本发明涉及一种测试方法，尤其是一种利用流式细胞仪检测 HeLa细胞凋亡的方法。
背景技术：
现有技术中对HeLa细胞凋亡的测试精度不够，方法繁琐，无法低成本推广。
本申请的发明人通过潜心研究找到一种高效，高精度测量HeLa细胞凋亡的方法。
技术实现要素：
本发明为了提供一种利用流式细胞仪检测 HeLa细胞凋亡的方法，包括：步骤1：将处于对数生长期HeLa细胞按照100000个细胞/孔分于6孔培养板中，置于37℃、5%二氧化碳，相对湿度为95%的细胞培养箱培养24小时；步骤2：加入不同浓度的第一化合物，浓度分别是：2.5、5和10μM，并以0.1%的溶媒化合物作为阴性对照组，孵育24小时；第一化合物的分子结构式是：；溶媒化合物的分子结构式是：
；步骤3：用不含溶媒化合物的胰酶消化收集，用聚丁二酸丁二醇酯洗涤细胞二次，（2000rpm离心5min），收集100000-200000个细胞；步骤4：加入5μL碘化丙啶，混匀；步骤5：室温、避光、反应5分钟；步骤6：1小时内进行流式细胞仪分析，激发波长Ex=488nm，发射波长Em=530nm。
本发明可以广泛应用到抗癌药物的测试中。
具体实施方式
实施例1：
一种利用流式细胞仪检测 HeLa细胞凋亡的方法，包括：
步骤1：将处于对数生长期HeLa细胞按照100000个细胞/孔分于6孔培养板中，置于37℃、5%二氧化碳，相对湿度为95%的细胞培养箱培养24小时；
步骤2：加入不同浓度的第一化合物，浓度分别是：25、50和100μM，并以0.1%的溶媒化合物作为阴性对照组，孵育24小时；第一化合物的分子结构式是：
；
溶媒化合物的分子结构式是：
步骤3：用不含溶媒化合物的胰酶消化收集，用聚丁二酸丁二醇酯洗涤细胞二次，（2000rpm离心5min），收集100000-200000个细胞；
步骤4：加入5μL碘化丙啶，混匀；
步骤5：室温、避光、反应5分钟；-
步骤6：1小时内进行流式细胞仪分析，激发波长Ex=488nm，发射波长Em=530nm。
实施例2：
一种利用流式细胞仪检测 HeLa细胞凋亡的方法，包括：
步骤1：将处于对数生长期HeLa细胞按照100000个细胞/孔分于6孔培养板中，置于37℃、5%二氧化碳，相对湿度为95%的细胞培养箱培养24小时；
步骤2：加入不同浓度的第一化合物，浓度分别是：0.5、1和2μM，并以0.1%的溶媒化合物作为阴性对照组，孵育24小时；第一化合物的分子结构式是：
；
溶媒化合物的分子结构式是：
步骤3：用不含溶媒化合物的胰酶消化收集，用聚丁二酸丁二醇酯洗涤细胞二次，（2000rpm离心5min），收集100000-200000个细胞；
步骤4：加入5μL碘化丙啶，混匀；
步骤5：室温、避光、反应5分钟；-
步骤6：1小时内进行流式细胞仪分析，激发波长Ex=488nm，发射波长Em=530nm。
实施例3：
一种利用流式细胞仪检测 HeLa细胞凋亡的方法，包括：
步骤1：将处于对数生长期HeLa细胞按照100000个细胞/孔分于6孔培养板中，置于37℃、5%二氧化碳，相对湿度为95%的细胞培养箱培养24小时；
步骤2：加入不同浓度的第一化合物，浓度分别是：1、2和4μM，并以0.1%的溶媒化合物作为阴性对照组，孵育24小时；第一化合物的分子结构式是：
；
溶媒化合物的分子结构式是：
步骤3：用不含溶媒化合物的胰酶消化收集，用聚丁二酸丁二醇酯洗涤细胞二次，（2000rpm离心5min），收集100000-200000个细胞；
步骤4：加入5μL碘化丙啶，混匀；
步骤5：室温、避光、反应5分钟；-
步骤6：1小时内进行流式细胞仪分析，激发波长Ex=488nm，发射波长Em=530nm。
实施例4：
一种利用流式细胞仪检测 HeLa细胞凋亡的方法，包括：
步骤1：将处于对数生长期HeLa细胞按照100000个细胞/孔分于6孔培养板中，置于37℃、5%二氧化碳，相对湿度为95%的细胞培养箱培养24小时；
步骤2：加入不同浓度的第一化合物，浓度分别是：5、10和20μM，并以0.1%的溶媒化合物作为阴性对照组，孵育24小时；第一化合物的分子结构式是：
；
溶媒化合物的分子结构式是：
步骤3：用不含溶媒化合物的胰酶消化收集，用聚丁二酸丁二醇酯洗涤细胞二次，（2000rpm离心5min），收集100000-200000个细胞；
步骤4：加入5μL碘化丙啶，混匀；
步骤5：室温、避光、反应5分钟；-
步骤6：1小时内进行流式细胞仪分析，激发波长Ex=488nm，发射波长Em=530nm。