一种测定白酒中四甲基吡嗪含量的方法
【专利摘要】本发明公开了一种测定白酒中四甲基吡嗪含量的方法，其通过在液相色谱仪上设定相关的色谱检测条件，采用配制的四甲基吡嗪系列标准溶液，在设定的色谱检测条件下，对不同浓度的四甲基吡嗪标准溶液进样测定，以进样标准溶液中四甲基吡嗪的浓度为纵坐标，测定的峰面积为横坐标，得到四甲基吡嗪标准曲线，将待测酒样在同样的色谱检测条件下进样测定，输出四甲基吡嗪含量数据，即加载在四甲基吡嗪标准曲线中。经验证，该方法定量限低至0.09mg/L，线性相关系数大于0.999，四甲基吡嗪的回收率为94.67％～100.33％，相对标准偏差在3.5％以下，说明其不仅可行、可靠，准确性高，而且操作简单快捷，对仪器设备条件要求不高，便于推广应用。
【专利说明】一种测定白酒中四甲基吡嗪含量的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种测定白酒中四甲基吡嗪含量的方法，属于白酒分析检测【技术领域】。
技术背景
[0002]近年来，随着社会的进步和经济的发展，人们对生活质量的要求越来越高。白酒作为中国的传统发酵产品，早已是老百姓餐桌上不可或缺的一部分。挖掘中国白酒中的生物活性成分(健康功能因子)，科学引导消费者健康饮酒，促进白酒产业提升，已经是国内外学者广泛研究的课题。相对其他国家蒸馏酒，中国白酒中的呈香呈味物质含量堪称世界之最。其中吡嗪类化合物作为重要的呈香呈味物质，越来越受到人们的重视和关注。其作为白酒中重要的健康功能因子，得到了业内学者的普遍认同。
[0003]吡嗪类化合物是一类含1，4_ 二氮杂苯母环化合物的总称，广泛存在于自然和发酵食品中，具有类似于炒坚果、烤肉的怡人香气，香气透散性好，对其它香味有显著的烘托和叠加作用。四甲基吡嗪，又名川芎嗪，是一种重要的吡嗪化合物。同时它作为中药材川穹根茎的主要活性生物碱成分，具有特殊的药理作用。研究表明，四甲基吡嗪具有扩张血管、改变血循环、护肝(防止酒精对胃黏膜和肝脏的损伤)等功能。酱香型、兼香型和芝麻香型白酒中富含吡嗪类物质，特别是四甲基吡嗪，其主要由微生物代谢和美拉德反应产生，是中国白酒中的健康风味成分，为“适量饮酒，有益健康”提供了依据。
[0004]近年来，针对白酒中四甲基吡嗪检测方法的研究主要有:江南大学徐岩、范文来等分别用液液萃取、顶空微萃取结合GC-MS及固相微萃取结合气相色谱的方法检测白酒中的吡嗪化合物；余晓等利用改进的Liebich酸化法萃取结合GS-MS测定白酒中的吡嗪化合物；王莉等建立了用气相色谱-质谱-离子扫描联用技术检测白酒中的吡嗪类物质；任学坤等利用气相色谱外标法检测白酒中的四甲基吡嗪。但基于液相色谱技术检测白酒中四甲基吡嚷的研究目如还尚属空白。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种可行、可靠且准确性高的测定白酒中四甲基吡嗪含量的方法。
[0006]其技术方案是:一种测定白酒中四甲基吡嗪含量的方法，其特征在于包括如下步骤:
[0007]I)配制四甲基吡嗪系列标准溶液:用四甲基吡嗪与乙醇稀释配制不同浓度的四甲基吡嗪标准溶液；
[0008]2)设定液相色谱仪的色谱检测条件:流动相为甲醇:水(v/v) = 35: 65，流速为lmL/min,柱温为 40 °C，色谱柱为 phenomenex Gemini5 μ C18110A (250 X 4.60mm),检测波长为278nm，进样量为20 μ L ;
[0009]3)绘制四甲基吡嗪标准曲线:在上述设定的色谱检测条件下，待基线平稳后，依次对不同浓度的四甲基吡嗪标准溶液经滤膜过滤后进样测定，以进样的四甲基吡嗪标准溶液的浓度为纵坐标，测定的四甲基吡嗪峰面积为横坐标，绘制出四甲基吡嗪标准曲线；
[0010]4)白酒中四甲基吡嗪含量的测定:吸取待测白酒酒样，经滤膜过滤后至液相色谱仪的样品瓶中，在上述设定的色谱检测条件下进样测定，输出酒样中四甲基吡嗪的含量数据，即加载在上述的四甲基吡嗪标准曲线中。
[0011]其有益效果是:本发明液相色谱技术测定白酒中四甲基吡嗪含量的方法，通过采用液相色谱法检测白酒酒样中四甲基吡嗪含量的回收率、精密度和检测限的试验验证，其定量限低至0.09mg/L,线性相关系数大于0.999，四甲基吡嗪的回收率为94.67 %?100.33 %，相对标准偏差在3.5 %以下，说明本发明采用液相色谱技术，绘制出四甲基吡嗪标准曲线，再通过在设定的色谱检测条件下对待测白酒酒样进样测定，从而测定白酒中四甲基吡嗪含量的方法，不仅可行性和可靠性好，精密度和准确性高，而且操作简单快捷，易于掌握，对白酒厂的仪器设备条件要求不高，便于推广应用。
【专利附图】
【附图说明】
[0012]图1是四甲基吡嗪标样液相色谱检测图；
[0013]图2是四甲基吡嗪标准曲线图。
[0014]具体实施方法
[0015]实施例1。测定宣酒产品中四甲基吡嗪含量的方法
[0016]一、配制四甲基吡嗪标准溶液:
[0017]四甲基吡嗪购自美国SIGMA公司。称取0.5g的四甲基吡嗪，溶于浓度60%的色谱级乙醇，并定容，配制500mg/L的四甲基吡嗪标样母液。
[0018]将上述的四甲基吡嗪标样母液倍比稀释，配制5mg/L的四甲基吡嗪标样溶液(见图1)。
[0019]用移液管依次移取上述lmL、2mL、4mL、6mL、8mL的四甲基吡嗪标样溶液于IOmL容量瓶中，定容至刻度，即配制成0.5mg/L、l.0mg/L、2.0mg/L、3.0mg/L、4.0mg/L四甲基卩比嗪标准溶液，待用。
[0020]二、设定液相色谱仪的色谱检测条件:采用安捷伦1200液相色谱仪，设定色谱检测条件:流动相为甲醇:水(v/v) = 35: 65，流速为lmL/min，柱温为40°C，色谱柱为phenomenex Gemini5 μ C18110A(250X4.60mm)，检测波长为 278nm，进样量为 20 μ L。
[0021]三、绘制四甲基吡嗪标准曲线:在上述设定的色谱检测条件下，待基线平稳后，依次对0.5mg/L、l.0mg/L、2.0mg/L、3.0mg/L、4.0mg/L不同浓度的四甲基卩比嗪标准溶液，经0.22 μ m滤膜过滤后进样测定，以进样四甲基吡嗪标准溶液的浓度为纵坐标，测定的四甲基吡嗪峰面积为横坐标，绘制出四甲基吡嗪标准曲线(见图2)。曲线方程:y =ΙΕ-Οδχ+Ο.0015 ;相关系数:r = 0.9996。
[0022]四、白酒中四甲基吡嗪含量的测定:待测白酒酒样由安徽宣酒集团提供。吸取3mL待测酒样，经0.22 μ m滤膜过滤后至液相色谱仪的样品瓶中，在上述设定的同样色谱检测条件下进样测定，输出酒样中四甲基吡嗪的含量数据，即加载在上述的四甲基吡嗪标准曲线中，测定该酒样中四甲基吡嗪的含量为1.27mg/L。
[0023]实施例2。液相色谱法检测宣酒酒样中四甲基吡嗪含量的回收率、精密度和检测限试验。
[0024]在上述实施例1的白酒酒样中分别添加0.5mg/L、l.0mg/L、2.0mg/L四甲基吡嗪标准溶液，经滤膜过滤后至液相色谱仪的样品瓶中，每个试验做三次平行，按照低浓度到高浓度的顺序，依次进样，酒样采集完毕后，启动后处理程序，加载方法，输出结果。计算该方法测定四甲基吡嗪的回收率和相对标准偏差(见表1)。
[0025]表1酒样中四甲基吡嗪回收率的测定
[0026](η = 3,单位 mg/L)
【权利要求】
1.一种测定白酒中四甲基吡嗪含量的方法，其特征在于包括如下步骤: 1)配制四甲基吡嗪系列标准溶液:用四甲基吡嗪与乙醇稀释配制不同浓度的四甲基吡嗪标准溶液； 2)设定液相色谱仪的色谱检测条件:流动相为甲醇:水(v/v)= 35: 65，流速为ImL/min,柱温为 40 °C，色谱柱为 phenomenex Gemini5 μ C18110A(250X4.60mm),检测波长为278nm，进样量为20 μ L ； 3)绘制四甲基吡嗪标准曲线:在上述设定的色谱检测条件下，待基线平稳后，依次对不同浓度的四甲基吡嗪标准溶液经滤膜过滤后进样测定，以进样的四甲基吡嗪标准溶液的浓度为纵坐标，测定的四甲基吡嗪峰面积为横坐标，绘制出四甲基吡嗪标准曲线； 4)白酒中四甲基吡嗪含量的测定:吸取待测白酒酒样，经滤膜过滤后至液相色谱仪的样品瓶中，在上述设定的色谱检测条件下进样测定，输出酒样中的四甲基吡嗪的含量数据，即加载在上述的四甲基吡嗪标准曲线中。
2.根据权利要求1所述的一种测定白酒中四甲基吡嗪含量的方法，其特征在于:所述的乙醇为浓度60 %的色谱级乙醇。
3.根据权利要求1所述的一种测定白酒中四甲基吡嗪含量的方法，其特征在于:所述不同浓度的四甲基卩比嗪标准溶液为0.5mg/L、l.0mg/L、2.0mg/L、3.0mg/L、4.0mg/L四甲基吡嗪标准溶液。
【文档编号】G01N30/02GK104007191SQ201410166445
【公开日】2014年8月27日 申请日期:2014年4月23日 优先权日:2014年4月23日
【发明者】周萍, 张温清, 司冠儒, 唐莹, 史书俊, 王永军 申请人:安徽宣酒集团股份有限公司, 周萍