77苏氨酸绿色79.12-5.91-2.42组氨酸蓝色71.13-7.82-17.46色氨酸黄色/绿色不适用不适用不适用苯丙氨酸深绿色不适用不适用不适用实例8：使用异亮氨酸或丙氨酸的天然着色剂。基本上根据前述方法实例的方法用于使用异亮氨酸或丙氨酸制造天然着色剂。这些天然着色剂的分析结果总结如下。表15：使用异亮氨酸的天然着色剂表16：使用丙氨酸的天然着色剂实例9：纯化的着色剂试验。以1:3.6的huito果实:水(重量:重量)的比率将huito果实与水混合，在40℃下加热并粗过滤，从而产生果实提取物的一般程序用于制备这个实例的着色剂。对于对照着色剂，将异亮氨酸以huito果实重量的按重量计1％加入到果实提取物中并加热4小时。对于纯化的着色剂，将果实提取物用95％乙醇以1:2的果实提取物:乙醇(重量:重量)的比率处理，过滤，蒸发乙醇，并与处于huito果实重量的按重量计1％的比率的异亮氨酸混合，并加热4小时。图7示出了对照物和纯化的着色剂的比较。结果总结如下。表17：对照物和纯化的着色剂的比较实例10：残留的非反应性氨基酸和京尼平的减少。遵循基本上根据涉及膜过滤的前述实例的方法。将样品浓缩2次并通过渗滤。下面总结的结果示出了，氨基酸(异亮氨酸)在2倍浓缩后减少了49％，并且在渗滤后减少了92％。残留的非反应性氨基酸的减少提供了在最终着色剂产品上允许清洁剂标签的益处。2倍浓缩和渗滤也去除了着色剂中所有剩余的未反应的京尼平。表18：残留的非反应性氨基酸和京尼平的减少的分析已经参考某些实例描述了本发明。然而应该认识到对于本领域技术人员来说可以对这些实例中的任一个做出多种替换、修改或组合而不背离本发明的精神和范围。因此，本发明不是由实例的描述、而是由所附的原始提交的权利要求书所限制。当前第1页12