一种纤细线状物长度的测量方法
【专利摘要】本发明公开一种纤细线状物长度的测量方法，所采用的技术方案是：设定两个透光度较高的玻璃培养皿，在玻璃纸上打印做成方格玻璃纸；用吸附剂将方格玻璃纸吸附在上培养皿中，在下培养皿中滴加一层浮载剂，将纤细线状物分散放置在下培养皿中使各线状物之间不重叠；将上培养皿放置于下培养皿中，统计纤细线状物与方格玻璃纸上的方格横竖线的总交叉点数；利用改进的十字交叉法公式R=11/14×N×a换算出纤细线状物的长度，本发明使用可以打印的玻璃纸，结合具体的测量物条件设计方格尺寸，同时采用两层透光玻璃的夹板式上下培养皿结构，使待测量的纤细线状物不容易在承载剂中浮动，从而使测量结果更加准确。使用简单，可行性强，准确度高。
【专利说明】一种纤细线状物长度的测量方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种测量方法，具体是一种纤细线状物长度的测量方法，属于测量【技术领域】。
【背景技术】
[0002]测量植物的细小根系以及菌丝等直径在Imm以下的散乱线状物长度，是研究植物根系与地下真菌互作方面的一项重要内容。而目前传统的根系扫描仪器对于此类线状物测量不够精确。为了测量此类直径以下的线状物长度，人们唯有依靠传统的十字交叉法(作者:Newman, E “ A method of estimating the total length of root in asample”《Journal of applied Ecology》139-145,1966),并利用改进的十字交叉法公式R=ll/14XNXa换算出纤细线状物的长度进行测量，R为测量物的长度，N为测量的线状物与方格横竖线的所有交叉点数，a为小方格边长(作者:Tennant, D“A test of a modifiedline intersect method of estimating root length，，〈〈The Journal of Ecology〉〉，1975)。对于十字交叉法测量此类线状物的长度，需要依赖体视显微镜的放大倍数、方格的尺寸、以及承载测量线状物质的容器。对于该类直径的线状物，目前人们对于不同直径和不同量的线状物采用不同的带不同尺寸方格的容器，而且多将方格制备于容器的底部。除此之外，还多用液体作为悬浮剂让线状物展开。这样对于测量不同量和不同直径的线状物质显得十分麻烦，而且在体式显微镜下测量的过程中，晃动会使悬浮剂中的线状物质游动，从而影响测量结果的准确性。目前尚没有一种简单的多规格的用于测量肉眼难以分辨的纤细线状物长度的测量方法。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是为了克服目前对散乱纤细线状物测量所存在的缺陷，而公开一种纤细线状物长度的测量方法，从而使测量结果更加准确。
[0004]本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
a.设定两个透光度较高的玻璃培养皿，其中上培养皿的底部厚度较薄，下培养皿的内直径大于上培养皿的外直径；
b.设计边长尺寸为28/ll-7/22cm的小方格，并通过打印机采用最细的线形方格打印在玻璃纸上，做成方格玻璃纸；
c.在上培养皿内滴加一层透明度高的植物油吸附剂，将打印有设计尺寸的方格玻璃纸放置在上培养皿中，方格玻璃纸吸附在上培养皿中且与底部不留气泡；
d.在下培养皿中滴加一层黏度高、透明性好、水溶性好的浮载剂，在体式显微镜可清晰识别的放大倍数下将纤细线状物分散放置在下培养皿中，各线状物之间不重叠；
e.然后将带有方格玻璃纸的上培养皿放置于下培养皿中，放置过程中不要出现气泡；
f.下培养皿与上培养皿依靠中间层的浮载剂吸附，从而黏贴在一起，然后放置在体式显微镜下，在可清晰识别的放大倍数下统计纤细线状物与方格玻璃纸上的十字方格横竖线的总交叉点数；
g.利用改进的十字交叉法公式R=ll/14XNXa换算出纤细线状物的长度，其中R为测量物的长度，N为测量的线状物与方格横竖线的所有交叉点数，a为小方格边长。
[0005]本发明由于使用可以打印的玻璃纸，结合具体的测量物条件进行设计方格尺寸，同时采用两层透光玻璃的夹板式上下培养皿结构，使待测量的纤细线状物不容易在承载剂中浮动，从而使测量结果更加准确。本发明所涉及装置在一般的实验室条件下均可达到，使用简单，可行性强，准确度高。
【专利附图】
【附图说明】
[0006]附图1是本发明的具体操作模式图。
[0007]附图2是本发明附图1的俯视图。
[0008]图示:下培养皿1，上培养皿2，方格玻璃纸3，植物油吸附剂4，浮载剂5。
【具体实施方式】
[0009]下面结合具体实施例及附图对本发明做进一步详细说明，以下实施例只是为了解释本发明而不是限制本发明:
实施例一:利用本发明进行测量植物Imm直径以下的根系长度。
[0010]a.设定两个透光度较高的玻璃培养皿，其中上培养皿2的底部厚度为0.1cm，下培养皿I的底部厚度为0.15cm，下培养皿I的内直径为14.8cm，外直径为15.2cm，上培养皿2的内直径为14.2cm,外直径为14.6cm ；
b.通过湿筛收集土壤中直径Imm以下的散乱植物根系，设计小方格长度为14/llcm，并利用打印机打印在玻璃纸上，做成方格玻璃纸3 ；
c.在上培养皿2中滴加葡萄籽油吸附剂4并均匀展开，然后用剪刀将打印好的方格玻璃纸3剪成直径为14.1cm的圆形铺于上培养皿2中，方格玻璃纸3与上培养皿2依靠葡萄籽油吸附剂4紧密地贴在一起，且中间不留气泡；
d.在下培养皿I中滴加一薄层丙三醇浮载剂5，将散乱根系放置其下培养皿I中，在体式显微镜20放大倍数下将散乱根系分散开，使其各个小根段间不发生重叠；
e.将带有打印方格玻璃纸3的上培养皿2放置于下培养皿I中，丙三醇浮载剂5的表面张力将下培养皿I与上培养皿2紧紧的吸附在一起，而且其间的根系不能浮动且不留气泡；
f.将下培养皿I与上培养皿2的组合装置放置于体式显微镜的载物台上，在放大40倍下统计各个根段与方格玻璃纸3上横竖方格线的交叉总数N，代入公式计算所测根系的长度 R=11/14XNX 14/1 I=N(cm)，即完成了一次测量；
g.取出上培养皿2，擦除附着在其底部的丙三醇浮载剂5，处理下培养皿I内的根系，用水冲洗下培养皿I后，可以开始第二次测量。
[0011]实施例二:利用本发明进行测量土壤中丛枝菌根真菌菌丝的长度。
[0012]a.设定两个透光度较高的玻璃培养皿，其中上培养皿的底部厚度为0.1cm，下培养皿I的底部厚度为0.15cm，下培养皿的内直径内直径为8.8cm,外直径为9.2cm,上培养皿的内直径为8.2cm,外直径为8.6cm ； b.通过吸取土壤悬浮液来抽滤获得土壤中的丛枝菌根真菌菌丝于8cm直径的滤膜上，并用染色剂染色，设计小方格长度为7/llcm，并利用打印机打印在玻璃纸上，做成方格玻璃纸3 ；
c.在上培养皿2中滴加葡萄籽油吸附剂4并均匀展开，然后用剪刀将打印好的方格玻璃纸3剪成直径8.1cm的圆形，然后铺于上培养皿2中，方格玻璃纸3与上培养皿2依靠葡萄籽油吸附剂4紧密地贴在一起且中间不留气泡；
d.在下培养皿中I滴加几滴丙三醇浮载剂5，将滤膜带染色菌丝的一面朝上放于下培养皿I中，并在体式显微镜放大40倍下观察确认可以分辨单个菌丝，然后在滤膜上滴加几滴丙三醇浮载剂5 ；
e.将带有打印方格玻璃纸3的上培养皿2放于下培养皿I中，丙三醇浮载剂5的表面张力将滤膜与下培养皿I与上培养皿2紧紧吸附在一起,菌丝不能浮动而且滤膜与上培养皿2和下培养皿I之间不留气泡；
f.将下培养皿I与上培养皿2的组合装置放于体式显微镜的载物台上，在放大60倍下统计滤膜上菌丝与方格玻璃纸3横竖方格线的交叉总数N，代入公式计算所测菌丝的长度R=ll/14XNX7/ll=N/2(cm)，即完成了一次测量；
g.取出上培养皿2，擦除附着在其底部的丙三醇浮载剂5，处理下培养皿I内的滤膜，用水冲洗下培养皿I后，可以开始第二次测量。
【权利要求】
1.一种纤细线状物长度的测量方法，其特征在于所采用的技术方案是: a.设定两个透光度较高的玻璃培养皿，其中上培养皿(2)的底部厚度较薄，下培养皿(1)的内直径大于上培养皿(2)的外直径； b.设计边长尺寸为28/ll-7/22cm的小方格，并通过打印机采用最细的线形方格打印在玻璃纸上，做成方格玻璃纸(3)； c.在上培养皿(2)内滴加一层透明度高的植物油吸附剂(4)，将打印有设计尺寸的方格玻璃纸(3 )放置在上培养皿(2 )中，方格玻璃纸(3 )吸附在上培养皿(2 )中且与底部不留气泡； d.在下培养皿(I)中滴加一层黏度高、透明性好、水溶性好的浮载剂(5)，在体式显微镜可清晰识别的放大倍数下将纤细线状物分散放置在下培养皿(I)中，各线状物之间不重置; e.然后将带有方格玻璃纸(3)的上培养皿(2)放置于下培养皿(I)中，放置过程中不要出现气泡； f.下培养皿(I)与上培养皿(2)依靠中间层的浮载剂(5)吸附，从而黏贴在一起，然后放置在体式显微镜下，在可清晰识别的放大倍数下统计纤细线状物与方格玻璃纸(3)上的十字方格横竖线的总交叉点数； g.利用改进的十字交叉法公式R=ll/14XNXa换算出纤细线状物的长度，其中R为测量物的长度，N为测量的线状物与方格横竖线的所有交叉点数，a为小方格边长。
2.根据权利要求1所述的一种纤细线状物长度的测量方法，其特征在于: a.上培养皿(2)的底部厚度为0.1cm，下培养皿(I)的底部厚度为0.15cm，下培养皿(I)的内直径为14.8cm，外直径为15.2cm，上培养皿(2)的内直径为14.2cm，外直径为14.6cm ； b.通过湿筛收集土壤中直径Imm以下的散乱植物根系，设计小方格长度为14/llcm，并利用打印机打印在玻璃纸上，做成方格玻璃纸(3)； c.在上培养皿(2)中滴加葡萄籽油吸附剂(4)并均匀展开，然后用剪刀将打印好的方格玻璃纸(3)剪成直径为14.1cm的圆形铺于上培养皿(2)中，方格玻璃纸(3)与上培养皿(2)依靠葡萄籽油吸附剂(4)紧密地贴在一起，且中间不留气泡； d.在下培养皿(I)中滴加一薄层丙三醇浮载剂(5)，将散乱根系放置其下培养皿(I)中，在体式显微镜20放大倍数下将散乱根系分散开，使其各个小根段间不发生重叠； e.将带有打印方格玻璃纸(3)的上培养皿(2)放置于下培养皿(I)中，丙三醇浮载剂(5)的表面张力将下培养皿(I)与上培养皿(2)紧紧的吸附在一起，而且其间的根系不能浮动且不留气泡； f.将下培养皿(I)与上培养皿(2)的组合装置放置于体式显微镜的载物台上，在放大40倍下统计各个根段与方格玻璃纸(3)上横竖方格线的交叉总数N，代入公式计算所测根系的长度 R=11/14XNX 14/1 I=N(cm)。
3.根据权利要求1所述的一种纤细线状物长度的测量方法，其特征在于: a.上培养皿(2)的底部厚度为0.1cm，下培养皿(I)的底部厚度为0.15cm，下培养皿(I)的内直径内直径为8.8cm，外直径为9.2cm，上培养皿(2)的内直径为8.2cm，外直径为`8.6cm ；b.通过吸取土壤悬浮液来抽滤获得土壤中的丛枝菌根真菌菌丝于8cm直径的滤膜上，并用染色剂染色，设计小方格长度为7/llcm，并利用打印机打印在玻璃纸上，做成方格玻璃纸(3)； c.在上培养皿(2)中滴加葡萄籽油吸附剂(4)并均匀展开，然后用剪刀将打印好的方格玻璃纸(3)剪成直径8.1cm的圆形，然后铺于上培养皿(2)中，方格玻璃纸(3)与上培养皿(2)依靠葡萄籽油吸附剂(4)紧密地贴在一起且中间不留气泡； d.在下培养皿中(I)滴加几滴丙三醇浮载剂(5)，将滤膜带染色菌丝的一面朝上放于下培养皿(I)中，并在体式显微镜放大40倍下观察确认可以分辨单个菌丝，然后在滤膜上滴加几滴丙三醇浮载剂(5)； e.将带有打印方格玻璃纸(3)的上培养皿(2 )放于下培养皿(I)中，丙三醇浮载剂(5 )的表面张力将滤膜与下培养皿(I)与上培养皿(2)紧紧吸附在一起，菌丝不能浮动而且滤膜与上培养皿(2)和下培养皿(I)之间不留气泡； f.将下培养皿(I)与上培养皿(2)的组合装置放于体式显微镜的载物台上，在放大60倍下统计滤膜上菌丝与方格玻璃 纸(3)横竖方格线的交叉总数N，代入公式计算所测菌丝的长度 R=ll/14XNX7/ll=N/2(cm)。
【文档编号】G01B11/02GK103499299SQ201310506144
【公开日】2014年1月8日 申请日期:2013年10月24日 优先权日:2013年10月24日
【发明者】唐明, 胡文涛, 陈辉, 王春燕 申请人:西北农林科技大学