一种6-苄基腺嘌呤快速检测装置的制作方法

文档序号:15145819发布日期:2018-08-10 20:26阅读:192来源:国知局

本实用新型属于免疫分析测试领域,具体涉及一种6-苄基腺嘌呤快速检测装置。



背景技术:

6-苄基腺嘌呤是一种人工合成的植物生长调节剂,其作为细胞分裂素被广泛添加于植物生长培养基中。2015年农业部等3家部委机构共同要求禁止6-苄基腺嘌呤被用于豆芽产品中(国家食品药品监督管理总局,2015),然而由于6-苄基腺嘌呤药效良好、价格低廉,其在豆芽生产中的添加屡禁不绝。因而加强对6-苄基腺嘌呤残留量监测对于保证食品质量安全十分重要。

目前已报道一系列6-苄基腺嘌呤残留量的检测方法,包括一系列的仪器分析方法。但仪器分析方法需要昂贵的仪器设备及专业操作人员,且样品前处理繁琐费时、检测费用高,难以满足高通量、快速、在线检测的需要。发展具有更广谱性和稳定性的6-苄基腺嘌呤快速检测装置和方法迫在眉睫。



技术实现要素:

有鉴于此,本实用新型提供一种6-苄基腺嘌呤快速检测装置,本实用新型的检测时间短、成本低、结果易判断,结构简单、操作方便、实用性强,非常适合豆芽等果蔬中6-苄基腺嘌呤残留量的检测。

本实用新型的技术方案为:一种6-苄基腺嘌呤快速检测装置,其特征在于,包括碾压部、样品处理部、检测部,所述样品处理部与检测部一体连接;所述样品处理部包括样品腔、储液腔、调温腔,所述储液腔设于调温腔内部,所述样品腔设于储液腔内部,所述碾压部与所述样品腔可活动连接;所述检测部设有载板,所述载板设有快速检测试纸条。特别的,所述载板为现有技术中具有粘性的载板,可安装和拆卸快速检测试纸条,所述碾压部可与所述样品腔分离。

特别的,所述储液区内装有0.05mol/L含10%甲醇的PBS溶液,所述0.05mol/L含10%甲醇的PBS溶液为经过5000rpm离心5-10min的上清液。

进一步的,所述储液腔上端设有可开合的加液口,所述储液腔内部设有预出液腔,所述预出液腔分别设有进液口和出液口,所述进液口与储液腔连接,所述出液口与样品腔连接。

进一步的,所述预出液腔还设有第一驱动装置,所述进液口设有第一阀门,所述出液口设有第二阀门,所述第一阀门、第二阀门分别与第一驱动装置连接。

进一步的,所述样品腔底部设有第三阀门,所述第三阀门连接有第二驱动装置,所述第三阀门下端设有出液管,所述出液管末端设有滴头。特别的,所述出液管的管口设有滤网,避免样品的残渣等颗粒进入出液管。为保证出液量不会过大影响测试结果,选择滴头的出液口的出液量为100-150uL。

特别的,所述第一驱动装置、第二驱动装置可通过任一现有技术实现,所述第一驱动装置、第二驱动装置均设有无线发送和接收模块,可与现有技术的遥控装置、手机、笔记本电脑等设备连接。

特别的,所述第一驱动装置、第二驱动装置内可安装电子、电池等供电设备。

进一步的,所述滴头与所述快速检测试纸条连接。

进一步的,所述碾压部包括金属头、与金属头连接的连杆、设于连杆末端的把手,所述金属头表面对侧设有碾压突块。

进一步的,所述金属头为圆柱体结构,所述碾压突块为梯台结构,所述金属头与碾压突块一体连接。

本实用新型的碾压部,通过碾压旋转,能够将水果皮、蔬菜、豆芽等小块充分碾压出汁,与缓冲液充分混合。

进一步的,所述检测部设有检测区和储存区,所述载板设于检测区,所述检测区设有可视窗口;所述储存区设有可开合的第一盖板,所述储存区可用于放置备用的快速检测试纸条。通过开合第一盖板可放置和移取快速检测试纸条。

进一步的,所述调温腔上端设有开合的第二盖板,所述调温腔内部设有高分子水凝胶层,所述调温腔外侧设有可开合的柔性密封膜。特别的,所述柔性密封膜为现有技术中不透水、具有反光性的柔性密封膜。通过第二盖板可添加高分子水凝胶,打开柔性密封膜,可使得高分子水凝胶在40℃开始释放出水,50℃开始大量释放出水,以实现快速降温,保证测试条件是在25-30℃。使用完后,可取出高分子水凝胶,安装柔性密封膜,打开第二盖板添加新的高分子水凝胶。

特别的,所述高分子水凝胶层可通过任一现有技术实现。优选的,采用能够在40℃开始释放出水,50℃开始大量释放出水,以实现快速降温的高分子水凝胶层,如聚丙烯酰胺/聚氨酯水凝胶层、聚乙二醇改性纳米纤维素/聚乙烯醇复合水凝胶层、聚乙烯醇水凝胶层等。

特别的,所述快速检测试纸条包括PVC底板,PVC底板上从左至右依次固定样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜及吸水垫;所述胶体金垫包被有胶体金标记6-苄基腺嘌呤抗体;所述硝酸纤维素膜上包被有6-苄基腺嘌呤核苷蛋白质偶联物和羊抗鼠IgG多抗。

进一步的,所述6-苄基腺嘌呤核苷蛋白质偶联物,其结构式如式(Ⅰ)所示:

(Ⅰ)

其中,所述protein(即载体蛋白)为牛血清白蛋白(BSA)或卵白蛋白(OVA)。

进一步的,所述胶体金垫制备:用磷酸盐缓冲液将胶体金标记的6-苄基腺嘌呤抗体配制成浓度0.5-1.0mg/ml的溶液,均匀地涂布在聚酯纤维上,涂布量为30-80μl/cm2,25-37℃真空干燥12小时。

进一步的,所述试纸条组装:将PVC底板的粘面暴露,将准备好的硝酸纤维素膜粘在中间位置,用磷酸盐缓冲液将6-苄基腺嘌呤核苷完全抗原配制成浓度0.5-1.0mg/ml的溶液,划在硝酸纤维素膜的检测区域上,用磷酸盐缓冲液将羊抗鼠IgG多抗配制成浓度0.5-1.0mg/ml的溶液,划在硝酸纤维素膜上距离检测线5mm的质控区域,硝酸纤维素膜在37℃干燥12小时。粘贴金标垫并使其压在硝酸纤维素膜前端0.2cm处,然后以玻璃纤维膜为样品垫,粘贴样品垫压在金标垫的另一端,最后粘贴吸水纸;将组装好的试纸条剪成0.3-0.4cm宽的窄条状。

本实用新型的操作过程为:控制第一驱动装置打开预出液腔的进液口进缓冲液,在关闭进液口,打开出液口出液,再关闭出液口;优选的,缓冲液的使用量为1-2mL;将水果、蔬菜、豆芽的等样品,其中水果取皮部分、蔬菜、豆芽切成小块放入样品腔中,再通过碾压部对样品进行碾压旋转3-5min;控制第二驱动装置打开第三阀门,混合液通过出液管进入滴头,混合液会从滴头流出到快速检测试纸条,通过可视窗口观察测试结果。特别的,所述出液管为现有技术中的拆取旋接结构,所述可视窗口为现有技术中的可开合结构,测试结束后,放出用缓冲液清洗样品腔,打开可视窗口取出快速检测试纸条,更换新的出液管,从储存区拿出新的快速测试试纸条安装在载板上进行下次测试。

本实用新型的快速测试试纸条,只需吸取100μl左右的样品液滴加在样品垫上,在5-10min内观察检测线和质控线。若检测线和质控线都显色,表明样品为阴性,不含6-苄基腺嘌呤,否则为阳性结果。无论结果为阳性或阴性,质控线应该出现线条,若质控线无线条,表明试纸失效。本实用新型的检测限为10ng/g。

与现有的大型液相、气相质谱仪等大型昂贵仪器相比,本实用新型具有以下有益效果:

(1)操作简便、快速,使用时,经处理的样品液滴加在快速检测试纸条的样品垫上,在5-10min内即可显出条带,根据条带判定检测结果,大大节省了检测时间,提高了工作效率。

(2)结果判定简单明了、准确,当在硝酸纤维素膜上显示两条红色条带,即检测线和质控线时,表示在被检测样品中检出6-苄基腺嘌呤,结果为阳性;当在硝酸纤维素膜上只显示一条红色的质控线时,表示在被检测样品中未检出6-苄基腺嘌呤,结果为阴性。

(3)检测方便,不需要昂贵的仪器设备,避免了采用传统HPLC等方法所涉及的仪器设备、试剂等较为昂贵的问题。

(4)采用的快速检测试纸条稳定性强、易于保存,试纸条可在4℃冰箱长期放置后再使用,同时试纸条能在常温保存24-48小时,而且检测效果良好,有利于购买后长期使用。

附图说明

图1为本实用新型的结构示意图;

图2为本实用新型的局部结构示意图;

图3为本实用新型的局部结构示意图;

图4为本实用新型的局部结构示意图;

图5为本实用新型的局部结构示意图。

具体实施方式

下面将结合本实用新型实施例中的附图,对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本实用新型保护的范围。

实施例1

一种6-苄基腺嘌呤快速检测装置,其特征在于,包括碾压部1、样品处理部2、检测部3,所述样品处理部与检测部一体连接;所述样品处理部包括样品腔21、储液腔22、调温腔23,所述储液腔设于调温腔内部,所述样品腔设于储液腔内部,所述碾压部与所述样品腔可活动连接;所述检测部设有载板311,所述载板设有快速检测试纸条312。特别的,所述载板为现有技术中具有粘性的载板,可安装和拆卸快速检测试纸条,所述碾压部可与所述样品腔分离。

特别的,所述储液区内装有0.05mol/L含10%甲醇的PBS溶液,所述0.05mol/L含10%甲醇的PBS溶液为经过5000rpm离心5-10min的上清液。

进一步的,所述储液腔上端设有可开合的加液口221,所述储液腔内部设有预出液腔,所述预出液腔分别设有进液口241和出液口242,所述进液口与储液腔连接,所述出液口与样品腔连接。

进一步的,所述预出液腔还设有第一驱动装置25,所述进液口设有第一阀门2411,所述出液口设有第二阀门2421,所述第一阀门、第二阀门分别与第一驱动装置连接。

进一步的,所述样品腔底部设有第三阀门26,所述第三阀门连接有第二驱动装置27,所述第三阀门下端设有出液管28,所述出液管末端设有滴头29。特别的,所述出液管的管口设有滤网,避免样品的残渣等颗粒进入出液管。为保证出液量不会过大影响测试结果,选择滴头的出液口的出液量为100-150uL。

特别的,所述第一驱动装置、第二驱动装置可通过任一现有技术实现,所述第一驱动装置、第二驱动装置均设有无线发送和接收模块,可与现有技术的遥控装置、手机、笔记本电脑等设备连接。

特别的,所述第一驱动装置、第二驱动装置内可安装电子、电池等供电设备。

进一步的,所述滴头与所述快速检测试纸条连接。

进一步的,所述碾压部1包括金属头11、与金属头连接的连杆12、设于连杆末端的把手13,所述金属头表面对侧设有碾压突块14。

进一步的,所述金属头为圆柱体结构,所述碾压突块为梯台结构,所述金属头与碾压突块一体连接。

本发明的碾压部,通过碾压旋转,能够将水果皮、蔬菜、豆芽等小块充分碾压出汁,与缓冲液充分混合。

进一步的,所述检测部设有检测区31和储存区32,所述载板设于检测区,所述检测区设有可视窗口313;所述储存区设有可开合的第一盖板321,所述储存区可用于放置备用的快速检测试纸条。通过开合第一盖板可放置和移取快速检测试纸条。

进一步的,所述调温腔上端设有开合的第二盖板231,所述调温腔内部设有高分子水凝胶层(未标注),所述调温腔外侧设有可开合的柔性密封膜232。通过第二盖板可添加高分子水凝胶,打开柔性密封膜,可使得高分子水凝胶在40℃开始释放出水,50℃开始大量释放出水,以实现快速降温,保证测试条件是在25-30℃。使用完后,可取出高分子水凝胶,安装柔性密封膜,打开第二盖板添加新的高分子水凝胶。

特别的,所述高分子水凝胶层可通过任一现有技术实现。优选的,采用能够在40℃开始释放出水,50℃开始大量释放出水,以实现快速降温的高分子水凝胶层,本实施例的高分子水凝胶层为聚丙烯酰胺/聚氨酯水凝胶层。

特别的,所述快速检测试纸条包括PVC底板3211,PVC底板上从左至右依次固定样品垫3212、胶体金垫3213、硝酸纤维素膜3217及吸水垫3216;所述胶体金垫包被有胶体金标记6-苄基腺嘌呤抗体;所述硝酸纤维素膜上包被有6-苄基腺嘌呤核苷蛋白质偶联物和羊抗鼠IgG多抗。

进一步地,所述硝酸纤维素膜上包被一条6-苄基腺嘌呤核苷蛋白质偶联物线作为检测线3214,包被一条羊抗鼠IgG线作为质控线3215。

进一步的,所述6-苄基腺嘌呤核苷蛋白质偶联物,其结构式如式(Ⅰ)所示:

(Ⅰ)

其中,所述protein(即载体蛋白)为牛血清白蛋白(BSA)或卵白蛋白(OVA)。

进一步的,所述胶体金垫制备:用磷酸盐缓冲液将胶体金标记的6-苄基腺嘌呤抗体配制成浓度0.5-1.0mg/ml的溶液,均匀地涂布在聚酯纤维上,涂布量为30-80μl/cm2,25-37℃真空干燥12小时。

进一步的,所述试纸条组装:将PVC底板的粘面暴露,将准备好的硝酸纤维素膜粘在中间位置,用磷酸盐缓冲液将6-苄基腺嘌呤核苷完全抗原配制成浓度0.5-1.0mg/ml的溶液,划在硝酸纤维素膜的检测区域上,用磷酸盐缓冲液将羊抗鼠IgG多抗配制成浓度0.5-1.0mg/ml的溶液,划在硝酸纤维素膜上距离检测线5mm的质控区域,硝酸纤维素膜在37℃干燥12小时。粘贴金标垫并使其压在硝酸纤维素膜前端0.2cm处,然后以玻璃纤维膜为样品垫,粘贴样品垫压在金标垫的另一端,最后粘贴吸水纸;将组装好的试纸条剪成0.3-0.4cm宽的窄条状。

本实用新型的操作过程为:控制第一驱动装置打开预出液腔的进液口进缓冲液,在关闭进液口,打开出液口出液,再关闭出液口;优选的,缓冲液的使用量为1-2mL;将水果、蔬菜、豆芽的等样品,其中水果取皮部分、蔬菜、豆芽切成小块放入样品腔中,再通过碾压部对样品进行碾压旋转3-5min;控制第二驱动装置打开第三阀门,混合液通过出液管进入滴头,混合液会从滴头流出到快速检测试纸条,通过可视窗口观察测试结果。特别的,所述出液管为现有技术中的拆取旋接结构,所述可视窗口为现有技术中的可开合结构,测试结束后,放出用缓冲液清洗样品腔,打开可视窗口取出快速检测试纸条,更换新的出液管,从储存区拿出新的快速测试试纸条安装在载板上进行下次测试。

本实用新型的快速测试试纸条,只需吸取100μl左右的样品液滴加在样品垫上,在5-10min内观察检测线和质控线。若检测线和质控线都显色,表明样品为阴性,不含6-苄基腺嘌呤,否则为阳性结果。无论结果为阳性或阴性,质控线应该出现线条,若质控线无线条,表明试纸失效。本实用新型的检测限为10ng/g。

与现有的大型液相、气相质谱仪等大型昂贵仪器相比,本实用新型具有以下有益效果:

(1)操作简便、快速,使用时,经处理的样品液滴加在快速检测试纸条的样品垫上,在5-10min内即可显出条带,根据条带判定检测结果,大大节省了检测时间,提高了工作效率。

(2)结果判定简单明了、准确,当在硝酸纤维素膜上显示两条红色条带,即检测线和质控线时,表示在被检测样品中检出6-苄基腺嘌呤,结果为阳性;当在硝酸纤维素膜上只显示一条红色的质控线时,表示在被检测样品中未检出6-苄基腺嘌呤,结果为阴性。

(3)检测方便,不需要昂贵的仪器设备,避免了采用传统HPLC等方法所涉及的仪器设备、试剂等较为昂贵的问题。

(4)采用的快速检测试纸条稳定性强、易于保存,试纸条可在4℃冰箱长期放置后再使用,同时试纸条能在常温保存24-48小时,而且检测效果良好,有利于购买后长期使用。

实施例2

本实施例采用结构与实施例1一致的6-苄基腺嘌呤快速检测装置,所不同的是,所述高分子水凝胶层为聚乙二醇改性纳米纤维素/聚乙烯醇复合水凝胶层。

实施例3

本实施例采用结构与实施例1一致的6-苄基腺嘌呤快速检测装置,所不同的是,所述高分子水凝胶层为聚乙烯醇水凝胶层。

对于本领域技术人员而言,显然本实用新型不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本实用新型的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本实用新型。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本实用新型的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本实用新型内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。

此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。需注意的是,本实用新型中所未详细描述的技术特征,均可以通过任一现有技术实现。

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