专利名称：多窗口、多检测指标检测卡的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及生物医药技术，特别是医学检验技术，具体是涉及一种检测卡 与检测试纸。
背景技术：
免疫层析法(Immunochromatography)是九十年代兴起的一种基于胶体金技术的
快速诊断技术，其原理是将特异的抗体先固定于硝酸纤维膜的某一区带，当该干燥的硝 酸纤维素膜一端浸入样品后，由于毛细管作用，样品将沿着该膜向前移动，当移动至固 定有抗体的区域时，样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合，若用胶体金可使该 区域显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。除胶体金外，采用彩色乳胶颗粒或 者磁颗粒作为标记物进行免疫层析法检测试剂的开发也较为成熟，同样应用于抗原抗体 反应，具有简便，快速，特异性强，灵敏度高，费用低的优点。免疫层析法技术在国内外无论人医应用方面，还是兽医应用方面，小分子物质 检测方面，都已经研制出了多种胶体金免疫层析快速检测试纸。目前，已有的免疫层析法技术检测试纸具有以下缺点1. 一种项目进行一种指标的检测；2.指标显示颜色和形式单一；3.不同检测指标在同一窗口观察。
发明内容本实用新型的目的在于提供一种多窗口、多检测指标检测卡，解决现有免疫 层析法技术检测试纸所具有的上述缺点。为实现上述目的，本实用新型采用的技术方案包括一种多窗口、多检测指标检测卡，其特征在于包括检测试纸与卡套，其中该检测试纸具有一个PVC背衬，在该PVC背衬上粘附有首尾相接的样品垫、结 合垫、检测膜结构和吸水垫，该检测膜结构具有至少两个包被膜，每两个该包被膜之间 通过硝酸纤维素膜相互连接，该至少两个包被膜与该结合垫以及该吸水垫之间也通过硝 酸纤维素膜相连接；该卡套具有一个供该检测试纸装套于内的容置空间，该卡套对应该检测试纸的 样品垫开设有一个加样孔，该卡套还设有与该检测膜结构位置相对应的至少一个观察窗。在一个较佳的技术方案中该至少两个包被膜以及该硝酸纤维素膜为一体结 构。在一个较佳的技术方案中该包被膜是通过在该硝酸纤维素膜上包被抗原原料 所形成。在一个较佳的技术方案中该至少两个包被膜的形状互不相同。[0016]在一个较佳的技术方案中该包被膜的形状为条形、菱形、圆形或者十字形。[0017]在一个较佳的技术方案中该结合垫上包被有标记物。[0018]在一个较佳的技术方案中该标记物是胶体金颗粒、彩色乳胶颗粒或者磁颗 粒。[0019]在一个较佳的技术方案中该观察窗是长方形、圆形、三角形、四边形、五边 形、六边形或者椭圆形。[0020]在一个较佳的技术方案中该观察窗的数目与该包被膜的数量相等，各观察窗 的位置分别与各包被膜的位置和大小相对应。[0021]与现有技术相比较，采用上述技术方案的本实用新型具有的优点在于本实 用新型选用多种原料作为检测线，相应选择多种原料获得标记物，在样品垫上加入样品 后，样品经过结合垫并且与相应的结合物形成免疫复合物，该复合物涌动至硝酸纤维素 膜上后，可能在不同原料包被的条带与包被原料发生反应，呈现出不同条带，并且通过 多窗口的塑料卡套进行结果观察。通过对于不同窗口中显色条带的判断，进行样品结果 的判断。
[0022]图1是本实用新型检测试纸的侧面剖视图；[0023]图2是本实用新型检测试纸的正面示意图；[0024]图3是本实用新型的塑料卡套正面结构示意图；[0025]图4是本实用新型的塑料卡套侧面结构示意图。[0026]附图标记说明1-样品垫；2-结合垫；3检测膜结构；31-硝酸纤维素膜； 32-包被膜；321-TP包被膜；322-HBsAg单克隆抗体膜；323-HCV包被膜；4-吸水 垫；7-PVC背衬；8-卡套；81-观察窗；82-加样孔；83-容置空间。
具体实施方式
[0027]本实用新型提供的多窗口、多检测指标检测卡，包括检测试纸与塑料卡套，以 下结合附图来描述该检测试纸的制造过程与具体结构。[0028]首先，以一种能够同时检测梅毒(TP)抗体、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和 丙型肝炎病毒(HCV)抗体的检测卡的制备方法为例，介绍本实用新型所述的检测卡及其 检测试纸与检测膜的结构如下[0029]步骤1、将检测用多种抗原原料分区域地包被在硝酸纤维素膜上，得到检测膜结 构3，本实施例中所使用的抗原原料包括TP抗原、抗HBsAg的单克隆抗体以及HCV抗原。[0030]1)用0.01MPH7.4PBS缓冲液将基因工程表达的TP抗原稀释到65μ g/ml，用 ^odot点膜仪将其包被于硝酸纤维素膜31上，包被量为0.6yl/cm，包被形状为条形，从 而形成条状的TP包被膜321 ；[0031]2)用0.01MPH7.4PBS缓冲液将抗HBsAg的单克隆抗体稀释到200 μ g/ml，用^odot点膜仪将其包被于硝酸纤维素膜31上，包被量为0.6yl/cm，包被形状为椭圆形， 从而形成椭圆形的HBsAg单克隆抗体膜322 ；[0032]3)用0.01MPH7.4PBS缓冲液将基因工程表达的HCV抗原稀释到100 μ g/ml，用^odot点膜仪将其包被于硝酸纤维素膜31上，包被量为0.6yl/cm，包被形状为十字形， 从而形成十字形的HCV包被膜323 ；[0033]4) 37 °C烘干，封装备用。[0034]从图1、图2中可以看到，所述的TP包被膜321、HBsAg单克隆抗体膜322、 HCV包被膜323沿该硝酸纤维素膜31长度方向依序排列，相互之间的间距以Icm为宜， 中间通过该硝酸纤维素膜31连接为一体结构。[0035]步骤2、将多种原料与乳胶颗粒进行标记。[0036]1)红色乳胶液制备取红色乳胶0.10ml，加灭菌蒸馏水0.40ml，再加 0.02MpH8.2硼酸缓冲液2ml，混合后即为25倍稀释的乳胶液；[0037]2) TP抗原乳胶标记每ImL乳胶液加入150 μ g采用0.01MPH7.4PBS缓冲液稀释的基因工程表达TP抗原，边加边摇，当出现肉眼可见的颗粒后，仍继续加入，直至颗 粒消失，成为均勻的乳胶悬液为止；[0038]3)绿色乳胶液制备取绿色乳胶0.10ml，加灭菌蒸馏水0.40ml，再加 0.02MpH8.2硼酸缓冲液2ml，混合后即为25倍稀释的乳胶液；[0039]4) HBsAg单克隆抗体乳胶标记每ImL乳胶液加入200 μ g采用0.01MPH7.4PBS缓冲液稀释的抗HBsAg单克隆抗体，边加边摇，当出现肉眼可见的颗粒后，仍继续加 入，直至颗粒消失，成为均勻的乳胶悬液为止；[0040]5)黑色乳胶液制备取黑色乳胶0.10ml，加灭菌蒸馏水0.40ml，再加 0.02MpH8.2硼酸缓冲液2ml，混合后即为25倍稀释的乳胶液；[0041]6) HCV抗原乳胶标记每mL乳胶液加入65 μ g采用0.01MPH7.4PBS缓冲液稀释的基因工程表达HCV抗原，边加边摇，当出现肉眼可见的颗粒后，仍继续加入，直至 颗粒消失，成为均勻的乳胶悬液为止。[0042]步骤3、结合垫的包被。[0043]将步骤2中的三种乳胶标记后的乳胶悬液按照1 1 1的体积比例进行混合 后，加入与乳胶悬液混合液同样体积的磷酸缓冲液(配方及制备20gBSA，25g蔗糖， 3Gpvpk-30, 0.2gNaN3NaC18g, KC10.2g, Na2HP04 · 12H202.9g, KH2P040.2g,用蒸 馏水定容至1000ml)进行稀释获得乳胶标记物稀释液，均勻滴加于结合垫2 (材质包括但 不限于玻璃纤维素膜，聚酯膜或者无纺布)上，每100平方厘米结合垫2滴加20ml乳胶 标记物稀释液，干燥后，在该结合垫2上包被的乳胶标记物就是三种不同颜色的乳胶颗 粒，然后将该结合垫2封装，置于4°C备用。[0044]步骤4、样品垫的处理。[0045]将样品垫1(材质包括但不限于玻璃纤维素膜，聚酯膜或者无纺布)浸泡 于0.01MPH7.4磷酸盐缓冲液(配方及制备20gBSA，25g蔗糖，3Gpvpk_30， 0.2gNaN3NaC18g, KC10.2g，Na2HP04 · 12H202.9g, KH2P040.2g,用蒸馏水定容至 1000ml)中30分钟后，于37°C烘干，封装，置于4°C备用。[0046]步骤5、检测试纸的组装。[0047]将上述经过处理后的样品垫1、结合垫2、检测膜结构3和吸水垫4 (材质为吸水 性材料，包括但不限于吸水纸、滤油纸灯)首尾相接地粘附在PVC背衬7上(如图1所示)，然后将其切成3mm宽的小条，封装。4-8°C保存。[0048]步骤6、将得到的检测试纸装入如图3所示的具有多个观察窗的塑料卡中，获得 所述的检测卡。[0049]可知，本实用新型提供的多窗口、多检测指标检测卡，包括检测试纸与塑料卡 套8，其中[0050]该检测试纸具有一个PVC背衬7，在该PVC背衬7上粘附有首尾相接的样品垫 1、结合垫2、检测膜结构3和吸水垫4，该检测膜结构3具有至少两个包被膜32，每两个 该包被膜32之间通过硝酸纤维素膜31相互连接，该至少两个包被膜32与该结合垫2以 及该吸水垫4之间也通过硝酸纤维素膜31相连接；该结合垫2上包被有标记物，该标记 物是彩色乳胶颗粒，实际上也可以是胶体金颗粒或者磁颗粒；[0051 ] 该卡套8具有一个供该检测试纸装套于内的容置空间83，该卡套8对应该检测试 纸的样品垫1开设有一个加样孔82，该卡套8还设有与该包被膜32的数量相等的观察窗 81，各观察窗81的位置分别与各包被膜32的位置和大小相对应，而该观察窗的形状可以 是长方形、圆形、三角形、四边形、五边形、六边形或者椭圆形。[0052]在介绍上述检测卡的制造过程后，再介绍上述检测卡的使用方法如下[0053]选取10份血清样本，所有样本均以梅毒抗体检测试剂盒(酶联免疫法)、乙型 肝炎病毒表面抗原检测试剂盒(酶联免疫法)和丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒(酶联免疫 法)进行检测后获得血清背景。该10份血清采用实施例1中制备的检测试纸检测结果如 表1所示，显示了该检测试纸具有良好的检测效果。[0054]表1.10份样本检测试剂条检测结果[0055]血清编号检测试纸检测结果样本背景显色检测线结果判断TP抗体HBsAgHCV抗体1红色/条状TP抗体阳性，HBsAg、 HCV抗体阴性+--2绿色/椭圓形HBsAg阳性，TP抗 体、HCV抗体阴性-+-3黑色/十 字形HCV抗体阳性，TP抗 体、HBsAg阴生--+4红色/条状、TP抗体、HBsAg阳++-[0056]
权利要求1.一种多窗口、多检测指标检测卡，其特征在于包括检测试纸与卡套，其中 该检测试纸具有一个PVC背衬，在该PVC背衬上粘附有首尾相接的样品垫、结合垫、检测膜结构和吸水垫，该检测膜结构具有至少两个包被膜，每两个该包被膜之间通 过硝酸纤维素膜相互连接，该至少两个包被膜与该结合垫以及该吸水垫之间也通过硝酸 纤维素膜相连接；该卡套具有一个供该检测试纸装套于内的容置空间，该卡套对应该检测试纸的样品 垫开设有一个加样孔，该卡套还设有与该检测膜结构位置相对应的至少一个观察窗。
2.根据权利要求1所述的多窗口、多检测指标检测卡，其特征在于该至少两个包 被膜以及该硝酸纤维素膜为一体结构。
3.根据权利要求2所述的多窗口、多检测指标检测卡，其特征在于该包被膜是通 过在该硝酸纤维素膜上包被抗原原料所形成。
4.根据权利要求1或3所述的多窗口、多检测指标检测卡，其特征在于该至少两个 包被膜的形状互不相同。
5.根据权利要求4所述的多窗口、多检测指标检测卡，其特征在于该包被膜的形 状为条形、菱形、圆形或者十字形。
6.根据权利要求1所述的多窗口、多检测指标检测卡，其特征在于该结合垫上包 被有标记物。
7.根据权利要求6所述的多窗口、多检测指标检测卡，其特征在于该标记物是胶 体金颗粒、彩色乳胶颗粒或者磁颗粒。
8.根据权利要求1所述的多窗口、多检测指标检测卡，其特征在于该观察窗是长 方形、圆形、三角形、四边形、五边形、六边形或者椭圆形。
9.根据权利要求1所述的多窗口、多检测指标检测卡，其特征在于该观察窗的数 目与该包被膜的数量相等，各观察窗的位置分别与各包被膜的位置相对应。
专利摘要本实用新型公开了一种多窗口、多检测指标检测卡，包括检测试纸和塑料卡套，该检测试纸是在PVC背衬上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，而该塑料卡套包括加样孔以及多个用来观察检测的窗口。本实用新型可以同时检测多个指标物质，该硝酸纤维素膜上包被了多种原料，可以同时进行多个检定指标的检定；结合垫上可以包括多种标记物，可以使不同检测线显示不同的颜色；产品具有多个观察窗，可以同时观察多个检测指标。本实用新型的检测卡有操作简便、检测快速、同时进行多个检测指标、不同指标可以清晰分辨等显著优点。
文档编号G01N33/558GK201804007SQ20102029138
公开日2011年4月20日 申请日期2010年8月13日 优先权日2010年8月13日
发明者李益民, 罗海峰 申请人:北京万泰生物药业股份有限公司