一种血细胞分析芯片、分析仪及分析方法
【专利摘要】本发明属于血细胞分析【技术领域】，涉及一种血细胞分析芯片、分析仪及分析方法。所述血细胞分析芯片包括白细胞/血红蛋白分析芯片及红细胞/血小板分析芯片；白细胞/血红蛋白分析芯片包括四分群细胞分析芯片和嗜碱性粒细胞分析芯片；四分群细胞分析芯片利用化学染色法、电阻抗技术和光吸收法进行细胞分类，并采用比色法检测血红蛋白，嗜碱性粒细胞分析芯片采用生物溶解技术、电阻抗测量法和阈值界标法进行白细胞计数和嗜碱细胞检测；红细胞/血小板分析芯片采用电阻抗技术、界标技术用于红细胞和血小板计数。所述血细胞分析芯片、分析仪及分析方法具有结构简单、体积小、成本低、操作方便、易维护、易运输、芯片用过即可丢弃等优势。
【专利说明】一种血细胞分析芯片、分析仪及分析方法
【技术领域】
[0001]本发明属于血细胞分析【技术领域】，尤其涉及一种血细胞分析芯片、分析仪以及分析方法。
【背景技术】
[0002]血细胞分析所获得的信息有助于诊断、鉴别诊断与血液系统有关的疾病；有助于分析病情、观察疗效、判断预后，为预防疾病提供依据；以及指导临床用药并开展临床医学研究。因此血细胞检验(即血常规)成为临床检验中三大常规检验(血常规、尿常规、便常规)之首，其临床应用也最为广泛。自1953年库尔特先生发明电阻抗法血细胞计数仪后，各种自动血细胞分析仪相继问世，血细胞分析技术得到迅速发展。
[0003]目前普遍通过市售的血细胞分析仪，经特定人员在特定条件下进行血细胞分析。而传统的血细胞分析仪体积庞大、价格昂贵、操作复杂，需要专人使用并进行定期维护，且与其配套的测量试剂价格较贵，因此一般适用于检验样本较多、较集中的医院检验科室，而不适于样本量通常较少，且在时间维度上非常分散的村卫生室等基层医疗单位。
[0004]因此急需研制出适用于现场检测、应急分析、家庭应用及基层医疗的，便携化、操作简单化、报告结果即时化的血细胞分析仪，以克服传统检验类设备缺点，并满足基层医疗单位对检验手段的需求。
[0005]20世纪90年代初，瑞士的Manz和Widmer首次提出以微机电加工技术为基础的微型全分析系统(miniaturized total analysis systems, μ TAS)。其目的是将分析实验室的功能转移到便携的分析设备中，甚至集成到方寸大小的芯片上，以适应分析仪器微型化、集成化、便携化、自动化的发展要求，为“个人化”、“家庭化”分析实验室的实现创造了有利条件。
[0006]微流控芯片(microfluidic chip)是μ TAS中最活跃的领域和发展前沿，并已广泛应用于免疫分析、DNA分析、蛋白分析、PCR、细胞分选和单细胞分析等领域。在微流控芯片上进行细胞研究越来越受到人们的重视，已应用于细胞培养、细胞计数和分类筛选、胞内成分分析、分子离子和细胞的相互作用的研究以及单细胞分析等方面。微流控芯片的微尺度效应和易于集成化，使其具有样品试剂消耗量小、反应速度快等特点，是发展快速、高效、低成本疾病诊断技术和新装置的理想平台，而在疾病诊断方面展现出较好的应用潜力。
【发明内容】
[0007]本发明提供了一种血细胞分析芯片、分析仪以及分析方法，旨在解决现有的血细胞分析仪体积庞大、价格昂贵、操作复杂、需要专人使用并进行定期维护的技术问题。
[0008]本发明提供的技术方案为:一种血细胞分析芯片，包括:白细胞/血红蛋白分析芯片及红细胞/血小板分析芯片；所述白细胞/血红蛋白分析芯片包括四分群细胞分析芯片和嗜碱性粒细胞分析芯片；所述四分群细胞分析芯片利用化学染色法、电阻抗技术和光吸收法进行细胞分类，并采用比色法检测血红蛋白，所述嗜碱性粒细胞分析芯片采用生物溶解技术、电阻抗测量法和阈值界标法进行白细胞计数和嗜碱细胞检测；所述红细胞/血小板分析芯片采用电阻抗技术、界标技术用于红细胞和血小板计数。
[0009]本发明的技术方案还包括:所述四分群分析芯片上设置有储液池、废液池、检测区、比色池以及定量组件，所述储液池用于存储血液样本和检测试剂，所述废液池用于存储经过检测的血液样本，所述检测区用于使血液样本的白细胞经过检测区时进行电阻抗检测及光吸收法检测，通过吸光率及细胞大小不同对检测的血液样本进行分类，所述比色池采用比色法检测血红蛋白含量，所述检测血红蛋白含量的检测方式为在530-550nm的波长下比色并测定血液样本的吸光度值，所述定量组件用于使各储液池内相应流体定量。
[0010]本发明的技术方案还包括:所述嗜碱性粒细胞分析芯片上设置有储液池、废液池、检测区和定量组件，所述储液池用于存储血液样本和检测试剂，所述废液池用于存储经过检测的血液样本，所述检测区用于血液样本的细胞经过检测区时采用电阻抗技术依据细胞大小进行检测，通过电子脉冲大小及数目计算白细胞裸核与嗜碱性粒细胞的有效数值，所述定量组件用于使各储液池内相应流体定量。
[0011]本发明的技术方案还包括:所述红细胞/血小板分析芯片上设置有储液池、废液池、检测区和定量组件，所述储液池用于存储检测试剂和血液样本，所述废液池用于存储经过检测的血液样本,血液样本的细胞经过检测区时采用电阻抗技术依据细胞大小进行检测，根据脉冲的高低对红细胞和血小板分别计数，所述定量组件用于使各储液池内相应流体定量，其中，所述红细胞和血小板的计数方式为:通过脉冲大小的测量测定出细胞体积，通过记录脉冲的数目得到细胞计数的结果；根据血小板与红细胞体积的差异设定阈值，将高于阈值的脉冲信号定义为红细胞，将低于阈值的脉冲信号定义为血小板，通过所产生电子脉冲的多少及大小进行红细胞及血小板的计数和体积分析。
[0012]本发明的技术方案还包括:所述白细胞/血红蛋白分析芯片及红细胞/血小板分析芯片采用的材料包括石英、玻璃、单晶硅或高分子聚合材料；所述储液池进样采用微泵、电动进样、正向压力驱动进样、负压进样或电渗进样多种方式。
[0013]本发明提供的又一技术方案为:一种血细胞分析仪，包括如权利要求1所述的血细胞分析芯片、检测单元和信号处理系统，所述血细胞分析芯片、检测单元和信号处理系统依次相连，所述血细胞分析芯片用于承载血细胞，所述检测单元用于对检测区施加激光束对血细胞进行照射，所述信号处理系统对检测区上下两端施加恒定电流，检测每个细胞产生与细胞体积成比例的电子脉冲，依据设定的阈值，区分白细胞裸核与嗜碱性粒细胞，给出准确的白细胞总数及嗜碱性粒细胞有效数值，或所述信号处理系统采用光吸收率测量细胞过染色程度。
[0014]本发明米取的又一技术方案为:一种血细胞分析方法，包括:
[0015]步骤a:利用化学染色、电阻抗技术和光吸收法对细胞进行分类，利用比色法检测血红蛋白含量；
[0016]步骤b:采用生物溶解技术、电阻抗法及阈值界标法检测嗜碱性粒细胞；
[0017]步骤c:采用电阻抗技术、界标技术检测红细胞及血小板。
[0018]本发明的技术方案还包括:所述步骤a包括:抗凝血、染色剂分别进样到对应储液池Al、A2，血液进行溶血处理以破坏RBC/PLT/BAS0细胞，且对单核细胞的初级颗粒、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的特异颗粒进行不同程度的染色，同时对细胞膜进行不同程度的着色；鞘液进样到储液池BI，经化学染色的血液样本在鞘液流作用下，白细胞排成一行且依次通过检测区SI及比色池E，根据吸光率及细胞大小不同对检测的血液样本进行分类，以及比色法检测血红蛋白含量。
[0019]本发明的技术方案还包括:所述步骤b包括:抗凝血进样到储液池Al,嗜碱性粒细胞稀释液进样到储液池A3，定量抗凝血和稀释液从各自储液池流出并混合，鞘液进样到储液池B2，经处理的血液样本在鞘液流作用下，白细胞排成一行且依次通过检测区S2，检测区S2上下两端施加恒定电流，经电阻抗检测流入废液池W2，依据阈值设定经信号处理系统处理分析，区分白细胞裸核与嗜碱性粒细胞，给出准确的白细胞总数及嗜碱性粒细胞有效数值。
[0020]本发明的技术方案还包括:在所述步骤c中，抗凝血进样到储液池A4，鞘液进样到储液池B3，抗凝血在鞘液作用下，血细胞排成一行且依次通过检测区S3，经电阻抗检测而流入废液池W3，所述红细胞和血小板的计数方式为:通过脉冲大小的测量测定出细胞体积，通过记录脉冲的数目得到细胞计数的结果；根据血小板与红细胞体积的差异设定阈值，将高于阈值的脉冲信号定义为红细胞，将低于阈值的脉冲信号定义为血小板，通过所产生电子脉冲的多少及大小进行红细胞及血小板的计数和体积分析。
[0021]本发明的技术方案具有如下优点或有益效果:本发明实施例的血细胞分析芯片、分析仪和分析方法在抗凝血中对血细胞进行分型，具有结构简单、体积小、成本低、操作方便、易维护、易运输、芯片用过即可丢弃等优势，符合分析仪器微型化、集成化及便携化的发展要求，适合医院、社区诊所和个人家庭等使用。
【专利附图】
【附图说明】
[0022]附图1是本发明实施例的血细胞分析芯片的结构示意图；
[0023]附图2是本发明实施例的血细胞分析芯片的白细胞/血红蛋白分析芯片的结构示意图；
[0024]附图3是本发明实施例的血细胞分析芯片的红细胞/血小板分析芯片的结构示意图；
[0025]附图4是本发明实施例的血细胞分析仪的结构示意图；
[0026]附图5是本发明实施例的血细胞分析方法的流程图。
【具体实施方式】
[0027]为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0028]请参阅图1，为本发明实施例的血细胞分析芯片的结构示意图。本发明实施例的血细胞分析芯片包括白细胞/血红蛋白分析芯片及红细胞/血小板分析芯片。
[0029]所述白细胞/血红蛋白分析芯片包括:四分群细胞分析芯片和嗜碱性粒细胞分析芯片。请参阅图2，图2揭示了本发明实施例的血细胞分析芯片的四分群细胞分析芯片的结构示意图。四分群细胞分析芯片上设置有储液池、废液池、检测区、比色池和定量组件。所述储液池用于存储血液样本和检测试剂；所述废液池用于存储经过检测的血液样本；所述检测区用于使血液样本的白细胞经过检测区时进行电阻抗检测及光吸收法检测，通过吸光率及细胞大小不同对检测的血液样本进行分类；所述比色池用于检测血红蛋白的浓度；所述定量组件用于使各储液池内相应流体定量。在本发明实施例中，储液池设置至少一个，在进行白细胞计数时，抗凝血(是临检工作中最常用和最重要的抗凝剂和试剂之一)进样到Al储液池，染色剂(含有溶血剂及染料，100-150m0sm/kg或800-1500m0sm/kg，pH为2_8的溶液)进样到A2储液池，使抗凝血和染色剂从各自储液池流出并实现混合。该过程的作用是:①血液进行溶血处理以破坏RBC/PLT/BASO细胞，且碎片远小于白细胞；②对单核细胞的初级颗粒、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的特异颗粒进行不同程度的染色，同时对细胞的膜(细胞膜、核膜、颗粒膜)也进行不同程度的着色；③固定细胞的形态，使其保持自然状态。鞘液进样到BI储液池，经染色的定量血液样本在定量鞘液作用下，白细胞排成一行且一个个通过检测区SI中下游的狭窄结构(上下两端施加恒定电流)，经电阻抗检测而流入下游。由于血细胞的传导性质比等渗的电解液低，当血细胞通过狭窄结构时，狭窄结构处电压发生改变，对应电阻抗技术设置的信号接收器将接收到一个脉冲信号，此脉冲信号的大小取决于通过狭窄结构的血细胞体积大小，脉冲信号的数目取决于通过狭窄结构的血细胞多少，从而根据脉冲信号多少以及大小得到细胞体积测定结果。由于淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞对染色剂的着色程度不同，每种细胞特定的细胞核形态和颗粒的结构造成光散射的强度不同，产生了特定的吸光率，在狭窄结构处同时进行光吸收率分析以判断细胞形态和内容物等情况，最终将细胞测定信息在散射图的相应位置表现出来。根据每类细胞在这两个分析参数上所表现出来的特性，形成二维分布的散点图。在此检测区内可完成白细胞中淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞和嗜酸细胞群的分类。同时，RBC (Red BloodCell，红细胞计数，是指单位体积血液中所含的红细胞数目)在被破坏的同时，释放出血红蛋白，血红蛋白与溶血剂(血红蛋白检测组分及红细胞溶血剂，溶血剂是低渗的、酸性的、含有适量湿润剂的溶液，能迅速溶解破坏血液中的红细胞，释放血红蛋白并与之形成稳定的化合物)反应形成血红蛋白衍生物，进入血红蛋白测试系统，即比色池E，并在530-550nm的特定波长下比色，吸光度的变化与液体中血红蛋白的含量成比例，由此即可测得血红蛋白的浓度。
[0030]请参阅图2，图2揭示了本发明实施例的血细胞分析芯片的嗜碱性粒细胞分析芯片的结构示意图。本发明实施例的嗜碱性粒细胞分析芯片上设置有储液池、废液池、检测区和定量组件。储液池用于存储血液样本和检测试剂，废液池用于存储经过检测的血液样本，检测区用于计算白细胞裸核与嗜碱性粒细胞的有效数值。其中，储液池数量至少为一个，分别用于存储抗凝血、嗜碱性粒细胞稀释液以及鞘液。在本发明实施方式中，嗜碱性粒细胞分析芯片进行检测的具体过程为:抗凝血进样到Al储液池，嗜碱性粒细胞稀释液(溶血剂，100-150m0sm/kg或800-1500m0sm/kg，pH为2-8的溶液)进样到A3储液池，定量抗凝血和定量溶血剂从各自储液池流出并实现混合，溶解红细胞，由于嗜碱性粒细胞具有抗酸性，能够保持形态完整，而其他白细胞胞浆溢出，成为裸核状态。鞘液进样到B2储液池，经处理的血液样本在定量鞘液作用下，血液中的白细胞排成一行且一个个通过检测区S2中下游的小孔(上下两端施加恒定电流)，经电阻抗检测(即每个细胞产生于细胞体积成比例的电子脉冲)而流入废液池W2，以细胞体积大小为横坐标绘制WBC/BAS0直方图。依据阈值设定经信号处理系统处理分析，区分白细胞裸核与嗜碱性粒细胞，给出较准确的白细胞总数及嗜碱性粒细胞有效数值。在本发明实施方式中，嗜碱性粒细胞分析芯片采用生物溶解技术及电阻抗技术检测嗜碱性粒细胞，进一步提高检测性能。
[0031 ] 图2中，定量组件Fl至F8用于使各储液池内相应流体定量。
[0032]请参阅图3，为本发明实施例的血细胞分析芯片的红细胞/血小板分析芯片的结构示意图。红细胞/血小板分析芯片上设置有储液池、废液池、检测区和定量组件。储液池用于存储血液样本和检测试剂；废液池用于存储经过检测的血液样本；检测区用于血液样本的细胞经过检测区时采用电阻抗技术依据细胞大小进行检测，根据脉冲的高低对红细胞和血小板分别计数；定量组件用于使各储液池内相应流体定量。本发明的一种具体的实施方式为:在定量组件F9和FlO的定量作用下，抗凝血进样到储液池A4，鞘液(渗透压250-300m0sm/kg, pH7_7.4的等渗溶液)进样到储液池B3，定量抗凝血在定量鞘液作用下，血液中的单细胞排成一行且一个个通过检测区S3，经电阻抗检测而流入废液池W3。由于血小板与红细胞体积有明显的差异，设定阈值，根据脉冲的高低对RBC和PLT分别计数，将高于阈值的脉冲信号定义为红细胞，反之为血小板，从而根据脉冲信号多少以及大小进行红细胞/血小板计数和体积分析，其中白细胞数量影响可以忽略不计。
[0033]鞘流技术具体为:为了避免检测过程中细胞发生并列或侧向流经检测区，以及细胞回流、湍流或涡流等现象带来检测误差，采用鞘流技术，即细胞悬液样品在高速流动的鞘液侧向挤压效应作用下，形成类似入鞘形状的压缩流动形态，保证样品细胞在鞘液的包被下形成单个排列的细胞流，依次通过检测区；鞘流技术可应用于两种细胞计数原理:一为电阻抗原理，鞘流通过小孔的敏感区进行细胞计数；另一种为激光计数原理，细胞液流室较长，与激光垂直相交，激光光束对流经的每一个细胞照射后产生光散射，利用此原理进行细胞计数；浮动界标技术为:因为各种细胞间的界限可以随细胞实际大小而向左或右移动，故称为浮动界标技术；正常标本中红细胞与血小板体积相差较大，一般将红细胞与血小板的界限定于35fl，大的为红细胞，小的为血小板，也有以30fl或20fl为界限的；但在某些病理情况下可能有大血小板超过35fl界限，造成血小板漏计使结果偏低；反之，如果红细胞体积偏小(如缺铁性贫血或地中海性贫血)，则可能将部分小红细胞误计为血小板，使血小板计数偏高；为了结果准确一些，计数仪利用计算机在5-35fl间寻找直方图最低点，以此定为红细胞和血小板的界限，直方图的界标会依据细胞群的变化做出相应的自动调整，由此可使所计数的数值符合实际情况。
[0034]在本发明实施例中，储液池进样采用微泵、电动进样、正向压力驱动进样、负压进样或电渗进样等多种方式，血细胞分析芯片可以由石英、玻璃、单晶硅、高分子聚合等材料制作，例如聚甲基丙烯酸甲酯PMMA、聚二甲基硅氧烷PDMS或聚碳酸酯PC等；可通过芯片微通道内表面改性、芯片材料改性或溶液中加入适宜的添加剂等方式以减轻或避免芯片微通道表面对血细胞吸附；同时，本发明除了应用于医疗行业外，同样适用于涉及测量物质颗粒的直径大小或液体中微粒子的数量进行定量和定性的分析等行业，例如，纯水中的理化分析中，测量其杂质和细菌的含量；或各种工业高纯度液体的纯净度的测量或标定等。
[0035]请参阅图4，为本发明实施例的血细胞分析仪的结构示意图。本发明实施例的血细胞分析仪包括如图1所述的血细胞分析芯片、检测单元和信号处理系统，所述血细胞分析芯片、检测单元和信号处理系统依次相连，所述血细胞分析芯片用于承载血细胞，所述检测单元用于对检测区施加激光束对血细胞进行照射，所述信号处理系统对检测区上下两端施加恒定电流，检测每个细胞产生与细胞体积成比例的电子脉冲，依据设定的阈值，区分白细胞裸核与嗜碱性粒细胞，给出准确的白细胞总数及嗜碱性粒细胞有效数值，或所述信号处理系统采用光吸收率测量细胞过染色程度。本发明实施例的血细胞分析仪除了应用于医疗行业外，凡是涉及要求测量物质颗粒的直径大小和液体中微粒子的数量进行定量和定性的分析，都可以用本仪器来测量，即本仪器可演变成激光粒度分析仪，例如，纯水中的理化分析中，测量其杂质和细菌的含量；各种工业高纯度液体的纯净度的测量，标定等，对微电子器件，集成电路的生产，质量控制，制药行业和化工行业，食品卫生监督等都有现实意义。
[0036]请参阅图5，为本发明实施例的血细胞分析方法的流程图。本发明实施例的血细胞分析方法包括:
[0037]步骤100:利用化学染色、电阻抗技术和光吸收法对细胞进行分类，利用比色法检
测血红蛋白含量；
[0038]在步骤100中，请同时参照图2，抗凝血、染色剂分别进样到储液池Al、A2，血液进行溶血处理以破坏RBC/PLT/BASO细胞，且对单核细胞的初级颗粒、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的特异颗粒进行不同程度的染色，同时对细胞膜进行不同程度的着色；鞘液进样到储液池BI，经化学染色的血液样本在鞘液流作用下，白细胞排成一行且依次通过检测区SI及比色池E，根据吸光率及细胞大小不同对检测的血液样本进行分类，以及比色法检测血红蛋白含量。
[0039]步骤200:采用生物溶解技术、电阻抗法及阈值界标法检测嗜碱性粒细胞；
[0040]在步骤200中，请同时参照图2，抗凝血进样到储液池Al，嗜碱性粒细胞稀释液进样到储液池A3，定量抗凝血和稀释液从各自储液池流出并混合，鞘液进样到储液池B2，经处理的血液样本在鞘液流作用下，白细胞排成一行且依次通过计数检测区S2，检测区S2上下两端施加恒定电流，经电阻抗检测(即每个细胞产生与细胞体积成比例的电子脉冲)流入废液池W2，依据阈值设定经信号处理系统处理分析，区分白细胞裸核与嗜碱性粒细胞，给出准确的白细胞总数及嗜碱性粒细胞有效数值。
[0041]步骤300:采用电阻抗技术、界标技术检测红细胞及血小板。
[0042]在步骤300中，请同时参照图3，抗凝血进样到储液池A4，鞘液进样到储液池B3，抗凝血在鞘液作用下，血细胞排成一行且依次通过计数检测区S3，经电阻抗检测而流入废液池W3，所述红细胞和血小板的计数方式为:通过脉冲大小的测量测定出细胞体积，通过记录脉冲的数目得到细胞计数的结果；根据血小板与红细胞体积的差异设定阈值，将高于阈值的脉冲信号定义为红细胞，将低于阈值的脉冲信号定义为血小板，通过所产生电子脉冲的多少及大小进行红细胞及血小板的计数和体积分析。
[0043]本发明实施例的血细胞分析芯片、分析仪和分析方法在抗凝血中对血细胞进行分型，具有结构简单、体积小、成本低、操作方便、易维护、易运输、芯片用过即可丢弃等优势，符合分析仪器微型化、集成化及便携化的发展要求，适合医院、社区诊所和个人家庭等使用。
[0044]以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种血细胞分析芯片，其特征在于，包括:白细胞/血红蛋白分析芯片及红细胞/血小板分析芯片；所述白细胞/血红蛋白分析芯片包括四分群细胞分析芯片和嗜碱性粒细胞分析芯片；所述四分群细胞分析芯片利用化学染色法、电阻抗技术和光吸收法进行细胞分类，并采用比色法检测血红蛋白，所述嗜碱性粒细胞分析芯片采用生物溶解技术、电阻抗测量法和阈值界标法进行白细胞计数和嗜碱细胞检测；所述红细胞/血小板分析芯片采用电阻抗技术、界标技术用于红细胞和血小板计数。
2.根据权利要求1所述的血细胞分析芯片，其特征在于，所述四分群分析芯片上设置有储液池、废液池、检测区、比色池以及定量组件，所述储液池用于存储血液样本和检测试剂，所述废液池用于存储经过检测的血液样本，所述检测区用于使血液样本的白细胞经过检测区时进行电阻抗检测及光吸收法检测，通过吸光率及细胞大小不同对检测的血液样本进行分类，所述比色池采用比色法检测血红蛋白含量，所述检测血红蛋白含量的检测方式为在530-550nm的波长下比色并测定血液样本的吸光度值，所述定量组件用于使各储液池内相应流体定量。
3.根据权利要求1所述的血细胞分析芯片，其特征在于，所述嗜碱性粒细胞分析芯片上设置有储液池、废液池、检测区和定量组件，所述储液池用于存储血液样本和检测试剂，所述废液池用于存储经过检测的血液样本，所述检测区用于血液样本的细胞经过检测区时采用电阻抗技术依据细胞大小进行检测，通过电子脉冲大小及数目计算白细胞裸核与嗜碱性粒细胞的有效数值，所述定量组件用于使各储液池内相应流体定量。
4.根据权利要求1所述的血细胞分析芯片，其特征在于，所述红细胞/血小板分析芯片上设置有储液池、废液池、检测区和定量组件，所述储液池用于存储血液样本和检测试剂，所述废液池用于存储经过检测的血液样本，血液样本的细胞经过检测区时采用电阻抗技术依据细胞大小进行检测，根据脉冲的高低对红细胞和血小板分别计数，所述定量组件用于使各储液池内相应流体定量，其中，所述红细胞和血小板的计数方式为:通过脉冲大小的测量测定出细胞体积，通过记录脉冲的数目得到细胞计数的结果；根据血小板与红细胞体积的差异设定阈值，将.高于阈值的脉冲信号定义为红细胞，将低于阈值的脉冲信号定义为血小板，通过所产生电子脉冲的多少及大小进行红细胞及血小板的计数和体积分析。
5.根据权利要求2至4任一项所述的血细胞分析芯片，其特征在于，所述白细胞/血红蛋白分析芯片及红细胞/血小板分析芯片采用的材料包括石英、玻璃、单晶硅或高分子聚合材料；所述储液池进样采用微泵、电动进样、正向压力驱动进样、负压进样或电渗进样多种方式。
6.一种血细胞分析仪，其特征在于，包括如权利要求1所述的血细胞分析芯片、检测单元和信号处理系统，所述血细胞分析芯片、检测单元和信号处理系统依次相连，所述血细胞分析芯片用于承载血细胞，所述检测单元用于对检测区施加激光束对血细胞进行照射，所述信号处理系统对检测区上下两端施加恒定电流，检测每个细胞产生与细胞体积成比例的电子脉冲，依据设定的阈值，区分白细胞裸核与嗜碱性粒细胞，给出准确的白细胞总数及嗜碱性粒细胞有效数值，或所述信号处理系统采用光吸收率测量细胞过染色程度。
7.—种血细胞分析方法，其特征在于，包括: 步骤a:利用化学染色、电阻抗技术和光吸收法对细胞进行分类，利用比色法检测血红蛋白含量；步骤b:采用生物溶解技术、电阻抗法及阈值界标法检测嗜碱性粒细胞； 步骤C:采用电阻抗技术、界标技术检测红细胞及血小板。
8.根据权利要求7所述的血细胞分析方法，其特征在于，所述步骤a包括:抗凝血、染色剂分别进样到对应储液池Al、A2，血液进行溶血处理以破坏RBC/PLT/BASO细胞，且对单核细胞的初级颗粒、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的特异颗粒进行不同程度的染色，同时对细胞膜进行不同程度的着色；鞘液进样到储液池BI，经化学染色的血液样本在鞘液流作用下，白细胞排成一行且依次通过检测区SI及比色池E，根据吸光率及细胞大小不同对检测的血液样本进行分类，以及比色法检测血红蛋白含量。
9.根据权利要求7所述的血细胞分析方法，其特征在于，所述步骤b包括:抗凝血进样到储液池Al，嗜碱性粒细胞稀释液进样到储液池A3，定量抗凝血和稀释液从各自储液池流出并混合，鞘液进样到储液池B2，经处理的血液样本在鞘液流作用下，白细胞排成一行且依次通过检测区S2，检测区S2上下两端施加恒定电流，经电阻抗检测流入废液池W2，依据阈值设定经信号处理系统处理分析，区分白细胞裸核与嗜碱性粒细胞，给出准确的白细胞总数及嗜碱性粒细胞有效数值。
10.根据权利要求7所述的血细胞分析方法，其特征在于，在所述步骤C中，抗凝血进样到储液池A4，鞘液进样到储液池B3，抗凝血在鞘液作用下，血细胞排成一行且依次通过检测区S3，经电阻抗检测而流入废液池W3，所述红细胞和血小板的计数方式为:通过脉冲大小的测量测定出细胞体积，通过记录脉冲的数目得到细胞计数的结果；根据血小板与红细胞体积的差异设定阈值，将高于阈值的脉冲信号定义为红细胞，将低于阈值的脉冲信号定义为血小板，通过所产生电子 脉冲的多少及大小进行红细胞及血小板的计数和体积分析。
【文档编号】G01N15/12GK103472216SQ201310373233
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2013年8月23日 优先权日:2013年8月23日
【发明者】李芳芳, 游璠, 周树民, 黄石, 薛广洲 申请人:深圳中科强华科技有限公司