一种饲料中四环素类药物及其异构体的检测方法与流程

文档序号:12452819阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种饲料中四环素类药物及其异构体的检测方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:

步骤一:称取待测样品加入提取液Na2EDTA-Mcllvaine缓冲液和乙酸铅水溶液涡动混匀,震荡,离心,取出上清液,备用;

步骤二:用甲醇、超纯水活化PRiME HLB固相萃取小柱,上清液过柱,用甲醇水溶液淋洗,真空泵抽干;甲醇洗脱,收集洗脱液,氮气吹干后,再用甲醇水溶液溶解残渣,供高效液相色谱-串联质谱仪测定;

步骤三:高效液相色谱-串联质谱仪的测定,液相色谱选用C18柱,采用0.1%甲酸乙腈和0.1%甲酸水体系,梯度洗脱,质谱条件采用正离子模式下进行多反应监测。

2.根据权利要求1所述的饲料中四环素类药物及其异构体的检测方法,其特征在于:步骤一中Na2EDTA-Mcllvaine缓冲液PH值为5.0。

3.根据权利要求1所述的饲料中四环素类药物及其异构体的检测方法,其特征在于:步骤二中选用固相萃取小柱PRiME HLB 60mg,3mL。

4.根据权利要求1所述的饲料中四环素类药物及其异构体的检测方法,其特征在于:步骤二中淋洗液选用的甲醇和水的混合体积比为5∶95。

5.根据权利要求1所述的饲料中四环素类药物及其异构体的检测方法,其特征在于:步骤二中溶解残渣的甲醇水溶液中甲醇和水的混合体积比为5∶5。

6.根据权利要求1所述的饲料中四环素类药物及其异构体的检测方法,其特征在于:步骤三中色谱柱为Waters BEH C18色谱柱;流动相为A:0.1%甲酸乙腈和B:0.1%甲酸水;梯度洗脱程序如下:

0~0.5min,A5%,B95%;

0.5~2.5min,A5%~20%,B95%~80%;

2.5~4.3min,A20%~95%,B80%~5%;

4.3~5.3min,A95%~5%,B5%~95%;

流速为0.3mL/min;进样量10μL;质谱条件为电喷雾正离子电离ESI;多反应监测扫描;电喷雾电压:5500V;雾化气压力:50psi;气帘气压力:30psi;辅助气流速:60psi;离子源温度:500℃;辅助气流速:60psi;离子源温度:500℃;碰撞气:Medium。

7.根据权利要求1所述的饲料中四环素类药物及其异构体的检测方法,其特征在于:四环素类药物分别为四环素、土霉素、金霉素,四环素类药物的异构体分别为差相四环素、差相土霉素、差相金霉素。

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