一种用于脐带血造血干细胞分离的平推式血液分浆夹的制作方法

1.本发明涉及脐带血造血干细胞，尤其是一种用于脐带血造血干细胞分离的平推式血液分浆夹。


背景技术：

2.脐带血造血干细胞的分离方法直接影响造血干细胞的回收率和活率。脐带血分离过程中,减少离心次数可更有效提高造血干细胞存活率；减少红细胞和部分血浆的残留，可提高造血干细胞回收率，从而获得数量更多的造血干细胞。
3.目前，脐带血分离技术常用的是二步离心法：即通过密度梯度离心，先进行第一次离心，收获上层血浆和中层富含有核细胞的白膜层，去除下层红细胞。然后再进行第二次离心，去除上层多余的血浆，最终收集到中层富含有核细胞的白膜层。此方法使用两次离心，造成细胞的损失和细胞活性的降低，对造血干细胞质量产生一定影响。
4.此外,脐带血造血干细胞分离常用v型开口的血液分浆夹，即分浆夹的固定挤压板和活动挤压板呈v型。现有技术的分浆夹在脐带血造血干细胞分离时存在以下缺点:(1)当将装有分层的脐带血袋放到v型分浆夹后，由于v型夹对脐带血袋上下层的挤压力不均一，导致脐带血袋内的上层血浆去除不干净，残留较多；(2)去除完脐带血袋内上层血浆后，由于v型夹底部挤压力较大，导致下层红细胞混合到白膜层(即中层，含造血干细胞)的数量较多，影响冻存及临床应用效果。


技术实现要素：

5.本发明所要解决的技术问题是，提供一种用于脐带血造血干细胞分离的平推式血液分浆夹，不仅减少了分离的次数，提高造血干细胞活性，而且提高了有核细胞回收率，减少了血浆和红细胞的残留。
6.为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种用于脐带血造血干细胞分离的平推式血液分浆夹，包括底座、固定挤压板、活动挤压板、弹簧折页、滑块、滑轨、手柄，在底座一端上固连有竖直的固定挤压板，在固定挤压板下部一侧边上开有一个延伸至固定挤压板中部的水平方向的贯通长槽，贯通长槽可使脐带血袋下端的连接小管穿过，在底座上开有垂直于固定挤压板的凹槽，凹槽中安装有滑轨，滑轨上套有能沿滑轨移动的滑块，滑块上固连有能与固定挤压板接触且平行的活动挤压板，活动挤压板的两侧边中部分别设置有带孔的耳座，在固定挤压板下方的底座上安装有弹簧折页，弹簧折页的两侧端杆通过两根与两侧端杆成锐角的连接杆连接插入在活动挤压板背面的两侧耳座孔中的旋转轴将活动挤压板紧贴在固定挤压板表面，在两个连接杆弹簧折页端杆铰接处之间连接有操纵杆，操纵杆上设置有手柄，在与固定挤压板相对的底座另一端设置有挂钩，通过向下按压手柄，使活动挤压板下方的滑块沿着滑轨远离固定挤压板，手柄压入挂钩，活动挤压板和固定挤压板分开，松开手柄时，在弹簧折页的弹力作用下，活动挤压板移向固定挤压板并与固定挤压板贴紧。
7.所述贯通长槽顶端为与贯通长槽相通的圆孔。
8.所述固定挤压板通过背部下部的“t”形支座固连在滑块上表面。
9.所述底座、活动挤压板和固定挤压板均为长方形，活动挤压板和固定挤压板的大小和形状相同。
10.本发明的有益效果是：可活动挤压板与固定挤压板平行，从而实现对脐带血分离袋产生均匀的压力。此外，固定挤压板的下部设计一个贯通长槽，可使脐带血袋下端的连接小管穿过长槽，从而实现脐带血离心后的同时排出上层血浆和下层红细胞，进而实现一次离心，同时去除血浆和红细胞的目的，进而提高细胞回收率和细胞活率。
附图说明
11.图1为本发明用于脐带血造血干细胞分离的平推式血液分浆夹闭合时的示意图。
12.图2为本发明用于脐带血造血干细胞分离的平推式血液分浆夹打开时的示意图。
具体实施方式
13.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述；显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
14.在本发明的描述中，需要说明的是，术语“上”、“下”、“内”、“外”、“顶/底端”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
15.在本发明的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“设置有”、“套设/接”、“连接”等，应做广义理解，例如“连接”，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
16.如图1、2所示，本发明的用于脐带血造血干细胞分离的平推式血液分浆夹，包括底座8、固定挤压板1、活动挤压板2、弹簧折页12、滑块10、滑轨11、手柄7，在底座8一端上固连有竖直的固定挤压板1，在固定挤压板1下部一侧边上开有一个延伸至固定挤压板1中部的水平方向的贯通长槽13，贯通长槽13可使脐带血袋下端的连接小管穿过，在底座8上开有垂直于固定挤压板1的凹槽15，凹槽15中安装有滑轨11，滑轨11上套有能沿滑轨移动的滑块10，滑块10上固连有能与固定挤压板1接触且平行的活动挤压板2，活动挤压板2的两侧边中部分别设置有带孔的耳座3，在固定挤压板1下方的底座上安装有弹簧折页12，弹簧折页12的两侧端杆通过两根与两侧端杆成锐角的连接杆5连接插入在活动挤压板2背面的两侧耳座3孔中的旋转轴4将活动挤压板2紧贴在固定挤压板1表面，在两个连接杆5与弹簧折页端杆铰接处之间连接有操纵杆6，操纵杆6上设置有手柄7，在与固定挤压板1相对的底座8另一端设置有挂钩9，通过向下按压手柄7，使活动挤压板2下方的滑块10沿着滑轨11远离固定挤
压板1，手柄7压入挂钩9，活动挤压板2和固定挤压板1分开，松开手柄7时，在弹簧折页12的弹力作用下，活动挤压板2移向固定挤压板1并与固定挤压板1贴紧。
17.所述贯通长槽13顶端为与贯通长槽13相通的圆孔14。
18.所述固定挤压板1通过背部下部的“t”形支座16固连在滑块10上表面。
19.本实施例中，所述底座8、活动挤压板2和固定挤压板1均为长方形，活动挤压板2和固定挤压板1的大小和形状相同。
20.使用密度梯度离心法对脐带血进行离心，使用该血液分浆夹时，离心参数为离心力747g、时间15分钟、温度10℃。通过密度梯度离心后，血液采集袋内的脐带血分为三层，上层为血浆，中层为富含造血干细胞的白膜层，下层为红细胞。
21.将离心好的脐带血垂直放置在打开的血液分浆夹中间，脐带血袋下端的连接小管从侧面穿过血液分浆夹固定挤压板的贯通长槽，卡在圆孔14中，放开手柄7，活动挤压板2移向固定挤压板1并挤压，血浆从脐带血袋上部排出，红细胞从脐带血袋下端连接小管排出。
22.使用本发明脐带血分浆夹数据比较如下：
23.用原血液分浆夹和本发明发明的脐带血分浆夹各分离3份脐带血标本，记录分离前后脐带血体积，分离前后分别取样，进行细胞计数、流式细胞仪cd34+细胞检测、干/祖细胞培养，然后对获得数据进行分析。
24.一、有核细胞(wbc)和红细胞(rbc)回收率比较
25.原血液分浆夹
‑
wbc和rbc数据记录
[0026][0027]
本发明脐带血分浆夹
‑
wbc和rbc数据记录
[0028]
对脐带血样本进行细胞计数，由以上数据结果可知，使用本发明的脐带血分浆夹进行分离的标本，在红细胞(rbc)去除率没有明显下降的情况下，有核细胞(wbc)回收率平
均值可达到92.1％，明显高于原血液分浆夹分离标本的有核细胞(wbc)回收率79.9％。说明本发明的脐带血分浆夹可以很好的提高有核细胞(wbc)回收率，具有更好的脐带血有核细胞分离效果。二、cd34
+
细胞百分率比较
[0029]
原血液分浆夹
‑
cd34
+
细胞数据记录
[0030][0031]
本发明血液分浆夹
‑
cd34
+
细胞数据记录
[0032][0033]
对脐带血样本进行流式细胞仪检测，由以上数据结果可知，使用本发明的脐带血分浆夹处理后的脐带血，由于有核细胞回收率较高，所以cd34
+
细胞回收率也相应的有所提高，说明本发明的脐带血分浆夹可以良好的保证脐带血样本的储存质量，更好的符合干细胞移植的行业标准。
[0034]
三、干/祖细胞培养结果
[0035][0036]
对使用本发明的脐带血分浆夹处理后的脐带血取样进行干/祖细胞培养，由以上数据结果可知，使用本发明的脐带血分浆夹进行处理后的脐带血，干祖细胞集落均可正常生长，证明本发明的脐带血分浆夹对干祖细胞没有损伤，可以很好保证干/祖细胞的生物学活性，保证脐带血储存的质量。
[0037]
综上数据结果分析，本发明的脐带血分浆夹在保证红细胞(rbc)去除率的同时，可以明显提高有核细胞(wbc)的回收率；在保证干/祖细胞活性的前提下，也有很好的提高了cd34+回收率。证明本发明的脐带血分浆夹可以更好的满足脐带血分离时的生产工艺要求，为脐带血样本的储存质量和后续血液移植创造了有利条件。
[0038]
综上所述，本发明的内容并不局限在上述的实施例中，相同领域内的有识之士可以在本发明的技术指导思想之内可以轻易提出其他的实施例，但这种实施例都包括在本发明的范围之内。