专利名称：具有隔板的样品室的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于显微镜镜检的样品室，所述样品室包括用于接收样品的贮液器。
背景技术：
特别是在细胞显微镜领域，大多数不同形式的样品室已众所周知。几乎所有的样品室都包括用于接收样品的结构，例如用微流体通道或贮液器的形式。在EP 1886 792 A2、W02008/149914A2、W02005/079985 或 DE 101 48 210 中显示了上述样品室的实施例。上述样品室可能的应用领域是，特别是分子或细胞显微镜领域。待测样品与液体一同置于样品室的贮液器中，然后可以用高分辨率的方法(例如透射光显微术、荧光显微术、共聚焦显微术，等等)进行检查。然而，在所述检查中，弯液面的形成，即液面的凸起，是不利的。无弯液面的显微镜检查很重要，例如，如果打算用相差显微镜检查的方法来增强对比。已知的样品室通常具有的缺点是，由于其几何形状的原因而难以实现无弯液面的填充或显微镜检查。因此，从W02008/149914A2获知的样品室(孵育盒)通过覆盖构件防止或最小化弯液面。然而，在所述样品室中，如果液体从进口泄露，样品室的外表面可能被污染，通过所述进口液体可被填充入贮液器中。在这种情况下，相邻贮液器中的样品间交叉污染均不可避免。此外，在这种情况下，用于覆盖样品室的盖子也会被污染。
发明内容
因此，本发明的目标在于提供一种用于显微镜镜检的样品室，所述样品室使显微镜检查无弯液面，并且同时包含较低的样品室外表面污染的风险。根据权利要求1，所述目标通过一种样品室实现。用于显微镜镜检的本发明样品室包括:用于接收样品的贮液器，所述贮液器由底板和侧壁界定，和置于贮液器中并且平行于底板的隔板，所述隔板布置于贮液器中低于侧壁最小高度的高度，因此所述隔板将贮液器分为上部分和下部分贮液器，下部分贮液器和上部分贮液器横向完全以侧壁为边界，并且所述上部分和下部分贮液器通过至少一个进口 /出口连接。在所述样品室中，通过向下部分贮液器中填充待测液体，使填充高度完全浸湿隔板的下表面，可实现无弯液面的显微镜检查。液体可以通过进口 /出口引入下部分贮液器中。通过布置于低于侧壁最小高度的高度上的隔板，上部分贮液器也是横向完全以侧壁为边界。因此，如果过多的液体从进口 /出口泄漏，有可能防止或至少最小化样品室外表面的污染或交叉污染。换言之，泄漏的液体将首先在上部分贮液器中收集，而不会从贮液器中漏出以致样品室的外表面污染。然后，上部分贮液器中过多的液体可以通过移液的方法随意去除。
所述贮液器可以特别是用于接收液体的贮液器。在这种情况下，样品可以是相应的液体或悬浮在液体中。可能的样品可以是，例如，细胞。侧壁的高度和/或隔板布置于贮液器中的高度可以是特别是从贮液器的底部测量。特别是如果贮液器的底面不平，侧壁的高度和/或隔板布置在贮液器中的高度也可以从样品室放置的平面确定，特别是在操作中。高度可以特别是测量至侧壁的上边缘。贮液器的侧壁可以特别是完全横向形成贮液器的边界，因此填充入贮液器的液体不会横向溢出贮液器。换言之，侧壁可以设计成围绕贮液器，所述侧壁特别是不包括任何通道开口。侧壁可以特别是恒定的高度。在这种情况下，侧壁最小的高度相当于侧壁恒定的高度。然而，侧壁也可以是可变高度的。因此，侧壁的最小高度可以特别是相当于直到液体可以填充入贮液器而不会溢出贮液器的高度。隔板布置的高度可以特别是小于或等于侧壁最小高度的3/4、特别是小于或等于侧壁最小高度的1/2、特别是小于或等于侧壁最小高度的1/4。因此，上部分贮液器的体积可以是足够大以暂时接收来自下部分贮液器的过多液体而避免样品室外表面的污染。在本文中，平行于底板可以特别是指平行于底板的平面区域，特别是在操作中所述样品室至少部分放置在这个平面区域上。平行于底板也可以指平行于在操作中样品室所放置的底板的区域。平行于底板可以特别是指底板，尤其是底板的平面区域与隔板间的夹角小于5°，特别是小于1°。隔板可以与侧壁相连，特别是与侧壁的侧面或两个对立面相连。特别是隔板可能只与侧壁的侧面或两个对立面相连。换言之，隔板可能至少部分不与侧壁相连。在这里隔板可以稳固地连接侧壁，特别是因此在没被破坏时隔板不会从侧壁移开。例如，侧壁可以与隔板粘接或焊接。侧壁和隔板也可以一体成型。作为备选，隔板可以松散地与侧壁相连。这允许，例如，向下部分贮液器引入相对大的物体，并且只能随后插入隔板。基于待测样品，这可以有助于获得更高的灵活性。特别是，样品室可以设计成隔板是可转换的。为此，特别是上部分贮液器可以向外开口，以便隔板可以通过这个开口被移除和/或插入。侧壁可以包括特别是环绕边缘，隔板松散地放置在所述环绕边缘上。这允许隔板与侧壁间简单的和牢固的松散的连接。特别是，隔板布置的高度可以因此精确地确定。边缘可以是特别是由突起部分或肩形成。然而，作为备选，侧壁的内侧也可能朝向底板逐渐缩小，特别是成圆锥形地逐渐缩小。由此，隔板也可以布置在贮液器内固定的高度上。与所述步骤相比，这种可逆的连接可以设计得更稳固一些，因为通过侧壁的逐渐缩小可以形成隔板与侧壁之间不确定的连接。作为备选，也可以在内壁上引入或布置一个或多个嵌入元件，以便隔板因此不确定地与侧壁相连。所述隔板可以具有与贮液器的几何形状相应的几何形状。因此，可以提供无弯液面显微镜检测的最佳表面。如果贮液器具有，例如，矩形的横切面，隔板也可以具有矩形设计。
所述隔板可以是液体可渗透的、能穿透的或设计成膜。如果隔板选择膜或另一种多孔材料，可以刨出所需尺寸的孔以便液体从底部引入隔板中，但由于水的表面张力，隔板的上面不是浸湿的。在这里，0.2 μ πΓ50 μ m的孔隙大小，特别是0.2 μ πΓ20 μ m的孔隙大小，是有利的。 所述膜可以形成可渗透或半渗透的膜。所述隔板可以具有0.1mnTlOmm的厚度，特别是lmnT3mm的厚度。这样可以提供隔板足够的稳定性。所述隔板可以特别是坚硬的。这样可以防止隔板在置于贮液器中的液体的压力下变形而不能再可靠地预防弯液面。特别是，所述隔板可以具有大于或等于聚碳酸酯组成的正方形隔板的挠曲强度的挠曲强度，所述正方形隔板边长1cm，具有恒定的1_的厚度及矩形的横切面。特别是，所述隔板的挠曲强度可以高于190000N.mm2。挠曲强度相当于隔板材料的弹性模量和隔板的几何惯性矩的乘积。弹性模量可以根据DIN53457的方法确定。挠曲强度可以特别是与垂直于隔板表面，尤其是垂直于与底板平行布置的隔板表面的力所产生的弯曲度相关。所述至少一个进口 /出口可以由隔板中的开口或隔板与侧壁之间的开口形成。这允许上部分和下部分的贮液器之间简单的和直接的连接。所述隔板中的开口可以是，例如，一个通孔。隔板和侧壁间的开口可以至少部分由隔板中的侧凹形成。所述侧凹可以是特别是由隔板的拐角区域提供。所述隔板和侧壁间的开口也可以是至少部分由至少部分与侧壁分离的隔板形成。由此，可以形成从上部分贮液器到下部分贮液器穿过隔板和侧壁间开口的长方形。如果贮液器是矩形或正方形的几何形状，开口可以在隔板和侧壁间扩大超过一个侧壁的全长。这允许更容易地填充下部分贮液器。所述开口，特别是在隔板中形成的通孔,可以具有至少0.6mm,尤其是至少0.8mm的直径。由此，下部分贮液器可以方便地用移液器填充，因为开口的面积因此至少相当于移液器吸头的典型大小。上部分和下部分的贮液器也可以通过两个特别是布置于贮液器对立面的开口 /出口相互连接。特别是当开口 /出口相对布置时，在填充下部分贮液器的时候可以获得良好的通风。申请人意外地发现，由此，在下部分贮液器中可以实现悬浮于液体中的样品更均匀的分布。然而，也可以提供两个以上的进口 /出口。隔板面积与贮液器底面面积的比例可以大于0.7，特别是大于0.8。由此，可以为显微镜镜检提供最大的面积。所述贮液器可以特别是包括矩形或正方形的底面。然而原则上，贮液器的，特别是贮液器底面的其它任意的几何形状，也是可以的。具有矩形或正方形几何形状的侧壁可以特别是包括四个侧壁。侧壁可以包括与底板呈80° 90°的夹角， 特别是90°的夹角。所述贮液器可以顶部开口。换言之，贮液器可以设计成上部分贮液器与外界自由相通。这样可以允许使用简单的将样品引入下部分贮液器的填充方法。例如，由此可以允许或促进移液法的使用。此外，样品室可以包括用于接收样品的附加贮液器，所述附加贮液器以底板和侧壁为边界，并且
在所述附加贮液器中布置平行于底板的隔板，所述附加贮液器中的隔板布置于低于侧壁最小高度的高度上，因此附加贮液器被分成了上部分和下部分的贮液器。所述下部分贮液器和上部分贮液器横向完全以侧壁为边界，并且所述上部分和下部分的贮液器通过至少一个进口 /出口相连。换言之，样品室可以包括数个上述贮液器，每个贮液器都具有相应的隔板。由此，用一个样品室可以进行不同的检查。总之，样品室可以包括两个或多个贮液器，每个贮液器包括按上述布置的上述隔板。更好的是，所述样品室可以确切地包括2个、4个、8个、12个、24个、48个或96个贮液器。所述贮液器和附加贮液器可以部分包括共有的侧壁。换言之，贮液器和附加贮液器可以是两个共用至少一部分侧壁的相邻的贮液器。此外，样品室可以包括用于封闭贮液器的盖子，特别是所述盖子至少部分水平紧靠侧壁的外侧面。通过所述盖子，可以避免或至少减少液体从贮液器中蒸发。所述盖子可以特别是以不漏气的或气体可渗透的方式密封液体贮液器。此外，使用所述盖子，可以降低包括在贮液器中的液体污染的风险。使用不漏气的密封，可以特别是在预定的气体环境下进行检查。更好的是，盖子和侧壁可以设计成盖子的外侧面与侧壁的外侧面对齐。由此，所述设备可以更容易控制，特别是促进了手动传输并使样品室更加牢固。所述盖子紧靠外侧面的水平对接可以确保盖子和侧壁间的牢固且紧密的连接。所述盖子和/或侧壁可以包括一个嵌入元件和/或用于接收嵌入元件的壁凹。如此，盖子可以稳固地与侧壁相连。然而，作为备选，所述盖子可以松散地放置在侧壁上，例如特别是在侧壁外表面的环绕边缘上。所述边缘可以由突起部分或肩形成。所述盖子可以特别是设计成可以盖住样品室所有的贮液器。侧壁和隔板可以是一体成型的，特别是形成模型制品。这允许简单的样品室制造。所述底板可以是特别是稳固地与侧壁相连，特别是以不透液的方式。所述底板可以借助于黏合剂、溶液、紫外处理、放射性处理、激光处理或热粘合与侧壁相连。可以横跨表面或以带状形式进行热粘合，特别是只沿着底板和/或侧壁的边缘。这有利地允许了侧壁和底板的稳固连接。侧壁也可以借助于黏合剂、溶液、紫外处理、放射性处理、激光处理或热粘合与隔板相连。底板可以特别是设计成平面的。在本文中“平面的”可以指每个底板的两个对立面设计成平行面的。底板也可以设计成只是部分平面的。底板可以具有I μ πΓ300 μ m的厚度,更好的是100 μ πΓ200 μ m的厚度。所述底板
有利地允许了倒置显微镜的应用。所述厚度可以相当于底板的最大厚度。如果是平面的底板，厚度是恒定的。
在贮液器内，底板可以具有凹口。由此，在贮液器内底板的厚度可以减小，对它用于显微镜镜检可以具有积极的影响；同时贮液器外面的底板厚度更大，对样品室的稳定性可以具有积极的影响。底板也可以设计成模型制品。样品室可以特别是包括与底板稳固连接的盖板，在所述盖板里提供一个凹处，因此贮液器由底板和凹处构成。换言之，侧壁可以是与底板相连的盖板的部分。所述底板、盖板，特别是侧壁，和/或隔板可以包括塑料的，特别是环烯共聚物、环烯多聚物、聚乙烯、聚苯乙烯、聚碳酸酯，和/或聚甲基丙烯酸甲酯。所述塑料可以具有低的双折射(例如玻璃)和/或本质上等同于传统盖玻片自发荧光的自发荧光。所述光学相关的高质量塑料可以改善显微镜镜检，特别是在荧光显微镜的应用中。所述底板可以包括柔韧的材料，例如胶片。然而，所述底板也可以由玻璃组成，特别是由盖玻片组成。样品室的底部，特别是底板，可以具有传统显微镜载物片的尺寸，特别是大约25.5mm的宽度和大约75.5mm的长度，或者具有多滴定板的尺寸，特别是大约85.6mm的宽度和大约127.6mm的长度。贮液器可以具有10 μ riOml的体积，更好的是20 μ广5ml的体积。贮液器的高度可以是25 μ nT20mm，更好的是0.lmnT5mm。特别是贮液器的最大直径或例如矩形贮液器的边长可以是0.5mm 50mm,更好的是lmm 25mm。如果侧壁是盖板的部分，那么所述盖板可以包括平行于底板的平面区域。在所述底板的平面区域的样品室的高度可以是0.5mnTl0mm,更好的是lmnT2mm,特别是1.7mm。如果样品室的盖板具有内部形成凹处的标高，如此形成的贮液器的体积可以是50 μ f 3ml，更好的是80μ f2.5ml。起始于所述盖板平面区域的标高高度，可以是Immlcm，更好的是5mm Icmο贮液器的内表面可以是至少部分亲水的。这样可以防止或至少最小化不想要的物质，例如疏水溶剂，渗透进样品室的材料中。特别是，在下部分贮液器中的样品室的内表面可以是亲水的。贮液器的内表面可以是至少部分亲水的，通过向贮液器中引入等离子体或等离子废气或活性气体，例如臭氧或一氧化氮。所述等离子体可以引入下部贮液器中，特别是通过至少一个进口 /出口。这样可以使贮液器表面具有有效的亲水性。
本发明进一步的特征和优点将参考示范图说明如下。图中:图1显示了用于显微镜镜检的示范样品室的剖视图；图2显示了根据图1中的示范样品室的俯视图；图3显示了根据图1中的示范样品室盖上盖子的剖视图；图4显示了用于显微镜镜检的附加示范样品室的透视图；图5显示了根据图4中的示范样品室带有盖子的透视图；图6显示了根据图4和图5中的示范样品室盖上盖子的透视具体实施例方式在图1中，显示了用于显微镜镜检，例如用于荧光显微术的示范样品室。所述示范样品室I包括底板2和侧壁3。贮液器由底板2和侧壁3界定，所述贮液器顶部开口。隔板4布置在贮液器中将贮液器分为下部分贮液器5和上部分贮液器6。在这种情况下，侧壁3具有恒定的高度。隔板4布置在贮液器中低于侧壁3高度的高度上。然而，贮液器也可以具有可变高度的侧壁3。在这种情况下，隔板布置在低于侧壁最小高度的高度上。下部分贮液器5和上部分贮液器6横向都完全以侧壁3为边界。在本实施例中，下部分贮液器5和上部分贮液器6以对齐的方式被安排为一个在另一个之上。上部分贮液器6通过第一进口 /出口 7和第二进口 /出口 8与下部分贮液器5相连。通过这些进口 /出口 7、8，样品，特别是悬浮于液体中的样品，可被引入下部分贮液器5中。如果下部分贮液器5填满了液体而使填充高度完全浸湿隔板4的底面，弯液面就不会形成。当下部分贮液器5被填满，液体可能通过进口 /出口 7、8其中一个越过隔板4的高度而泄漏。然而，由于侧壁3也横向完全形成上部分贮液器6的边界，于是降低了样品室I外表面污染的风险。隔板4布置的高度可以特别是相当于侧壁3最小高度的一半或更小。隔板4的挠曲强度可以特别是高于191666N.mm2。这相当于由聚碳酸酯组成的、厚1_、边长Icm的正方形隔板的挠曲强度。所述挠曲强度与垂直于与底板2平行布置的隔板4表面的弯曲度相关。通过所述刚性隔板4，可以防止或至少最小化隔板4在引入贮液器中的液体的压力下变形，由此更可靠地防止或最小化弯液面。图2显示了根据图1中的示范样品室的俯视图。很明显，在所述俯视图中两个进口 /出口 7、8由至少部分与侧壁3分离的隔板4形成。特别是，隔板4只与侧壁3的两个对立面连接。隔板4与侧壁3的两个面分离，由此形成上部分贮液器6和下部分贮液器5之间的通孔。进口 /出口 7、8因此具有狭槽的形状。在狭槽状开口的端部提供了加宽。这些可以有利于填充，例如用移液器。这些加宽由隔板4拐角处的侧凹形成。隔板4和侧壁3在加宽区域内的距离大于0.6mm,特别是大于0.8mm。在本实施例中，隔板4稳固地连接侧壁3，例如通过热粘合。然而，作为备选，隔板4也可以松散地连接侧壁3。为此，侧壁3可以具有隔板4可以至少在两个对立面松散放置的边缘。图3显示了示范样品室进一步的剖视图。如同图1的样品室，所述样品室具有底板2、侧壁3和隔板4。侧壁3和底板2界定了用于接收样品的贮液器。隔板4将贮液器分为由两个进口 /出口 7、8相连的下部分贮液器5和上部分贮液器6。在本实施例中，贮液器被盖子9封闭。所述盖子9可以以不漏气的或气体可渗透的方式封闭贮液器。使用所述盖子，也可以降低包含在贮液器中的样品污染的风险。使用不漏气密封时，可以是特别是在预定的气体环境下进行检查。
在本实施例中，侧壁3外表面具有由肩形成的盖子9放置的边缘。盖子9的外表面与侧壁3的外表面对齐。由此，样品室可以更容易控制，特别是促进了手动传输并使样品室更加牢固。在本实施例中，盖子9也水平紧靠侧壁3的外侧面。这样可以确保盖子9和侧壁3之间稳固的和紧密的连接。图4显示了附加示范样品室I的透视图。在所述样品室I中，提供了由侧壁3和底板2界定的两个相邻的贮液器。在两个贮液器中，布置了平行于底板2的液体不可渗透的并将各自的贮液器分为通过进口 /出口 7、8相连的下部分贮液器5和上部分贮液器6的隔板4。
作为备选，隔板4也可以是可渗透的或设计成膜。在用于封闭贮液器的盖子可以放置的侧壁3的外表面上可见边缘10。图5根据图4显示了带有用于封闭贮液器的盖子9的示范样品室。在图6中，显示了图5的示范样品室，所述样品室的两个贮液器被盖子9封闭。上述贮液器的内表面，特别是下部分贮液器的内表面，也可以是至少部分亲水的，意味着所述贮液器可以包括亲水层。通过所述亲水层，可以防止或至少最小化不想要的物质，例如溶剂，迁移至样品室的材料中。所述亲水层可以具有高于70mN/m的表面张力，特别是高于72mN/m。如此，更好地获得亲水性。亲水层可以是，例如，SiOx层。所述亲水层可以通过例如沉淀SiOx的等离子体技术获得。SiOx具有高于72mN/m的表面张力。可以从，例如，B.Jacoby et al., " Abscheidung, Charakterisierung undAnwendung von Plasma-Polymerschichten auf HMDSO-Basis^, Vakuum in Forschungund Praxis (2006), pages 12-18，或 D.Hegemann et al.，"Deposition Rate andThree-dimensional Uniformity of RF plasma deposited SiOx films' Surface andCoating Technology (2001), page849.中取得产生所述亲水层的合理方法。根据IS08296:2003 (塑料-膜和板-湿润张力的确定，IS08296:2003)确定表面张力(或表面能)。IS08296 (原来是DIN53364)校准塑料的平均润湿性评估。判断标准是蘸有测试墨水的画笔的笔画边缘的反应。为此使用具有不同表面张力的测试墨水。如果画笔的笔画边缘在2秒内缩小，将会使用紧邻的更低的值重复测量。如果画笔的笔画边缘向外延伸，将会使用紧邻的更高的值重复测量。表面能(临界的)是笔画边缘静止2秒的测试液体的值。需要理解的是上述实施例中提到的特征并不局限于这些特定组合，也可以是任何其它组合形式。此外，贮液器的几何形状不局限于图中所示的正方形。任何其它的几何形状也是可以的。例如，所述贮液器也可以具有圆柱形的设计。
权利要求
1.用于显微镜镜检的样品室(1)，包括: 用于接收样品的贮液器，所述贮液器由底板(2 )和侧壁(3 )界定，和 布置于贮液器中并且平行于底板(2)的隔板(4)。
所述隔板(4)布置于贮液器中低于侧壁(3)最小高度的高度上，因此所述隔板将贮液器分为上部分和下部分贮液器(6、5)， 所述下部分贮液器(5)和上部分贮液器(6)横向完全以侧壁(3)为边界，并且 所述上部分和下部分贮液器(6、5)通过至少一个进口 /出口(7、8)连接。
2.根据权利要求1所述的样品室，所述侧壁(3)具有恒定的高度。
3.根据权利要求1或2所述的样品室，所述隔板(4)与侧壁(3)相连，特别是与侧壁(3)的侧面或两个对立面相连。
4.根据权利要求3所述的样品室，所述隔板(4)松散地与侧壁(3)相连。
5.根据上述权利要求之一所述的样品室，所述侧壁(3)包括隔板(4)松散放置其上的特别是环绕的边缘。
6.根据上述权利要求之一所述的样品室，所述至少一个进口/出口(7、8)由隔板中的开口或隔板(4)与侧壁(3)之间的开口形成。
7.根据权利要求6所述的样品室，所述隔板(4)与侧壁(3)之间的开口至少部分由隔板(4)的侧凹形成。
8.根据权利要求6或7所述的样品室，所述隔板(4)与侧壁(3)之间的开口至少部分形成于与侧壁(3)至少部分分离的隔板(4)。
9.根据上述权利要求之一所述的样品室，所述上部分和下部分的贮液器(6、5)通过特别是布置于贮液器对立面的两个进口 /出口(7、8)连接。
10.根据上述权利要求之一所述的样品室，所述隔板(4)面积与贮液器底面面积之比大于0.7，特别是大于0.8。
11.根据上述权利要求之一所述的样品室，所述贮液器具有矩形或正方形底面。
12.根据上述权利要求之一所述的样品室，此外包括用于接收样品的附加贮液器，所述附加贮液器以底板(2)和侧壁(3)为边界，并且 所述附加贮液器中设置有平行于底板(2)的隔板(4)。
所述附加贮液器中的隔板(4)布置于低于侧壁(3)最小高度的高度上，因此所述隔板将附加贮液器分为上部分和下部分的贮液器， 所述下部分贮液器和上部分贮液器横向完全以侧壁(3)为边界，并且 所述上部分贮液器和下部分贮液器(6、5)由至少一个进口 /出口(7、8)连接。
13.根据权利要求12所述的样品室，所述的贮液器和附加贮液器在部分区域包括共用的侧壁(3)。
14.根据上述权利要求之一所述的样品室，此外包括用于封闭贮液器的盖子(9)，特别是所述盖子(9)至少部分水平紧靠侧壁(3)的外侧面。
15.根据上述权利要求之一所述的样品室，所述贮液器的内表面至少部分是亲水的。
16.根据上述权利要求之一所述的样品室，所述隔板是液体不可渗透的、可渗透的或设计成膜。
全文摘要
本发明为具有隔板的样品室，用于显微镜镜检，其包含用于接收样品的贮液器，所述贮液器由底板和侧壁界定，以及布置于贮液器中平行于底板的隔板，所述贮液器中的隔板布置于低于侧壁最小高度的高度上，因此所述隔板将贮液器分为上部分和下部分贮液器。所述下部分贮液器和上部分贮液器横向完全以侧壁为边界，并且上部分和下部分贮液器通过至少一个进口/出口连接。
文档编号B01L3/00GK103157524SQ201210536279
公开日2013年6月19日 申请日期2012年12月12日 优先权日2011年12月12日
发明者罗曼·詹托, 伊莱亚斯·霍恩 申请人:易必迪股份有限公司