专利名称：一种中药组合物二十五味肺病制剂的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物制剂的质量检测方法，特别涉及一种中药组合物二十五味肺病制剂的质量检测方法。
背景技术：
二十五味肺病胶囊始载于桑结嘉措所著《藏医秘诀补遗》中，至今有近300年临床应用史，是藏医治疗肺病的良药。收载于中成药地方标准上升国家标准部分，标准编号WS-11380 (ZD-1380)-2002ο 二十五味肺病胶囊由檀香、悬构木、石灰华、红花、葡萄、甘草、铁棒锤、榜嘎、诃子、毛诃子、余甘子、牛黄等25味药组成的，具有消热消炎，宣肺化痰、止咳平喘的作用。主要用于肺邪病引起的咳痰不止，呼吸急促，肺热，发烧，鼻塞，胸胁疼痛，咯血，倦怠等。二十五味肺病胶囊是国家中成药标准汇编(中成药地方标准上升国家标准部分)记载的药品名称。二十五味肺病胶囊方中铁棒锤、榜嘎含有乌头碱等生物碱，具有较高的药理活性和药用价值，但同时也具有较强的毒性。虽然经过炮制后毒性成分明显减少，并不能保证药用的安全性。二十五味肺病胶囊原质量标准有土木香内酷、异土木香内酷、胆酸、齐墩果酸的薄层鉴别，甘草酸的含量测定项，未对铁棒锤、榜嘎含有的乌头碱进行限度检查，使该制剂存在安全隐患。对于除二十五肺病胶囊以外的制剂其质量标准低于二十五味肺病胶囊，如二十五味肺病丸。为防止该类制剂的存在安全隐患，保证患者用药安全有效，同时还保证新的质量检测更加准确和可Φ，原标准有待提闻。
发明内容
本发明的目的是为克服上述现有技术的不足，提供一种中药组合物二十五味肺病制剂的质量检测方法。为实现上述目的，本发明采用下述技术方案一种中药组合物二十五味肺病制剂的质量检测方法，该二十五味肺病制剂为由檀香、悬构木、石灰华、山奈、红花、葡萄、印度獐牙菜、甘草、兔儿草、沙棘膏、巴夏嘎、香旱芹、榜嘎、白花龙胆、诃子、肉果草、毛诃子、无茎芥、余甘子、甘肃蚤缀、土木香、铁棒锤(根、叶)、宽筋藤、人工牛黄、カ嘎都按药剂学常规方法制成的各种制剂，质量检测方法包括对制剂中乌头碱的限度检查方法，对羟基红花黄色素Α、獐牙菜苦苷、胆酸的含量測定方法，和对毛诃子、檀香、香旱芹、巴夏嘎、甘草的鉴别方法中的ー种或几种。作为本发明之优选，质量检测方法为以下方法中的ー种或多种Α.乌头碱的限度检查其是以乌头碱对照品为对照，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积份数比6(Γ70:4(Γ30:0. 2:5的甲醇-水-三こ胺-ニ氯甲烷为流动相，检测波长为23(T240nm的高效液相色谱法；B.羟基红花黄色素A的含量測定其是以羟基红花黄色素A对照品为对照，以、十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比25 35:75 65的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相，检测波长为40(T410nm的高效液相色谱法；C.獐牙菜苦苷的含量測定其是以獐牙菜苦苷对照品为对照，以十八烷其硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比2(Γ30 :8(Γ70的甲醇-体积份数比O. 1%磷酸水溶液为流动相；检测波长24(T250nm的高效液相色谱法；D.胆酸的含量測定其是以胆酸对照品为对照，以 十 八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比60 70:40 30的こ腈-体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相；检测波长为192nm的高效液相色谱法；E.毛诃子鉴别其是以毛诃子对照药材为对照，以体积比为5:2:1.5的三氯甲烷-甲酸こ酯-甲醇为展开剂在硅胶G薄层色谱板上展开，以l%(g/ml)铁氰化钾溶液与l%(g/ml)三氯化铁溶液的体积比1:1混合溶液为显色剂的薄层色谱法；F.檀香鉴别其是以檀香对照药材为对照，以体积比为8:8:2的石油醚60_90°C(指馏程)-ニ甲苯-こ酸こ酯为展开剂在硅胶G薄层色谱板上展开，以5%(g/ml)香草醛硫酸溶液为显色剂的薄层色谱法；G.香旱芹鉴别其是以香旱芹对照药材为对照，以体积比为8:8:2的石油醚60-900C - ニ甲苯-こ酸こ酯为展开剂在硅胶G薄层色谱板上展开，以5%(g/ml)香草醛硫酸溶液为显色剂的薄层色谱法；H.巴夏嘎鉴别其是以巴夏嘎对照药材为对照，以体积比为10:4:1:0. I的环己烷-甲酸こ酷-甲醇-氨水为展开剂在硅胶G薄层色谱板上展开，以改良碘化铋钾溶液为显色剂的薄层色变法；I.甘草鉴别其是以甘草对照药材为对照，以体积比为2:5:6:0. 5的ニ甲苯-三氯甲烷-甲酸こ酷-甲醇为展开剂在硅胶G薄层色谱板上展开，置紫外光灯365nm下检视的薄层色谱法。进ー步地，质量检测方法具体是A.乌头碱的限度检查具体为照高效液相色谱法測定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比60 70:40 30:0. 2:5的甲醇-水-三こ胺-ニ氯甲烷为流动相；检测波长为23(T240nm，理论板数按乌头碱峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取乌头碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含20 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取本发明待检测二十五味肺病制剂粉末l(Tl5g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，加氨试液10ml，精密加入无水こ醇8(Tl20ml，密塞，称定重量，冷浸Ih后加热回流lh，放冷，再称定重量，用无水こ醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液50ml，40°C以下减压回收溶剂至干，残渣精密加入稀盐酸溶液20ml溶解，冰浴中放置30min,滤过；用氨水调PH至10,将滤液转移至分液漏斗中，加こ酸こ酯萃取5次,姆次20ml，合并こ酸こ酯液，40°C以下减压回收溶剂至干，残渣精密加入甲醇2ml溶解，滤过，取续滤液，即得；測定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1(Γ20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；B.羟基红花黄色素A的含量測定具体为照高效液相色谱法測定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比25 35:75 65的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为40(T410nm ；理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加体积份数比25%甲醇水溶液制成每Iml含3(Γ40 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取待检测二十五味肺病制剂粉末4 6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比25%甲醇水溶液2(T30ml，密塞，称定重量，超声40分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比25%甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；測定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5 10μ 1，注入液相色谱仪，測定，即得;C.獐牙菜苦苷的含量測定具体为照高效液相色谱法測定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷其硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比20^30 80^70的甲醇-体积份数比O. 1%磷酸水溶液为流动相；检测波长24(T250nm ;理论板数按獐牙菜苦苷峰计算应不低于2500 ；对照品溶液的制备取獐牙菜苦苷对照品适量，加甲醇制成每Iml含40μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取待检测二十五味肺病制剂粉末5 7g，置具塞的锥形瓶中，加入甲醇2(T30ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；測定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5 10μ 1，注入液相色谱仪，測定，即得；D.胆酸的含量测定具体为照高效液相色谱法測定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比60 70:40 30的こ腈-体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相；检测波长为192nm ;理论板数按胆酸峰计算应不低于5000 ；对照品溶液的制备精密称取胆酸对照品适量，加甲醇制成每Iml含4(Γ50 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取待检测二十五味肺病制剂粉末7、g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入甲醇4(T60ml，密塞，称定重量，超声30分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液2(T30ml，40°C以下减压回收，转移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，滤过，取续滤液，即得；測定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5 10μ 1，注入液相色谱仪，測定，即得;Ε.毛诃子鉴别具体为、
取待检测二十五味肺病制剂粉末0. l-10g，加甲醇5_50ml超声1040min，滤过，滤液浓缩至l_50ml，作为样品溶液。取毛诃子对照药材0. lg，同法制备对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述二种溶液各1-20 yl，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲酸乙酯-甲醇(5:1-5:1. 5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以l%(g/ml)铁氰化钾溶液与l%(g/ml)三氯化铁溶液的I: I混合溶液，检视。样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。F.檀香鉴别取待检测二十五味肺病制剂粉末l_8g，置IOOml圆底烧瓶中，加40_80ml /K，照挥发油测定法甲法(中国药典2010年版一部附录X D)提取，在挥发油提取器的上部加水使水溢入烧瓶中，再加Iml乙酸乙酯，回流提取0. 5-2小时，冷却至室温，分取乙酸乙酯液，作为样品溶液。同法制备檀香对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述二种溶液各5-20 u 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以石油醚(60-90°C)-二甲苯-乙酸乙酯(5-10:8:2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以l%_5%(g/ml)香草醛硫酸溶液，100-110°C加热至斑点显色清晰。样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；G.香旱芹鉴别取待检测二十五味肺病制剂粉末l_8g，置IOOml圆底烧瓶中，加40_80ml /K，照挥发油测定法甲法(中国药典2010年版一部附录X D)提取，在挥发油提取器的上部加水使水溢入烧瓶中，再加Iml乙酸乙酯，回流提取0. 5-2小时，冷却至室温，分取乙酸乙酯液，作为样品溶液。同法制备香旱芹对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述二种溶液各5-20 u 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以石油醚(60-90°C)-二甲苯-乙酸乙酯(5-10:8:2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以l%_5%(g/ml)香草醛硫酸溶液，100-110°C加热至斑点显色清晰。样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；H.巴夏嘎鉴别取待检测二十五味肺病制剂粉末4-10g，研细，加氨水l_5ml润湿后，加二氯甲烷或乙醚或石油醚(60-90°C) 20-50ml，超声15_45min，滤过，药渣备用，滤液挥干二氯甲烷或乙醚或石油醚(60-90 V )，残渣加甲醇0. 5-2ml使溶解，作为样品溶液。同法制备巴夏嘎对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述二种溶液各5-20 u 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以环己烷-甲酸乙酯-甲醇-氨水(10:2-6:1:0. I)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾溶液，检视。样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。I.甘草鉴别取“巴夏嘎鉴别”项下的备用药渣，加乙酸乙酯10_45ml，超声10_40分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇0. 5-2ml使溶解，作为供试品溶液。同法制备甘草对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各5-20 u 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以二甲苯-三氯甲烷-甲酸乙酯-甲醇(2:5:4-8:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。
作为本发明之进一步优选，所述制剂的原料药组成优选为原料药组成为檀香12. 5重量份、悬构木24. 9重量份、石灰华16. 6重量份、山奈8. 3重量份、红花11.6重量份、葡萄11. 6重量份、印度獐牙菜11. 6重量份、甘草24. 9重量份、兔儿草11. 6重量份、沙棘膏
11.6重量份、巴夏嘎11. 6重量份、香旱芹8. 3重量份、榜嘎11. 6重量份、白花龙胆12. 5重量份、诃子21. 6重量份、肉果草16. 6重量份、毛诃子13. 3重量份、无茎芥8. 3重量份、余甘子16. 6重量份、甘肃蚤缀12. 5重量份、土木香11. 6重量份、铁棒锤(根、叶)13. 3重量份、宽筋藤16. 6重量份、人工牛黄0. 2重量份、力嘎都10重量份。所述优选原料药组分的质量检测方法具体是A.乌头碱的限度检查 照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比66:34:0.2:5的甲醇-水-三乙胺-二氯甲烷为流动相；检测波长为235nm，理论板数按乌头碱峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取乌头碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含20 ii g的溶液，即得；供试品溶液的制备取待检测二十五味肺病制剂粉末12g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，加氨试液10ml，精密加入无水乙醇100ml，密塞，称定重量，冷浸Ih后加热回流lh，放冷，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液50ml，40°C以下减压回收溶剂至干，残渣精密加入稀盐酸溶液20ml溶解，冰浴中放置30min，滤过；用氨水调PH至10，将滤液转移至分液漏斗中，加乙酸乙酯萃取5次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，40°C以下减压回收溶剂至干，残渣精密加入甲醇2ml溶解，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 yl，注入液相色谱仪，测定，即得；B.羟基红花黄色素A的含量测定照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比29:71的甲醇-体积份数比0. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为403nm ;理论板数按羟基红花红色素A峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加体积份数比25%甲醇水溶液制成每Iml含35 y g的溶液，即得；供试品溶液的制备取待检测二十五味肺病制剂粉末5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比25%甲醇水溶液25ml，密塞，称定重量，超声40分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比25%甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，即得;C.獐牙菜苦苷的含量测定照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷其硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比25 75的甲醇-体积份数比0. 1%磷酸水溶液为流动相；检测波长243nm ;理论板数按獐牙菜苦苷峰计算应不低于2500 ；对照品溶液的制备取獐牙菜苦苷对照品适量，加甲醇制成每Iml含40y g的溶液，即得；供试品溶液的制备取待检测二十五味肺病制剂粉末6g，置具塞的锥形瓶中，力口入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10 yl，注入液相色谱仪，测定，即得;D.胆酸的含量测定照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比65:35的乙腈-体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相；检测波长为192nm ;理论板数按胆酸峰计算应不低于5000 ；对照品溶液的制备精密称取胆酸对照品适量，加甲醇制成每Iml含46 Ug的溶液，即得；供试品溶液的制备取待检测二十五味肺病制剂粉末8g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声30分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液25ml，40°C以下减压回收，转移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，即得。E.毛诃子鉴别具体为取待测二十五味肺病制剂粉末0. 5g，加甲醇20ml超声30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，作为样品溶液。取毛诃子对照药材0. 2g，同法制备对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述二种溶液各10 u 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲酸乙酯-甲醇(5:2:1. 5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以l%(g/ml)铁氰化钾溶液与l%(g/ml)三氯化铁溶液的I: I混合溶液，检视。样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。F.檀香鉴别取待测二十五味肺病制剂粉末4g，置IOOml圆底烧瓶中，加60ml水，照挥发油测定法甲法(中国药典2010年版一部附录X D)提取，在挥发油提取器的上部加水使水溢入烧瓶中，再加Iml乙酸乙酯，回流提取I小时，冷却至室温，分取乙酸乙酯液，作为样品溶液。同法制备檀香对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述二种溶液各20 yl，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以石油醚(馏程60-90°C) - 二甲苯-乙酸乙酯(8:8:2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%(g/ml)香草醛硫酸溶液，110°C加热至斑点显色清晰。样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；G.香旱芹鉴别取待测二十五味肺病制剂粉末4g,置IOOml圆底烧瓶中,加60ml水,照挥发油测定法甲法(中国药典2010年版一部附录X D)提取，在挥发油提取器的上部加水使水溢入烧瓶中，再加Iml乙酸乙酯，回流提取I小时，冷却至室温，分取乙酸乙酯液，作为样品溶液。同法、制备香旱芹对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述二种溶液各20 yl，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以石油醚(60-90°C) 二甲苯-乙酸乙酯(8:8:2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%(g/ml)香草醛硫酸溶液，110°C加热至斑点显色清晰。样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；H.巴夏嘎鉴别取待测二十五味肺病制剂粉末或内容物6g，研细，加氨水3ml润湿后，加二氯甲烷30ml，超声30分钟，滤过，药渣备用，滤液挥干二氯甲烷，残渣加甲醇0. 5ml使溶解，作为样品溶液。同法制备巴夏嘎对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各20 u 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以环己烷-甲酸乙酯-甲醇-氨水(10:4:1:0. I)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾溶液，检视，
样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。I.甘草鉴别取“巴夏嘎鉴别”项下的备用药渣，加乙酸乙酯30ml超声处理30min，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为样品溶液。同法制备甘草对照药材。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各10 yl，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以二甲苯-三氯甲烷-甲酸乙酯-甲醇(2:5:6:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。所述质量检测方法中乌头碱含量不得高于20 U g/g ;羟基红花黄色素A含量不得少于0. 14mg/g ;猜牙菜苦苷含量不得少于0. 081mg/g ;胆酸含量不得少于0. 025mg/g。作为本发明之优选，所述檀香和香旱芹可以合并鉴别。合并鉴别即其是同时以檀香对照药材和香旱芹对照药材为对照，以体积比为8:8:2的石油醚60-90°C - 二甲苯-乙酸乙酯为展开剂在同一块硅胶G薄层色谱板上展开，以5% (g/ml)香草醛硫酸溶液为显色剂的薄层色谱法。合并鉴别是由于香旱芹和檀香的样品处理方法、展开剂、显色、检视方法完全一致，因此，可以将檀香和香旱芹合并鉴别，合并鉴别可以节省时间和试剂。所述合并鉴别的方法是取待检测制剂内容物l_8g，置IOOml圆底烧瓶中，力口40-80ml水，照挥发油测定法甲法(中国药典2010年版一部附录X D)提取，在挥发油提取器的上部加水使水溢入烧瓶中，再加Iml乙酸乙酯，回流提取0. 5-2小时，冷却至室温，分取乙酸乙酯液，作为样品溶液。同法制备香旱芹和檀香对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各5-20 u 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以石油醚(60-90°C)-二甲苯-乙酸乙酯(5-10:8:2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%_5%香草醛硫酸溶液，100-110°C加热至斑点显色清晰。样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。所述的待检测二十五味肺病制剂是指取中药组合物二十五味肺病胶囊原料药，按常规工艺，加入常规辅料制备成临床可接受的任何一种剂型，包括微丸、滴丸、片剂、胶囊、颗粒、分散片。本说明书中所述的重量份与体积份的单位对应关系为g/ml或kg/1。本申请中的毛诃子对照药材、檀香对照药材、香旱芹对照药材、巴夏嘎对照药材和甘草对照药材即分别为毛诃子药材、檀香药材、香旱芹药材、巴夏嘎药材和甘草药材，其中巴夏嘎对照药材为I!粟壳植物塞北紫堇Corydalis impatiens (Pall. ) Fisch.的干燥全草；香旱芳:对照药材为伞形科植物香旱芳:Cuminum cyminum L.的干燥成熟果实。本申请中的上述药材经青海省藏医院名誉院长、青海省藏医首席专家尼玛鉴定。本发明公开了一种中药组合物二十五味肺病胶囊及其制剂的质量检测方法，使用高效液相色谱法(HPLC法)对二十五味肺病胶囊中乌头碱进行了限度检查，同时采用高效液相色谱法(HPLC法)对羟基红花黄色素A、獐牙菜苦苷、胆酸进行了定量检测，对毛诃子、檀香、香旱芹、巴夏嘎和甘草进行鉴别。本发明方法在原标准的基础上，增加新的检查项目，提高了产品质量，在治疗疾病的同时，保证了用药的安全有效。同时本法还可用于中药组合物二十五味肺病胶囊的其他制剂，如二十五味肺病丸等。
图Ia是毛诃子的鉴别薄层色谱图一；图Ib是毛诃子的鉴别薄层色谱图二 ； 图Ic是毛诃子的鉴别薄层色谱图三；图Id是檀香的鉴别薄层色谱图四；图2a是檀香的鉴别薄层色谱图一；图2b是檀香的鉴别薄层色谱图二 ；图2c是檀香的鉴别薄层色谱图三；图3a是香旱芹的鉴别薄层色谱图一；图3b是香旱芹的鉴别薄层色谱图二 ；图3c是香旱芹的鉴别薄层色谱图三；图3d是香旱芹和檀香合并鉴别薄层色谱图；图4a是巴夏嘎的鉴别薄层色谱图一；图4b是巴夏嘎的鉴别薄层色谱图二 ；图4c是巴夏嘎的鉴别薄层色谱图三；图5a是甘草的鉴别薄层色谱图一；图5b是甘草的鉴别薄层色谱图二 ；图5c是甘草的鉴别薄层色谱图三。
具体实施例方式下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。实验例I :乌头碱的限度检查I.仪器、试药和供试样品仪器L-2100型日立高效液相色谱仪；AuW220D岛津电子分析天平。对照品乌头碱对照品(中国药品生物制品检定所)批号MUST-11031101。样品二十五味肺病胶囊(青海金诃藏药药业股份有限公司提供)，批号分别为20110901、20110902、20110903。2.检测波长的选择取乌头碱对照品溶液，于19(T400nm波长范围内进行扫描，乌头碱在235nm波长处有最大吸收，故根据紫外吸收图谱选定235nm为检测波长。3.流动相选择研究发现，以体积份数比为6(T70:4(T30:0. 2:5的甲醇-水-三乙胺-二氯甲烷体系为流动相，乌头碱均能达到很好的色谱分离效果。其中以甲醇-水-三乙胺-二氯甲烷的体积比为66:34:0. 2:5为流动相最优。4.系统适用性试验在上述色谱条件下，分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各20 yl，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明，对照品、供试品色谱中乌头碱与其相邻色谱峰的分离度均大于I. 5,分离效果好。5.对照品溶液制备取乌头碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含20ii g的溶液，即得。6.供试品溶液制备6. I提取时间的考察按检查项下方法对供试品溶液进行检测。按供试品溶液的制备项下的方法制备3份，分别加热回流0. 5小时、I小时、I. 5小时。以每克药品中乌头碱的含量为指标确定提取时间。结果见表I。表I提取时间考察试验结果
权利要求
1.一种中药组合物二十五味肺病制剂的质量检测方法，该二十五味肺病制剂为由檀香、悬构木、石灰华、山奈、红花、葡萄、印度獐牙菜、甘草、兔儿草、沙棘膏、巴夏嘎、香旱芹、榜嘎、白花龙胆、诃子、肉果草、毛诃子、无茎芥、余甘子、甘肃蚤缀、土木香、铁棒锤(根、叶)、宽筋藤、人工牛黄、カ嘎都按药剂学常规方法制成的各种制剂，其特征是，质量检测方法包括对制剂中乌头碱的限度检查方法，对羟基红花黄色素A、獐牙菜苦苷、胆酸的含量測定方法，和对毛诃子、檀香、香旱芹、巴夏嘎、甘草的鉴别方法中的ー种或几种。
2.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，质量检测方法为以下方法中的ー种或多种 A.乌头碱的限度检查其是以乌头碱对照品为对照，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充齐U，以体积份数比6(Γ70:4(Γ30:0.2:5的甲醇-水-三こ胺-ニ氯甲烷为流动相，检测波长为23(T240nm的高效液相色谱法； B.羟基红花黄色素A的含量測定其是以羟基红花黄色素A对照品为对照，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比25 35:75 65的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相，检测波长为40(T410nm的高效液相色谱法； C.獐牙菜苦苷的含量測定其是以獐牙菜苦苷对照品为对照，以十八烷其硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比2(Γ30 :8(Γ70的甲醇-体积份数比O. 1%磷酸水溶液为流动相；检测波长24(T250nm的高效液相色谱法； D.胆酸的含量測定其是以胆酸对照品为对照，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比60 70:40 30的こ臆-体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相；检测波长为192nm的高效液相色谱法； E.毛诃子鉴别其是以毛诃子对照药材为对照，以体积比为5:2:1.5的三氯甲烷-甲酸こ酯-甲醇为展开剂在硅胶G薄层色谱板上展开，以1% (g/ml)铁氰化钾溶液与1% (g/ml)三氯化铁溶液的体积比I: I混合溶液为显色剂的薄层色谱法； F.檀香鉴别其是以檀香对照药材为对照，以体积比为8:8:2的石油醚60-90°C-ニ甲苯-こ酸こ酯为展开剂在硅胶G薄层色谱板上展开，以5% (g/ml)香草醛硫酸溶液为显色剂的薄层色谱法； G.香旱芹鉴别其是以香旱芹对照药材为对照，以体积比为8:8:2的馏程60-90°C石油醚-ニ甲苯-こ酸こ酯为展开剂在硅胶G薄层色谱板上展开，以5% (g/ml)香草醛硫酸溶液为显色剂的薄层色谱法； H.巴夏嘎鉴别其是以巴夏嘎对照药材为对照，以体积比为10:4:1:0.I的环己烷-甲酸こ酯-甲醇-氨水为展开剂在硅胶G薄层色谱板上展开，以改良碘化铋钾溶液为显色剂的薄层色变法； I.甘草鉴别其是以甘草对照药材为对照，以体积比为2:5:6:0.5的ニ甲苯-三氯甲烷-甲酸こ酷-甲醇为展开剂在硅胶G薄层色谱板上展开，置紫外光灯下检视的薄层色谱法。
3.如权利要求2所述的质量检测方法，其特征是，具体是 A.乌头碱的限度检查具体为 照高效液相色谱法測定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比60^70:40^30:0. 2:5的甲醇-水-三こ胺-ニ氯甲烷为流动相；检测波长为230 240鹽，理论板数按乌头碱峰计算应不低于2000 ； 对照品溶液的制备取乌头碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含20μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取本发明待检测二十五味肺病制剂粉末l(Tl5g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，加氨试液10ml，精密加入无水こ醇8(Tl20ml，密塞，称定重量，冷浸Ih后加热回流lh，放冷，再称定重量，用无水こ醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液50ml，40°C以下减压回收溶剂至干，残渣精密加入稀盐酸溶液2 0ml溶解，冰浴中放置30min,滤过；用氨水调PH至10,将滤液转移至分液漏斗中，加こ酸こ酯萃取5次，姆次20ml，合并こ酸こ酯液，40°C以下减压回收溶剂至干，残渣精密加入甲醇2ml溶解，滤过，取续滤液，即得； 測定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1(Γ20μ 1，注入液相色谱仪，測定，SP得; B.羟基红花黄色素A的含量測定具体为 照高效液相色谱法測定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比25 35:75 65的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为40(T410nm ;理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000 ； 对照品溶液的制备取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加体积份数比25%甲醇水溶液制成每Iml含3(Γ40 μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取本发明待检测二十五味肺病制剂粉末4 6g，精密称定置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比25%甲醇水溶液2(T30ml，密塞，称定重量，超声40分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比25%甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；測定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5 10μ 1，注入液相色谱仪，測定，即得； C.獐牙菜苦苷的含量測定具体为 照高效液相色谱法測定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷其硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比20^30 80^70的甲醇-体积份数比O. 1%磷酸水溶液为流动相；检测波长24(T250nm ;理论板数按獐牙菜苦苷峰计算应不低于2500 ； 对照品溶液的制备取獐牙菜苦苷对照品适量，加甲醇制成每Iml含40 μ g的溶液，即得; 供试品溶液的制备取本发明待检测二十五味肺病制剂粉末5 7g，置具塞的锥形瓶中，加入甲醇2(T30ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 測定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5 10 μ 1，注入液相色谱仪，測定，即得； D.胆酸的含量測定具体为 照高效液相色谱法測定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比60 70:40 30的こ腈-体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相；检测波长为192nm ;理论板数按胆酸峰计算应不低于5000 ； 对照品溶液的制备精密称取胆酸对照品适量，加甲醇制成每Iml含4(Γ50 μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取本发明待检测二十五味肺病制剂粉末7、g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入甲醇4(T60ml，密塞，称定重量，超声30分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液2(T30ml，40°C以下减压回收，转移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，滤过，取续滤液，即得； 測定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5 10μ 1，注入液相色谱仪，測定，即得； Ε.毛诃子鉴别具体为 取待检测二十五味肺病制剂粉末O. I-IOg,加甲醇5-50ml超声10_40min，滤过，滤液浓缩至l_50ml，作为样品溶液；取毛诃子对照药材O. 1-0. 3g，同法制备对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述ニ种溶液各1-20 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以体积比5:ト5:1.5三氯甲烷-甲酸こ酷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%铁氰化钾溶液与1%三氯化铁溶液的1:1混合溶液，检视；样品色谱中，在于对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点； F.檀香鉴别 取待检测二十五味肺病制剂粉末l_8g，置IOOml圆底烧瓶中，加40-80ml水，照挥发油測定法甲法提取，在挥发油提取器的上部加水使水溢入烧瓶中，再加Imlこ酸こ酷，回流提取O. 5-2小时，冷却至室温，分取こ酸こ酯液，作为样品溶液；同法制备檀香对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述ニ种溶液各5-20 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以体积比为5-10:8:2的馏程60-90°C石油醚-ニ甲苯-こ酸こ酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%_5%香草醛硫酸溶液，100-110°C加热至斑点显色清晰；样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点； G.香旱芹鉴别 取待检测二十五味肺病制剂粉末l_8g，置IOOml圆底烧瓶中，加40-80ml水，照挥发油測定法甲法提取，在挥发油提取器的上部加水使水溢入烧瓶中，再加Imlこ酸こ酷，回流提取O. 5-2小时，冷却至室温，分取こ酸こ酯液，作为样品溶液；同法制备香旱芹对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述ニ种溶液各5-20μ 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以体积比为5-10:8:2的馏程60-90°C石油醚-ニ甲苯-こ酸こ酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%_5%香草醛硫酸溶液，100-110°C加热至斑点显色清晰；样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点； H.巴夏嘎鉴别 取待检测二十五味肺病制剂粉末4-10g，研细，加氨水l-5ml润湿后，加ニ氯甲烷或こ醚或馏程60-90°C石油醚20-50ml，超声15_45min，滤过，药渣备用，滤液挥干ニ氯甲烷或こ醚或馏程60-90°C石油醚，残渣加甲醇O. 5-2ml使溶解，作为样品溶液；同法制备巴夏嘎对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述ニ种溶液各5-20 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以体积比为10:2-6:1:0. I环己烷-甲酸こ酷-甲醇-氨水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾溶液，检视；样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；I.甘草鉴别 取“巴夏嘎鉴别”项下的备用药渣，加こ酸こ酯10-45ml，超声10-40分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇O. 5-2ml使溶解，作为供试品溶液；同法制备甘草对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述ニ种溶液各5-20 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以体积比为2:5:4-8:0. 5的ニ甲苯-三氯甲烷-甲酸こ酷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。
4.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，所述制剂 的原料药组成为原料药组成为檀香12. 5重量份、悬构木24. 9重量份、石灰华 16. 6重量份、山奈8. 3重量份、红花11. 6重量份、葡萄11. 6重量份、印度獐牙菜11. 6重量份、甘草24. 9重量份、兔儿草11. 6重量份、沙棘膏11. 6重量份、巴夏嘎11. 6重量份、香旱芹8. 3重量份、榜嘎11. 6重量份、白花龙胆12. 5重量份、诃子21. 6重量份、肉果草16. 6重量份、毛诃子13. 3重量份、无茎芥8. 3重量份、余甘子16. 6重量份、甘肃蚤缀12. 5重量份、土木香11. 6重量份、鉄棒锤(根、叶)13. 3重量份、宽筋藤16. 6重量份、人工牛黄O. 2重量份、カ嘎都10重量份。
5.如权利要求4所述的质量检测方法，其特征是，所述检测方法具体是 A.乌头碱的限度检查 照高效液相色谱法測定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比66:34:0. 2:5的甲醇-水-三こ胺-ニ氯甲烷为流动相；检测波长为235nm，理论板数按乌头碱峰计算应不低于2000 ； 对照品溶液的制备取乌头碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含20μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取待检测二十五味肺病制剂粉末12g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，加氨试液10ml，精密加入无水こ醇100ml，密塞，称定重量，冷浸Ih后加热回流lh，放冷，再称定重量，用无水こ醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液50ml，40°C以下减压回收溶剂至干，残渣精密加入稀盐酸溶液20ml溶解，冰浴中放置30min，滤过；用氨水调PH至10，将滤液转移至分液漏斗中，加こ酸こ酯萃取5次，每次20ml，合并こ酸こ酯液，40°C以下减压回收溶剂至干，残渣精密加入甲醇2ml溶解，滤过，取续滤液，即得； 測定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪，測定，SP得; B.羟基红花黄色素A的含量測定 照高效液相色谱法測定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比29:71的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为403nm ;理论板数按羟基红花红色素A峰计算应不低于3000 ； 对照品溶液的制备取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加体积份数比25%甲醇水溶液制成每Iml含35 μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取待检测制剂粉末5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比25%甲醇水溶液25ml，密塞，称定重量，超声40分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比25%甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；測定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各ΙΟμ 1，注入液相色谱仪，測定，即得； C.獐牙菜苦苷的含量測定 照高效液相色谱法測定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷其硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比25 75的甲醇-体积份数比O. 1%磷酸水溶液为流动相；检测波长243nm ;理论板数按獐牙菜苦苷峰计算应不低于2500 ； 对照品溶液的制备取獐牙菜苦苷对照品适量，加甲醇制成每Iml含40 μ g的溶液，即得; 供试品溶液的制备取待检测制剂粉末6g，置具塞的锥形瓶中，加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 測定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，測定，即得； D.胆酸的含量測定 照高效液相色谱法測定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比65:35的こ臆-体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相；检测波长为192nm ;理论板数按胆酸峰计算应不低于5000 ； 对照品溶液的制备精密称取胆酸对照品适量，加甲醇制成每Iml含46μ g的溶液，即得;供试品溶液的制备取待检测制剂粉末Sg，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声30分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液25ml，40°C以下减压回收，转移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，滤过，取续滤液，即得；測定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各IOy 1，注入液相色谱仪，測定，即得； Ε.毛诃子鉴别具体为 取待测制剂内容物O. 5g，加甲醇20ml超声30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，作为样品溶液；取毛诃子对照药材O. 2g，同法制备对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述ニ种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以体积比为5:2:1. 5的三氯甲烷-甲酸こ酷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%铁氰化钾溶液与1%三氯化铁溶液的1:1混合溶液，检视；样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点； F.檀香鉴别 取待测制剂内容物4g，置IOOml圆底烧瓶中，加60ml水，照挥发油測定法甲法提取，在挥发油提取器的上部加水使水溢入烧瓶中，再加Imlこ酸こ酷，回流提取I小时，冷却至室温，分取こ酸こ酯液，作为样品溶液；同法制备檀香对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述ニ种溶液各20 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以体积比为8:8:2的馏程60-90°C石油醚-ニ甲苯-こ酸こ酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，110°C加热至斑点显色清晰；样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点； G.香旱芹鉴别 取待测制剂内容物4g，置IOOml圆底烧瓶中，加60ml水，照挥发油测定法甲法提取，在挥发油提取器的上部加水使水溢入烧瓶中，再加Imlこ酸こ酷，回流提取I小时，冷却至室温，分取こ酸こ酯液，作为样品溶液；同法制备香旱芹对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述ニ种溶液各20 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以体积比为8:8:2的馏程·60-90°C石油醚-ニ甲苯-こ酸こ酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，·110°C加热至斑点显色清晰；样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点； H.巴夏嘎鉴别 取待测制剂内容物6g，研细，加氨水3ml润湿后，加ニ氯甲烷30ml，超声30分钟，滤过，药渣备用，滤液挥干ニ氯甲烷，残渣加甲醇O. 5ml使溶解，作为样品溶液；同法制备巴夏嘎对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述ニ种溶液各20 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以体积比为10:4:1:0. I的环己烷-甲酸こ酷-甲醇氨水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾溶液，检视，样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； I.甘草鉴别 取待测制剂内容物6g，研细，加氨水3ml润湿后，加ニ氯甲烷30ml，超声30分钟，滤过，滤液弃去，药渣加こ酸こ酯30ml超声处理30min，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为样品溶液；同法制备甘草对照药材；照薄层色谱法试验，吸取上述ニ种溶液各·10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以体积比为2:5:6:0. 5的ニ甲苯-三氯甲烷-甲酸こ酷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。
6.如权利要求5所述的质量检测方法，其特征是，质量检测方法中乌头碱含量不得高于20 μ g/g ;羟基红花黄色素A含量不得少于O. 14mg/g ;獐牙菜苦苷含量不得少于O. 081mg/g ;胆酸含量不得少于O. 025mg/go
7.如权利要求2或3所述的质量检测方法，其特征是，所述檀香和香旱芹合并鉴别，合并鉴别即其是同时以檀香对照药材和香旱芹对照药材为对照，以体积比为8:8:2的石油醚60-900C - ニ甲苯-こ酸こ酯为展开剂在同一块硅胶G薄层色谱板上展开，以5% (g/ml)香草醛硫酸溶液为显色剂的薄层色谱法。
8.如权利要求7所述的质量检测方法，其特征是，所述合并鉴别的方法是取待检测制剂内容物l_8g，置IOOml圆底烧瓶中，加40-80ml水，照挥发油測定法甲法提取，在挥发油提取器的上部加水使水溢入烧瓶中，再加Imlこ酸こ酷，回流提取O. 5-2小时，冷却至室温，分取こ酸こ酯液，作为样品溶液；同法制备香旱芹对照药材溶液和檀香对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5-20 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以体积比为5-10:8:2的馏程60-90°C石油醚-ニ甲苯-こ酸こ酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%_5%香草醛硫酸溶液，100-110°C加热至斑点显色清晰；样品色谱中，在与两对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点。
9.如权利要求8所述的质量检测方法，其特征是，所述檀香和香旱芹合并鉴别，合并鉴别的方法是取待测制剂内容物4g，置IOOml圆底烧瓶中，加60ml水，照挥发油测定法甲法提取，在挥发油提取器的上部加水使水溢入烧瓶中，再加Imlこ酸こ酷，回流提取I小时，冷却至室温，分取こ酸こ酯液，作为样品溶液；同法制备香旱芹对照药材溶液和檀香对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各20μ 1，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以体积比为5-10:8:2的馏程60-90°C石油醚-ニ甲苯-こ酸こ酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，110°C加热至斑点显色清晰；样品色谱中，在与两对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点。
10.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，所述的制剂是指取中药组合物二十五味肺病胶囊原料药，按常规エ艺，加入常规辅料制备成临床可接受的任何ー种剂型，包括微丸、滴丸、片剂、胶囊、颗粒、分散片。
全文摘要
本发明公开了一种中药组合物二十五味肺病胶囊及其制剂的质量检测方法，在原标准的基础上，增加了使用高效液相色谱法(HPLC法)对二十五味肺病胶囊中乌头碱进行了限度检查，同时采用高效液相色谱法(HPLC法)对有效成分羟基红花黄色素A、獐牙菜苦苷、胆酸进行了定量检测，对毛诃子、檀香、香旱芹、巴夏嘎和甘草进行鉴别；本发明提高了产品质量，使该制剂在治疗疾病的同时，保证了用药的安全有效。
文档编号G01N30/02GK102749401SQ20121026682
公开日2012年10月24日 申请日期2012年7月30日 优先权日2012年7月30日
发明者刘玉芹, 孙泰俊, 孙绪丁, 张本永, 马宏伟 申请人:山东阿如拉药物研究开发有限公司