专利名称：止咳丸的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第十一册中止咳
丸的质量检测方法。
背景技术：
《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第i^一册中的药物止咳丸(WS3-B-2096-96)，具有降气化痰，止咳定喘的作用，用于风寒入肺，肺气不宣引起的咳嗽痰多，喘促胸闷，周身酸痛或久咳不止，以及老年急慢性支气管炎。该复方制剂由中药麻黄20g、紫苏子40g、厚朴(姜炙)50g、葶苈子20g、川贝母4g、法半夏(砂炒)20g、白果18g、罂粟壳50g、硼砂6g、枳壳(麸炒)40g、陈皮70g、桔梗30g、防风40g、茯苓70g、白前20g、前胡30g、甘草40g、桑叶50g、黄芩(酒炙)10g、南沙参60g、薄荷50g、紫苏叶40g组成。麻黄为方中主药，麻黄为麻黄科植物草麻黄Ephedra siriica St即f、中麻黄Ephedra intermediEiSchrenk et C. A. Mey.或木贼麻黄Ephedra equisetina Bge.的干燥草质茎，具发汗散寒，宣肺平喘之功效；紫苏子为唇形科植物紫苏Perilla frutescens (L. ) Britt.的干燥成熟果实，具有降气消痰，平喘，润肠之功效；厚朴为木兰科植物厚朴MagnoliaofficinalisRehd. et Wils.或凹口十厚朴Magnolia officinalis Rehd. et Wils. var. biloba Rebd.et Wils.的干燥干皮、根皮及枝皮，具有燥湿消痰之功效；葶苈子为十字花科植物独行菜L印idium即etelum Willd.或播娘嵩Descurainia Sophia(X. )Webb ex Prantl的干燥成熟种子，具有泻肺平喘，行水消肿之功效；川贝母为百合科植物川贝母Fritillaria cirrhosaD. Don、暗紫贝母Fritillaria皿ibracteata Hsiao et K. C. Hsia、甘肃贝母Fritillariaprzewalskii Maxim.或梭砂贝母Fritillaria delavayi Franch.的干燥鳞茎，具有清热润肺，化痰止咳之功效；法半夏为半夏的炮制加工品(半夏为天南星科植物半夏Pinelliaternata (Thunb.) Breit.的干燥块茎)，具有燥湿化痰之功效；白果为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥成熟种子，具有敛肺定喘之功效；罂粟壳为罂粟科植物罂粟P即aver somniferum L.的干燥成熟果壳，具有敛肺，涩肠，止痛之功效；硼砂为四硼酸钠，#Na2B407 101120应为99. 0 105. 0% ，具清热解毒、清肺化痰之功效；枳壳为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种的干燥未成熟果实，具理气宽中，行滞消胀之功效；陈皮为芸香科植物橘Citrus reticulate Blanco及其栽培变种的干燥成熟果皮，具有理气健脾，燥湿化痰之功效；桔梗为桔梗科植物桔梗Platycodongrandiflorum(Jacq. )A. DC.的干燥根，具有宣肺，利咽，祛痰，排脓之功效；防风为伞形科植物防风S即oshnikoviadivaricate(Turcz.)Schischk.的干燥根，具解表祛风之功效；茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw. )Wolf的干燥菌核，具有利水渗湿，健脾宁心之功效；白前为萝摩科植物柳口十白前Cynanchum sta皿tonii (Dec_ne. ) Schltr. ex Levi.或芫花口十白前Cynanchumglaucescens(Dcene. )Hand. -Mazz.的干燥根茎及根，具有降气、消痰，止咳之功效；前胡为伞形科植物白花前胡Peuceda皿m praeruptorm Dunn的干燥根，具有散风清热，降气化痰之功效；甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza inflata Bat.、胀果甘草Glycyrrhizain flataBat或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根及根茎，具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，调和诸药之功效；桑叶为桑科植物桑Morus alba L.的干燥叶，具有疏散风热，清肺润燥之功效；黄芩为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根，具有清热燥湿，泻火解毒之功效；南沙参为桔梗科植物轮叶沙参Adenophoratetraphylla(Th皿b. )Fisch.或沙参Ade,hora stricta Miq.的干燥根，具有养阴清肺，化痰，益气之功效；薄荷为唇形科植物Menthah即localyx Briq.的干燥地上部分，具宣散风热，清头目，透疹之功效；紫苏叶为唇形科植物紫苏Perilla frutescens (L. ) Britt的干燥叶(或带嫩枝)，具有解表散寒之功效。《中华人民共和国卫生部药品标准》第十一册颁布了止咳丸的质量控制标准(WS3-B-2096-96)，但卫生部颁发的现有的止咳丸质量控制方法中，只有显微鉴别和理化反应鉴别，局限性很大，难以准确控制止咳丸的质量。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种止咳丸的质量检测方法，以提高止咳丸的质量控制标准。 止咳丸的药物配方为麻黄20g，紫苏子40g，厚朴(姜炙)50g，葶苈子20g，川贝母4g，法半夏(砂炒)20g，白果18g，罂粟壳50g，硼砂6g，枳壳(麸炒)40g，陈皮70g，桔梗30g，防风40g，茯苓70g，白前20g，前胡30g，甘草40g，桑叶50g，黄芩(酒炙)10g，南沙参60g，薄荷50g，紫苏叶40g。
本发明的止咳丸的质量检测方法为 1、取止咳丸置显微镜下观察不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛液溶化；菌丝无色或淡棕色，直径4 6 ii m。油室碎片含挥发油滴，淡黄色，分泌细胞内含黄棕色物；部分类圆形或椭圆形细胞的角隅处常增厚；联结乳管内含微小淡黄色颗粒状物；纤维成束，淡黄色，韧皮纤维较少见，梭形，壁厚。导管梯纹、网纹较多见，具缘纹孔少见，管胞细小；草酸钙针晶多散在，方晶多面形。非腺毛常破碎，一至数个细胞组成。淀粉粒类圆形、卵圆形，脐点裂缝状、星状、点状及人字状； 2、盐酸麻黄碱的薄层色谱鉴别方法取止咳丸适量，除去糖衣，研碎，取粉末20g，加乙醚一无水乙醇(体积配比8 : 2)混合液70-90ml，再加入浓氨试液2-3ml，密塞，时时振摇，放置过夜，滤过，残渣用乙醚10-20ml分两次洗涤，洗液与滤液合并，加入盐酸乙醇溶液(1 — 20)(指lml盐酸加乙醇使成20ml溶液)2_3ml，摇匀，于水浴上蒸至近干，残渣加甲醇2ml搅拌使溶，用少许脱脂棉滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验(中国药典2005年版一部附录VI B)，吸取上述供试品溶液5 10 iU ，对照品溶液5 iU ，分别点于同一 以含1 %(g/ml)氢氧化钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿一甲醇一浓氨试液(体积配比36-44 : 6-8 : 0.8-1.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0. 5% (g/ml)茚三酮乙醇溶液，在lOO-ll(TC加热至斑点显色清晰，供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 3、和厚朴酚、厚朴酚的薄层色谱鉴别方法，取止咳丸适量，除去糖衣，研碎，取粉末10g，加活性炭2-4g，乙醇40-60ml，回流20-40分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水15-25ml温热使溶解，放冷，用氯仿提取两次，每次10-20ml，合并氯仿液，再用水洗涤两次，每次10-20ml，氯仿液于水浴上蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取厚 朴酚与和厚朴酚对照品，分别加甲醇制成每1ml含lmg的溶液，作为两种对照品溶液；照薄 层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液2 5 l，两种对照 品溶液各5ia，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，先以氯 仿一苯一醋酸乙酯(体积配比5 : 4 : 1)展至3-4cm，取出，晾干，再以氯仿一醋酸乙酯(体 积配比20 : 1)，氨蒸汽饱和下展至约8-10cm，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；或 喷以1% (g/ml)香草醛硫酸溶液，于100-ll(TC加热至斑点显色清晰，供试品色谱中在与两 种对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 4、陈皮的薄层色谱鉴别方法取陈皮对照药材0. 5g，用乙醚一无水乙醇(体积配 比8 : 2)混合液15-25ml，密塞，时时振摇，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶 解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取鉴别 1项下的供试品溶液与上述对照药材溶液各2 5iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶 液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷一醋酸乙酯(体积配比2-3 : 2-4)为展开剂，展 开，取出，晾干，于紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置 上，显相同颜色的荧光主斑点； 5、枳壳的薄层色谱定性鉴别方法取枳壳对照药材0. 5g，加乙醚一无水乙醇(体 积配比8 : 2)混合液15-25ml，密塞，时时振摇，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml 使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取 上述1项下的供试品溶液与上述对照药材溶液各5iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶 液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯一醋酸乙酯一甲酸(体积配比6-7 : 3-4 : 0.4-0.6) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10% (g/ml)硫酸乙醇溶液，于100-11(TC加热至斑点显色 清晰，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上，显相同 颜色的荧光主斑点； 6、止咳丸中盐酸麻黄碱的含量测定方法，照高效液相色谱法(中国药典一部附录 VID)测定 1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇一水 (体积配比l : 1)为流动相；检测波长为254士2nm，理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低
于3000 ; 2)对照品溶液的制备精密称取盐酸麻黄碱对照品12. 5mg，置100ml量瓶中，用水 溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量 取10ml，置25ml量瓶中，加入高碘酸溶液(0. 25g — 10ml)(指0. 25g高碘酸加水使成10ml 溶液)lml，O. 25mol/L氢氧化钠溶液2. 5ml，摇匀，放置30分钟，用0. 5mol/L盐酸溶液调节 ra至中性，加甲醇至刻度，摇匀，即得(每lml中含盐酸麻黄碱7.5iig);
3)供试品溶液的制备取止咳丸适量，除去糖衣，取50丸，研细，置500ml的圆 底烧瓶中，加氯化钠7. 5g，再加入消泡剂lg，加5mol/L氢氧化钠溶液120ml，摇散，超声处 理10分钟，再摇散，蒸馏，用预先盛有0. 5mol/L盐酸溶液5ml的100ml量瓶收集蒸馏液近 95ml，加水至刻度，摇匀，精密量取10ml，置25ml量瓶中，加入高碘酸溶液(0. 25g — 10ml) (指0. 25g高碘酸加水使成10ml溶液)lml，O. 25mol/L氢氧化钠溶液2. 5ml，摇匀，放置30 分钟，用0. 5mol/L盐酸溶液调节ra至中性，加甲醇至刻度，摇匀，即得；
4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测 定，即得，本品每丸含麻黄以盐酸麻黄碱(C1QH15N0 HCI)计，不得少于25ii g。
其中，"％ (g/ml)"表示溶液每100ml中含有溶质若干克。 本发明的止咳丸的质量检测方法，提高了止咳丸的质量控制标准，建立制剂中主 药的含量测定检测指标及其检测方法，删除了专属性差的理化反应鉴别，增加了盐酸麻黄 碱、和厚朴酚、厚朴酚及陈皮、枳壳的薄层色谱定性鉴别方法，保证了止咳丸复方制剂较高 的质量标准水平。
具体实施方式
实施例 止咳丸的药物配方为麻黄20g，紫苏子40g，厚朴(姜炙)50g，葶苈子20g，川贝母 4g，法半夏(砂炒)20g，白果18g，罂粟壳50g，硼砂6g，枳壳(麸炒)40g，陈皮70g，桔梗30g， 防风40g，茯苓70g，白前20g，前胡30g，甘草40g，桑叶50g，黄芩(酒炙)10g，南沙参60g， 薄荷50g，紫苏叶40g。制法以上二十二味，将桑叶、罂粟壳、甘草加水煎煮二次，每次2小 时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至适量，加入硼砂溶解；其余川贝母等十八味粉碎成细粉，过 筛，混匀，用上述的浓縮药液泛丸，干燥，包糖衣，即得。性状本品为糖衣浓縮丸，除去糖衣 后显黄褐色；味苦、微涩。 本发明的止咳丸的质量检测方法为 1、取止咳丸置显微镜下观察不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛液溶化；菌丝 无色或淡棕色，直径4 6 i！ m ;油室碎片含挥发油滴，淡黄色，分泌细胞内含黄棕色物；部分 类圆形或椭圆形细胞的角隅处常增厚；联结乳管内含微小淡黄色颗粒状物。纤维成束，淡黄 色，韧皮纤维较少见，梭形，壁厚；导管梯纹、网纹较多见，具缘纹孔少见，管胞细小。草酸钙 针晶多散在，方晶多面形。非腺毛常破碎，一至数个细胞组成。淀粉粒类圆形、卵圆形，脐点 裂缝状、星状、点状及人字状； 2、盐酸麻黄碱的薄层色谱定性鉴别方法取止咳丸适量，除去糖衣，研碎，取粉末 20g，加乙醚一无水乙醇(体积配比8 : 2)混合液80ml，再加入浓氨试液2ml，密塞，时时 振摇，放置过夜，滤过，残渣用乙醚15ml分两次洗涤，洗液与滤液合并，加入盐酸乙醇溶液 (1 — 20)(指lml盐酸加乙醇使成20ml溶液)2ml ，摇匀，于水浴上蒸至近干，残渣加甲醇2ml 搅拌使溶，用少许脱脂棉滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成 每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB) 试验，吸取上述供试品溶液5 10 ii 1，对照品溶液5 ii 1，分别点于同一以含1 % (g/ml)氢 氧化钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿一甲醇一浓氨试液(体 积配比40 : 7 : 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5% (g/ml)茚三酮乙醇溶液，在 105t:加热至斑点显色清晰，供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑 点； 3、厚朴酚的薄层色谱定性鉴别方法取止咳丸适量，除去糖衣，研碎，取粉末10g， 加活性炭3g，乙醇50ml，回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水20ml温热使溶 解，放冷，用氯仿提取两次，每次15ml，合并氯仿液，再用水洗涤两次，每次15ml，氯仿液于 水浴上蒸干，残渣加无水乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取厚朴酚与和厚朴酚对照品，分别加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为两种对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典 2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液2 5 1，两种对照品溶液各5 y 1，分别点 于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，先以氯仿一苯一醋酸乙酯(体 积配比5 : 4 : 1)展至3cm，取出，晾干，再以氯仿一醋酸乙酯(体积配比20 : l)，氨蒸汽 饱和下展至约9cm，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；或喷以1% (g/ml)香草醛硫酸 溶液，于IO(TC加热至斑点显色清晰，供试品色谱中在与两种对照品色谱相应的位置上，显 相同颜色的斑点； 4、陈皮的薄层色谱定性鉴别方法取陈皮对照药材0. 5g，用乙醚一无水乙醇(体 积配比8 : 2)混合液20ml，密塞，时时振摇，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使 溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上 述1项下的供试品溶液与上述对照药材溶液各2 5iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠 溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷一醋酸乙酯(体积配比2 : 3)为展开剂，展开， 取出，晾干，于紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上， 显相同颜色的荧光主斑点； 5、枳壳的薄层色谱定性鉴别方法取枳壳对照药材0. 5g，加乙醚一无水乙醇(体 积配比8 : 2)混合液20ml，密塞，时时振摇，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使 溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取鉴 别1项下的供试品溶液与上述对照药材溶液各5iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液 为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯一醋酸乙酯一甲酸(体积配比6.5 : 3.5 : 0.5)为展 开剂，展开，取出，晾干，喷以10% (g/ml)的硫酸乙醇溶液，于105t:加热至斑点显色清晰， 置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色 的荧光主斑点； 6、止咳丸含盐酸麻黄碱的含量测定方法，照高效液相色谱法(中国药典一部附录 VID)测定 1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇一水 (体积配比l : 1)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于 3000。 2)对照品溶液的制备精密称取盐酸麻黄碱对照品12. 5mg，置100ml量瓶中，用水 溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量 取10ml，置25ml量瓶中，加入高碘酸溶液(0. 25g — 10ml)(指0. 25g高碘酸加水使成10ml 溶液)lml，O. 25mol/L氢氧化钠溶液2. 5ml，摇匀，放置30分钟，用0. 5mol/L盐酸溶液调节 ra至中性，加甲醇至刻度，摇匀，即得(每lml中含盐酸麻黄碱7.5iig);
3)供试品溶液的制备取止咳丸适量，除去糖衣，取50丸，研细，置500ml的圆底 烧瓶中，加氯化钠7. 5g，再加入消泡剂lg(杀泡大王一食用消泡剂第二代，江苏省武进市 小河精细化工厂制造，标准代号Q/320482XJH001-1999)，加5mol/L氢氧化钠溶液120ml， 摇散，超声处理10分钟，再摇散，蒸馏，用预先盛有0. 5mol/L盐酸溶液5ml的100ml量 瓶收集蒸馏液近95ml，加水至刻度，摇匀，精密量取10ml，置25ml量瓶中，加入高碘酸溶 液(0. 25g — 10ml)(指0. 25g高碘酸加水使成10ml溶液)lml，O. 25mol/L氢氧化钠溶液 2. 5ml，摇匀，放置30分钟，用0. 5mol/L盐酸溶液调节PH至中性，加甲醇至刻度，摇匀，即得； 4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测
定，即得，本品每丸含麻黄以盐酸麻黄碱(C1QH15N0 HCI)计，不得少于25ii g。 其中，"％ (g/ml)"表示溶液每100ml中含有溶质若干克。 改进后的止咳丸的质量控制标准如下 止咳丸药品标准 止咳丸 zhike Wan处方麻黄20g，紫苏子40g，厚朴(姜炙)50g，葶苈子20g，川贝母4g，法半夏(砂 炒)20g，白果18g，罂粟壳50g，硼砂6g，枳壳(麸炒)40g，陈皮70g，桔梗30g，防风40g，茯 苓70g，白前20g，前胡30g，甘草40g，桑叶50g，黄芩(酒炙)10g，南沙参60g，薄荷50g，紫 苏叶40g。制法以上二十二味，将桑叶、罂粟壳、甘草加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液， 滤过，滤液浓縮至适量，加入硼砂溶解；其余川贝母等十八味粉碎成细粉，过筛，混匀，用上 述的浓縮药液泛丸，干燥，包糖衣，即得。性状本品为糖衣浓縮丸，除去糖衣后显黄褐色；味苦、微涩。鉴别(1)取本品，置显微镜下观察不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛液溶化； 菌丝无色或淡棕色，直径4 6 ii m。油室碎片含挥发油滴，淡黄色，分泌细胞内含黄棕色物。 部分类圆形或椭圆形细胞的角隅处常增厚。联结乳管内含微小淡黄色颗粒状物。纤维成束， 淡黄色，韧皮纤维较少见，梭形，壁厚。导管梯纹、网纹较多见，具缘纹孔少见，管胞细小。草 酸钙针晶多散在，方晶多面形。非腺毛常破碎，一至数个细胞组成。淀粉粒类圆形、卵圆形， 脐点裂缝状、星状、点状及人字状。 (2)取本品适量，除去糖衣，研碎。取粉末20g，加乙醚一无水乙醇(8 : 2)混合 液80ml，再加入浓氨试液2ml，密塞，时时振摇，放置过夜，滤过，残渣用乙醚15ml分两次洗 涤，洗液与滤液合并，加入盐酸乙醇溶液(1 — 20)2ml，摇匀，于水浴上蒸至近干，残渣加甲 醇2ml搅拌使溶，用少许脱脂棉滤过，滤液作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲 醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附 录VI B)试验，吸取上述供试品溶液5 10 ii 1，对照品溶液5 ii 1，分别点于同一以含1 % 氢氧化钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿一甲醇一浓氨试液
(40 : 7 : i)为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以o.5^茚三酮乙醇溶液，在i05t:加热至斑点
显色清晰。供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取本品适量，除去糖衣，研碎。取粉末10g，加活性炭3g，乙醇50ml，回流30 分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水20ml温热使溶解，放冷，用氯仿提取两次，每次 15ml，合并氯仿液，再用水洗涤两次，每次15ml，氯仿液于水浴上蒸干。残渣加无水乙醇lml 使溶解，作为供试品溶液。另取厚朴酚与和厚朴酚对照品，分别加甲醇制成每lml含lmg的 溶液，作为两种对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸 取供试品溶液2 5iU，两种对照品溶液各5iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为 黏合剂的硅胶G薄层板上，先以氯仿一苯一醋酸乙酯(5 :4:1)展至3cm，取出，晾干，再 以氯仿一醋酸乙酯(20 : 1)，氨蒸汽饱和下展至约9cm，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；或喷以1%香草醛硫酸溶液，于IO(TC加热至斑点显色清晰。供试品色谱中在与两种 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 (4)取陈皮对照药材O. 5g，用乙醚一无水乙醇(8 : 2)混合液20ml，密塞，时时振 摇，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法 (中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液与上述对照药 材溶液各2 5ia，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正 己烷一醋酸乙酯(2 : 3)为展开剂，展至9cm，取出，晾干，于紫外光灯(365nm)下检视。供 试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。
(5)取枳壳对照药材O. 5g，加乙醚一无水乙醇(8 : 2)混合液20ml，密塞，时时振 摇，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法 (中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液与上述对照 药材溶液各5 ii 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲 苯一醋酸乙酯一甲酸(6. 5 : 3.5 : 0.5)为展开剂，展至约9cm，取出，晾干，喷以10%的硫 酸乙醇溶液，于105t:加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中在 与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。检查应符合丸剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录I A)。
含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇一水 (1 : 1)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备精密称取盐酸麻黄碱对照品12. 5mg，置100ml量瓶中，用水 溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量 取10ml，置25ml量瓶中，加入高碘酸溶液(0. 25g — 10ml) lml，O. 25mol/L氢氧化钠溶液 2. 5ml，摇匀，放置30分钟，用0. 5mol/L盐酸溶液调节ffl至中性，加甲醇至刻度，摇匀，即得 (每lml中含盐酸麻黄碱7. 5 ii g)。 供试品溶液的制备取本品适量，除去糖衣，取50丸，研细。置500ml的圆底烧瓶 中，加氯化钠7. 5g，再加入消泡剂lg，加5mol/L氢氧化钠溶液120ml，摇散，超声处理10分 钟，再摇散，蒸馏，用预先盛有0. 5mol/L盐酸溶液5ml的100ml量瓶收集蒸馏液近95ml，加 水至刻度，摇匀。精密量取10ml，置25ml量瓶中，照对照品溶液制备项下的方法，自"加入 高碘酸溶液"起，依法操作，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测 定，即得。 本品每丸含麻黄以盐酸麻黄碱(C1QH15NO HCI)计，不得少于25 y g。功能主治降气化痰，止咳定喘。用于风寒入肺，肺气不宣引起的咳嗽痰多，喘促
胸闷，周身酸痛或久咳不止，以及老年急慢性支气管炎。用法用量口服，一次6丸，一日2次。规格每18丸重3g。贮藏密封。
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权利要求
一种止咳丸的质量控制方法，止咳丸的药物配方为麻黄20g，紫苏子40g，厚朴(姜炙)50g，葶苈子20g，川贝母4g，法半夏(砂炒)20g，白果18g，罂粟壳50g，硼砂6g，枳壳(麸炒)40g，陈皮70g，桔梗30g，防风40g，茯苓70g，白前20g，前胡30g，甘草40g，桑叶50g，黄芩(酒炙)10g，南沙参60g，薄荷50g，紫苏叶40g；其特征在于止咳丸的质量检测方法为1)取止咳丸置显微镜下观察不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛液溶化；菌丝无色或淡棕色，直径4～6μm；油室碎片含挥发油滴，淡黄色，分泌细胞内含黄棕色物，部分类圆形或椭圆形细胞的角隅处常增厚，联结乳管内含微小淡黄色颗粒状物，纤维成束，淡黄色，韧皮纤维较少见，梭形，壁厚；导管梯纹、网纹较多见，具缘纹孔少见，管胞细小，草酸钙针晶多散在，方晶多面形，非腺毛常破碎，一至数个细胞组成，淀粉粒类圆形、卵圆形，脐点裂缝状、星状、点状及人字状；2)盐酸麻黄碱的薄层色谱鉴别方法取止咳丸适量，除去糖衣，研碎，取粉末20g，加乙醚-无水乙醇按体积配比8∶2混合液70-90ml，再加入浓氨试液2-3ml，密塞，时时振摇，放置过夜，滤过，残渣用乙醚10-20ml分两次洗涤，洗液与滤液合并，加入盐酸乙醇溶液1→20即指1ml盐酸加乙醇使成20ml溶液2-3ml，摇匀，于水浴上蒸至近干，残渣加甲醇2ml搅拌使溶，用少许脱脂棉滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5～10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以含1％(g/ml)氢氧化钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨试液按体积配比36-44∶6-8∶0.8-1.2作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5％(g/ml)茚三酮乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；3)和厚朴酚、厚朴酚的薄层色谱鉴别方法取止咳丸适量，除去糖衣，研碎，取粉末10g，加活性炭2-4g，乙醇40-60ml，回流20-40分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水15-25ml温热使溶解，放冷，用氯仿提取两次，每次10-20ml，合并氯仿液，再用水洗涤两次，每次10-20ml，氯仿液于水浴上蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取厚朴酚与和厚朴酚对照品，分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为两种对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2～5μl，两种对照品溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，先以氯仿-苯-醋酸乙酯按体积配比5∶4∶1混合展至3-4cm，取出，晾干，再以氯仿-醋酸乙酯按体积配比20∶1混合，氨蒸汽饱和下展至约8-10cm，取出，晾干，置紫外光灯下检视；或喷以1％(g/ml)香草醛硫酸溶液，于100-110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中在与两种对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；4)陈皮的薄层色谱鉴别方法取陈皮对照药材0.5g，用乙醚-无水乙醇按体积配比8∶2的混合液15-25ml，密塞，时时振摇，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述1)项下的供试品溶液与上述对照药材溶液各2～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯按体积配比2-3∶2-4作为展开剂，展开，取出，晾干，于紫外光灯下检视，供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点；5)枳壳的薄层色谱定性鉴别方法取枳壳对照药材0.5g，加乙醚-无水乙醇按体积配比8∶2的混合液15-25ml，密塞，时时振摇，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述1)项下的供试品溶液与上述对照药材溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸按体积配比6-7∶3-4∶0.4-0.6作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％(g/ml)硫酸乙醇溶液，于100-110℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯下检视，供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点；6)止咳丸中盐酸麻黄碱的含量测定方法，照高效液相色谱法测定(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水按体积配比1∶1作为流动相，检测波长为254±2nm；(2)对照品溶液的制备精密称取盐酸麻黄碱对照品12.5mg，置100ml量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置25ml量瓶中，加入高碘酸溶液0.25g→10ml即指0.25g高碘酸加水使成10ml溶液1ml，0.25mol/L氢氧化钠溶液2.5ml，摇匀，放置30分钟，用0.5mol/L盐酸溶液调节PH至中性，加甲醇至刻度，摇匀，即得；(3)供试品溶液的制备取止咳丸适量，除去糖衣，取50丸，研细，置500ml的圆底烧瓶中，加氯化钠7.5g，再加入消泡剂1g，加5mol/L氢氧化钠溶液120ml，摇散，超声处理10分钟，再摇散，蒸馏，用预先盛有0.5mol/L盐酸溶液5ml的100ml量瓶收集蒸馏液近95ml，加水至刻度，摇匀，精密量取10ml，置25ml量瓶中，加入高碘酸溶液0.25g→10ml即指0.25g高碘酸加水使成10ml溶液1ml，0.25mol/L氢氧化钠溶液2.5ml，摇匀，放置30分钟，用0.5mol/L盐酸溶液调节PH至中性，加甲醇至刻度，摇匀，即得；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得，本品每丸含麻黄以盐酸麻黄碱计，不得少于25μg；其中，“％(g/ml)”表示溶液每100ml中含有溶质若干克。
全文摘要
本发明涉及《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第十一册中止咳丸的质量检测方法。包括止咳丸显微鉴别、盐酸麻黄碱的薄层色谱鉴别方法、和厚朴酚、厚朴酚的薄层色谱鉴别方法、陈皮的薄层色谱鉴别方法、枳壳的薄层色谱定性鉴别方法、止咳丸中盐酸麻黄碱的含量测定方法。本发明的止咳丸的质量检测方法，提高了止咳丸的质量控制标准，建立制剂中主药的含量测定检测指标及其检测方法，删除了专属性差的理化反应鉴别，增加了盐酸麻黄碱、和厚朴酚、厚朴酚及陈皮、枳壳的薄层色谱定性鉴别方法，保证了止咳丸复方制剂较高的质量标准水平。
文档编号G01N30/00GK101732553SQ20101010215
公开日2010年6月16日 申请日期2010年1月28日 优先权日2010年1月28日
发明者张兴元, 朱敏, 田婷婷 申请人:昆明中药厂有限公司