基于分子吸收的毛细管电泳检测器及检测方法与流程

文档序号:11823678阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种基于分子吸收的毛细管电泳检测器,它包括一个双光束光路的检测单元A及信号处理单元B,其特征在于,所述双光束光路的检测单元A,由激光光源(1)、装在激光光源(1)前方的分光镜(2)、准直系统(透镜或透镜组)(4)、毛细管(6)、第一光检测器(3)和装在分光镜(2)一侧的第二光检测器(7)组成。

2.根据权利要求1所述的基于分子吸收的毛细管电泳检测器,其特征在于,所述的激光光源(1)为根据监测样品的特征吸收波长选择的出光波长在紫外可见光区的各种激光光源。

3.根据权利要求1所述的基于分子吸收的毛细管电泳检测器,其特征在于,所述的毛细管(6)为用于毛细管电泳的各种毛细管。

4.根据权利要求1所述的基于分子吸收的毛细管电泳检测器,其特征在于,所述的两个光检测器(3、7)为光电倍增管,或为光电管、或为光电二极管。

5.根据权利要求2所述的基于分子吸收的毛细管电泳检测器,其特征在于,所述激光光源(1)根据检测对象的吸光波长范围选择,其发出的激光能被样品有效吸收;激光光源(1)或采用半导体激光器,或采用其他类型的激光器。

6.一种利用权利要求1所述的基于分子吸收的毛细管电泳检测器的检测方法,其特征在于,该检测方法为,于双光束光路的检测单元A中的激光光源(1)产生的激发光,首先经45度角安装的分光镜(2)分为两束光,分光所得两束光中的一束光被反射到第二光检测器(7),经第二光检测器(7)检测后得到激光光源强度随时间变化的情况;

分光所得两束光中的另一束光透过分光镜(2)后,经准直系统(透镜或透镜组)(4)聚焦到毛细管(6)上,被在毛细管内部流动的样品部分吸收后剩余部分光透过毛细管(6)照射在安装于另一侧的第一光检测器(3)上,由第一光检测器(3)检测得到透过毛细管的光强信号;

所述第一光检测器(3)和第二光检测器(7)检测得到的光强度信号,由信号处理单元B的信号检测和处理电路分别记录后得到二者随时间变化的情况;其中由第二光检测器(7)得到监测光束的光强度值IJ,由第一光检测器(3)测定光束的光强度值Ix,由于激光光源(1)的强度有微小变化时,会导致IJ和Ix同时发生等比例的变化,因此可以根据测量得到的IJ的变化对相应时刻的Ix进行校正,得到校正激光光源强度变化影响后的测定光束的光强度;

最后由信号处理单元B的信号记录和处理系统记录校正后的测定光束光强度随时间变化的关系曲线,即为毛细管电泳图。

7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,所述双光束光路的检测单元A获得的监测光束和测定光束的强度信号通过信号处理单元模拟转换或数字转换等处理方式处理成数字信号;在保持信号处理方式不变的情况下,信号校正方法如下:在毛细管电泳进行过程中,当无吸光样品到达毛细管(6)检测窗口时,第二光检测器(7)光电倍增管测量得到的检测光束光强度记为IJ(0),同一时刻由第一光检测器(3)光电倍增管测量得到的测定光束光强度记为Ix(0);若t时刻时有吸光样品到达毛细管(6)检测窗口,由于样品吸收,导致第一光检测器(3)测量得到的测定光束光强度Ix减小,在毛细管电泳图上呈现为该样品对应的峰,记为Ix(t),同一时刻由第二光检测器(7)测量得到的测定光束光强度记为IJ(t);在激光光光源(1)强度保持不变(即IJ(t)=IJ(0))的情况下,可计算得到样品的光吸收强度ΔI=Ix(0)-Ix(t),如果激光光源(1)的强度有变化(即IJ(t)≠IJ(0)),则校正激光光源(1)光强度变化影响后的光吸收强度ΔI=(Ix(0)-Ix(t))×(IJ(t)/IJ(0));校正后的ΔI的值与样品的浓度c呈正比,即ΔI=Kc;依据这一关系可用标准曲线法对样品浓度进行定量,必要时可以采用内标法对样品处理和进样过程带来的误差进行进一步校正。

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